CD30、c-Myc及P53蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义.pdf

论著C D 3 0、c-M y c及P 5 3蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义*王小玲1 何礼想2 王研1 吕国庆1 吴隼1,2(新乡医学院第一附属医院 1.血液科;2.病理科,河南 卫辉 4 5 3 1 0 0)【摘要】目的 探讨C D 3 0、c-M y c及P 5 3蛋白在新发弥漫大B细胞淋巴瘤(D L B C L)中的表达情况,及其与临床病理和预后的相关性。方法 纳入2 0 1 9年3月2 0 2 3年1月新乡医学院第一附属医院血液科收治的1 6 0例D L B C L患者的临床和病理学资料,分析C D 3 0、c-M y c及P 5 3蛋白在新发D L B C L中的表达情况并分析其与临床病理参数及预后的关系。并根据H a n s分型将患者分为G C B组(1 7例)和n o n-G C B组(1 4 3例),分别分析c-M y c、B C L-2与C D 3 0、P 5 3蛋白表达之间的关系。结果 以0%为界值,则有5 0例(3 1%)新发D L B C L患者表达C D 3 0阳性,2 0%为界值则有2 7例(1 7%)患者表达C D 3 0阳性。C D 3 0阳性组和阴性组患者的东部肿瘤协作组体能状态(E C OG P S)评分2分患者比例、国际预后指数(I P I)评分2分患者比例及E B病毒阳性患者比例比较差异均有统计学意义(P0.0 5)。c-M y c阳性和阴性表达组患者的初诊时L DH升高患者比例、骨髓浸润发生率对比差异均有统计学意义(P0.0 5)。在n o n G C B组比较中,C D 3 0阳性组(2 0%)与阴性组相比具有更高的c-M y c表达率,余下组间比较差异均无统计学意义(P0.0 5)。结论 C D 3 0与c-M y c蛋白在D L B C L中的表达与多种临床病理参数及预后相关,在判断其临床病理及预后中具有重要的参考价值。【关键词】C D 3 0;c-M y c;P 5 3;蛋白;弥漫大B细胞淋巴瘤【中图分类号】R 7 3 3 【文献标志码】A D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.1 0.0 1 6 基金项目:河南省科技厅科技攻关基金资助项目(1 8 2 1 0 2 3 1 0 2 7 6)通讯作者:吴隼,E-m a i l:1 3 2 2 0 9 8 6 2 8q q.c o m引用本文:王小玲,何礼想,王研,等.C D 3 0、c-M y c及P 5 3蛋白在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义J.西部医学,2 0 2 3,3 5(1 0):1 4 9 4-1 5 0 0.D O I:1 0.3 9 6 9/j.i s s n.1 6 7 2-3 5 1 1.2 0 2 3.1 0.0 1 6T h e e x p r e s s i o n a n d c l i n i c a l s i g n i f i c a n c e o f C D 3 0,c-M y c a n d P 5 3 p r o t e i n i n d i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m p h o m aWA N G X i a o l i n g1,H E L i x i a n g2,WA N G Y a n1,L Y U G u o q i n g1,WU S u n1,2(1.D e p a r t m e n t o f H e m a t o l o g y,T h e F i r s t A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f X i n x i a n g M e d i c a l U n i v e r s i t y,W e i h u i 4 5 3 1 0 0,H e n a n,C h i n a;2.D e p a r t m e n t o f P a t h o l o g y,T h e F i r s t A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f X i n x i a n g M e d i c a l U n i v e r s i t y,W e i h u i 4 5 3 1 0 0,H e n a n,C h i n a)【A b s t r a c t】O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e e x p r e s s i o n o f C D 3 0,c-M y c,a n d P 5 3 p r o t e i n s i n n e w l y d i a g n o s e d d i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m p h o m a,a s w e l l a s t h e i r c o r r e l a t i o n w i t h c l i n i c a l p a t h o l o g y a n d p r o g n o s i s.M e t h o d s C l i n i c a l a n d p a t h o-l o g i c a l d a t a o f 1 6 0 d i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m p h o m a p a t i e n t s a d m i t t e d t o t h e D e p a r t m e n t o f H e m a t o l o g y,T h e F i r s t A f f i l i a-t e d H o s p i t a l o f X i n x i a n g M e d i c a l U n i v e r s i t y f r o m M a r c h 2 0 1 9 t o J a n u a r y 2 0 2 3 w e r e a n a l y z e d.T h e e x p r e s s i o n o f C D 3 0,c-M y c,a n d P 5 3 p r o t e i n s i n n e w l y d i a g n o s e d d i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m p h o m a w a s a n a l y z e d,a l o n g w i t h t h e i r r e l a t i o n s h i p w i t h c l i n i c a l a n d p a t h o l o g i c a l p a r a m e t e r s a n d p r o g n o s i s.P a t i e n t s w e r e d i v i d e d i n t o t w o g r o u p s a c c o r d i n g t o t h e H a n s c l a s s i f i c a t i o n,a n d t h e r e l a t i o n s h i p b e t w e e n c-M y c,B C L-2,a n d C D 3 0,P 5 3 p r o t e i n e x p r e s s i o n w a s a n a l y z e d.R e s u l t s U-s i n g 0%a s t h e c u t-o f f v a l u e,C D 3 0 w a s e x p r e s s e d i n 5 0 c a s e s(3 1%)o f n e w l y d i a g n o s e d d i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m p h o m a p a t i e n t s,w h i l e u s i n g 2 0%a s t h e c u t-o f f v a l u e,C D 3 0 w a s e x p r e s s e d i n 2 7 c a s e s(1 7%)o f p a t i e n t s.T h e r e w e r e s t a t i s t i-c a l l y s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s i n t h e p r o p o r t i o n o f p a t i e n t s w i t h E C OG P S s c o r e 2,I P I s c o r e 2,a n d E B E R-p o s i t i v e b e-t w e e n C D 3 0-p o s i t i v e a n d C D 3 0-n e g a t i v e e x p r e s s i o n g r o u p s(P0.0 5).T h e r e w e r e s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s i n t h e p r o p o r t i o n o f p a t i e n t s w i t h e l e v a t e d L DH a t i n i t i a l d i a g n o s i s a n d b o n e m a r r o w i n f i l t r a t i o n b e t w e e n c-M y c-p o s i t i v e a n d 4941西部医学 2 0 2 3年1 0月 第3 5卷第1 0期 M e d J W e s t C h i n a,O c t o b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 0c-M y c-n e g a t i v e e x p r e s s i o n g r o u p s(P0.0 5).O n l y i n t h e n o n-G C B s u b g r o u p c o m-p a r i s o n,C D 3 0-p o s i t i v e g r o u p(2 0%)h a d a h i g h e r r a t e o f c-M y c e x p r e s s i o n c o m p a r e d t o t h e n e g a t i v e g r o u p,w h i l e t h e r e w e r e n o s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e s b e t w e e n o t h e r s u b g r o u p s(P0.0 5).C o n c l u s i o n T h e e x p r e s s i o n o f C D 3 0 a n d c-M y c p r o t e i n s i n d i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m p h o m a i s a s s o c i a t e d w i t h v a r i o u s c l i n i c a l a n d p a t h o l o g i c a l p a r a m e t e r s a n d p r o g n o s i s,p r o v i d i n g i m p o r t a n t r e f e r e n c e v a l u e f o r c l i n i c a l p a t h o l o g y a n d p r o g n o s i s e v a l u a t i o n.T h e l a c k o f s t a t i s t i c a l-l y s i g n i f i c a n t f i n d i n g s r e g a r d i n g P 5 3 p r o t e i n e x p r e s s i o n i n t h i s s t u d y m a y b e d u e t o t h e s a m p l e s i z e l i m i t a t i o n.【K e y w o r d s】C D 3 0;c-M y c;P 5 3;P r o t e i n;D L B C L 弥漫大B细胞淋巴瘤(D i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m-p h o m a,D L B C L)是最常见的侵袭性大B淋巴细胞淋巴瘤类型,发病年龄峰值为6 07 0岁,占非霍奇金淋巴瘤的2 5%3 0%。该病可发生在有淋巴组织存在的任何部位,异质性较强,临床、病理学特征不同,对免疫化疗的反应亦不相同。其病情进展较为迅速,若不及时治疗,中位生存时间一般不超过1 2个月1-2。淋巴造血系统病变,无疑也是病理诊断中的一个难点。一方面是因为病种繁多,另一方面也是因为不同病种间的形态学、免疫表型存在显著重叠。也正是因为这一点,近年来C D 3 0逐渐成为体液免疫及细胞免疫中 一 个 颇 有 潜 力 的 靶 点3-4。因 此,本 研 究 就C D 3 0及c-M y c、P 5 3蛋白在D L B C L中的表达情况及临床病理学特征进行分析,评估其预后价值,并确定其可能的相关因素。1 资料与方法1.1 一般资料 回顾性分析2 0 1 9年3月2 0 2 3年1月新乡医学院第一附属医院血液科收治并确诊的1 6 0例D L B C L患者的临床信息,收集纳入患者资料:性别、年龄、体重指数(BM I)、B组症状、初诊时乳酸脱氢酶(L DH)水平、结外累及、霍奇金淋巴瘤(S t a g i n g o f H o d g k i n s l y m p h o m a,A n n A r b o r)分期、国际预后指数(I n t e r n a t i o n a l p r o g n o s t i c i n d e x,I P I)评分、东部肿瘤协 作 组 体 能 状 态(E a s t e r n C o o p e r a t i v e O n c o l o g y G r o u p p e r f o r m a n c e s t a t u s,E C OG P S)评分、H a n s分型、骨髓浸润、治疗方案;病理学资料:C D 3 0、c-M y c、P 5 3、K i-6 7、C D 5及B C L-2等。1 6 0例患者按照H a n s免疫分型进行分组,生发中心B细胞样亚型(G e r m i-n a l c e n t e r B c e l l,G C B)分型(G C B组)1 7例,非生发中心B细 胞 样 亚 型(n o n-G e r m i n a l c e n t e r B c e l l,n o n G C B)分型(n o n-G C B组)1 4 3例。纳入标准:符合WHO(2 0 1 6)关于淋巴组织肿瘤修订版相关分类标准,淋巴结活检确诊为D L B C L的成年患者。确诊后生存期6个月。检查完善且资料齐全。排除标准:排除了原发性免疫缺陷、H I V感染、淋巴恶性肿瘤史、实体器官移植、同种异体干细胞移植或免疫抑制药物导致的免疫系统损害患者。该研究经本院伦理委员会审核批准。1.2 实验方法 利用免疫组化(I mm u n o h i s t o c h e m-i s t r y,I HC)中抗原能够与抗体特异性结合的原理,通过一些化学反应使被荧光素酶、金属离子、同位素等显色剂标记的抗体显色,并对其进行定位、定性及定量研究,间接确定组织细胞内C D 3 0、c-M y c、P 5 3、C D 5等的表达情况。步骤:取45 m厚的连续石蜡切片,放在6 7 烘箱中烤片2 h,二甲苯脱蜡和常规梯度酒精水化,用p H=6.0的柠檬酸盐缓冲液微波加热至沸腾修复抗原。P B S缓冲液冲洗,然后3%过氧化氢冲洗阻断内源性过氧化物酶活性。向每张切片滴加稀释后的一抗,恒温箱中4 过夜,P B S缓冲液冲洗,滴加1滴酶标抗鼠/兔聚合物(即二抗),3 7 恒温箱中孵育1 5 m i n,P B S冲洗,二氨基联苯胺试剂染色、苏木素复染,P B S缓冲液冲洗,蓝化,梯度酒精脱水干燥,二甲苯透明,最后用中性树胶封片。阴性对照采用P B S代替一抗。荧光原位杂交(F l u o r e s c e n c e i n s i-t u h y b r i d i z a t i o n,F I S H)是原位杂交的方法之一,可以用于定位固定组织和细胞中特定核酸靶标的强大技术,能够获得与基因表达和遗传位点相关的时间和空间信息。本研究收集的病例中有2 3例患者使用了F I S H检测技术,使用的c-M y c、B C L-2基因探针为双色断裂探针,-2 0 保存备用。步骤:首先将探针8 5 温浴5 m i n,立即0 放置51 0 m i n,使双链D NA探针变性。将制作好的染色体玻片标本5 0 培养箱烤片23 h,再将其置于7 07 5 7 0%甲酰胺/2S S C的变性液中23 m i n,使其变性,7 0%、9 0%、1 0 0%乙醇梯度脱水,各5 m i n,然后空气干燥。加1 0 L已变性的D NA探针在玻片标本上杂交区域,盖盖玻片,橡胶封片,放在3 7 湿盒中杂交过夜,洗脱,暗处晾干。取1 0 L杂交蓝染染色液至干燥的载玻片上,荧光显微镜下观察结果。最后由2名以上病理学专家确定I HC及F I S H的检测结果。关于I HC评估C D 3 0阳性的阈值目前尚缺乏共识,本研究使用0%和2 0%的阈值分别评估了D L B C L患者中C D 3 0的表达情况。1.3 统计学分析 采用 S P S S 2 6.0软件分析数据。5941西部医学 2 0 2 3年1 0月 第3 5卷第1 0期 M e d J W e s t C h i n a,O c t o b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 0使用描述性统计表示基线资料,计数资料以均数标准差(xs)表示,所有样本或者是G C B组与n o n-G C B组中,C D 3 0、c-M y c、P 5 3蛋白及C D 5阳性与阴性组患者之间的临床和病理学特征差异采用皮尔逊2检验或F i s h e r精确检验法进行分析。以P0.0 5为差异有统计学意义。2 结果2.1 纳入患者一般资料 纳入患者中男7 9例,女8 1例;平均年龄(6 3.0 31 2.4 6)岁,6 0岁 1 0 3例,6 0岁5 7例;结外累及7 9例;A n n A r b o r分期为+分期患者7 5例,而+分期患者8 5例;I P I评分2分9 5例,而2分6 5例;E C OG P S评分2分3 7例,而2个小淋巴细胞,高倍镜下易见核分裂象(见图1)。C D 3 0研究结果如下:阈值为0%时,5 0例(3 1%)患者的C D 3 0结果判读阳性;使用2 0%的阈值,2 7例(1 7%)患者C D 3 0结果判读阳性(见图2)。c-M y c阳性表达率及P 5 3表达率分别为4 6%(7 4/1 6 0)、5 2%(8 3/1 6 0),其它临床和病理学特征(见表1)。根据免疫组化结果对1 6 0例患者进行了细胞起源分型评估:1 7例(1 1%)为G C B,1 4 3例(8 9%)为n o n G C B。在所有患者中,B C L-2和 c-M y c的表达率分别为8 1.2 5%和4 6.2 5%(见图2),其中有3例(1.9%)原位杂交发现E B病毒阳性,并且这3例患 者 均 表 达C D 3 0(无 论 阳 性 阈 值0%,还 是2 0%),相较C D 3 0阴性组,C D 3 0阳性组患者可能有较高的E B病毒阳性率,差异有统计学意义(P0%和2 0%)不同,但分析所得出的结 果 却 是 相 似 的。当C D 3 0阳 性 阈 值0%时,C D 3 0阳性组与C D 3 0阴性组数据分析显示:E C OG P S评分、E B E R两组参数比较,差异有统计学意义(P2 0%时,I P I评分和E B 图1 D L B C L形态特点F i g u r e 1 M o r p h o l o g i c a l c h a r a c t e r i s t i c s o f d i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m p h o m a注:A.HE,2 0 0;B.HE,4 0 0图2 D L B C L组织C D 3 0、c-M y c、P 5 3、B C L-2及C D 5蛋白表达免疫组化检测结果F i g u r e 2 I mm u n o h i s t o c h e m i c a l d e t e c t i o n r e s u l t s o f C D 3 0,c-M y c,P 5 3,B C L-2,a n d C D 5 p r o t e i n e x p r e s s i o n i n d i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m p h o m a t i s s u e注:A.C D 3 0(1 0%+);B.C D 3 0(3 0%+);C.c-M y c;D.P 5 3;E.B C-L 2;F.C D 5。6941西部医学 2 0 2 3年1 0月 第3 5卷第1 0期 M e d J W e s t C h i n a,O c t o b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 0病毒阳性相比差异有统计学意义(P0.0 5)。c-M y c阳性和阴性表达组患者与初诊时L DH水平、骨髓浸润发生率之间对比差异有统计学意义(P7 0%,5 8例,7 8%)增殖指数(P=0.0 0 1)。C D 5阳性组与阴性组高BM I及结外累及的发生对比差异有统计学意义(P0.0 5)。此外,P 5 3阳性与阴性之间临床、预后参数数据分析差异均无统计学意义(P0.0 5)。见表1。图3 D L B C L F I S H基因检测结果F i g u r e 3 F I S H g e n e d e t e c t i o n r e s u l t s f o r d i f f u s e l a r g e B-c e l l l y m p h o m a注:A.c-M y c(+);B.B C L-2(+)。表1 1 6 0例D L B C L患者的临床病理特征与C D 3 0、c-M y c、P 5 3蛋白表达情况的比较n(1 0-2)T a b l e 1 C o m p a r i s o n o f c l i n i c o p a t h o l o g i c a l f e a t u r e s a n d e x p r e s s i o n o f C D 3 0,c-M y c,a n d P 5 3 p r o t e i n s i n 1 6 0 D L B C L p a t i e n t s临床资料n=1 6 00%c u t-o f f值2 0%c u t-o f f值4 0%c u t-o f f值是否表达0%c u t-o f f值C D 3 0+(n=5 0)PC D 3 0+(n=2 7)Pc-M y c+(n=7 4)PP 5 3+(n=8 3)PC D 5+(n=1 8)P性别0.9 1 50.8 8 90.8 6 50.5 2 30.3 4 5 男7 9(4 9)2 5(5 0)1 3(4 8)3 6(4 9)4 3(5 2)7(3 9)女8 1(5 1)2 5(5 0)1 4(5 2)3 8(5 1)4 0(4 8)1 1(6 1)年龄(岁)0.4 3 60.2 9 40.6 5 20.3 9 60.4 6 1 6 01 0 3(6 4)3 0(6 0)1 5(5 6)4 9(6 6)5 6(6 7)1 3(7 2)6 05 7(3 6)2 0(4 0)1 2(4 4)2 5(3 4)2 7(3 3)5(2 8)BM I(k g/m2)0.6 1 50.4 2 30.6 6 60.6 2 80.0 0 3 2 48 6(5 4)2 5(5 0)1 5(5 6)3 8(5 1)4 5(5 4)6(3 3)2 45 6(3 5)1 8(3 6)1 1(4 1)2 9(3 9)3 1(3 7)6(3 3)2 81 7(1 1)7(1 4)1(3)7(1 0)7(9)6(3 3)B组症状0.0 8 40.5 8 10.5 0 90.7 4 20.0 9 2 无1 0 8(6 8)2 9(5 8)1 7(6 3)4 8(6 5)5 7(6 9)9(5 0)有5 2(3 2)2 1(4 2)1 0(3 7)2 6(3 5)2 6(3 1)9(5 0)诊断时L DH水平0.8 7 20.2 8 60.0 40.3 0 40.5 9 9 正常9 8(6 1)3 0(6 0)1 9(7 0)3 9(5 3)5 4(6 5)1 0(5 6)升高6 2(3 9)2 0(4 0)8(3 0)3 5(4 7)2 9(3 5)8(4 4)结外累及0.9 1 50.3 2 50.2 6 20.1 1 20.0 4 是7 9(4 9)2 5(5 0)1 1(4 1)3 3(4 5)4 6(5 5)1 3(7 2)否8 1(5 1)2 5(5 0)1 6(5 9)4 1(5 5)3 7(4 5)5(2 8)A n n A r b o r评分0.8 4 80.4 8 40.8 2 70.7 7 40.1 9 9+期7 5(4 7)2 4(4 8)1 1(4 1)3 4(4 6)3 8(4 6)1 1(6)+期8 5(5 3)2 6(5 2)1 6(5 9)4 0(5 4)4 5(5 4)7(3 9)I P I评分(分)0.2 4 20.0 3 70.2 5 60.6 9 10.4 6 9 29 5(5 9)2 6(5 2)1 1(4 1)4 7(6 4)5 0(6 0)1 2(6 7)26 5(4 1)2 4(4 8)1 6(5 9)2 7(3 6)3 3(4 0)6(3 3)E C O G P S评分(分)0.0 2 80.1 6 80.2 7 80.4 9 80.0 9 2 23 7(2 3)1 7(3 4)9(3 3)2 0(2 7)2 1(2 5)7(3 9)7 0%1 5 8(9 9)3 6(7 2)0.4 7 82 1(7 8)0.2 3 85 8(7 5)0.0 15 9(7 1)0.4 0 41 3(7 5)0.8 7 5注:使用F i s h e r精确检验。7941西部医学 2 0 2 3年1 0月 第3 5卷第1 0期 M e d J W e s t C h i n a,O c t o b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 02.4 不同亚组C D 3 0、P 5 3表达与B C L-2、c-M y c蛋白与基因变化的相关性分析 G C B组与n o n-G C B组1 4 3例,不同亚组C D 3 0、P 5 3表达患者与B C L-2、c-M y c基因重排或蛋白表达之间的关系。发现仅n o n G C B组中,C D 3 0阳性(2 0%)患者相较于C D 3 0阴性患者有较高的c-M y c阳性表达率(P0.0 5)。同样,P 5 3表达组对比差异均无统计学意义(P0.0 5)。见表2、表3。表2 C D 3 0、P 5 3蛋白表达情况与c-M y c蛋白和基因变化的相关性T a b l e 2 T h e c o r r e l a t i o n b e t w e e n t h e e x p r e s s i o n o f C D 3 0,P 5 3 p r o t e i n s a n d c-M y c p r o t e i n a n d g e n e a l t e r a t i o n s分组0%c u t-o f f值2 0%c u t-o f f值是否突变C D 3 0+(n=5 0)C D 3 0-(n=1 1 0)PC D 3 0+(n=2 7)C D 3 0-(n=1 3 3)PP 5 3+(n=8 3)P 5 3-(n=7 7)PG C B组 c-M y c表达2/59/1 20.6 3 32/38/1 41.0 0 06/94/80.8 3 9 c-M y c重排2/52/1 20.6 8 51/31/1 41.0 0 03/91/80.6 6 1n o n G C B组 c-M y c表达2 3/4 54 1/9 80.3 0 01 5/2 44 9/1 1 90.0 5 53 6/7 42 8/6 90.3 3 2 c-M y c重排1/4 52/9 81.0 0 00/2 43/1 1 91.0 0 00/7 43/6 90.2 1 9注:使用F i s h e r精确检验。表3 C D 3 0、P 5 3蛋白表达情况与B C L-2蛋白和基因变化的相关性T a b l e 3 T h e c o r r e l a t i o n b e t w e e n t h e e x p r e s s i o n o f C D 3 0,P 5 3 p r o t e i n s a n d B C L-2 p r o t e i n a n d g e n e a l t e r a t i o n s分组0%c u t-o f f值2 0%c u t-o f f值P 5 3是否突变C D 3 0+(n=5 0)C D 3 0-(n=1 1 0)PC D 3 0+(n=2 7)C D 3 0-(n=1 3 3)PP 5 3+(n=8 3)P 5 3-(n=7 7)PG C B组 B C L-2表达3/58/1 21.0 0 02/39/1 41.0 0 07/94/80.4 9 2 B C L-2重排0/51/1 21.0 0 00/31/1 41.0 0 01/90/81.0 0 0n o n G C B组 B C L-2表达3 8/4 58 1/9 80.7 9 02 1/2 49 8/1 1 90.7 5 26 1/7 45 8/6 90.7 9 5 B C L-2重排1/4 50/9 80.3 1 50/2 41/1 1 91.0 0 00/7 41/6 90.4 8 3注:使用F i s h e r精确检验。3 讨论D L B C L是一类由中等至大B淋巴样细胞构成的肿瘤,肿瘤细胞的核相当于或超过正常巨噬细胞的胞核,或者是大于正常淋巴细胞胞核的2倍,呈弥漫性生长。形态学上包括中心母细胞变型、免疫母细胞变型、间变变型以及其它少见的变型(如梭形细胞变型、印戒细胞样变型)1;D L B L C是非霍奇金淋巴瘤中最常见的类型,是一种高侵袭性肿瘤,在细胞起源、形态学、免疫组织化学表型、分子遗传学、累及部位、化疗反应及生存率等方面都表现出明显的异质性5-6。根据H a n s分型,D L B L C细胞起源可以通过联合使用C D 1 0、B C L-6、I R F 4/MUM 1抗体,从免疫表型上将其分为具有对预后良好的G C B亚型和不良的n o n G C B亚型。然而,环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松(CHO P)传统方案联合利妥昔单抗作为最基础的治疗方案,可以改善n o n G C B亚型患者的预后,减少两个亚组之间的预后差异,但这两种亚型之间仍然是异质的7。R-CHO P仅可以治愈6 0%的患者,仍然有高达4 0%的患者对一线标准治疗原发难治,或者在一线治疗缓解后或早或晚出现复发8,其中涉及多种机制和相关基因蛋白的异常表达。因此精确的病理诊断及分子学分类,早期确定肿瘤病情恶化及不良预后风险,是优化D L B L C治疗方案,进一步提升疗效的关键所在。C D 3 0是肿瘤坏死因子超家族的成员之一,主要在活化的T细胞、B细胞和NK细胞表面表达9,生理状态下表达水平较低;而在疾病状态下,例如病毒感染、自身免疫性疾病及多种淋巴瘤中,C D 3 0则会呈现较高水平表达1 0。既往的研究1 1表明,相当数量的弥漫大B细胞淋巴瘤中会有比例不等的瘤细胞表达C D 3 0。有研究认为不管细胞来源如何(G C B、n o n G C B),C D 3 0阳性D L B C L的总体预后、无进展预后都优于C D 3 0阴性D L B C L,但其在预后方面的预测价值仍不十分明确,尚不能将C D 3 0作为D L B C L患者的独立预后因素1 2-1 4。并且随着C D 3 0靶向药物B r e n-t u x i m a b v e d o t i n(B V,维布妥昔单抗)在我国的上市及多项单/多中心临床试验的开展,一致认为B V与传统疗法相结合治疗C D 3 0阳性B细胞淋巴瘤是一种可行8941西部医学 2 0 2 3年1 0月 第3 5卷第1 0期 M e d J W e s t C h i n a,O c t o b e r 2 0 2 3,V o l.3 5,N o.1 0且积极的一线治疗方法1 5。本研究中3 1%(阈值0%)的D L B C L患者表达C D 3 0,阈值为2 0%时,1 7%的患者表达C D 3 0,这些结果与之前其他研究1 2,1 6中的数据是一致的,相对于C D 3 0阳性患者,C D 3 0阴性组患者中存在B组症状、I P I评分2分、E C OG P S评分2分患者比例更高。此外有研究发现两种不同阈值可以 得 出 类 似 的 阳 性 表 达 结 果,提 出 低 水 平 的C D 3 0表达似乎足以对C D 3 0靶向治疗做出反应,阈值0%可能成为识别新发C D 3 0阳性D B L C L患者的最佳方法3。并且有研究1 1提出绝大部分E B V阳性D L B C L患者也表达C D 3 0,它们之间的这种关联可能是由于特定的病毒机制引起的,而本研究中3例E B V阳性患者也同样是如此,不管C D 3 0阳性阈值0%还是2 0%,差异均具有统计学意义。另外,因为大部分E B V阳性D L B C L病例表达P D-L 1或P D-L 21 7,有研究指出这类患者可能会从C D 3 0靶向治疗中获益,尤其是联合免疫检查点抑制剂治疗。癌蛋白c-M y c和肿瘤抑制因子P 5 3在调控正常细胞存活和增殖中密不可分,它们的功能也维持组织的稳态:c-M y c能够诱导A R F肿瘤抑制因子的表达,随后结合并抑制MDM 2的表达,最终引起P 5 3的激活;而P 5 3能够通过包括转录失活和m i c r o-R NA介导的抑制作用在内的多种机制来对c-M y c起抑制作用1 8-1 9。本研究同时也纳入了c-M y c、P 5 3与临床及病理相关参数的观察,发现c-M y c阳性患者有更高的L DH水平(初诊时)、骨髓浸润 发生率 及K i-6 7(7 0%)增殖指数,而P 5 3蛋白表达与否在本研究中没有指标有显著统计学差异,可能是样本量较少的原因。除此之外,C D 5在D L B L C患者中有1 1%的阳性表达率,C D 5阳性患者结外累及发生率较高,虽然统计学提示其与BM I之间存在相关性,但临床意义并