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实验五-酶的特性.doc

1、实验五 酶的特性 实验目的 1. 巩固对酶的性质的认识 2. 了解研究酶的性质的一些实验方法 温度对酶活力的影响 实验原理 温度对酶的催化活力有很大的影响。在最适温度下,酶的反应速度最高。在高温情况下,酶因变性而失活,在低温情况下,降低或抑制了酶活力,但酶未失活。 实验试剂及配制 1.0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液150ml 2.稀释50倍的唾液 3.碘化钾-碘溶液50ml 实验器材 试管及试管架;恒温水浴锅;冰块 实验操作 按下表加入试剂 管号 1 2

2、3 0.2%淀粉(ml) 1.5 1.5 1.5 稀释唾液(ml) 1 1 -- 煮沸后的稀释唾液 -- -- 1 (ml) 摇匀 水浴温度

3、 37℃ 0℃ 37℃ 各管水浴10min后,各管加碘化钾-碘溶液1滴,观察现象。 PH对酶活力的影响 实验原理 大部分酶的活力受环境PH影响极为显著。不同酶的最适PH值不同。在最适PH下酶活力最高。 实验试剂及配制 1. 新配制的溶于0.3%氯化钠的0.5%淀粉溶液250ml 2. 稀释50倍的新鲜唾液 3. 0.2M磷酸氢二钠溶液600ml 4. 碘化钾-碘溶液50ml 5. PH=5,PH=5.8,PH=6.8,PH=8四种缓冲溶液 实验器材 试管及试管架;吸管;滴

4、管;50ml锥形瓶;恒温水浴锅;点滴板 实验操作 1. 配制四种不同PH的缓冲溶液 锥形瓶编号 0.2M磷酸氢二钠(ml) 0.1M柠檬酸(ml) PH 1 5.15 4.85 5.0 2 6.05 3.95 5.8 3 7

5、72 2.28 6.8 4 9.72 0.28 8.0 从4个锥形瓶中各取缓冲液3ml,分别注入4支带有号码的试管中,然后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml,和稀释50倍的唾液2ml。置于37℃恒温水浴锅中保温,每隔1min由第3号管中取出1滴混合液于点滴板上,加1滴碘化钾-碘溶液,检验淀粉的水解程度。待溶液变为棕黄色时,把所有试管从水浴锅中取出,向各管中加入1

6、2滴碘化钾-碘溶液,观察各管颜色,分析PH值对酶活力的影响。 唾液淀粉酶的活化和抑制 实验原理 凡能提高酶活力的物质称为酶的活化剂;凡使酶活力下降,但并不引起酶蛋白变性的作用称为酶的抑制剂。 实验试剂及配制 1.0.1%淀粉溶液150ml 2.稀释50倍的唾液 3.1%氯化钠溶液50ml 4.1%硫酸铜溶液50ml 5.1%硫酸钠溶液50m 6.碘化钾-碘溶液100ml 实验器材 恒温水浴锅;试管及试管架 实验操作 按下表加试剂 管号 1 2 3

7、 4 0.1%淀粉溶液(ml) 1.5 1.5 1.5 1.5 稀释唾液(ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 1%硫酸铜溶液(ml) 0.5 1%氯化钠溶液(ml) 0.5 1%硫酸钠溶液(ml) 0.5 双蒸水(ml) 0.5 37℃水浴,保温10min 碘化钾-碘溶液(滴) 2-3 2-3 2-3 2-3 现象 思考题 解释第三组实验中4支管的意义。

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