NY∕T 3173-2017 茶叶中9,10-蒽醌含量测定 气相色谱-串联质谱法(农业).pdf

ICS 67.140.10 X55 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 3173一2017茶叶中9，10-惠眼含量测定气相色谱-串联质谱法Determination of 9 ,10-anthraquinone in tea-Gas chromatography-tandem mass spectrometry 2017 -12-22发布2018-06-01实施华人民共和国农业部发布目。吕本标准按照GB/T 1. 1-2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位:中国农业科学院茶叶研究所。本标准主要起草人:陈宗憨、周利、罗逢健、张新忠、楼正云、孙荷芝、汪煌。NY/ T 3173-2017 I NY/T 3173-2017 茶叶中9，10 -惠眼含量测定气相色谱-串联质谱法范围本标准规定了茶叶中9，10-惠眼含量的气相色谱-串联质谱检测方法。本标准适用于茶叶中9，10-!fl!t含量的测定。本标准的定量限为0.02mg/kg。2 规范性引用文件3 原理试样中的9，内标法定量。4 4. 1 试剂4. 1. 1 丙酣4. 1. 2正己4. 1.3 4. 1.4 4. 2 溶液配制4.2. 1丙嗣正4.2.2丙翻-正己4. 3 标准晶4.3.1 9，10-惠酿标准品4.3.2 内标D8-;惠酿标准品4. 4 标准溶液配制4.4.1 9，10葱酿标准储备溶液。mg/:准萌带曹喃嘻政军确到队1吨)9，10-惠酿标准品于50mL烧杯中，用丙阁溶解并转移至1mL容量瓶中，用丙回民运容至刻度，混匀，-18.C冷冻避光保存，有效期6个月。4. 4. 2 Ds惠酿标准贮备溶液(1mg/:准确称取10吨(精确到O.1吨)马-葱1I!t标准品于50mL烧杯中，用丙酣溶解并转移至1mL容量瓶中，用丙嗣定容至刻度，混匀，一18.C冷冻避光保存，有效期6个月。4. 4. 3定容溶液(含D8-惠酿0.04mg/ L):移取Da-葱酿标准储备溶液1mL于50mL容量瓶中，4. 2. 2溶液定容至刻度，再取出其中1mL于50mL容量瓶中.4.2.2溶液定容至刻度。4. 5 材料4.5. 1 弗罗里硅土050m250m).500.C条件下烘干4h.加入7%水Cw/w)脱活。NY/ T 3173-2017 4.5.2 有机系滤膜(尼龙材质)，0.22m。5 仪器和设备5. 1 气相色谱串联质谱:配电子轰击电离源(ED。5. 2 分析天平:感量0.0001g和0.01g. 5. 3 超声仪。5. 4 旋转蒸发仪。5.5 离心机:转速不低于6000r/min. 5. 6 玻璃填充柱:10 cmX O . 5 cm (内径)。5. 7 固体样品粉碎机。5. 8 标准网筛:425m.5. 9 梨形浓缩瓶:100mL. 5.10 离心管:50mL(带聚四氟乙烯旋盖)。5. 11 氮吹仪。6 试样制备取茶叶500g，粉碎后使其全部通过425m标准网筛，放人聚乙烯瓶或袋中。试样于常温干燥避光条件下保存。7 分析步骤7. 1 提取准确称取1.5 g(精确至0.01g)试样子50mL离心管中，加入1.5mL7.K浸润30min，加入15mL提取溶液(4.2.1)，超声提取20min后，加入19元水硫酸侯，立刻摇匀，以6000r/min离JL5 mino移取10mL上、清液于1mL梨形浓缩瓶中，35C旋转蒸发至近干，氮气吹干。2mL洗脱溶液(4.2.2)溶解残渣，待净化。7.2 净化在玻璃填充柱中依次加入脱脂棉、2g元水硫酸锅、2g弗罗里硅土和2g元水硫酸销后，10mL洗脱溶液(4.2.2)预淋洗柱，弃去流出液.上样待净化液(7.1)，分2次，每次用4mL洗脱溶液(4.2.2)润洗梨形浓缩瓶，上柱，再加入10mL洗脱溶液(4.2.2)洗脱目标物，收集所有流出液，于35C旋转蒸发至近干，氮气吹干。1mL定容溶液(4.4.3)溶解残渣，过0.22m有机系滤膜于进样小瓶，待测。7. 3 仪器参考条件7.3. 1 气相色i曾参考条件色谱柱:VF-5ms石英毛细管柱5%二苯基95%二甲基硅氧炕，30mXO. 25 mm(内径)XO. 25 mJ或相当类型色谱柱。载气:氮气纯度二主99.999%，流速1.0 mL/min)。进样口温度:250C。程序升温条件:初始温度80C，以15C/min升温至240C，再以25C/min升温至280C，保留5min. 进样方式:不分流进样。迸样体积:1L。7.3.2 质谱参考条件2 检测方式:多反应监测h但M，多反应监测条件见表1。电离能量:70 eV. NY/ T 3173-2017 离子源温度:210C . 传输线温度:280C。碰撞气体(Ar):2.0 mTorr. 表19，10-葱酿和D8-:1:酷的色谱质谱参数化合物名称9,10 -惠酿马-惠离保留时间，rmn7. 4 标准工作曲线13.02 12. 99 7.4. 1 溶剂标准溶液曲线的制备定量离子对碰撞能，eV)208.0/ 152.0(22) 216.0/ 160.0(20) 定性离子对(碰撞能，eV)208.0/180.0(10) 216.0/188.0(10) 准确吸取适量9，10-惠酿溶液(4.4.1)，氮气吹干，用4.4.3溶液逐级稀释，配制成质量浓度为0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.2mg/L和1mg/L系列标准溶液，按参考色谱和质谱条件测定。以测得9，10-惠眼和D8-惠酿峰面积比为纵坐标，对应的9，10-惠酿标准溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，求出回归方程和相关系数。7. 4. 2 基质匹配标准溶液曲线的制备按准确吸取适量9，10-葱ft溶液(4.4.1)，氮气吹干，用空白溶液稀释，配制成质量浓度为0.01mg/ L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.2mg/L和1mg/L系列标准溶液，按参考色谱和质谱条件测定.以测得9,10 -惠ft和Da-葱酿峰面积比为纵坐标，对应的9，10-惠ft标准溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，求出回归方程和相关系数。7. 5 定性及定量7.5. 1 保留时间被测试样中9，10-惠ft和内标物色谱曲辈的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在土2.5%之内。7.5.2 定量离子、定性离子及子离子丰度比在相同实验条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，目标化合物的质谱定性离子对应出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品中目标化合物的定性离子和定量离子的相对丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表2规定的范围，则可判断样品中存在9，10-葱酿。相对离子丰度允许相对偏差7.6 测定表2定性时相对离子丰度的最大允许偏差50 士2020-50(含)土2510-20(含土30分别将基质匹配标准溶液和待测溶液注入气相色谱-串联质谱联中，以保留时间和定性离子对定性，样品中9，10葱酶质量浓度应在标准工作曲线质量浓度范围内。采用内标法定量。同时做空白试验。7. 7 空白试验除不加试料外，采用完全相同的测定步骤等进行平行操作。8 结果计算试样中惠酶的残留量用质量浓度计，按式(1)计算。式中:四A一三&.主主.(1)A,X m 四一一试样中9，10惠酿含量，单位为毫克每千克(mg/kg); 3 NY/T 3173-2017 A一一样品溶液中9，10-葱酿和Dg-葱酶的峰面积比;A，一一一标准工作溶液中9，10-惠颐和Dg-惠酶的峰面积比;p，一一标准溶液中9，10-惠酿的质量浓度，单位为毫克每升(mg/L); V 样品提取溶液体积，单位为毫升(mL);m一一试样的质量，单位为克(g)。计算结果以重复性条件下获得的2次独立测定结果的算术平均值表示，保留2位有效数字。当结果大于1mg/同时，保留3位有效数字。9 精密度本方法的精密度数据按照9. 1 在重复性条件下，2质量浓度为0.02质量浓度为O.质量浓度为9.2 10 11 相对峰度.%75 50 25 。50 4 1 图1复性限(r)的数据为:2。3 质核比.mlzD. -惠酿160.0 5.2i2. 150 2 250 3 质核比.mlz9,10 -葱醒和g-葱酿全扫质谱图响应值nunUA 句，-i208.0 152.0 9，10-1!:图气A 208.0180.0 9，10-慧眼J - A 216.0160.0 t Dr也醺F 216.0188.0 D.-1!:酿 20 10 。UAAUnUZJ 。12.25 13.50 12.50 12.75 13 13.25 图2O.01mg/L9，10-葱醒标准溶液色谱图NY/T 3173-2017 13.75 t,mm 5 EON-的hF的Hhz中华人民共和国农业行业标准茶叶中9，10-惠醒含量测定气相色i普-串联质谱法NY/ T 3173-2017 4峰中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(邮政编码:100125网址:.ccap. cQrn. cn) 北京印刷一厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销陪* 3唾印张O.75 字数15千字2018年5月北京第1次印刷* 开本880rnrnX1230rnrn 1/16 2018年5月第1版书号16109 4361 定价18.00元* 版权专有侵权必究举报电话[phone]