2141例孕妇阴道和直肠B族链球菌的定植率、血清型及生物膜形成能力.pdf

山东医药2023 年第 63 卷第 26 期2 141例孕妇阴道和直肠B族链球菌的定植率、血清型及生物膜形成能力梁正，聂署萍中山大学附属第八医院检验科，广东深圳518033摘要：目的探讨孕妇阴道和直肠B族链球菌（GBS）的定植率、血清型及生物膜形成能力。方法收集行GBS产前筛查的2 141例围生期孕妇，采集阴道下段1/3处和肛门直肠处拭子标本进行GBS培养和鉴定。随机选取分离的67株GBS，采用多重PCR法检测GBS荚膜血清型，流加培养方法观察菌株生物膜形成能力。结果阴道拭子检出 GBS 232 株，定植率为 10.84%；直肠拭子检出 GBS 301 株，定植率为 14.06%；GBS 在直肠的定植率高于阴道（P0.05）。67株GBS中，形成强生物膜11株，中等强度生物膜26株，弱生物膜30株。不同血清型菌株生物膜形成能力比较差异无统计学意义（P均0.05），直肠GBS生物膜形成能力强于阴道GBS（P0.84）、中度生物膜（0.32OD5950.84）、弱生物膜（0.16OD5950.32）、非生物膜（OD5950.16）。每块96孔板分别设3个空白对照孔（未加培养基及细菌）和3个阴性对照孔（只加培养基），每株细菌设3个复孔，试验重复3次，取平均值。1.5统计学方法采用SPSS20.0统计软件。计数资料以例（%）表示，组间比较采用2检验及Kruskal-Wallis检验。P0.05为差异有统计学意义。2 结果 2.1直肠和阴道GBS定植率比较2 141例围生期孕 妇 中，阴 道 拭 子 检 出 GBS 232 株，定 植 率 为10.84%。直肠拭子检出301株，定植率为14.06%；阴道、直肠拭子联合共检出GBS 349株，总定植率为16.30%。直肠GBS定植率高于阴道（P0.05）。部分菌株荚膜血清型多重PCR结果见图1。M a b a b b a M（bp）1 1001 000900800700600500400300200100 注：M为DNA marker；其余为GBS不同血清型。图1 部分菌株荚膜血清分型电泳图2.3GBS 生物膜形成能力检测结果67 株 GBS中，形成强生物膜11株，中等强度生物膜26株，弱生物膜30株。2.4不同血清型和部位来源GBS生物膜形成能力比较5种血清型GBS生物膜形成能力比较，差异无统计学意义（P均0.05），见表1。直肠GBS生物膜形成能力较阴道GBS增强（P0.01），见表2。3 讨论 围生期孕妇 GBS定植率、血清型分布与种族、地域以及社会经济状况相关，了解本地区的定植率和血清型分布情况对合理制定 GBS感染的预防措施有重要意义。据报道，全球孕妇 GBS 定植率约15%，以加勒比海地区最高为34%，最低的为美拉尼西亚地区，仅2%；欧洲、北美洲以及澳大利亚等地区定植率相似，为18%，南非地区的定植率为25%，西非地区为14%，南亚及东南亚地区为10%1。我国不同地区围生期孕妇GBS定植率也存在明显差异，江苏地区为 8.7%，北京地区为 7.1%，青岛地区为10.6%8-10。本研究中2 141例围生期孕妇GBS定植率为16.3%，明显高于文献报道。这种差异可能与研究时间、采样部位、采样方法的不同有关，因此需要进行连续监测。既往研究显示，全球孕妇直肠、阴道定植的GBS血清型均以a、b、型为主，占总体血清型的98%；但是不同地区主要流行的GBS血清型存在差异，如型占全球总体流行血清型的25%，但在中美洲、东南亚等地区仅占11%1。本研究在围生期孕妇中共检出a、b、型5种血清型，直肠和阴道定植的 GBS在血清型分布上无统计学差异，总体以型和型为主，分别占 32.8%、38.9%。该结果与本地区 2018 年报道的型占60.7%11略有不同，提示GBS流行血清型可随时间表1不同血清型GBS生物膜形成能力比较（株）GBS血清型ab生物膜形成能力弱 4 4 11015中度35086强20045表2不同部位来源GBS生物膜形成能力比较（株）GBS来源部位阴道直肠生物膜形成能力弱2014中度 517强3863山东医药2023 年第 63 卷第 26 期迁移而变化，因此需进行定期监测。此外，本地区的研究结果与我国其他地区也有差异，如厦门地区孕妇 定 植 GBS 血 清 型 以 型（54.2%）和 b 型（17.7%）为主12，青岛地区以型（44.4%）和b型（31.5%）为主10。了解本地区流行的流行情况，有助于更好地、有针对性地预防母婴GBS感染。生物膜能够帮助细菌抵御外环境的变化，抵抗抗生素的杀伤及逃避宿主免疫，维持细菌在宿主体内的持续定植13-14。本研究结果显示，不同GBS菌株的生物膜形成能力存在明显差异，可能是造成GBS在宿主体内呈现间歇性、暂时性或持续性等不同定植状态的原因15。本研究中孕妇直肠和阴道定植的GBS以中、弱生物膜形成株为主，不同血清型GBS生物膜形成情况比较差异无统计学意义；而不同部位来源GBS生物膜形成能力存在差异，直肠定植的GBS生物膜形成能力比阴道定植的菌株强，可能是造成 GBS在直肠定植率高于阴道的原因。目前国内外关于GBS定植机制的研究少见，下一步我们将重点研究生物膜在宿主GBS定植中的作用。综上所述，围生期孕妇 GBS定植率较高，血清型以型和V型为主。定植菌株整体生物膜形成能力较弱，直肠定植的菌株生物膜形成能力强于阴道定植株，可能与直肠定植率高有关，其具体机制仍有待进一步研究。参考文献：1RUSSELL N J，SEALE A C，ODRISCOLL M，et al.Maternal colonization with group B streptococcus and serotype distribution worldwide：systematic review and meta-analyses J.Clin Infect Dis，2017，65（Suppl 2）：S100-S111.2STEER P J，RUSSELL A B，KOCHHAR S，et al.Group B streptococcal disease in the mother and newborn：a review J.Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol，2020，252：526-533.3NANDURI S A，PRTIT S，SMELSER C，et al.Epidemiology of invasive early-onset and late-onset group B streptococcal disease in the United States，2006 to 2015：multistate laboratory and population-based surveillanceJ.JAMA Pediatr，2019，173（3）：224-233.4DAKIN A，FERGUSON W，DREW R，et al.Assessing standards for prevention of early onset group B streptococcal（GBS）disease in Ireland J.Ir J Med Sci，2022，191（2）：785-791.5SHIBATA M，MOROZUMI M，MAEDA N，et al.Relationship between intrapartum antibiotic prophylaxis and group B streptococcal colonization dynamics in Japanese mother-neonate pairsJ.J Infect Chemother，2021，27（7）：977-983.6VORNHAGEN J，ADAMS WALDORF K M，RAJAGOPAL L.Perinatal group B streptococcal infections：virulence factors，immunity，and prevention strategies J.Trends Microbiol，2017，25（11）：919-931.7DONLAN R M，COSTERTON J W.Biofilms：survival mechanisms of clinically relevant microorganismsJ.Clin Microbiol Rev，2002，15（2）：167-193.8GE Y，PAN F，BAI R，et al.Prevalence of group B streptococcus colonization in pregnant women in Jiangsu，East China J.BMC Infect Dis，2021，21（1）：492.9LU B，LI D，CUI Y，et al.Epidemiology of group B streptococcus isolated from pregnant women in Beijing，China J.Clin Microbiol Infect，2014，20：370-373.10宋海燕，郑旭，由晓颜.青岛孕晚期妇女B族链球菌定植、药敏及血清型分析 J.中国实验诊断学，2019，23（11）：1937-1939.11聂署萍，成子贤，王琼，等.深圳地区孕妇定植型B族链球菌流行病学特征分析J.中国感染控制杂志，2018，17（6）：522-526.12林雅茵，林新祝，郑欣怡，等.B族链球菌血清型和基因型及耐药性的研究 J.中华医院感染学杂志，2020，30（9）：1292-1296.13胡金树，赵建宏.细菌生物膜的形成及影响因素 J.中华医院感染学杂志，2009，19（18）：2519-2520.14赵琳珊，徐广健，陈俊文，等.四环素耐药无乳链球菌生物膜形成特点 J.中国热带医学，2020，20（3）：227-230.15WANG L，TAO Z，LU B.Biofilm formation and invasive ability contribute to CC17 serotype group B streptococcus virulenceJ.Chin Med J，2022，135（7）：869-871.（收稿日期：2023-04-07）64