HSP90抑制剂前药设计及合成.pdf

Zhejiang Sci-Tech Univer49(5):604-611Reference Format:LIU Wenjin,CAO Xiaodong.Design and synthesis of HSP90 inhibitorI.Journal oforO611.引文格式：刘文金，曹小冬：HSP90抑制剂前药设计及合成LJI.浙江理工大学学报（自然科学），,2023,49(5):604浙江理工学学报，第49 卷。第5期，2 0 2 3年9 月Journal of Zhejiang Sci-Tech University05DOI:10.3969/j.issn.1673-3851(n).2023.05.009HSP90抑制剂前药设计及合成刘文金，曹小冬（浙江理工大学理学院，杭州310 0 18）摘要：为解决热休克蛋白9 0(Heatshockprotein90,HSP90)抑制剂的周身毒性问题，自主设计并合成了两个HSP90抑制剂的三肽前药P1和P2。以4-(2-羟乙基)哌啶-1-甲酸叔丁酯和1-（溴甲基）-4-硝基苯为起始原料，经羟胺缩合、硝基还原、关环等反应合成HSP90抑制剂HSP90i-1和HSP90i-2；以L-脯氨酸和L-缬氨酸衍生物为原料，经缩合、脱保护、酰化等反应合成多肽连接子M1。将HSP90i-1、H SP9 0 i-2 分别和M1缩合，得到两个三肽前药P1和P2。H NM R、L CM S、13CNM R分析表征结果表明两个前药分子被成功合成。该研究具有使用的原料廉价易得、反应都在常温下进行、条件温和可控、总产率较高等特点，为多肽前药的设计及合成提供了新的思路和方法。关键词：HSP90抑制剂；前药；缩合；酰化；多肽前药中图分类号：0 6 2 2.6文献标志码：A文章编号：16 7 3-38 51（2 0 2 3）0 9-0 6 0 4-0 8Desian andsvntheP9o inhibitorprodrugsLIU Wenjin,CAO Xiaodong(School of Science,Zhejiang Sci-Tech University,Hangzhou 310018,China)Abstract:To solve the peripheral toxicity problem of heat shock protein 90(HSP90)inhibitors,wedesigned and synthesized two HSP90 inhibitors,Pl and P2,as tripeptide prodrugs.The HSP90 inhibitorsHSP90i-1 and HSP90i-2 were synthesized from tert-Butyl 4-(2-hydroxyethyl)piperidine-1-carboxylate and1-Bromo-4-nitrobenzene by the reactions of hydroxylamine condensation,nitroreduction,ring closure,etc.The peptide linker Ml was synthesized from L-proline and L-valine derivatives by the reactions ofcondensation,deprotection,acylation,etc.HSP90i-1 and HSP90i-2 were condensed with M1 to obtain thetwo tripeptide prodrugs of P1 and P2.H NMR,LCMS,13C NMR analysis and characterization resultsindicated that the two prodrugs were successfully synthesized.The study is characterized by theavailability of inexpensive raw materials,the mild and controlled conditions of the reactions at roomtemperature,and the high overall yields,which provides new ideas and methods for the design andsynthesis of polypeptide prodrugs.Key words:HSP9o inhibitor;prodrug;condensation;acylation;polypeptide prodrug0引言热休克蛋白 9 0(Heat shock protein 90,HSP90)是一种癌症治疗靶点，近年来备受关注。HSP90通过与客户蛋白和辅助分子伴侣的相互作用调节细胞内的信号通路、蛋白质稳态和细胞调亡过程。通常，HSP90可用于保持40 0 多个蛋白的构象稳定，同时也是癌细胞生长和转移的关键调节因子，能促进瘤收稿日期：2 0 2 3一0 1一18网络出版日期：2 0 2 30 6 0 7作者简介：刘文金（19 9 5一），男，甘肃天水人，硕士研究生，主要从事有机物合成方面的研究。通信作者：曹小冬，E-mail：s h e l d o n.c a o e u b u l u s b i o.c o m605刘文金等：HSP90抑制剂前药设计及合成第5期细胞运动、侵袭和转移1。HSP90治疗靶点发现至今已有三十多年时间，尽管有三十多个HSP90抑制剂进入了临床研究，但都因安全性问题宣告失败2-3。Synta公司研发的 Ganetespib,在前期研究中对非小细胞肺癌表现出良好的治疗效果,却在临床三期试验中因毒性而终止后续研究4。前药策略是将母药分子进行化学结构修饰，使活性母药与某些功能基团以共价键相连，在体内经由某些生物酶的作用释放出母药，从而达到较好的药效。前药策略在药物开发过程中被广泛应用，如用于提高口服药物的生物利用度、增强药物的血脑屏障渗透性、增强药物化学代谢以及母药的靶向递送等5-8 。将前药策略用于母药的靶向递送，在抗肿瘤药物开发领域极具前景，能够极大地提高药物的安全性。HSP90抑制剂的毒性主要来源于两个方面：一方面是由于药物进人体内循环后，在各个器官广泛分布，对正常组织的HSP90蛋白功能产生抑制作用，从而诱发周身毒性；另外,进人临床的HSP90抑制剂的选择性过大，尤其对HSP90蛋白家族的其他亚型也都有较强的抑制作用,不可避免地产生脱靶毒性。因此,HSP90亚型选择性抑制剂的开发已经成为一个重要的研究方向。然而，HSP90的蛋白结构高度保守,这使得开发选择性抑制剂异常困难-141。本文以4-(2-羟乙基）哌啶-1-甲酸叔丁酯和1-（溴甲基）-4-硝基苯为起始原料，经缩合、还原、关环等多步反应得到两个HSP90抑制剂HSP90i-1和HSP90i-2;以L-脯氨酸和L-缬氨酸衍生物为原料，经过缩合、脱保护、酰化反应得到三肽连接子M1。将M1分别与HSP90i-1和HSP90i-2缩合，得到三肽前药分子P1和P2。利用 HNMR、L CM S、13CNMR等分析中间体及目标分子的结构。本文的研究可为三肽类前药提供新的设计思路和合成方法。1实验部分1.1实验材料及仪器实验材料：N,N-二甲基甲酰胺（DMF）、二氯甲烷(DCM)、四氢呋喃（THF）、甲醇（MeOH）、乙醇(EtOH)，三氟乙酸（TFA)均为分析纯，购于上海安耐吉化学有限公司；4-二甲氨基吡啶（DMAP）、盐酸二恶烷（HCI）、1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑（HOAT）、2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、2-乙氧基-1-乙氧碳酰基-1,2-二氢喹啉(EEDQ)、对氨基苄醇（PAB)、N-乙基二异丙胺(DIEA)、三乙胺（TEA）、对硝基氯甲酸苯酯、对甲苯磺酰氯（TsCl)、氢化钠(NaH)、钯碳(Pd/C)、碳酸钠(Na,CO,）、羰基二咪唑（CDI)、水合肼（NH,-NH，H,O),均为分析纯，购于上海毕得医药。实验仪器:Bruker Avance AV(400 MHz)核磁共振波谱仪，Biotage LCQ-Fleet质谱仪，watersBiotageIsoleraPrime快速制备液相色谱，岛津UV-2600紫外分光光度仪。1.2抑制剂HSP90i-1合成目标分子的合成路线见图1。4-（2-羟乙基）哌啶-1-甲酸叔丁酯经TsC1活化羟基、羟胺缩合、硝基还原、关环和脱保护15 等步骤合成4-(5-羟基-4-（1-（2-（哌啶-4-基）乙基）-1H-吲哚-5-基）-4H-1，2，4-三唑-3-基）-6-异丙基苯-1，3-二醇（HSP90i-1）。H NMR(400 MHz,DMSO)11.90(s，,1H),9.07(d,J=8.7 Hz，1H),8.8 8(d,J=9.4 H z,1H),7.507.45(m,2 H)，,7.43(d，J=1.9 H z,1H),6.93(dd，J=8.7,1.9 H z，1H)，6.6 9(s,1H),6.43(d,J=3.0Hz，1H)，6.32(s，1H),4.21(t，J=7.1H z,2 H),3.2 2 3.16(m,2 H),2.89(m，1H),2.7 5(q，J=11.7 H z,2 H)，1.8 3(d，J=12.6 H z，2 H)，1.6 8（q，J=13.5,6.7Hz，2 H)，1.49 1.32（m，3H)，0.8 1（d,J=6.9 Hz,6H)。L C M SM+H J+=46 2.3。1.3抑制剂HSP90i-2的合成目标分子的合成路线见图2。将1-（溴甲基）-4-硝基苯经取代、还原、缩合、关环和脱保护等步骤合成4-(5-羟基-4-（4-（哌嗪-1-基甲基）苯基）-4H-1,2，4-三唑-3-基）-6-异丙基苯-1，3-二醇（HSP90i-2）。1H NMR(401 MHz,DMSO)11.92(s,1H),9.51(d，J=8 2.9 H z,2 H)，7.7 3 5.6 5(m，6 H)，3.46(s，2 H)，3.2 9(s，4H)，3.0 6 2.8 7(m，1H),2.622.18(m，43H),1.38(s，,9 H),0.9 4(d,J=6.9 Hz,6H)。L C M SM+H J+=410.1。1.4三肽连接子M1合成目标分子的合成需经历5步反应，具体合成路线见图3。1.4.1M1b合成将L-缬氨酸衍生物（Mla,0.9g，2.9 5m m o l)溶于DMF（2 0 m L），加人脯氨酸（0.3g，2.95mmol)和碳酸钠（0.5g，4.43m m o l)，室温反应16 h。加水(10 mL）,用乙酸乙酯(50 mL4)萃取，无水硫酸钠干燥有机层，减压浓缩，得白色固体(672.0 mg，收率：7 5%)。LCMSM+HJ+=259.1。6062023年第49 卷浙江理工大学学报（自然科学）BocBocHOOHNOHNOTsSHSTsCIPd/CCH2CICO2Na/Na2CO3THF/r/18hDMAP/DCM,0-r/18 hNaH/DMF/O-rt/3hDMF/rt-80C/6hBocBocH-1aH-1bH-1cH-1dNBOCNHNBOCHOHONBOCHOCDINH2-NH2HCHCIHCSTHF/rt/3 hEtOH/rt/18hMeOH/rt/18hHCHOSOHOHH-1eH-1fH-1gHSP90i-1图1HSP90i-1合成路线OHHOOH30CBocSHHOBrBocSNHPd/CCH2CICO2Na/Na2CO3THF/rt/12 hTHF/rt/18 hDMF/t-80C/6hNO2NO2NH2BocH-2aH-2bH-2cH-2dBocHOHO工BocNHOSCDINH2-NH2HOHOHCITHF/rt/3 hEtOH/rt/18hMeOH/rt/4hOHOHH-2eH-2fHSP90i-2图2抑制剂HSP90i-2合成路线OHPABBocOHTFABocOHDMF/Na2COg/rt/16hOHEEDQ/DCM/rt/3hDCM/rt/3hNHBocM1aM1bM1cM1dHNNHBocM1aBoONHHDCM/TEAVr/3hHTEA/DCM/rt/2hHNBocNO2M1eM1图3三肽连接子M1合成路线1.4.2M1c合成将 M1b(0.5 g，1.59 m m o l)和 PAB(0.2 g,1.75mmol)加人二氯甲烷（2 0 mL），加人EEDQ(0.8g，3.18 m m o l)，室温反应3h。减压浓缩，硅胶色谱法纯化(PE与EtOAc比值为7:3)得白色固体(513.0 mg，收率：7 7%)。LCMSM+HJ+=420.2。1.4.3M1d合成将Mlc（0.6 g，1.43m m o l)加人二氯甲烷(20 mL),加人三氟乙酸（0.4 mL，4.30 m m o l)，室温反应3h。减压浓缩，硅胶色谱法纯化（PE与EtOAc比值为4:1)得白色固体（37 9.0 mg，收率：80%)。L C M SM+H +=32 0.2。607刘文金等：HSP90抑制剂前药设计及合成第5期1.4.4Mle合成将M1d(0.1g，1.30 m m o l)溶于二氯甲烷(10 mL),加人Mla(0.2g，1.40 m m o l)和三乙胺(0.3mL，1.9 5m m o l)，室温反应3h。加水(5mL），用乙酸乙酯（2 0 mLX4)萃取，无水硫酸钠干燥有机层，减压浓缩，得白色固体（110 mg，收率：69%)。H NM R（40 1 M H z，D M SO）10.159.67(m，1H)，7.7 7 (d，J=8.3 H z，1H),7.667.41(m,2 H),7.2 3(d，J=8.5H z,2 H),6.84(dd,J=23.6,9.2Hz,1H),5.76(s,2H),5.09(t，J=5.6 H z,1H)，4.42(d,J=5.2 H z,4H)，3.9 2 3.7 1(m，,2 H),3.6 3(d,J=6.7 H z,1H),2.12(d,J=8.5Hz,1H),2.061.79(m,5H)，1.38(s，11H)，0.9 7 0.6 9(m，13H)。LCMSM+HJ+=519.3。1.4.5M1合成将Mle（0.4g，1.30 m m o l)溶于二氯甲烷(10mL）,加人对硝基氯甲酸苯酯（39.0 mg，0.19mmol),加人三乙胺(1.0 mL，0.38 m m o l),室温反应2 h。加水（5mL），用乙酸乙酯（2 0 mLX4)萃取，无水硫酸钠干燥有机层，减压浓缩，得白色固体(441.9 mg，收率：8 4%)。LCMSM+HJ+=628.3。1.5三肽前药P1的合成目标分子的合成路线见图4。将HSP90i-1(80.0 mg，0.17 m m o l)溶于 DMF(10 mL),加人M1(118.0 mg,0.17 mmol)和 HOAT(34.7 mg,0.23mmol),加人DIEA(41.0mg，0.34 m m o l),在30 反应4h。减压浓缩，硅胶色谱法纯化（PE与EtOAc比值为7：3)得白色固体（12 3.8 mg，收率:7 1%)。H NMR(401 MHz,DMSO)11.87(s，1H)，10.0 6(s，1H),9.52(d,J=16.2 H z,2H),7.77(d，J=8.8 H z，1H),7.47(d d d，J=23.6,14.1,5.2Hz,5H),7.28(d,J=8.6Hz,2H),6.93(dd，J=8.6,2.0 H z,1H),6.8 1(d,J=9.5 Hz，1H)，6.6 8(s，1H)，6.42(d,J=3.0Hz，1H),6.2 3(s，1H)，4.9 8(s,2 H),4.3 8(dd，J=15.9,7.2 H z,2 H),4.2 0(s,2 H),3.9 5(d,J=11.1Hz,2H),3.82(s,2H)，3.6 3(s,1H)，2.9 52.7 7(m，1H)，2.10 1.7 9(m,6H),1.67(d,J=6.5 Hz，,4H),1.38(s，,11H),1.170.9 9 (m，3H)，0.9 8 0.8 5(m，7 H),0.80(dd,J=12.7,6.9 Hz,12H)。L C M SM+HJ+=963.5。NHBCOHOHNHOAT/DIEAHONHDMF/30C/4hHNOHBocNOHOP1OHHSP90i-1M1OH图4三肽前药P1的合成路线1.6三肽前药P2的合成目标分子的合成路线见图5。将HSP90i-2(100.0 mg，0.2 4m m o l)溶于DMF(10 mL),加人M1(167.0mg，,0.2 4m m o l)和HOAT(49.0 mg,0.36 mmol),加人DIEA(57.9mg，0.48 m m o l),在30 反应4h。减压浓缩，硅胶色谱法纯化（PE与EtOAc比值为7：3）得白色固体（158.5mg，收率:6 8%)。H NMR（40 1 M H z,D M SO)11.9 1(s,1H),10.10(d，J=2 3.2 H z,1H),9.58(s,1H),9.38(s，1H),7.7 7(d，J=8.9 H z，1H),7.56(d，J=8.5H z，2 H)，7.2 9（d d，J=8.4,4.6Hz，4H)，7.13(d，J=8.3H z，,2 H),6.8 9 6.66(m，2 H)，6.2 5(s，1H)，4.9 9(s，2 H),4.39(dt,J=17.0,8.3 Hz,2H),3.82(s,2H),3.64(s，1H)，3.46(s，3H)，3.0 7 2.8 5(m,1H),2.762.59(m，2 H)，2.38-2.2 3(m，7 H),2.201.74(m，6 H)，1.38(s，9 H)，1.0 3 0.6 9(m,18H)。L CM SM+H J+=9 54.2。2结果与讨论2.1M1的合成过程分析对M1进行质谱分析测试，结果如图6 所示。在三肽连接子M1的合成过程中,Mla和脯氨酸在DMF和Na,CO，条件下进行缩合，得到M1b。该氨基酸缩合反应条件温和，特异性高16 ，收率为75%。图6(a)展示了M1b在液相质谱ESI正模式6082023年第49 卷浙江理工大学学报（自然科学）下测试所得的谱图；由图6（a)可知其中：横坐标为化合物的摩尔质量，单位为（g/mol)），表示化合物的分子质量；纵坐标为荧光强度，用a.u.表示，表示化合物吸收强度。测得离子峰M+H+=259.1,因结构中包含Boc，由此推断所测样品中化合物分子量为2 59.1十56，与目标产物M1b的理论分子质量314.1一致。BocHOOHHNHHOAT/DIEAHONHDMF/30C/4 hNHNHOOHBocHSP90i-2M1P2OHOH图5三肽前药P2的合成路线3000020000250001800016000(ne)柔(n)乐2000014000LLI120001500010000ILLI8000100006000IS9S91191ISSE50004000200000010020030040050060070050100150200250300350400450500摩尔质量/(gmol-)摩尔质量/g:mol)(a)M1b的液相质谱(b)M1c的液相质谱300008000E250006000(ne)/乐柔20000(ne)乐柔ILLI61S1500040001191ItsK1000011912000250000004080120160200240280320050100150200250300350400450500550600摩尔质量/(g:mol)摩尔质量/(g:mol)(c)Mld的液相质谱(d)Mle的液相质谱4000E35003000(ne)250020001T91F81500IOS1000ILST2S8L500100200300400 500600 700800900摩尔质量/(gmol)(e)M1的液相质谱图6M1合成过程中产物的液相质谱609刘文金等：HSP90抑制剂前药设计及合成第5期由于无保护的二肽很容易发生自身缩合，形成稳定的哌嗪二酮结构17 ,故在引人第三个氨基酸之前,先与M1b的羧基反应,即M1b和对氨基苄醇反应得到二肽的苯酰胺衍生物M1c，纯化后产物收率为7 7%。图6(b)展示了M1c在液相质谱ESI正模式下测试所得的谱图；由图6（b)可知，测得离子峰M+H+=420.3,与目标产物M1c的理论分子质量419.3一致。M1c在DCM中用TFA脱去氨基保护基Boc，得到N端未保护的二肽M1d，收率8 0%。图6（c)展示了M1d在液相质谱ESI正模式下测试所得的谱图；由图6（c)可知，测得离子峰M十H+=320.2，与目标产物M1d的理论分子质量319.2一致。Mld中的氨基与Mla的活性酯部分高效缩合得到三肽苯酰胺衍生物Mle,收率为6 9%。图6(d)展示了Mle在液相质谱ESI正模式下测试所得的谱图；由图6（d)可知，测得离子峰M+H+=519.3,与目标产物M1e的理论分子质量518.3一致。M1e与对硝基氯甲酸苯酯发生酰化反应,得到稳定的三肽苯酰胺活性酯衍生物M1,收率8 4%,该路线总产率为2 7%。图6（e)展示了M1在液相质谱ESI正模式下测试所得的谱图；由图6（e)可知，测得离子峰M+H+=628.3,因结构中包含Boc，由此推断所测样品中化合物分子量为6 2 8.3十56，与目标产物M1的理论分子质量6 8 3.3一致，确定为目标化合物。2.2P1和P2合成过程分析将含有二级胺官能团的HSP90抑制剂分别与含有活性酯的三肽连接子缩合，得到两个三肽前药P1和P2。反应路线简短，条件温和，产品收率较高，为三肽类药物的合成提供了新的方法。2.2.1P1液相质谱分析采用液相质谱（LCMS)对P1进行质谱分析，分析结果如图7（a)所示，测得离子峰M十H+=963.5,因结构中包含Boc，由此推断所测样品中化合物分子量为9 6 3.5十43，与所设计目标产物P1的相对分子质量10 0 5.5相吻合，确定为目标化合物。2.2.2P1核磁氢谱分析采用核磁氢谱（H NMR)对P1进行氢谱分析见图7(b),P1分子式为Cs4H,N。O 1o，图中氢的个数为7 1，1、2、3位置的3个氢为3个羟基峰，4、5位置的6 个氢为异丙基的两个甲基的氢，6、7、8、9 位置的12 个氢为另外4个甲基的氢，因此可以确定为目标化合物9001tS60S644444899998689760606802806L08L063000E2500(ne)柔20003H1500OH1N6789溶剂：DMSO-deOH21000化学式：C50H67N9010260590522345389L2S96500230100220030040050060070080090010001L011.07.5/8摩尔质量/(gmol)(a)P1的液相质谱(b)P1的核磁氢谱图7P1的液相质谱和核磁氢谱2.2.3P2液相质谱分析采用液相质谱（LCMS)对P2进行质谱分析，分析结果如图8（a)所示。测得离子峰M+H+=954.5,与所设计的目标产物P2的相对分子质量953.5相吻合，确定为目标化合物。2.2.4P2核磁氢谱分析采用核磁氢谱（HNMR)对P2进行氢谱分析，结果见图8(b)。P2 分子式为Cs。H。N。O 1o，图中氢的个数为50,1、2、3位置的3个氢为3个羟基峰，4、5、6、7、8、9 位置的18 个氢为6 个甲基的氢，由此可以确定为目标化合物。2.2.5P1和P2核磁碳谱分析核磁碳谱(13CNMR)对P1和P2进行碳谱分析见图9，根据碳的位置和数量可以确定为目标化合物。6102023年浙江理工大学报（自然科学）第49 卷52SZ966+5560E60680280乙8 0233180二62000StS61500(ne)来柔11913.HO456789溶剂：DMSO-d6-OH1100020HNN化学式：C50H67N9O10239LL6500691260060310020030040050060070080090010001652L.5425010摩尔质量/(g:mol)(a)P2的液相质谱(b)P2的核磁氢谱图：P2的液相质谱和核磁氢谱02040 6080100120140160180020406080100120140160180f1/8f1/8(a)P1(b)P2图9P1和P2的核磁碳谱3结论本文先通过多步反应得到HSP90i-1和HSP90i-2两种HSP90抑制剂，随后分别与三肽连接子M1进行缩合反应，得到三肽前药分子P1和P2。合成三肽连接子M1的总产率为2 7%，通过 HNMR、L CM S、13CNM R证明成功合成了目标化合物。本文提出的整个合成路线所使用的原料廉价易得，反应都在常温下进行，条件温和可控，总产率较高。本研究对HSP90抑制剂的毒性问题进行分析，利用前药方法优化化合物的结构，从而达到降低药物毒性，提高药物安全窗的目的，对抗肿瘤药物的发展有着重要的实践意义。参考文献：1Li Y Y,Zhang T,Schwartz S J,et al.Newdevelopments in Hsp90 inhibitors as aanti-cancertherapeutics:Mechanisms,clinical perspective and morepotentialJJ.Drug Resistance Updates,2009,12(1/2):17-27.2J Sidera K,Patsavoudi E.HSP90 inhibitors:Currentdevelopment and potential in cancer therapyJ.RecentPatents on Anti-Cancer Drug Discovery,2013,9(1):1-20.3 Alarcon S V,Mollapour M,Lee M J,et al.Tumor-intrinsic and tumor-extrinsic factors impacting hsp90-targeted therapy J.Current Molecular Medicine,2012，12(9)：112 5-1141.4 张钟元，阎爱侠.Hsp90抑制剂的研究进展J中国医药生物技术，2 0 2 1，16(1)：41-50.5J Shrestha L,Bolaender A,Patel H J,et al.Heat shockprotein（H SP）d r u g d i s c o v e r y a n d d e v e l o p me n t:Targeting heat shock proteins in diseaseJ.CurrentTopics in Medicinal Chemistry，2 0 16，16(2 5):2 7 53-2764.6 Liu N X,Chen Q H,Zhang QQ,et al.The applicationof prodrug-based drug delivery strategy in anticancerdrugs J.Current Topics in Medicinal Chemistry,2021,21(24):2184-2204.7 Zawilska J B,Wojcieszak J,Olejniczak A B.Prodrugs:A challenge for the drug development J .Pharmacological Reports,2013,65(1):1-14.611刘文金等：HSP90抑制剂前药设计及合成第5期8 Zhang T,Yang X R,Xu W P,et al.Heat shock protein90 promotes RNA helicase DDX5 accumulation andexacerbates hepatocellular carcinomaby inhibitingautophagyLJ.Cancer Biology&Medicine,2021,18(3):693-704.9 Daneri-Becerra C,Galigniana M D.The Hsp90-bindingimmunophilin FKBP52 enhances neurodifferentiation andneuroregeneration in murine models J .Ne u r a lRegeneration Research,2022,17(3):555-556.10林智才，陈燕丽，苏小清，等。Hsp90抑制剂减弱肝癌耐药细胞株对索拉非尼诱导铁死亡的耐受性现代肿瘤医学，2 0 2 2，30(2 1)：38 6 2-38 6 8.11Rautio J,Kumpulainen H,Heimbach T,et al.Prodrugs:Design and clinical applicationsJJ.NatureReviews Drug Discovery,2008,7(3):255-270.12J Diez-Torrubia A,Garcia-Aparicio C,Cabrera S,et al.Application of the dipeptidyl peptidase IV(DPPIV/CD26)based prodrug 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