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抗体保存详细指南

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fantibody全球抗体搜索引擎是一个供公共检索的抗体数据库，其抗体信息数据来源于全球范围的研究机构与商业公司。该引擎由商品化抗体数据库与抗体应用评价数据库两部分组成，以帮助研究者更高效的寻找并评估该抗体的性能。全球抗体搜索引擎是继基因与蛋白数据库之后更为复杂的应用型检索平台，网址：
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抗体保存得当与否，直接决定了抗体的活性和使用效果，如果抗体保存得当，抗体活性大部分都可以维持数年。

1. 收到抗体后，请务必在4℃，12000rpm，离心3 分钟，再打开管盖进行分装和保存（如果抗体体积小于50ul，请延长离心时间至5 分钟，以保证全部抗体均离心下来）。
抗体使用特制的储存管，只有在12000rpm 离心3 分钟，才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下来（即使是在10000rpm 离心也会离心不完全，导致出现抗体的量不足的现象)。

请谨记，无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体！

2. 对于大部分抗体，比较合适的保存方式是，分装后保存在-20℃或者-80℃。
（1）对绝大多数抗体来说，保存在-20℃就完全足够了，没有任何证据显示保存在-80℃会更好。
（2）分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害，同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。
（3）分装的量以一次实验用完为好，最少不能少于10ul 每份。因为分装体积越小，抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。
（4）复融后的分装抗体如果一次用不完，将剩余母液保存在4℃，避免再冻起来。
（5）抗体工作液应该当天配制当天用完，4℃保存尽量不要超过1 天。
（6）绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱中。将抗体保存在冰箱里层，避免温度变化造成反复冻融。

3. 大部分抗体收到后4℃短暂保存1~2 周对抗体活性没有影响。
如果抗体很快会使用（1~2 周内），推荐在4℃保存，这是为了避免反复冻融对抗体活性的损害，如果要长期保存，则最好是在-20℃或者-80℃。最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体。腹水形式的抗体产品请在收到后立即冻起来，因为该类产品含有大量的蛋白酶，长期在4℃保存会导致抗体的降解。

4. 大部分抗体的运输条件：一般的运输过程需要1~2 周的时间，所以是在低温4℃的条件下来完成的。
4℃运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害（如果使用干冰运输，那么收到时抗体是冻起来的，为了分装就需要解冻，这就多了一次冻融的过程），所以运输过程中绝对避免干冰运输。

特殊抗体的保存条件
· 酶联抗体：永远保存在4℃，避免冻起来，否则会导致酶活性的下降或者丧失。
· 偶联抗体：所有偶联抗体都需要在棕色管中或使用锡箔纸避光4℃保存，尤其是荧光抗体，对光极为敏感，因此在所有的实验阶段也是要避光操作的。
· IgG3 的同型对照：永远保存在4℃，避免冻起来。因为如果出现冻融过程，该抗体非常容易形成多聚体。

无论是保存还是运输，请避免反复冻融！

反复冻融会导致抗体空间结构变性，导致多聚体形成，从而降低抗体的结合能力。

抗体保存其它相关信息

关于加入甘油保存：
有些人会加50%的甘油到抗体中来避免反复冻融，甘油在-20℃会降低冰点，这对很多抗体可能是可行的。加入甘油的溶液不建议在-80℃保存，因为这已经超过了甘油的冰点。如果您要加入甘油来保存抗体的话，请谨慎注意无菌操作，避免污染！

关于蛋白保护剂：
蛋白在高浓度时更不容易降解（1mg/ml 或者更高），这就是为什么在抗体中加入BSA之类作为稳定剂的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以减少抗体由于管壁吸附所造成的损失。但是如果抗体要用来标记的话，则不能加入蛋白稳定剂，因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物。

关于叠氮化钠（sodium azide）的使用：
为了防止微生物污染，叠氮化钠经常被加入到抗体中（终浓度0.02% (w/v)）。不少公司绝大部分抗体已经含有了0.02％-0.05%的叠氮化钠，在说明书的储存缓冲液中有标明。

在下述情况中不能使用叠氮化钠
· 如果抗体用于染色或处理活细胞，用于体内研究叠氮化钠在抵抗微生物的同时，对其它大部分有机物也是有毒的，因为它阻断了线粒体的细胞色素电子传递系统。
· 要偶联带有氨基基团的抗体
叠氮化钠会干扰任何含有氨基基团的偶联，因此在进行偶联之前，应将叠氮化钠去除。偶联后的抗体可以加入叠氮化钠保存，但是浓度只能是0.01％。对于需要偶联的抗体，硫汞撒也可以替代叠氮化钠作为保护剂。

注：叠氮化钠的去除方式
可以通过凝胶电泳或过滤的方式去除，IgG 的分子量是150kDa（IgM 约600kDa）；叠氮化钠的分子量只有65Da，使用截留分子量为14kDa 的滤膜即可将叠氮化钠从抗体中去除。