PD-1_PD-L1信号调节在类风湿性关节炎的研究进展.pdf

：综述 信号调节在类风湿性关节炎的研究进展殷淑瑛，吕巧怡，王荟，邵启祥，（江苏大学医学院，江苏镇江；江苏护理职业学院医学技术学院，江苏淮安）摘要：类风湿性关节炎（，）是一种慢性全身性自身免疫性疾病，以滑膜炎导致的软骨、骨、关节的破坏和重塑导致畸形为特征。程序性死亡受体（，）表达于各种活化的免疫细胞表面，参与调控免疫细胞的活化、增殖、存活和免疫应答的转归，介导机体免疫耐受和免疫稳态的维持等生理过程。近年来，研究发现 信号参与了 的病程进展，因此，深入探讨该信号途径对 的诊疗具有重要的临床意义。该文从 表达及 对、细胞的功能调节角度阐述了 信号在 发病中的作用机制及其临床检测技术进展。关键词：程序性死亡受体；类风湿性关节炎；免疫细胞；滤泡辅助 细胞；外周辅助 细胞中图分类号：；文献标志码：类风湿性关节炎（，）是常见的自身免疫性疾病，约影响全球 的成年人，的发病机制复杂，目前认为与环境因素，甲基化，免疫耐受被打破，、细胞功能失调以及免疫炎症等密切相关。近年来有关程序性死亡受体（，）信号在 病程中的作用机制、临床检测方法和靶向治疗方面有了长足的进展，本文就上述研究进展作一综述。患者 信号调节 细胞功能的机制 研究发现，分子的表达与 疾病进程有关，在 活动期的表达水平显著高于 缓解期，即使在缓解期，的表达水平也明显高于健康人对照。尽管 在 患者滑膜组织及外周血 细胞、细胞和 等细胞表面呈高表达，但相关研究表明 在 患者滑膜组织中的表达降低，且 患者血清或滑膜液中存在可溶性（，）、或 蛋白自身抗体等干扰 信号通路的分子，导致 信号不能发挥负向调控作用。另外，参与 致病的免疫细胞的分化、代谢、功能调控也受到 通路的调控。目前，针对 的人源化免疫球蛋白 单克隆抗体 在 患者的期临床试验已显示出较好的治疗效果。由此可见，明确 信号对 病程进展的影响机制至关重要。对 患者 细胞 信号的调控 由 的剪接或膜蛋白的裂解产生，是 信号通路的阻断剂，当 与 特异性结合，可阻断 通路负性信号的转导。既往研究表明，在慢性感染、抗肿瘤免疫和自身免疫性疾病中发挥重要作用。在 患者滑膜液和血清中 的浓度显著高于健康人对照组，且与 评分和临床活动期有关，经过治疗后的 患者血清 的浓度显著降低。抑制负向调控机制可能是过多的 竞争性结合细胞表面 配体，使得 结合配体相对减少，抑制 的负性调控作用，加快、加剧关节炎的发生和关节损伤。另外，的发生、发展与促炎细胞因子（、和）的产生有关，有学者发现，这些炎性因子作用于 细胞可诱导 的产生，经腹腔注射 蛋白至 小鼠模型可使小鼠体内 数量增加，导致 比例失衡，关节严重受损。综上所述，通过阻断 信号通路的转导或使 比例失衡，加速 进展。信号淋巴细胞活化分子相关蛋白 （），对 患者 细胞 信号的调控 细胞是介导自身免疫性疾病的关键细胞，患者外周血和滑膜组织中 细胞中 的表达水平显著高于健康人对照组，并且与疾病活动度呈正相关，这表明随着 患者病情的进展，疾病活动度越高则 细胞比例越高。作为负向调控分子在 患者 细胞中呈高表达，但并没有发挥其负向调控作用。因此，等推断 信号在 疾病进展中被阻断，具有阻断 信号的 高表达于 患者 细胞，且与疾病活动性密切相关。作为一种间接的“分子屏障”使 下游信号免疫受体酪氨酸转换基序（，）酪氨酸残基不受含 同源性 的蛋白酪氨酸磷酸酶（，）活性的影响，阻止了 与 的相互作用，抑制 信号在 细胞的负向调控功能。这可能是 在 中不能发挥负临床检验杂志 年 月第 卷第 期 ，基金项目：国家自然科学基金（）。作者简介：殷淑瑛，年生，女，硕士研究生，主要从事临床免疫学研究。通信作者：邵启祥，教授，博士研究生导师，：。向调控作用的另一原因。对 细胞功能的影响 对滤泡辅助性 细胞（，）功能的影响 是 个特化的 细胞亚群，其特征是高表达 基序趋化因子受体（，）、诱导性共刺激分子（，）、和 等分子，这些分子可促进 发育并迁移到生发中心，辅助 细胞分化发育，从而产生抗体。在此期间，功能缺陷或亢进都会导致机体免疫功能紊乱。功能亢进对 细胞产生过强的辅助信号，使自身反应性 细胞活化，分泌大量针对自身抗原的抗体，导致、等多种自身免疫性疾病的发生。在 发育过程中 信号起着重要的调控作用，初始 细胞（，）进入 细胞交界区发育是由 磷酸肌醇 激酶（，）信号介导的，而 相互作用则可抑制该信号，使高表达 的 发育为 的数量下降。另外，信号是调节 功能的另一种重要信号的分子，缺陷患者的鸟苷酸环化酶（）形成受损，且 和记忆 细胞数量减少，而 的表达增加会使 的比例增加，促进 细胞向浆细胞分化，产生大量自身抗体，从而导致自身免疫性疾病。另有研究表明，可下调 信号，从而抑制淋巴滤泡中 的增殖，避免 细胞过度增殖和抗体产生。因此，是 发育过程中有效的负向调节因子。对外周辅助性 细胞（，）功能的影响 是在抗环瓜氨酸化蛋白抗体阳性的 患者滑膜中发现的一种 细胞亚群，该亚群通过分泌趋化因子 基序趋化性细胞因子配体（，），促进炎症部位淋巴滤泡和三级淋巴样结构（，）的形成，并辅助 细胞的发育，进而加重 的病情。据文献报道，促炎因子 和 可上调的表达，而 信号具有负向调控 分泌的作用；当使用抗 或 的单抗阻断 信号后，增殖加速以及 的表达增加。在 患者滑膜中，与 细胞相比，中、和 的表达量显著增加，说明其具有辅助 细胞分化的功能。在淋巴聚集体中，细胞和 细胞均与 细胞相邻；而在淋巴聚集体以外的区域，与 细胞相邻的大多数是 细胞。以上结果表明 细胞具有独特的能力，可以在淋巴聚集体和炎症滑膜中广泛与 细胞相互作用，促进 细胞分化为浆细胞并产生抗体。的这种作用也存在于 患者中，其频率与疾病活动性相关，并可促进 细胞表达靶向外周组织的迁移受体，由此可见，在 中也具有病理潜能。对调节性 细胞（，）功能的影响 是体内具有免疫抑制功能的，以表达叉头状 翼状螺旋转录因子（，）、为特征的 细胞亚群，其缺失或功能异常可导致自身免疫病的发生。研究发现，信号途径可调控 向 的分化。在 包被的磁珠和的作用下，可下调蛋白激酶（，）哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（，）信号通路，同时上调磷酸酶和紧张素 同源物（，）等 发育的关键信号分子，从而促使 分化为。另外，等通过一系列过继转移试验发现，表达 的 通过 信号依赖的方式抑制自身反应性 细胞的活化和自身抗体的产生。在 的发展过程中，比例降低，功能受到抑制，经过甲氨蝶呤治疗后患者 向 分化比例增加，疾病进程得到缓解。因此，通过 信号通路诱导 可能是治疗 的一种新的策略。信号调节 记忆 细胞的产生和代谢 组织驻留记忆 细胞（，）是以 和 为表型的第三类记忆 细胞亚群，被认为是 复发的关键驱动因素。在 患者的滑膜组织中高表达 的 比例增加。研究表明，信号调节 细胞记忆的形成和维持，与野生型小鼠相比，缺失的小鼠在 细胞记忆维持阶段数量减少，使得淋巴区和非淋巴区 显著减少。另外，信号强度与 细胞的形成呈负相关，信号的丢失会增强 信号，使 数量和功能受损。在代谢方面，信号轴通过调节 依赖的糖酵解和脂肪酸氧化途径，满足静息 的能量需求，促进 的发育和稳态维持。上述结果表明，是 形成和代谢维持的调节剂。患者 信号调节 细胞功能的机制 约 的 患者产生抗环瓜氨酸蛋白和 或变性免疫球蛋白（类风湿因子）的抗体。高水平和持续产生自身抗体表明 细胞在 发病机制中起重要作用。是记忆 细胞迁移到滑膜炎症部位重要的趋化因子受体。大多数表达 的 细胞在体外激活后可表达。与 细胞相比，细胞具有更高的 细胞共刺激能力和促炎性细胞因子产生能力。细胞参与糖酵解的基因显著上调，通路显著激活，葡萄糖摄取显著增加，在阻断糖酵解途径后 细胞消失，但目前其具体机制尚不清楚。另有研究表明，在缺乏 信号的情况下（如 和 配体缺乏）导致长寿命浆细胞生成不足，数量减少，由于浆细胞分化本身不受 信号的影响，晚期生发中心更侧重于产生长寿命浆细胞。长寿命浆细胞可以在骨髓中存活数个月至数年，即使在缺乏自身反应性 和 淋巴细胞慢性激活的情况下，长寿命浆细胞也可继续分泌自身抗体。消除自身抗原特异性的长寿命浆细胞对开发新的免疫治疗策略可能是一种新的方向。检测技术的研究进展临床检验杂志 年 月第 卷第 期 ，传统的 检测方法包括免疫组织化学技术（）、和流式细胞术（）等。传统方法均存在一定的局限性，例如 是有创性检查，重复性差，其结果判读具有一定的主观性，易误诊为假阴性结果，需要较高浓度的蛋白质，在实际应用中并不敏感；法需要昂贵的抗体来捕获和标记靶标，且抗体的质量存在差异；检测主要应用于外周血检测，对于组织检测在临床应用中有一定的限制性；此外由于个体差异较大，正常参考值的确定比较困难。表达水平在临床自身免疫病和肿瘤等疾病诊断和治疗中具有重要价值，有望为疾病的靶向治疗提供参考。因此，开发高灵敏度、高精度，适合临床的检测方法具有十分重要的意义。目前，除了经典方法以外，技术、正电子发射断层扫描（，）、液相色谱串联质谱技术（，）等多种方法已应用于 的检测。技术在 检测中的应用 技术由美国 公司开发，用于检测目的 原位定量杂交的新技术。它克服了 因抗体质量、抗体来源及检测条件等因素不同造成检测结果不准确的缺点，通过设计特异性的探针，几乎可实现对所有基因的检测，具有灵敏度高、特异性强、信噪比高等优势。研究发现，技术在 检测中与、和二代测序等检测方法具有较好的一致性。技术在 检测中的应用 是一种无创、精准、实时、可重复的成像技术，其检测体内 分子的原理是利用放射性核素标记抗 抗体或抗体片段制成分子探针，引入活体后，探针靶向识别体内的 分子，然后利用 对体内的放射性摄取进行测量，实现对体内 分子的定量检测。探针是 影像学研究的先决条件，当核素标记抗 单克隆抗体作为探针显像时，其识别 分子的亲和力强，制备方法简单，但不易被机体迅速代谢，且穿透能力差限制了其临床应用。核素标记低分子量 抗体片段、纳米抗体显像时，其穿透性强，半衰期短可被机体快速清除，已展现出巨大的发展潜力，然而，核素标记低分子量 抗体片段、纳米抗体也存在制备复杂、稳定性较差、开发成本较高等短板。技 术 在 检 测 中 的 应 用 作为一种灵敏度高、准确性好的蛋白质定量技术，可独立进行蛋白质的定量分析，已被广泛应用于临床。在 和 的 检 测 过 程 中，等利 用 检测方法首次使用自动抗肽抗体测定福尔马林固定石蜡包埋（，）组织中 和 的含量，该方法提高了对 组织检测的灵敏度和特异性。在另一项研究中，研究人员开发了一种完全自动化、超靶向的双向液相色谱与串联质谱联用技术（，）分析血清中的 蛋白含量，其灵敏度比传统 高出 倍。由于该方法灵敏度高，可对目标物质进行准确的定量检测。小结及展望 是机体免疫系统的强大调节分子信号，患者外周血、滑膜腔中的、细胞直接或间接受、等 上、下游多种信号分子的调节，从而影响 的临床表现。目前，在临床试验中，抗体治疗 已显示出较好的疗效。因此，通过有效的 抗体药物治疗，联合先进的检测方法评估 的表达，有望为临床治疗 带来新的希望和路径。参考文献张彩凤，徐兢鸿 甲氨蝶呤联合美洛昔康治疗类风湿关节炎的效果及对免疫功能及生化指标的影响探讨 中国实用医药，（）：，：，（）：段厚全，叶小英，葛彦，等 在类风湿关节炎外周血 淋巴细胞亚群表达的临床意义 国际检验医学杂志，（）：，（）：，（）（），（）：，（），（）：郑忠青，焦国慧，郭丽萍，等 通路调控淋巴细胞分化参与自身免疫性疾病发生的研究进展 天津医科大学学报，（）：，（）：郭艳华，王新建 血清 在类风湿关节炎患者中的表达及意义 河南医学研究，（）：，：，（）：，：，（）：，临床检验杂志 年 月第 卷第 期 ，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，：，：，（）：，（）：，（）：，（）：王涛，王钢，汪湛东，等 细胞失衡参与类风湿关节炎发病机制的研究进展 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