生药的鉴定专题知识讲座.pptx

,单击此处编辑母版标题样式,#,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,生药的鉴定专题知识讲座,生药的鉴定专题知识讲座,第1页,第一节 生药判定意义,生药判定：,就是依据国家药典，部颁和地方药品标准以及相关资料要求或记载生药标准，对商品生药或检品进行真实性、纯度、品质优良度检定。,1,、发掘中医药学遗产，整理中药品种,2,、制订生药质量标准，促进生药标准化,3,、寻找和利用新药资源，发展中药事业,生药的鉴定专题知识讲座,第2页,第二节 生药判定依据,中华人民共和国药典,中华人民共和国药典，简称中国药典，是国家药品法典。它要求了药品起源、质量要求和检验方法。全国药品生产、供给、使用、检验和管理部门等单位都必须遵照执行。,从1963年版起，开始分一、二部，一部收载药材和成方制剂，二部收载化学药品、抗生素、生物制品和各类制剂。国家药典对药品品种和质量都有明确要求，其判别和检验伎俩不停提升。,生药的鉴定专题知识讲座,第3页,年版一部，收载中药材,582,种，中成药,564,种。薄层色谱判别应用提升，,TLC,判别项有863种（1523），约为品种总数（1146）75%，比现版药典（60%）提升了约15%。,HPLC,法用于含量测定品种有479种（518），占含测品种数66%，比现版药典（34%）增加了一倍多，加大仪器分析比重，增强先进性。,生药的鉴定专题知识讲座,第4页,常见判定方法有：,起源,（原植物、原动物和矿物）,判定,、,性状判定,、,显微判定,及,理化判定,等方法,。各种方法有其特点和适用对象，有时还需要几个方法配合进行工作，这要依据检品详细条件和要求灵活掌握。,生药的鉴定专题知识讲座,第5页,第三节 生药判定普通程序与方法,一、生药取样,1,、取样前详细统计品名、产地、规格、等级，检验包装完整性、清洁程度及有没有水迹、霉变或污染等情况。,2,、取样标准：总包件少于,5,件，逐包取样；,总包件,599,件，取样,5,件；,总包件,1001000,件，按,5%,取样。,珍贵药不论多少件，要逐包取样。,3,、破碎、粉末状或大小在,1,厘米以下生药，用采样器取样，每包最少在不一样部位取,23,份样品。,4,、将抽取样品混匀，依对角线划,，分为四等份，取对角两份。,1/3,试验分析，,1/3,供复核，,1/3,留样保留。,生药的鉴定专题知识讲座,第6页,二、生药常规检验,1,、杂质检验 包含非药用部位、沙石、泥块、尘土等，算重量百 分比。,2,、水分测定 烘干法、甲苯法、减压干燥法,3,、灰分测定 总灰分测定 酸不溶性灰分,4,、浸出物测定 水溶性浸出物 醇溶性浸出物 醚溶性浸出物,5,、挥发油测定 甲法,适合用于比重小于,1.0,挥发油测定；,乙 法,适合用于比重大于,1.0,挥发油测定。,生药的鉴定专题知识讲座,第7页,三、生药限量检验,1,、砷盐检验 不得过百万分之十,2,、重金属检验 铅、铜、铬、,3,、农药残留量检验 主要为有机氯和有机磷类,六六六,不得过百万分之,0.2,滴滴涕（,DDT,）,不得过百万分之,0.2,五氯硝基苯（,PCNB,）,不得过百万分之,0.1,4,、其它有害物质检验,生药的鉴定专题知识讲座,第8页,大黄,Radix et Rhizoma Rhei,两千多年前，大黄就作为我国特产药材而闻名于中外，成为,国际性生药,。据记载：我国在公元前,2700,年已经有大黄应用。公元前,114,年已经陕西运往欧洲。马可波罗（,12501323,年）旅游东方时记载：,“,中国凉州（今甘肃）产大黄甚丰,”,。,17,世纪英国所用大黄为中国经印度运往英国。,16871762,年间，俄国政府以中国大黄为专卖品，判别甚严，并以本品为主制订了,“,莫斯科标准,”,，凡不适于该标准尽行剔去。由上可见，,大黄在历史上就在欧洲享受盛誉,。,生药的鉴定专题知识讲座,第9页,历 史,1,、,大黄,始载于,神农本草经,，列为下品。因根大而色黄而故名。以后历代本草都有记载。,2,、吴普谓：,“,生蜀郡（今四川）北部或陇西（今甘肃）。八月采根，根有黄汁。,”,3,、苏颂谓：,“,以蜀川锦纹者佳。,根如芋，大者如碗，长一二尺。,四月开黄花（与今药用大黄相符）亦有青红似荞麦者（与今掌叶大黄和唐古特大黄相符）。,总而言之：,在植物起源方面：历代本草所载大黄主要是掌叶组大黄,结合本草附图，可认为与现今药用正品大黄相符。在质量方面：古本草认为以四川北部和甘肃大黄为好。关于混同品：在唐代已发觉河北产大黄与正品大黄不一样，与现在河北产商品,“,山大黄,”,（原植物为华北大黄,Rheum franzanbachiiMunt.,）相当。,生药的鉴定专题知识讲座,第10页,来 源,为蓼科（,Polygonaceae,）植物,掌叶大黄,Rheum palmatumL.,唐古特大黄,Rheum tanguticumMaxim.ex Balf.,药用大黄,Rheum officinaleBail1.,干燥根及根茎。,注：,Rheum,（大黄属）由,Reuma,“,河,”,而来，示在伏尔加河,Rha,地方有产。,生药的鉴定专题知识讲座,第11页,为多年生高大草本，根状茎及根部肥厚，黄褐色。,直立，粗大，中空。,叶片掌状半裂，每裂片具粗齿。,圆锥花序顶生，分枝帖于茎，花小，紫红色或带紫红色。,果枝聚拢，瘦果具三棱。,掌叶大黄,生药的鉴定专题知识讲座,第12页,唐古特大黄 药用大黄,生药的鉴定专题知识讲座,第13页,三种大黄不一样点：,主要是叶片和花区分,掌叶大黄,叶片掌状,半裂,，每裂片具粗齿，圆锥花序顶生，分枝帖于茎，,花小，紫红色或带紫红色,。,唐古特大黄,极似掌叶大黄，但其叶片掌状,深裂,，裂片再分裂，裂片通常窄长，呈三角状披针形或窄线形（呈鸡爪状，故名鸡爪大黄）。,药用大黄,与掌叶大黄相近，但本种叶片,浅裂,，（普通仅达,1/4,）浅裂片大齿形或宽三角形，,花较大，黄白色,。,生药的鉴定专题知识讲座,第14页,产 地,掌叶大黄,主产于甘、青、藏、川等地，多为栽培。,唐古特大黄,主产于青、甘、藏、川等地，野生或栽培。,药用大黄,主产于川、贵、云、鄂、陕等省，栽培或野生。,前,2,种习称,“,北大黄,”,，后者习称,“,南大黄,”,。,商品中以掌叶大黄产量大，唐古特大黄次之，药用大黄较少。,生药的鉴定专题知识讲座,第15页,采收加工,选择生长,3,年以上植物，在秋季上冻之前或春季大黄未发芽前采挖，除去泥土，切去茎或细根，刮去粗皮，横切成段或片，纵切成瓣，加工成卵圆形或圆柱形进行干燥。,晒黄,晒后发汗，再晒，重复进行至干。,炕黄,微火炕成,5,至,6,成干，发汗，凉干。,阴黄,切片后用绳子穿起，挂在屋檐下通风处阴干。,生药的鉴定专题知识讲座,第16页,圆柱形、圆锥形、块片状、马蹄形。表面黄棕色（未去粗皮者表面棕褐色，有横皱纹及纵沟）蛋结表面光滑，有类白色网状纹理（有形容为槟榔花纹，又称锦纹大黄）。断面黄棕色；根茎髓部有,星点（异型维管束），,根无星点,，有放射状纹理。气清香，味苦涩，嚼之粘牙，有砂粒感，唾液染成黄色。以质坚实、气清香、味苦而微涩者为佳。,性 状 鉴 定,生药的鉴定专题知识讲座,第17页,掌叶大黄横向切断面,星 点,皮 部,名词术语：,锦纹：,指药材表面或横切面上类白色薄壁组织与红棕色射线及星点交互排列形成织锦状纹理，习称锦纹，如大黄。,星点：,指大黄根茎横切面上髓部异形维管束呈暗红色星芒状小点，习称星点。,生药的鉴定专题知识讲座,第18页,显微判别,根茎及横切面,：偶有残余木栓层皮层窄韧皮部宽广，粘液腔外大内小木质部导管非木化髓部宽广，有内韧式异型维管束；,根,无髓部，无异型维管束薄壁组织中含淀粉粒及草酸钙簇晶,生药的鉴定专题知识讲座,第19页,生药的鉴定专题知识讲座,第20页,生药的鉴定专题知识讲座,第21页,粉末特征：,大型草酸钙簇晶，直径可达,190um,棱角大多短钝。大型网纹导管多，非木化，亦有具缘纹孔及螺纹导管。淀粉粒众多，单粒圆球形、长圆形，脐点大多,生药的鉴定专题知识讲座,第22页,成 分,蒽醌衍生物,游离型,：为抗菌成份。大黄酸,(rhein),、大黄素,(emodin),、大黄酚,(chrysophanol),、芦荟大黄素、大黄素甲醚等。,结合型,：为主要泻下成份。双蒽酮甙：番泻甙,(sennoside)A,、,B,、,C,、,D,。泻下作用最强。游离蒽醌类葡萄糖甙。具一定泻下作用。,鞣质类,有没食子酰葡萄糖、没食子酸、,d-,儿茶素等。为收敛成份，具收敛止血作用。,尚含四种,大黄酸甙,(rheinosides)A,、,B,、,C,、,D,。亦为泻下成份。,生药的鉴定专题知识讲座,第23页,理化判别,微量升华,：本品粉末少许，进行微量升华，可见菱状针晶或羽状结晶，加碱显红色。（蒽醌类成份）,荧光判别,：,药材新鲜断面于紫外光灯下观察，显,浓棕色荧光,。,粉末稀乙醇（,40%,）浸出液，滴于滤纸上，再滴加稀乙醇扩散后呈黄色或淡棕色环，置紫外光灯下观察，显,棕色或棕红色,荧光，不得显持久亮蓝紫色荧光。,检验羟基蒽醌衍生物,：,粉末用稀盐酸与乙醚提取，分取乙醚层，加碳酸氢钠试液，碱液层,显红色,。,生药的鉴定专题知识讲座,第24页,返 回,生药的鉴定专题知识讲座,第25页,薄层判别,对照品,：大黄酸、大黄药材,吸附剂,：硅胶,H,薄层板,展开剂,：石油醚,-,甲酸乙酯,-,甲酸（,15,：,5,：,1,）,1,、,在与大黄酸对照品色谱对应位置上，显相同橙黄色荧光斑点。（置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。）,2,、,在与对照药材色谱对应位置上，显相同五个橙黄色荧光斑点。,供试品色谱中,生药的鉴定专题知识讲座,第26页,质量评价,干燥失重,：不得过,15.0%,灰分,：总灰分不得过,10.0%,；酸不溶性灰分不得过,0.8%,土大黄苷：,取本品粉末甲醇浸液点于滤纸上，置紫外光灯（,365nm,）下检视，,不得显持久亮紫色荧光,。,浸出物,：热浸法测定水溶性浸出物含量，不得少于,25.0%,含量测定,：,HPLC,测定芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚总量，不得少于,1.5%,年版中国药典要求,生药的鉴定专题知识讲座,第27页,第四节 性状判定,生药性状判定是利用人体感官看、摸、闻、尝及水试、火试等直观方法，对生药性状，包含形态、大小、色泽、表面、质地、断面、气味等特征作为依据而进行判别方法。,性状判定主要观察完整,生药及饮片,。,性状判定内容：,1,、,形状,（,shape,form),：与生药形状与药用部位相关；,2,、,大小,(size),：指生药长短、粗细、厚薄等；,3,、,色泽,(color),：各种生药颜色不一样，同一生药色泽改变与生药质量相关；,4,、,表面特征,(surface character),：生药表面特征不尽相同，如光滑、粗糙、皱纹、皮孔或毛茸等；,生药的鉴定专题知识讲座,第28页,5,、质地,(texture),：生药质地特征可分软硬、坚韧、疏松、致密、黏性或粉性等。,6,、断面,(fracture),：一是指生药自然断面，二是指用刀横切（或削）成断面。易折性、粉尘性、响声、断面特征。,7,、气,(odour),：挥发性物质。,8,、味,(taste),：口尝实际滋味。,9,、水试法：,是利用生药在水中发生沉浮溶解、颜色改变、透明度、膨胀性、旋转性、粘性、酸碱改变等现象进行判别。如红花浸水中，水变金黄色不褪色。苏木投热水中，水显鲜艳桃红色。秦皮浸水中，水浸液显蓝色荧光等作为判别依据。,10,、火试法：,是利用生药受火燃烧后产生颜色，烟雾、响声、膨胀、熔融聚散等改变现象进行判别。,生药的鉴定专题知识讲座,第29页,第五节 显微判定,显微判定是利用显微镜对生药及成方制剂中药味组织、细胞或内含物等特征进行判别一个方法。是生药判别主要伎俩之一。,一、显微判定常见方法,横切片或纵切片：,选取生药适当部位，用徒手或滑走切片法制作切片，用甘油醋酸试液、水合氯醛试液或其它试液处理后观察。必要时可选取石蜡切片法制片观察。,对于根、根茎、茎藤、皮类等，普通制作横切片观察，必要时制纵切片。,表面制片：,判定叶、花、果实、种子、全草等类生药，可取叶片、萼片、花冠、果皮、种皮制表面片，加适宜试液，观察各部位表面（皮）特征。,方法为水合氯醛液，在小火焰上微微加热透化。,生药的鉴定专题知识讲座,第30页,粉末制片,粉末生药可选取甘油醋酸试液，水合氯醛试液或其它适当试液处理后观察。为了使细胞、组织能观察清楚，需用水合氯醛液装片透化。,二、显微判定关键点,1.,根类生药,2.,根茎类生药,3.,皮类生药 组织,4.,叶类生药 细胞,5.,花类生药 内含物,6.,果实类生药,7.,种子类生药,生药的鉴定专题知识讲座,第31页,（一）根类生药,组织结构：,各种类型根类区分：观察根类药材组织结构，可依据维管系统，区分其为双子叶植物初生结构、次生结构或单子叶植物根。,粉末判定：,以含有判别特征细胞后含物、厚壁组织、分泌组织为重点，其次是表皮、下皮、根被或木栓组织、内皮层、导管及管胞。,包含：淀粉粒、结晶、分泌组织、纤维、石细胞、导管、木栓组织,薄壁细胞,生药的鉴定专题知识讲座,第32页,（二）根茎类生药,组织结构：,观察根茎类生药组织结构，首先依据中柱、维管束类型，区分其为蕨类植物、双子叶植物或单子叶植物根茎。,粉末特征：,根茎类粉末生药观察，与根类相同。,注意鳞茎、块茎、球茎常含多量较大淀粉粒，其形状、大小、脐点、层纹以及复粒、半复粒、多脐点单粒,(,如贝母类,),等特征是判别主要依据。,鳞茎鳞叶表皮常可察见气孔。单子叶植物根茎较易见到环纹导管。蕨类植物根茎只有管胞。,生药的鉴定专题知识讲座,第33页,（三）茎藤类生药：,组织特征：,双子叶植物草本茎：表皮、皮层、中柱鞘、形成层、韧皮部、髓,单子叶植物茎：最外层为表皮，其内基础组织中散生许多有限外韧 型维管束，无髓。,裸子植物茎结构与双子叶植物木本茎类似，但木质部多为管胞，无导管（麻黄除外），韧皮部为筛胞、韧皮薄壁细胞。,粉末特征：,茎藤类药材组织结构及粉末显微观察注意点基础同根、根茎类。主要不一样点：,(1),表皮细胞角质层普通较厚。,(2),纤维普遍存在。,(3),石细胞常见。,(4),草酸钙结晶易见。,(5),淀粉粒较少见。,生药的鉴定专题知识讲座,第34页,（四）皮类生药：,组织结构：,皮类生药组织结构主要为周皮、中柱鞘及韧皮部。,粉末判定：,皮类粉末生药观察，普通不应有木质部组织，如导管、管胞等。注意木栓细胞、纤维、石细胞、分泌组织及草酸钙结晶。,生药的鉴定专题知识讲座,第35页,（五）木类生药：,组织结构：,横切面：木射线宽度,(,细胞列数,),、密度，导管与木薄壁细胞百分比及分布型式，导管、木纤维形状、直径等。,径向纵切面：木射线高度及细胞类型、导管类型，导管分子长短、直径及有没有侵填体，木纤维类型及大小、壁厚度、纹孔等。,切向纵切面：木射线宽度、高度及类型、导管、木纤维等。,粉末特征：,木类粉末药材观察，以导管、韧型纤维、纤维管胞形态特征，以及细胞后含物为主要判别点。,生药的鉴定专题知识讲座,第36页,（六）叶类生药：,叶类生药显微判定，通常观察横切片,(,观察表皮、叶肉及叶脉组织结构,),、表面片,(,观察表皮细胞、气孔及各种毛茸全形，以及叶肉组织一些判别点，如草酸钙结晶及其分布等,),和粉末片。,（七）花类生药,组织结构：,依据不一样目标物，将苞片、花萼、花冠、雄蕊或雌蕊等分别作表面制片，或将完整花作表面制片观察，也有将萼筒作横切面观察,(,如丁香,),。,粉末特征：,以花粉粒、花粉囊内壁细胞、非腺毛、腺毛为主关键点，并注意草酸钙结晶、分泌组织及色素细胞等。,生药的鉴定专题知识讲座,第37页,（八）果实类生药：,组织结构：,普通观察果皮组织特征。,粉末特征：,注意外果皮细胞形状、垂周壁增厚情况、角质层纹理以及非腺毛、腺毛有没有及其特征；中果皮中分泌组织、厚壁组织及草酸钙结晶有没有；内果皮细胞形态。,果实类如包含有种子，其判别点参见种子类生药。,（九）种子类生药：,种子类生药显微判定，着重观察种皮结构。,种子类粉末生药观察，注意种皮表面观及断面观形态特征。,生药的鉴定专题知识讲座,第38页,第六节 理化判定,生药理化判定是利用物理或化学方法，对生药及其制剂中所含主要化学成份或有效成份进行定性和定量分析，来判定生药品质优劣程度一个方法。,普通应用于含不一样化学成份生药判定，及生药同名异物，或性状相同又无显著显微特征生药判别。,一、显微化学反应,显微化化学反应是将生药干粉、手切片或浸出液少许，置于载玻片上，滴加一些化学试剂使产生沉淀或结晶，在显微镜下观察反应结果；或产生特殊颜色，从而进行判定。,生药的鉴定专题知识讲座,第39页,二、物理常数,物理常数包含相对密度、旋光度、折光率、凝点、熔点等。,对于油脂类、挥发油及树脂类药材真实性和纯度判别含有尤其主要意义。,三、微量升华,利用生药中所含一些化学成份，在一定温度下能升华性质，取得升华物，在显微镜下观察其形状、颜色以及化学反应作为判别特征。,比如：,茶叶升华物，为白色针状结晶（咖啡碱）。,大黄升华物为黄色针状或羽状结晶（蒽醌化合物），加碱液溶解并显红色。,生药的鉴定专题知识讲座,第40页,四、荧光分析,荧光分析是利用生物中一些化学成份，接收自然光或紫外光照射时，能发生荧光，其特征和强度能够进行定性或定量分析。,五、分光光度法,分光光度法是经过测定被测物质在一些特定波优点或一定波长范围内光吸收度，对该物质进行定性和定量分析方法。,1,、紫外分光光度法,2,、可见分光光度法,3,、红外分光光度法,4,、原子吸收分光光度法,生药的鉴定专题知识讲座,第41页,六、色谱法,色谱法又称层析法，是一个对混合物进行分离和分析物理化学方法，也是,生药化学成份分离和判别主要方法之一,。依据色谱分离原理分类可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。依据色谱分离方法分类可分为纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。,生药的鉴定专题知识讲座,第42页,第七节,DNA,分子标识判定,DNA,分子标识特点,遗传稳定性：每一个体任一体细胞均含有相同遗传信息。,遗传多样性：不一样物种已穿上差异表现为四种碱基排列次序改变。,化学稳定性：在陈旧标本中所保留下来,DNA,仍能够用于,DNA,分子遗传标识研究。,生药的鉴定专题知识讲座,第43页,DNA,分子标识方法,1,、限制性内切酶酶切片段长度多态性,(RFLP),2,、聚合酶链式反应,(PCR),3,、随机扩增多态性,DNA(RAPD),和任意引物,PCR(AP-PCR),4,、,PCR,扩增特定片段限制行位点分析,(PCR-RFLP),、,RAPD-RFLP,5,、,DNA,测序方法,DNA,分子标识应用,1,、在植物进化、分类、判定中应用,2,、在中药材判别中应用,3,、在道地生药判定中应用,生药的鉴定专题知识讲座,第44页,