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不同来源赤芝活性成分分析及质量评价.pdf

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资源描述

1、 70 食用菌学报 2023.30(5):2023.05.不同来源赤芝活性成分分析及质量评价鞠瑞鑫1,李云华2,田 荣1,吴文庆1,谷 巍1,3*,朱育凤4*(1南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2江苏金丝利药业股份有限公司,江苏 无锡 214205;3江苏省中药资源产业化过程协同创新中心,江苏 南京 210023;4江苏省中医院,江苏 南京 210023)摘要:分别采用高效液相色谱仪、荧光分光光度计、紫外-可见分光光度计测定 13 批不同来源赤芝(Ganoderma lucidum)子实体的多糖、总三萜中甾醇、灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇以

2、及硒的含量,并基于熵权逼近理想解排序法(technique for order preference by similarity to an ideal solution,TOPSIS)对上述测定指标进行数据分析,综合评价产品质量。结果表明,基于液相色谱分析建立的6种三萜化合物含量测定方法具有较高的灵敏度与准确度;熵权TOPSIS评价模型快速、灵敏、有效,与主成分分析评价模型结论基本一致,能全面、客观地评价赤芝药材质量,可为赤芝品质分析与综合评价提供参考。关键词:赤芝;熵权TOPSIS模型;活性物质;成分分析;质量评价Active Ingredient Analysis and Quality

3、 Evaluation of Ganoderma lucidum from Different PlacesJU Ruixin1,LI Yunhua2,TIAN Rong1,WU Wenqing1,GU Wei1,3*,ZHU Yufeng4*(1 College of Pharmacy,Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing 210023,Jiangsu,China;2 Jiangsu Jinsili Pharmaceutical Co.,Ltd.,Wuxi 214205,Jiangsu,China;3 Collaborative Inn

4、ovation Center for the Industrialization of Chinese Medicine Resources,Nanjing 210023,Jiangsu,China;4 Jiangsu Hospital of Traditional Chinese Medicine,Nanjing 210023,Jiangsu,China)Abstract:Fruiting bodies of G.lucidum from 13 different places were determined for contents of polysaccharides,total tri

5、terpenoids,ganoderic acid C2,ganoderic acid B,ganoderic acid A,ganoderic acid E,ganodermanontriol,ganodermadiol,and selenium by high performance liquid chromatography,fluorescence spectroscopy,and ultraviolet-visible spectrophotometry.Then these indices were analyzed by entropy-weighted technique fo

6、r order preference by similarity to an ideal solution(TOPSIS)to comprehensively evaluate the quality of the G.lucidum samples from different places.The results showed that a highly sensitive and accurate HPLC method was developed and validated to quantify the six triterpenoids.The entropy weight TOP

7、SIS evaluation model was fast,sensitive,effective,and consistent with the conclusions of the principal component analysis evaluation model.It can be used to comprehensively evaluate quality of G.lucidum.Key words:Ganoderma lucidum;entropy TOPSIS model;active substances;component analysis;quality eva

8、luation收稿日期:2023-04-10原稿;2023-05-25修改稿基金项目:江苏道地药材生态种植与质量保证研究(2022);江苏省林业科技创新与推广项目LYKJ-常州(2020)04;校企合作项目(012009200072)作者简介:鞠瑞鑫(1997),男,在读硕士,主要从事中药资源研究。*本文通信作者 E-mail:;7082008 71 鞠瑞鑫,等:不同来源赤芝活性成分分析及质量评价第 5 期赤芝(Ganoderma lucidum)为名贵中药材灵芝的基原之一,主要分布于安徽、山东、江苏、浙江、吉林、福建、广西、四川等省份1-2。现在的赤芝主要为野生以及人工袋料、段木栽培等方式生

9、产的子实体。赤芝始载于 神农本草经,是传统的食药同源原料,其味甘、性平,具有补气安神,止咳平喘的功效3。现代药理学研究表明,赤芝具有抗癌、抗病毒、抗氧化、抗菌、防治心血管疾病与抗癫痫等作用4-5。赤芝的生物活性与其所含的多种功效物质或微量元素密切相关,其主要功效物质包括多糖、三萜、甾醇等化学成分,微量元素有硒等6-7。多糖是灵芝中是抗氧化、抗癌的主要活性物质之一8-9。三萜、甾醇等化合物具有抗炎、抗肿瘤和抗病毒等作用10:其中灵芝酸A、B具有抗肿瘤、抑制血管紧张素转换酶等作用;灵芝酸C2具有抗病毒、降脂等作用;灵芝酮三醇具有抗病毒、抗肿瘤以及保肝等功效;灵芝酸E、灵芝萜烯二醇具有抗肿瘤等功效;

10、上述6种三萜化合物均被证明具有良好的药理活性11-15。硒为人必不可少的微量元素之一,具有抗氧化、抗糖尿病和解毒排毒等作用16。赤芝中硒的含量在0.105.00 mgkg-1之间,适宜作为人体优良的补硒剂,硒的摄入量若超出标准,可能会导致硒中毒17-18。现有研究发现由于生态环境和种植方式的不同,不同来源的赤芝质量差异较大19-20。熵权逼近理想解排序法(technique for order preference by similarity to an ideal solution,TOPSIS)是一种根据若干评价对象与理想化目标的接近程度进行排序的方法,适用于中药材品质指标复杂且不相容的研

11、究;给各指标权重赋值可降低主观因素影响,该评价方法客观、全面,目前已用于中药多指标的综合质量评价21。笔者拟建立赤芝中多糖、总三萜中甾醇、灵芝酸A、灵芝酸B、灵芝酸C2、灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇和硒的测定分析方法;基于熵权TOPSIS法对上述测定指标进行数据分析并采用主成分分析法进行验证,建立一种科学、有利于呈现赤芝品质的质量评价体系。1 材料与方法1.1 供试材料共收集13批不同种植地赤芝(G.lucidum)子实体样品,由南京中医药大学谷巍教授鉴定为多孔菌科真菌赤芝的干燥子实体,具体种植地信息见表1。分别将各来源样品随机分为3份。每份10个进行混合。样品经鼓风干燥后,粉碎并过50

12、目筛,密封包装并于-18 保存备用。表1 赤芝来源信息Table 1 Source information of G.lucidum样品Sample 来源 SourceGL-1江苏省南京市栖霞区 Xixia District,Nanjing City,Jiangsu ProvinceGL-2安徽省六安市金寨县 Jinzhai County,Luan City,Anhui ProvinceGL-3山东省聊城市冠县 Guanxian County,Liaocheng City,Shandong ProvinceGL-4浙江省丽水市龙泉市 Longquan City,Lishui City,Zhej

13、iang ProvinceGL-5福建省三明市尤溪县 Youxi County,Sanming City,Fujian ProvinceGL-6福建省龙岩市漳平市 Zhangping City,Longyan City,Fujian ProvinceGL-7黑龙江省牡丹江市宁安市 Ningan City,Mudanjiang City,Heilongjiang ProvinceGL-8吉林省延边朝鲜族自治州敦化市 Dunhua City,Yanbian Korean Autonomous Prefecture,Jilin ProvinceGL-9辽宁省抚顺市抚顺县 Fushun County,

14、Fushun City,Liaoning ProvinceGL-10河北省衡水市高新技术产业开发区 Hengshui High-tech Industrial Development Zone,Hebei ProvinceGL-11湖南省怀化市沅陵县 Yuanling County,Huaihua,Hunan ProvinceGL-12四川省广元市青川县 Qingchuan County,Guangyuan City,Sichuan ProvinceGL-13广西壮族自治区百色市隆林县 Longlin County,Baise City,Guangxi Zhuang Autonomous Re

15、gion 72 第 30 卷食 用 菌 学 报1.2 主要试剂和仪器硝酸(优级纯)购自德国Merck试剂有限公司;香草醛(分析纯)、冰醋酸(分析纯)、高氯酸(分析纯)、乙酸乙酯(分析纯)、无水乙醇(分析纯)、2,3-二氨基萘(分析纯)、蒽酮(分析纯)、EDTA-2Na(分析纯)、甲酚红(分析纯)、氨水(优级纯)、盐酸(优级纯)、甲酸(色谱纯)、浓硫酸(分析纯)购自国药化试有限公司;甲醇(色谱纯)、乙腈(色谱纯)购自美国TEDIA公司;环己烷(分析纯)、盐酸羟胺(分析纯)均购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司;纯水、超纯水为笔者实验室自制;对照品无水葡萄糖(批号:G6172,质量分数99%)购自上

16、海麦克林生化科技有限公司;齐墩果酸(批号:MB6817-S,质量分数98%)购自大连美仑生物技术有限公司;硒单元素标准溶液(批号:223030-4,1 000 gmL-1)购自国家有色金属及电子材料分析测试中心;灵芝酸A、灵芝酸B(批号:DST201109-039,DST210701-147,质量分数98%)购自成都德斯特生物科技有限公司;灵芝酸C2(批号:7162,质量分数98%)购自上海诗丹德标准技术服务有限公司;灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇(质量分数98%)笔者实验室自制。e2695高效液相色谱仪(美国Waters公司);FL6500荧光分光光度计(美国Perkin Elmer公司

17、);Mars 6 微波消解仪(美国Cem公司);UV-1800紫外分光光度计(上海美普达公司);AP135W十万分之一电子分析天平(日本岛津有限公司);HH-S电热恒温水浴锅(巩义市予华仪器厂);JA31002电子天平(上海舜宇恒平仪器有限公司);3-18K离心机(德国Sigma公司);KQ-500B超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。1.3 多糖含量测定参照文献1的硫酸-蒽酮法方法测定多糖含量。1.4 总三萜中甾醇含量测定参照文献1的香草醛-冰醋酸方法测定总三萜中甾醇含量。1.5 三萜类成分含量测定1.5.1 供试品溶液制备精密称定干燥的各样品粉末(过孔径0.33 mm分离筛)0.5 g,

18、置于100 mL具塞锥形瓶中,加入甲醇20 mL,在室温条件下超声提取40 min,冷却至室温后用甲醇补足失重,取上清液用0.22 m有机微孔滤膜过滤后即得供试品溶液。1.5.2 色谱条件流动相:0.1%甲酸水(A):乙腈(B);色谱柱为Agilent 5 HC-C18(2)(250 mm4.6 mm,5 m);洗脱程序:020 min,29%B;2026 min,29%32%B;2640 min,32%B;4043 min,32%35%B;4353 min,35%B;5358 min,35%60%B;5863 min,60%B;6368 min,60%75%;6880 min,75%B;80

19、83 min,75%100%B;8393 min,100%B。检测波长254 nm,流速1.0 mL min-1,柱温35,进样量10 L。1.5.3 混合对照品溶液的制备精密称取标准品灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇6.20、5.80、13.00、2.60、2.60、2.60 mg,加入甲醇溶解,制得质量浓度分别为0.31、0.29、0.65、0.13、0.13、0.13 mgmL-1的混合对照品溶液。1.5.4 线性关系考察用移液枪精密移取1.5.3混合对照品溶液0.008、0.040、0.200、1.000、5.000 mL,分别置于5 mL 容量瓶中,

20、加甲醇稀释至5 mL刻度,摇匀,得系列混合对照品溶液。参照1.5.2色谱条件进行分析,记录色谱图。以对照品溶液质量浓度为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y),进行线性回归。73 鞠瑞鑫,等:不同来源赤芝活性成分分析及质量评价第 5 期1.5.5 重复性将样品参照1.5.1平行制备6份供试品溶液,参照1.5.2色谱条件进样,计算灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇峰面积的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)。1.5.6 稳定性将样品参照1.5.1制备供试品溶液,分别于制备后的0、5、10、15、20、25 h进样,计算灵芝酸C

21、2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇的峰面积的RSD。1.5.7 精密度将样品参照1.5.1制备供试品溶液,参照1.5.2色谱条件连续进样6次,计算灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇峰面积的RSD。1.5.8 加样回收率精密称取0.5 mg GL-1赤芝样品粉末共6份,分别准确加入6种对照品储备液适量,参照1.5.1制备供试品溶液,参照1.5.2进样,由回归方程计算样品中6种成分的含量,并计算每种成分的加样回收率及峰面积的RSD。1.6 硒含量测定参照文献22的荧光分光光度法测定硒含量。1.7 数据处理九种指标成分含量测定所有数据平行测定3

22、次。实验数据经单因素ANOVA检验的多重比较,不同小写字母表示差异显著(P0.05)。1.8 熵权TOPSIS模型的建立1.8.1 归一化处理由于测定的赤芝9种指标成分量纲不一致,因此以公式(1)对数据进行归一化处理,建立标准化决策矩阵23-24。Xij-min(X1j X2j,.,Xmj)max(X1j X2j,.,Xmj)-min(X1j X2j,.,Xmj)Rij=(1)公式(1)中Rij代表不同指标类型,样本值i=(1,2,.,m);指标值j=(1,2,.,n),后两者形成了多目标决策矩阵为Xij1.8.2 各指标熵权权重的确定熵权法是基于评价指标的信息熵大小与差异程度,来客观反映不同

23、来源样品在综合质量评价中的重要性23-24。计算方法见公式(2)。Z=(RijWj)mn (2)公式(2)中,Z表示加权决策矩阵,Wj代表各指标权重1.8.3 最优与最劣方案的确定根据加权决策矩阵得到最优方案Z+=max(Z1,Z2,Zm)和最劣方案Z-=min(Z1,Z2,Zm)23-24。1.8.4 相对接近度的计算及质量评价根据最优与最劣方案,按公式(3)、(4)、(5)计算赤芝样品的正理想解距离(Di+)、负理想解距离(Di-)及最优解的相对接近度(Ci)23-24。Ci越大则质量越优。(3)74 第 30 卷食 用 菌 学 报 (4)(5)1.9 主成分分析采用SIMCA 13.1统

24、计学软件对13批来源样品的9种指标成分指标归一化后的数据进行主成分分析,选取代表主成分占比超过90%的个数作为主成分指标。利用SPSS 25.0软件进行若干主成分的降维,将得到的特征向量与标准化后的数据相乘,得到含每个主成分的特征值的主成分表达式,再以每个主成分特征值占主成分总的特征值比例作为指标权重,计算13批赤芝药材的主成分得分、综合得分及排名。综合得分越高,表明质量越好。2 结果与分析2.1 多糖含量无水葡萄糖标准曲线的绘制:质量浓度X为横坐标,吸光度值Y为纵坐标,回归方程为Y=38.581 X+0.000 9,R2=0.999 5,线性范围为0.002 50.020 0 mgmL-1。

25、不同来源赤芝样品的多糖含量见图1,在13批来源样品中,GL-1子实体样品中总多糖含量最高,为43.15 mgg-1。GL-7、GL-5、GL-2、GL-10样品多糖含量依次为37.24、35.42、32.69、32.04 mgg-1,显著高于其他8批赤芝子实体样品;GL-9、GL-13、GL-11样品中多糖含量较低。注:数据为平均值标准差(n=3);不同小写字母表示不同来源地赤芝的多糖含量差异显著(P0.05);横坐标的不同分组注同表1。Notes:values are means SD(n=3);different lowercase letters indicate a significa

26、nt difference between samples(P0.05);information of GL-1 to GL-13 as described in Table 1.图1 不同来源赤芝多糖含量Fig.1 Polysaccharide content of G.lucidum samples from different places2.2 总三萜中甾醇含量齐墩果酸标准曲线的绘制:质量浓度X为横坐标,吸光度值Y为纵坐标,回归方程为Y=59.375 X-0.081 0,R2=0.999 3,线性范围为0.0040.016 mgmL-1。不同来源赤芝的总三萜中甾醇含量见图2,13批样品

27、中,GL-4样品中总三萜中甾醇含量最高,75 鞠瑞鑫,等:不同来源赤芝活性成分分析及质量评价第 5 期为22.68 mgg-1。其次是GL-8样品,总三萜中甾醇含量为19.65 mgg-1,显著高于其他11批来源样品;GL-11、GL-13的总三萜中甾醇含量较低,仅为8.30、8.50 mgg-1。注:数据为平均值标准差(n=3);不同小写字母表示不同来源地赤芝的总三萜中甾醇含量差异显著(P0.05);横坐标的不同分组注同表1。Notes:values are means SD(n=3);different lowercase letters indicate a significant di

28、fference between samples(P0.05);information of GL-1 to GL-13 as described in Table 1.图2 不同来源赤芝总三萜中甾醇含量Fig.2 Total triterpene content of G.lucidum samples from different places2.3 三萜化合物含量混合对照品溶液及赤芝GL-1样品溶液的HPLC色谱图见图3。灵芝酸等三萜成分的方法学考察结果见表2,方法学考察结果表明该方法重复性、准确度良好,仪器精密度良好,供试品溶液在检测时间内稳定性良好,方法设计科学、准确,可表明不同来源

29、三萜类成分含量的差异。不同来源样品中灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇含量测定结果见表3。其中GL-3赤芝中灵芝酸A、B、C2含量最多,GL-11和GL-12中的也相对较高;GL-1、GL-2中灵芝酸E、灵芝萜烯二醇含量较高;GL-10中灵芝酮三醇含量较高。统计学分析表明不同来源赤芝的灵芝酸、灵芝醇类成分含量具有显著差异。76 第 30 卷食 用 菌 学 报注:1表示灵芝酸C2;2表示灵芝酸B;3表示灵芝酸A;4表示灵芝酸E;5表示灵芝酮三醇;6表示灵芝萜烯二醇。Notes:16 represent ganoderic acid C2,ganoderic aci

30、d B,ganoderic acid A,ganoderic acid E,ganodermanontriol,and ganodermadiol,respectively.图3 混合对照品溶液(A)及赤芝GL-1样品溶液(B)的HPLC色谱图Fig.3 HPLC chromatograms of mixed standards(A)and G.lucidum GL-1 sample(B)表2 高效液相色谱法测定赤芝三萜类成分含量的方法学考察结果Table 2 Methodology review results for determination of triterpenoids in G.

31、lucidum by HPLC对照品Standard标准曲线Standard curve相关系数Correlation coefficient线性范围Linear range/(gmL-1)重复性 RSDRepeatability RSD/%稳定性RSDStability RSD/%精密度RSDPrecision RSD/%加样回收率Sample recovery rate/%加样 RSDSample RSD/%灵芝酸 C2Ganoderic acid C2Y=6 084.94X-5 312.290.999 80.500 0310.01.6631.5641.900101.783.970灵芝酸

32、BGanoderic acid BY=7 950.17X-12 214.200.999 80.470 0290.01.2992.7751.563100.842.241灵芝酸 AGanoderic acid AY=6 832.97X-3 286.820.999 91.040 0650.01.4962.2171.520102.892.423灵芝酸 EGanoderic acid EY=5 399.75X-2 049.130.999 90.200 0130.03.6563.3101.774101.170.058灵芝酮三醇Ganoder-manontriolY=8 961.79X-6 083.990.

33、999 70.200 0130.00.7833.7781.690101.692.443灵芝萜烯二醇GanodermadiolY=12 083.0X-8 892.230.999 50.200 0130.00.3602.0801.342102.063.212表3 高效液相色谱法测定赤芝三萜类成分含量Table 3 Contents of triterpenoids in G.lucidum samples determined by HPLC样品Sample灵芝酸 C2Ganoderic acid C2灵芝酸 BGanoderic acid B灵芝酸 AGanoderic acid A灵芝酸 EG

34、anoderic acid E灵芝酮三醇Ganodermanontriol灵芝萜烯二醇GanodermadiolGL-1154.487.87 g184.788.62 d452.953.01 e118.363.91 b105.973.80 c214.190.73 bGL-2205.874.09 f199.227.57 d634.082.35 d183.261.62 a34.301.09 g237.182.45 aGL-3445.768.96 a488.147.13 a986.532.92 a80.860.57 c56.751.55 e152.682.74 dGL-4214.695.19 f191

35、.935.18 d296.734.42 h20.940.80 i148.641.46 b95.382.35 h 77 鞠瑞鑫,等:不同来源赤芝活性成分分析及质量评价第 5 期样品Sample灵芝酸 C2Ganoderic acid C2灵芝酸 BGanoderic acid B灵芝酸 AGanoderic acid A灵芝酸 EGanoderic acid E灵芝酮三醇Ganodermanontriol灵芝萜烯二醇GanodermadiolGL-540.463.16 i73.251.38 g117.473.33 j52.961.15 f35.231.07 g40.581.47 jGL-668.

36、633.27 h116.724.33 f98.103.27 k70.243.97 d40.442.84 f23.501.41 kGL-76.140.73 j10.350.99 h10.961.44 l2.200.49 j21.571.00 h10.350.81 lGL-873.951.41 h61.335.41 g282.764.83 i23.733.25 i101.791.84 c133.571.32 eGL-9304.638.98 c237.489.24 c708.891.44 c44.861.41 g158.892.64 a113.231.43 gGL-10245.983.95 e236

37、.518.64 c389.613.46 g24.261.70 i162.801.70 a123.953.78 fGL-11430.045.79 b346.024.15 b428.432.15 f34.771.34 h40.830.52 f39.910.34 jGL-12430.082.41 b147.328.69 e754.534.38 b64.172.57 e93.362.00 d181.71 3.32 cGL-13279.547.44 d235.316.43 c296.241.30 h33.942.75 h40.242.36 f77.47 1.40 i注:数据单位为gg-1;数据为平均值标

38、准差(n=3);同列不同小写字母表示不同来源地赤芝的三萜类成分含量差异显著(P0.05)。Notes:values are means SD(n=3)in gg-1;different lowercase letters in the same column indicate a significant difference between different samples(P0.05).2.4 硒元素含量不同来源赤芝样品中硒含量如图4所示,十三批不同来源赤芝样品中的硒含量均未超过行业标准中富硒食用菌总硒标准17。GL-1样品中硒含量最高,为377.0 gkg-1。其次是GL-12、GL-1

39、1、GL-2,硒含量依次为368.4、330.4、201.9 gkg-1。以上4批赤芝样品硒含量显著高于其他9批;GL-4、GL-5、GL-6、GL-7样品中总硒含量低于检测限。注:GL-4、GL-5、GL-6、GL-7样品硒含量低于检测限(10.0 gkg-1),在图中未体现;数据为平均值标准差(n=3);不同小写字母表示差异显著(P0.05)。Notes:the selenium contents of GL-4,GL-5,GL-6,and GL-7 are below the detection limit(10.0 gkg-1),and thus are not shown in th

40、e figure;values are meansSD(n=3);different lowercase letters indicate a significant difference between different samples(P0.05).图4 不同来源赤芝硒含量Fig.4 Selenium content of different G.lucidum samples2.5 熵权TOPSIS模型的建立2.5.1 归一化处理九种成分指标归一化后结果见表4,该结果消除了各指标之间的量纲影响,可用于输入SIMCA软件进行下一步的数据处理。续表 78 第 30 卷食 用 菌 学 报表4

41、 各指标归一化处理结果Table 4 Normalized results of different G.lucidum samples样品Sample 灵芝酸 C2Ganoderic acid C2灵芝酸 BGanoderic acid B灵芝酸 AGanoderic acid A灵芝酸 EGanoderic acid E灵芝酮三醇Ganoder-manontriol灵芝萜烯二醇Ganoder-madiol多糖Polysa-ccharide硒Selenium总三萜中甾醇Total triterpenoid sterolsGL-10.3370.3650.4530.6420.5980.8991.

42、0001.0000.444GL-20.4540.3950.6391.0000.0901.0000.6570.5360.213GL-31.0001.0001.0000.4340.2490.6270.4230.3900.256GL-40.4740.3800.2930.1040.9000.3750.4910.0001.000GL-50.0780.1320.1090.2800.0970.1330.7470.0000.450GL-60.1420.2230.0890.3760.1340.0580.5060.0000.296GL-70.0000.0000.0000.0000.0000.0000.8060.0

43、000.330GL-80.1540.1070.2790.1190.5680.5430.7590.2110.789GL-90.6790.4750.7150.2360.9720.4540.2350.2880.170GL-100.5460.4730.3880.1221.0000.5010.3080.2130.067GL-110.9640.7030.4280.1800.1360.1300.0000.8760.000GL-120.9640.2870.7620.3420.5080.7550.3810.9770.344GL-130.6220.4710.2920.1750.1320.2960.0400.062

44、0.0142.5.2 各指标熵权权重的确定经1.8.2公式(2)计算各个指标的熵权结果:多糖为7.70%,总三萜中甾醇为12.03%,灵芝酸A为8.76%,灵芝酸B为7.98%,灵芝酸C2为9.38%,灵芝酸E为10.87%,灵芝酮三醇为13.23%,灵芝萜烯二醇为9.73%,硒为20.32%。2.5.3 正理想解距离、负理想解距离与相对接近度的计算每批样品与正负理想解距离、相对接近度及综合排名结果见表5。结果显示,综合排名最高的样品为GL-1,相对接近度达到了0.669,排名前八的样品依次为GL-12(0.634)、GL-2(0.510)、GL-3(0.493)、GL-11(0.482)、G

45、L-9(0.454)、GL-4(0.424)以及GL-10(0.407)。表5 不同来源赤芝TOPSIS分析结果Table 5 TOPSIS analysis results of different G.lucidum samples样品Sample 正理想解距离Positive ideal solution distance 负理想解距离Negative ideal solution distance相对接近度Relative proximity综合排名Comprehensive rankingGL-10.1330.2690.6691GL-20.1980.2060.5103GL-30.20

46、10.1950.4934GL-40.2550.1870.4247GL-50.3030.0880.22510GL-60.3050.0730.19412GL-70.3310.0740.18213GL-80.2380.1540.3949GL-90.2180.1810.4546GL-100.2430.1670.4078GL-110.2290.2130.4825GL-120.1490.2580.6342GL-130.2980.0840.22111 79 鞠瑞鑫,等:不同来源赤芝活性成分分析及质量评价第 5 期2.6 主成分分析结果经SIMCA13.0软件计算得主成分1的占比为43.20%,由特征向量值可

47、知主要反映主成分2、主成分3、主成分4、主成分5的信息,为综合评价指标,占比分别为24.6%、15.8%、6.22%、5.14%,前5个主成分代表了灵芝药材中94.90%的信息量,具有较好的代表性,可用于灵芝药材品质评价。5个主成分的特征向量见表6。不同来源赤芝样品各主成分得分、综合得分及排名见表7。熵权TOPSIS模型分析表明GL-1、GL-12、GL-2、GL-3的综合质量较优,主成分分析结果排名与熵权TOPSIS模型分析结果基本一致。表6 各指标的特征向量值Table 6 Eigenvector values of indices指标名称Index主成分 1Principal compo

48、nent 1主成分 2Principal component 2主成分 3Principal component 3主成分 4Principal component 4主成分 5Principal component 5灵芝萜烯二醇Ganodermadiol0.6210.7210.1210.022-0.161灵芝酮三醇Ganodermanontriol0.1840.0940.900-0.117-0.336灵芝酸 EGanoderic acid E0.4530.665-0.4710.206-0.173灵芝酸 AGanoderic acid A0.9190.1540.1440.1740.047灵芝

49、酸 BGanoderic acid B0.821-0.3080.0290.3490.121灵芝酸 C2Ganoderic acid C20.907-0.3190.136-0.0460.195总三萜中甾醇Total triterpenoids-0.4540.4850.5580.1880.426多糖Polysaccharide-0.4710.818-0.0710.0300.088硒Selenium0.7000.343-0.123-0.5590.223表7 各主成分得分、综合得分及排名Table 7 Principal component score,comprehensive score and

50、ranking样品Sample 主成分 1 得分Score of principal component 1 主成分 2 得分Score of principal component 2主成分 3 得分Score of principal component 3主成分 4 得分Score of principal component 4主成分 5 得分Score of principal component 5综合得分Comprehensive score排名RankingGL-12.0082.3570.520-0.1730.1751.527 74GL-22.3832.051-0.0970.2

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