GC-MS_MS法测定猪肉中二噁英及二噁英类多氯联苯.pdf

364 2023,Vol.44,No.18 食品科学 安全检测GC-MS/MS法测定猪肉中二噁英及 二噁英类多氯联苯陆 静，焦艳娜，成 婧，申甜甜，朱绍华，付善良*（长沙海关技术中心，食品安全科学技术湖南省重点实验室，湖南 长沙 410004）摘 要：建立基于气相色谱-串联质谱（gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）仪器，采用稳定性同位素稀释法测定猪肉中二噁英及二噁英类多氯联苯。样品经索氏提取，酸化硅胶除脂。然后经过多层硅胶柱、碱性氧化铝柱和活性炭柱净化，分别收集含二噁英（dioxins，PCDD/Fs）和二噁英类多氯联苯（dioxin like polychlorinated biphenyls，DL-PCBs）的组分。最后经浓缩溶剂交换后供GC-MS/MS测定。从样品的除脂方式、脂肪含量对净化的影响、系统空白污染来源等方面进行探讨。结果发现，凝胶渗透色谱除脂对PCDD/Fs和DL-PCBs的回收率影响较大，酸化硅胶除脂更适合超痕量的二噁英类化合物的分析和检测。二噁英检测的系统空白污染主要来自于索氏提取仪。该方法中内标的回收率为45.3%122.4%，相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）为1.0%14.7%；目标物的回收率为64.9%118.8%，RSD为1.1%14.7%，方法线性和检出限能够达到GB 5009.2052013食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定的相关要求，适用于猪肉样品中PCDD/Fs和DL-PCBs的测定。关键词：气相色谱-串联质谱；二噁英；二噁英类多氯联苯；猪肉Determination of Dioxins and Dioxin-like Polychlorinated Biphenyls in Pork by Gas Chromatography-Tandem Mass SpectrometryLU Jing,JIAO Yanna,CHENG Jing,SHEN Tiantian,ZHU Shaohua,FU Shanliang*(Hunan Key Laboratory of Food Safety Science&Technology,Technology Center of Changsha Customs,Changsha 410004,China)Abstract:A gas chromatography-tandem mass spectrometry(GC-MS/MS)with stable isotope dilution(SID)method was established for the determination of dioxins(PCDD/Fs)and dioxin like polychlorinated biphenyls(DL-PCBs)in pork.The sample was extracted by Soxhlet extraction,defatted using acidified silica gel,and purified by sequential chromatography on a multi-layer silica gel column,an alkaline alumina column and an activated carbon column.PCDD/Fs-and DL-PCBs-rich fractions were collected separately,concentrated and redissolved for GC-MS/MS analysis.The influence of defatting method and fat content on the purification efficiency was investigated,and the blank contamination source of the system was discussed.The results showed that gel permeation chromatography(GPC)degreasing had a great influence on the recovery of PCDD/Fs and DL-PCBs,and acidified silica gel degreasing was more suitable for the analysis and detection of ultra-trace dioxins.The major blank pollution source of the dioxin detection system was the Soxhlet extractor.The recoveries for internal standard were 45.3%122.4%with relative standard deviation(RSD)of 1.0%14.7%.The recoveries for the analytes were 64.9%118.8%with RSD of 1.1%14.7%.Both the linearity and limit of detection(LOD)met the requirements of the national standard of China GB 5009.205-2013.The proposed method is suitable for the determination of PCDD/Fs and DL-PCBs in actual pork samples.Keywords:gas chromatography-tandem mass spectrometry;dioxins;dioxin-like polychlorinated biphenyls;porkDOI:10.7506/spkx1002-6630-20221108-080中图分类号：O656.31 文献标志码：A 文章编号：1002-6630（2023）18-0364-08收稿日期：2022-11-08基金项目：海关总署科技计划项目（2021HK202）第一作者简介：陆静（1986）（ORCID:0000-0001-5308-818X），女，工程师，博士，研究方向为食品安全与检测。E-mail:*通信作者简介：付善良（1977）（ORCID:0000-0003-0281-8351），男，高级工程师，硕士，研究方向为食品安全与检测。E-mail:安全检测 食品科学 2023,Vol.44,No.18 365引文格式：陆静,焦艳娜,成婧,等.GC-MS/MS法测定猪肉中二噁英及二噁英类多氯联苯J.食品科学,2023,44(18):364-371.DOI:10.7506/spkx1002-6630-20221108-080.http:/LU Jing,JIAO Yanna,CHENG Jing,et al.Determination of dioxins and dioxin-like polychlorinated biphenyls in pork by gas chromatography-tandem mass spectrometryJ.Food Science,2023,44(18):364-371.(in Chinese with English abstract)DOI:10.7506/spkx1002-6630-20221108-080.http:/二 噁 英 属 于 多 氯 取 代 的 芳 香 烃 族 化 合 物，是多氯代二苯并-对-二噁英（polychlorinateddibenzo-p-d i o x i n s，P C D D s）、多 氯 代 二 苯 并 呋 喃（polychlomateddibenzofurans，PCDFs）和共平面多氯联苯的统称1-3。其中，2,3,7,8-四氯代苯并二噁英（2,3,7,8-tetrachlorinated dibenzo-p-dioxin，TCDD）是迄今为止发现毒性最强的化合物，比氰化钾要毒100 倍以上；TCDD已经被世界卫生组织判定为一级致癌物，具有生殖毒性、神经毒性、内分泌毒性和免疫毒性效 应等2,4。二噁英类物质毒性的另一个特点是，二噁英为脂溶性化合物，易积累在生物体的脂肪组织中，不易被降解和排出，可以在人和动物体内不断蓄积达到较高浓度，在生物体表现出明显的症状之前有一个漫长的潜伏过程5-7。近年来，我国肉类产品进口和消费快速增长，肉类进口来源也呈现多元化。湖南作为肉类产品消费大省，每年肉类消费都在80万 t以上，对进口的肉类需求也在逐年增加，每年需求量达到40万 t以上8。李云秀等9对我国部分地区的猪肉和猪肝中的二噁英污染状况进行调研和风险评估，肉类中二噁英的污染受到了不少专家学者的关注。目前，国内还没有二噁英类物质的限量标准，根据（EU）2022/2002欧盟食品污染物限量标准10，猪肉中二噁英总和的最高限量值为1.0 pg/g（以脂肪计）。二噁英分析属于超痕量、多组分分析，其分析测定必须具备有效的提取和净化技术、异构体的高效分离定性定量、良好的质量管理等技术条件11-12。且同位素稀释内标法是国际上通用的测定食品、饲料及环境样品中二噁英质量浓度的方法。自2014年6月起，气相色谱-串联质谱（gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）成为欧盟委员会（EU）规程2017/644中的一项确证方法13。目前，GC-MS/MS法已广泛用于食品、饲料及环境样品中二噁英（dioxins，PCDD/Fs）及二噁英类多氯联苯（dioxin like polychlorinated biphenyls，DL-PCBs）的检测14-17。同时，不少学者和专家对比研究了该2 种仪器在检测PCDD/Fs的区别。Sun Huizhong等18对鱼、牛肉以及玉米饲料3 种基质中的PCDD/Fs浓度进行GC-MS/MS和高分辨气相色谱-高分辨质谱（high resolution gas chromatography-high resolution mass spectrometry，HRGC-HRMS）仪器比对检测，检出含量为0.99.0 pg/g，2 种仪器的测定偏差为0.7%14%。猪肉中的脂肪含量较高，而二噁英检测的一大难点是对脂肪的提取和去除，以降低背景检测干扰，提高检测的准确度19。凝胶渗透色谱（gel permeation chromatography，GPC）作为除脂的常用方法和手段，在肉类食品检测中发挥着重要作用20-22，然而作为超痕量的二噁英检测，GPC的相关使用报道较少，我国也只是在相关标准中推荐使用23-24。本实验拟对猪肉基质中的二噁英相关检测前处理方法进行探讨和优化，开发一种适合肉类食品中PCDD/Fs和DL-PCBs检测的 GC-MS/MS方法，对推动和保障动物源性食品的顺利出口具有重要意义。1 材料与方法1.1 材料、试剂与仪器猪肉从当地市场购买。肉样搅碎后以冷冻干燥机干燥，计算含水量，混匀备用。二氯甲烷、甲苯、乙酸乙酯、正己烷（均为农残级）iMagiLab公司；硅胶（农残级）加拿大Silicycle 公司；浓硫酸、无水硫酸钠（均为优级纯）国药集团化学试剂有限公司；多层硅胶柱、碱性氧化铝柱、活性炭柱 美国FMS公司。分离度检查标准溶液、回收率和精密度检查标准溶液、同位素标记定量内标标准溶液、回收率内标标准溶液、含有天然和同位素标记的系列校正标准曲线标准溶液（浓度同国家标准中规定25）购于加拿大Wellington Laboratories公司；临用时取20 L于进样小瓶中，备用。硅胶使用前分别用甲醇和二氯甲烷清洗，晾干后在180 烘烤2 h，备用。然后以浓硫酸进行酸化，配制成质量分数为44%的酸化硅胶。GC-MSTQ8050型气相色谱-三重四极杆串联质谱仪 日本岛津公司；J2 GPC仪、Bio Beads S-X3净化柱（700 mm25 mm）美国Scientific公司；R-300旋转蒸发仪 瑞士步琦公司；JF-602全自动样品净化系统 北京普立泰科公司；DC801冷冻干燥机 日本雅马拓公司。1.2 方法1.2.1 样品前处理1.2.1.1 提取提取前，在索氏提取器中装入一支空的玻璃纤维素提取套筒，以正己烷-二氯甲烷（11，V/V）为提取溶366 2023,Vol.44,No.18 食品科学 安全检测剂，预提取812 h，浓缩上机测定，直至仪器未检测到本底值。称取8.0 g冷冻干燥后的样品，加无水硫酸钠研磨，制成能自由流动的粉末。将粉末全部转移至处理好的提取套筒内，加入13C12-PCDD/Fs和13C12-DL-PCBs标记的定量内标溶液（GB 5009.2052013食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定附录B.2和B.8（稀释10 倍）各20 L，用玻璃棉盖住样品，装入索氏提取器，以正己烷-二氯甲烷（1 1，V/V）为提取溶剂提取1824 h。提取完成后，将提取溶液转移至茄形瓶中，旋转蒸发至近干，恒质量，计算前后平底烧瓶质量差，得到脂肪含量。1.2.1.2 净化将提取液转移至圆底烧瓶中，旋转蒸发浓缩至近干，加入100 mL正己烷，50 g酸化硅胶，用旋转蒸发仪在70 条件下旋转加热20 min。静置810 min后，将正己烷倒入圆底烧瓶中。再用50 mL正己烷清洗瓶中的酸化硅胶，合并上清液至茄形瓶中，重复3 次。用旋转蒸发仪浓缩至25 mL。将多层硅胶柱、碱性氧化铝柱和活性炭柱按顺序接在全自动样品净化系统上，按照洗脱程序顺序洗脱，对样品进行上样、净化、分离，分别收集含PCDD/Fs和DL-PCBs组分的洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩至35 mL。将上述浓缩液转移至氮吹浓缩管中，氮吹浓缩到12 mL，氮气流下转移至微量进样小瓶中，用正己烷洗涤氮吹管，一并转入进样瓶浓缩到约20 L。加入PCDD/Fs 回收率内标标准溶液（GB 5009.2052013附录B.3）10 L和DL-PCBs回收率内标标准溶液（GB 5009.2052013附录B.10（稀释100 倍），异辛烷）40 L，继续在微小氮气流下浓缩至约20 L。先进行PCDD/Fs的测定，完成后将其和DL-PCBs的溶液合并，氮吹至约20 L，进行DL-PCBs的检测。如果样品当日不进行仪器分析，则于10 下避光保存。1.2.2 仪器分析条件PCDD/Fs测定条件：SH-Rxi-5Sil MS色谱柱（60 m0.25 mm，0.25 m）；进样口温度280；柱升温程序：初始温度120，保持1.0 min，以 43/min升温至220，保持15 min，再以2.3/min升温至250，以0.9/min升温至260，以20/min升温至310，保持9 min；接口温度290；载气为氦气（纯度不小于99.999%），流量为1 mL/min，恒流模式；电子电离源；温度230；电离能量70 eV。进样量2 L；溶剂延迟时间4.5 min。DL-PCBs测定条件：SH-Rxi-5Sil MS色谱柱（60 m0.25 mm，0.25 m）；进样口温度290；柱 升 温 程 序：初 始 温 度 8 0 ，保 持 2.0 m i n，以15/min升温至150，以2.5/min升温至270，保持3 min，以15/min升温至310，保持3 min；接口温度290；载气为氦气（纯度不小于99.999%），流量为1.2 mL/min，恒流模式；电子电离源；温度230，电离能量70 eV。进样量1 L；溶剂延迟时间6.0 min。采集方式：多反应离子监测模式，母离子/子离子对及其碰撞能量见表1，各化合物的总离子流图见图1。表 1 PCDD/Fs和DL-PCBs的保留时间、母离子/子离子对和其碰撞能Table 1 Qualitative ions,retention time,precursor ion/product ion and collision energy of PCDD/Fs and DL-PCBs序号化合物保留时间/minm/z碰撞能1/eVm/z碰撞能2/eV母离子1子离子1母离子2子离子2113C12-2,3,7,8-TCDF27.799315.9251.928317.9253.92822,3,7,8-TCDF27.822303.9240.928305.9242.928313C12-1,2,3,4-TCDD28.126331.9268.020333.9270.020413C12-2,3,7,8-TCDD28.824331.9268.020333.9270.02052,3,7,8-TCDD28.849319.9256.920321.9258.920613C12-1,2,3,7,8-PeCDF34.195351.9287.930349.9285.93071,2,3,7,8-PeCDF34.218339.9276.930337.9274.930813C12-2,3,4,7,8-PeCDF35.982351.9287.930349.9285.93092,3,4,7,8-PeCDF36.007339.9276.930337.9274.9301013C12-1,2,3,7,8-PeCDD36.613367.9303.920365.9301.920111,2,3,7,8-PeCDD36.637355.9292.920353.9290.9201213C12-1,2,3,4,7,8-HxCDF42.593385.8321.930387.8323.930131,2,3,4,7,8-HxCDF42.619373.8310.930375.8312.9301413C12-1,2,3,6,7,8-HxCDF42.869385.8321.930387.8323.930151,2,3,6,7,8-HxCDF42.893373.8310.930375.8312.9301613C12-2,3,4,6,7,8-HxCDF43.917385.8321.930387.8323.930172,3,4,6,7,8-HxCDF43.933373.8310.930375.8312.9301813C12-1,2,3,4,7,8-HxCDD44.172401.8337.922399.9335.922191,2,3,4,7,8-HxCDD44.188389.8326.922391.8328.9222013C12-1,2,3,6,7,8-HxCDD44.314401.8337.922399.9335.922211,2,3,6,7,8-HxCDD44.328389.8326.922391.8328.9222213C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD44.665401.8337.922399.9335.922231,2,3,7,8,9-HxCDD44.679389.8326.922391.8328.9222413C12-1,2,3,7,8,9-HxCDF45.031385.8321.930387.8323.930251,2,3,7,8,9-HxCDF45.044373.8310.930375.8312.9302613C12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDF46.798419.8355.930421.8357.930271,2,3,4,6,7,8-HpCDF46.809407.8344.830409.8346.8302813C12-1,2,3,4,6,7,8-HpCDD48.138435.8371.822437.8373.822291,2,3,4,6,7,8-HpCDD48.15423.8360.822425.8362.8223013C12-1,2,3,4,7,8,9-HpCDF48.764419.8355.930421.8357.930311,2,3,4,7,8,9-HpCDF48.776407.8344.830409.8346.8303213C12-OCDD52.123469.8405.822471.8407.82233OCDD52.136457.7394.722459.7396.72234OCDF52.378441.8378.830443.8380.83035PCB-81L40.27301.9231.926303.9233.92636PCB-8140.289289.9219.926291.9221.92637PCB-77L41.005301.9231.926303.9233.92638PCB-7741.025289.9219.926291.9221.92639PCB-123L42.5335.9265.926337.9267.92640PCB-12342.521323.9253.926325.9255.92641PCB-118L42.765335.9265.926337.9267.92642PCB-11842.787323.9253.926325.9255.92643PCB-114L43.476335.9265.926337.9267.92644PCB-11443.496323.9253.926325.9255.92645PCB-105L44.548335.9265.926337.9267.92646PCB-10544.569323.9253.926325.9255.92647PCB-126L46.96335.9265.926337.9267.92648PCB-12646.979323.9253.926325.9255.92649PCB-167L48.261371.8301.928373.8303.92850PCB-16748.282359.9289.928361.9291.92851PCB-156L49.795371.8301.928373.8303.92852PCB-15649.815359.9289.928361.9291.92853PCB-157L50.12371.8301.928373.8303.92854PCB-15750.14359.9289.928361.9291.92855PCB-169L52.476371.8301.928373.8303.92856PCB-16952.495359.9289.928361.9291.92857PCB-189L54.939405.8335.928407.8337.92858PCB-18954.959393.8323.928395.8325.928安全检测 食品科学 2023,Vol.44,No.18 3670.044404852562.02.5a1234567891011121.01.50.5?105?/min0.0283236404844522.02.5b1.01.50.5?105?/min1234567812131415161710119a.DL-PCBs总离子流图；1.PCB81；2.PCB77；3.PCB123；4.PCB118；5.PCB114；6.PCB105；7.PCB126；8.PCB167；9.PCB156；10.PCB157；11.PCB169；12.PCB189。b.PCDD/Fs总离子流图；1.2,3,7,8-TCDF；2.2,3,7,8-TCDD；3.1,2,3,7,8-PeCDF；4.2,3,4,7,8-PeCDF；5.1,2,3,7,8-PeCDD；6.1,2,3,4,7,8-HxCDF；7.1,2,3,6,7,8-HxCDF；8.2,3,4,6,7,8-HxCDF；9.1,2,3,4,7,8-HxCDD；10.1,2,3,6,7,8-HxCDD；11.1,2,3,7,8,9-HxCDD；12.1,2,3,7,8,9-HxCDF；13.1,2,3,4,6,7,8-HpCDF；14.1,2,3,4,6,7,8-HpCDD；15.1,2,3,4,7,8,9-HpCDF；16.OCDD；17.OCDF。标准溶液CS3。图 1 二噁英类化合物校正标准溶液的总离子流图Fig.1 Total ion current chromatograms of DL-PCBs and PCDD/Fs standards 2 结果与分析2.1 凝胶色谱除脂条件优化先称取1 g的猪脂肪溶于5 mL的环己烷-乙酸乙酯（11，V/V）溶液中，考察脂肪的出峰时间，见图2a。再于5 mL的环己烷-乙酸乙酯（11，V/V）溶液中加入5 ng的DL-PCBs，考察目标物的出峰时间，见图2b。最后于含有猪脂肪的5 mL环己烷-乙酸乙酯（11，V/V）溶液中加入5 ng DL-PCBs，考察目标物的收集时间段，见图2c。如图2所示，猪脂肪出峰时间为47.5 min，杂质峰出峰时间为7.510 min，DL-PCBs出峰时间为9.513 min，因此目标物的收集时间为813 min，则凝胶色谱条件为：上样量5 mL，流速5 mL/min，收集820 min的组分。00.02.5?5.15.07.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0200450400350300250a10015050?/min00.02.5?3.65.07.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0200550500450400350300250b10015050?/min00.02.5?7.85.07.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0200175225c100751501255025?/mina.猪脂肪的GPC出峰图；b.DL-PCBs的GPC出峰图；c.猪脂肪中DL-PCBs的GPC出峰图。图 2 猪脂肪样品GPC出峰图 Fig.2 GPC chromatograms of pork fat2.2 凝胶色谱在二噁英里的应用取经索氏提取后的猪脂肪2 g，以5 mL的乙酸乙酯-环己烷（1 1，V/V）溶解，加入DL-PCBs回收率和精密度检查标准溶液，13C12-DL-PCBs标记的定量内标溶液，用GPC净化除脂，收集820 min的组分，得到的GPC净化图（图3）。经旋转蒸发仪浓缩和氮吹浓缩后有约20 L的肉眼可见油层，然后酸化硅胶净化1 次，浓缩后加入回收率内标溶液，进样测定。回收率情况见 图4，DL-PCBs的回收率为88.3%120.1%，而内标的回收率只有42.1%48.5%。可见直接以GPC进行除脂净化，色谱柱容易出现饱和状态，目标物出现跟脂肪分子重叠交叉流出的情况，导致脂肪没有完全去除，从而干扰样品的结果测定，同时也说明后续必须以多层硅胶柱、碱性氧化铝柱和活性炭柱进一步净化，以减少基质干扰26-27。00.02.5?5.05.07.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.03 5002 0001 5003 0002 5001 000500?/min图 3 猪脂肪中目标物DL-PCBs的GPC出峰图Fig.3 GPC chromatograms of DL-PCBs from pork fat 368 2023,Vol.44,No.18 食品科学 安全检测080140120100604020?/%?817712311811410512616715615716918981L77L123L118L114L105L126L167L156L157L169L189L图 4 猪肉脂肪以GPC除脂时DL-PCBs的回收率情况（n=3）Fig.4 Recoveries of DL-PCBs removed from pork fat by GPC(n=3)2.3 凝胶色谱除脂和酸化硅胶除脂的选择和对比取猪脂肪2 g，分别加入PCDD/Fs和DL-PCBs的回收率和精密度检查标准溶液，13C12-PCDD/Fs和13C12-DL-PCBs标记的定量内标溶液。先以酸化硅胶除脂3 次，再用GPC除脂，样液浓缩后以净化仪净化，最后浓缩、进样测定。同时取另一份猪脂肪2 g，酸化硅胶除脂3 次后直接以净化仪净化，没有用GPC除脂，其他操作同前。考察各物质的回收率情况见图5。可知，脂肪以酸化硅胶除脂3 次基本能够满足要求，如果再以GPC除一次脂肪，目标物反而有所损失，降低待测物的回收率。因此，实际测定时以酸化硅胶进行除脂操作。前期实验结果发现GPC容易产生饱和现象而不能完全去除脂肪，因此，考察脂肪含量对酸化硅胶以及净化仪除脂时的过载现象。结果发现，当脂肪含量超过5 g时，用酸化硅胶除脂3 次后，虽然再没有出现使硅胶变色的情况（判定酸化硅胶除脂步骤已经完成）。但是经过净化仪净化后，DL-PCBs收集管浓缩后仍有40 L左右的脂肪层，说明此时酸化硅胶除脂和净化仪除去脂肪部分都出现过载现象。因此，建议称样量（以脂肪计）为25 g。2.4 方法的线性、检出限和回收率将PCDD/Fs和DL-PCBs校正标准溶液分别按浓度由低到高的顺序注入GC-MS/MS中，得到峰面积。以目标物的含量为横坐标，峰面积为纵坐标，根据内标法定量，绘制标准曲线，求出线性相关方程，各物质的线性方程见表2，线性相关系数R2大于0.999，表明该方法在较宽的浓度范围内色谱峰面积与含量呈较好的线性关系。从表2可知，仪器测定时，各化合物的相对保留时间为1.0001.001，符合国家标准的要求。相对响应因子（relative response fact，RRF）的相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）为3.39%16.22%，小于20%，符合国家标准对其小于20%的要求25。本实验采用添加标准物质的方法获得方法检出限，以空白猪肉为样品进行方法学验证，检出限的测定方法为以工作曲线最低点的浓度加标，然后测定7 组平行样的偏差，其中检出限为3 倍标准差，得到方法检出限28，本方法中各目标物的检出限为0.0200.172 ng/kg。表 2 PCDD/Fs和DL-PCBs的线性方程Table 2 Linear equations for quantitation of PCDD/Fs and DL-PCBs化合物相对保留时间线性范围/（pg/L）线性方程线性相关系数（R2）平均RRFRRFRSD%方法检出限/（ng/kg）2,3,7,8-TCDF1.0000.5200Y=1.059 113X0.000 450.999 920.978 612.860.0432,3,7,8-TCDD1.0010.5200Y=1.057 488X0.000 890.999 960.948 09.530.0241,2,3,7,8-PeCDF1.0002.51 000Y=0.883 262 5X0.017 190.998 970.913 37.860.0522,3,4,7,8-PeCDF1.0012.51 000Y=1.008 636X0.008 810.999 721.014 64.710.0991,2,3,7,8-PeCDD1.0012.51 000Y=0.940 710 7X0.009 860.999 730.952 36.770.1551,2,3,4,7,8-HxCDF1.0002.51 000Y=0.938 167 8X0.010 240.999 770.956 66.640.0961,2,3,6,7,8-HxCDF1.0012.51 000Y=0.928 192 7X0.012 220.999 300.942 55.640.0872,3,4,6,7,8-HxCDF1.0002.51 000Y=0.928 988 3X0.012 770.999 180.959 06.550.0721,2,3,4,7,8-HxCDD1.0012.51 000Y=0.949 020 5X0.000 120.999 990.931 16.440.1881,2,3,6,7,8-HxCDD1.0002.51 000Y=0.926 278 6X0.013 180.999 590.965 93.800.1521,2,3,7,8,9-HxCDD1.0002.51 000Y=1.130 498X0.000 450.999 791.180 27.340.0971,2,3,7,8,9-HxCDF1.0002.51 000Y=0.886 641 5X0.007 810.999 650.858 414.820.1651,2,3,4,6,7,8-HpCDF1.0002.51 000Y=0.901X0.011 990.999 540.933 63.390.1161,2,3,4,6,7,8-HpCDD 1.0002.51 000Y=0.939 667 6X0.015 180.999 360.977 54.700.0881,2,3,4,7,8,9-HpCDF1.0002.51 000Y=0.893 484 8X0.015 300.999 240.930 14.990.141OCDD1.00052 000Y=1.012 804X0.014 630.999 551.050 64.670.059OCDF1.00152 000Y=1.125 801X0.022 140.999 351.209 14.540.050PCB-811.00112 000Y=0.966 295 4X0.062 670.999 951.120 25.500.071PCB-771.00012 000Y=0.888 712 9X0.083 840.999 891.011 816.220.020PCB-1231.00112 000Y=0.955 725X0.025 540.999 991.058 46.260.038PCB-1181.00112 000Y=0.996 665 4X0.445 807 30.994 591.075 45.940.029PCB-1141.00012 000Y=1.003 915X0.041 530.999 971.077 08.580.106PCB-1051.00012 000Y=0.946 944 1X0.151 79480.999 441.052 65.460.064PCB-1261.00012 000Y=1.022 268X0.096 240.999 591.068 15.970.172PCB-1671.00012 000Y=0.837 841 6X0.045 450.999 961.030 18.400.058PCB-1561.00012 000Y=0.859 546X0.104 502 20.999 691.003 313.590.053PCB-1571.00112 000Y=0.828 870 6X0.067 420.999 891.050 410.580.093PCB-1691.00012 000Y=0.828 870 6X0.067 420.999 891.016 46.190.079PCB-1891.00112 000Y=0.905 354X0.043 400.999 970.903 316.170.106080140120100604020?/%2,3,7,8-TCDF2,3,7,8-TCDD1,2,3,7,8-PeCDF2,3,4,7,8-PeCDF1,2,3,7,8-PeCDD1,2,3,4,7,8-HxCDF1,2,3,6,7,8-HxCDF2,3,4,6,7,8-HxCDF1,2,3,4,7,8-HxCDD1,2,3,6,7,8-HxCDD1,2,3,7,8-HxCDD1,2,3,7,8-HxCDF1,2,3,4,6,7,8-HpCDD1,2,3,4,6,7,8-HpCDFOCDDOCDF817712311811410512616715615716818981L77L123L118L114L10