BaP通过AhR和Nrf2信号通路对HepG2细胞中GSTP1的影响.pdf

内蒙古医科大学学报2023 年 6 月第 45 卷第 3 期BaP通过AhR和Nrf2信号通路对HepG2细胞中GSTP1的影响（1.内蒙古医科大学 药学院，内蒙古呼和浩特010059；2.内蒙古自治区新药筛选工程研究中心，内蒙古呼和浩特010100）【摘要】目的 探究苯并芘（benzoapyrene，BaP）通过芳香烃受体（aryl hydrocarbon receptor，AhR）和核因子E2相关因子（subcellular localization of nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2）信号通路对HepG2细胞中谷胱甘肽-S-转移酶P1（glutathione s-transferase P1，GSTP1）的影响。方法 将体外培养HepG2细胞分为Control组、BaP（10 mol/L）组、BaP（10 mol/L）+AhR抑制剂（1 mol/L）组和BaP（10 mol/L）+Nrf2抑制剂（1 mol/L）组。BaP组给予10 mol/L BaP培养24 h，抑制剂组给予1 mol/L抑制剂0.5 h后，加入10 mol/L BaP培养24 h，采用Western Blot和qPCR实验方法检测各组AhR、Nrf2、细胞色素P450s（cytochrome P450s，CYPs）、血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）及GSTP1基因和蛋白的表达。结果 与Control组相比，BaP组中AhR、Nrf2、GSTP1、CYP1A1及HO-1的mRNA和蛋白表达均升高（P0.05）；与BaP组相比，BaP+AhR抑制剂组中AhR、GSTP1和CYP1A1的mRNA和蛋白表达均降低（P0.05），BaP+Nrf2抑制剂组中Nrf2、GSTP1和HO-1的表达均降低（P0.05）；与BaP+AhR抑制剂组相比，BaP+Nrf2抑制剂组GSTP1 mRNA 和蛋白的表达降低，差异有统计学意义（P0.05）。结论 BaP 通过AhR 和Nrf2两条信号通路增加GSTP1的表达，以Nrf2信号通路为主导影响GSTP1的表达。【关键词】苯并芘；芳香烃受体；核因子E2相关因子2；谷胱甘肽-S-转移酶P1；药物代谢酶中图分类号：R966文献标识码：A文章编号：2095-512X（2023）03-0235-06王蕾1，张梦迪1,2，苏敏1，王朝杰1，胡玉霞1,2，白图雅1,2，吕晓丽1,2，李君1,2，常福厚1,2*收稿日期：2022-07-25；修回日期：2023-04-14基金项目：国家自然科学基金项目（81760676，82260733）；内蒙古自治区自然科学基金项目（2019LH08017）；内蒙古自治区高等学校科学研究项目（NJZY21593）；内蒙古自治区自然科学青年基金项目（2023QN08016）第一作者：王蕾（1997），女，2020级在读硕士研究生。E-mail：*通信作者：常福厚，男，博士，教授，硕士研究生导师。研究方向：生化与分子药理学。E-mail：【Abstract】ObjectiveTodeterminetheeffectsofBaPregulatestheexpressionofGSTP1throughAhRandNrf2signalingpathway sin HepG2 cells.Methods HepG2 cells in vitro were divided into control group,BaP(10 mol/L)group,BaP(10 mol/L)+AhR(1 mol/L)inhibitor group and BaP(10 mol/L)+Nrf2(1 mol/L)inhibitor group.The BaP group was given 10mol/LBaPfor 24hours.Theinhibitorgroupwasgiven 1mol/Linhibitorforhalfanhourandthanadded 10mol/LBaPfor 24hours.The expressions of AhR,Nrf2,CYP1A1,HO-1 and GSTP1 were detected by Western Blot and qPCR.Results Compared withthe control group,the mRNA and protein expressions of AhR,Nrf2,GSTP1,CYP1A1 and HO-1 in HepG2 cells were risen ofBaP group(P 0.05).Compared with BaP group,the mRNA and protein expressions of AhR,GSTP1 and CYP1A1 in HepG2cells were reduced of BaP+AhR inhibitor group(P 0.05).And compared with the the control group,the mRNA and protein ex-pressions of Nrf2,GSTP1 and HO-1 in HepG2 cells were reduced of BaP+Nrf2 inhibitor group(P 0.05).Compared with thegroup of BaP+AhR,the expression of GSTP1 mRNA and protein in BaP+Nrf2 inhibitor group was lower than BaP+AhR inhibi-BaP REGULATES THE EXPRESSION OF GSTP1 IN HepG2 CELLSTHROUGH AhR AND Nrf2 SIGNALING PATHWAYSWANG Lei1,ZHANG Mengdi1,2,SU Min1,WANG Zhaojie1,HU Yuxia1,2,BAI Tuya1,2,LV Xiaoli1,2,LI Jun1,2,CHANG Fuhou1,2*(1.College of Pharmacy,Inner Mongolia Medical University,Hohhot 010059,China;2.New Drug Screening EngineeringResearch Center of Inner Mongolia Autonomous Region,Hohhot 010100,China）235Journal of Inner Mongolia Medical UniversityJune.2023Vol.45No.3药物代谢酶分为三相：I相、II相和III相，具有代谢药物、环境污染物的作用，还可以将部分药物代谢后再次发挥作用1。细胞色素 P450s（cyto-chrome P450s，CYPs）如 CYP1A1、CYP1B2 是 I 相酶中的一种单胺酶，在药物代谢中发挥氧化作用；II相药物代谢酶主要发挥结合作用，如谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione-s-transferases，GSTs）和血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）等；III相酶系统由各种 ATP 结合（ATP-binding cassette，ABC）转运蛋白家族组成，参与排除药物和异生物质及其代谢物24。药物代谢酶可受芳香烃受体（aryl hydrocar-bon receptor，AhR）、核因子E2相关因子（subcellularlocalization of nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2）等多种转录因子调节57。多环芳烃类化合物（polycyclic aromatic hydro-carbons，PAHs）是常见的环境污染物。研究认为PAHs可以诱导CYP1A1的表达，增加机体对PAHs的 代 谢8，9，其 中 苯 并 芘（benzoapyrene，BaP）是PAHs中最主要的成分，BaP在体内可通过AhR激活I相酶和II相酶的转录5，10。代谢途中会产生大量活性代谢产物和活性氧（reactive oxygen species，ROS），激活Nrf2信号通路，进而引起一系列抗氧化和解毒相关因子的转录11，12。谷胱甘肽-S-转移酶P1（glutathione s-transfer-ase P1，GSTP1）是谷胱甘肽硫转移酶（GST）家族中的pi类，是近期国内外研究最广泛的蛋白，是肿瘤的抑制基因，具有消除潜在毒性的外源性物质、代谢多种致癌化合物的作用，保护细胞免受DNA损伤和癌变13，14。研究表明15，具有AhR拮抗作用的白藜芦醇可以抑制PM2.5中的可提取有机物引发的氧化应激，减弱GSTP1的表达，GSTP1同Nrf2之间存在功能性相互作用；克百威可以影响对Nrf2的信号传导，暴露于克百威后，Nrf2 和 GSTP1 的表达下降16。而BaP在HepG2细胞中是否影响GSTP1的表达，以及是否与影响AhR或Nrf2通路有关的研究鲜有报道，因此本实验采用Western Blot和qPCR法检测 BaP 通过 AhR 及 Nrf2 两条信号通路调节 HepG2细胞中GSTP1表达的分子机制，为研究BaP的致癌机制提供一定的实验参考依据，为以GSTP1为靶点的抗癌药提供新思路。1材料与方法1.1细胞株人肝癌细胞株（HepG2）（北京协和基础医学研究所）。1.2主要试剂与仪器1.2.1仪器 垂直电泳仪（型号：HE99X-15-1.5）购自美国Hoefer公司；红外荧光扫面系统（型号：Od-yssey CLx）购自美国 LICOR 公司；金属浴（型号：OSE-DB-01）购自北京天根生化公司；台式高性能离心机（型号：ST16R）、二氧化碳培养箱（型号：Her-aeus HERA cell 150i）和荧光实时定量PCR仪（型号：Thermo-Forma-702）购自美国Thermo Fisher公司。1.2.2试剂 DMEM 培养基（批号：11965118）和灭活胎牛血清（批号：10100147）购自美国Gibco公司；胰蛋白酶（批号：2326508）购自美国 Sigma 公司；AhR（批号：ab190797、CYP1A1（批号：ab235185）、Nrf2（批 号：ab62352）、HO-1（批 号：ab52947）、GSTP1（批号：ab138491）、-actin（批号：ab8226）抗体购自美国 Abcam 公司；AhR 抑制剂 CH-223191（批号：301326-22-7）和Nrf2抑制剂ML-385（批号：846557-7-19）购自上海源叶生物科技有限公司；RIPA裂解液（批号：P0014B）和蛋白浓度测定试剂盒（货号：183056）购自碧云天生物技术有限公司；5loading buffer（SDS-PAGE）蛋白上样缓冲液（批号：103023）、甘氨酸（批号：15121223）和Tris（批号：G1262）购自北京普利莱基因技术有限公司；TEMED（批号：15021392）购自迈新生物技术开发有限公司；Rever Tra Ace q PCR RT Kit（批号：K1622）购自美国 Thermoscientific 公司；SYBR Green 试剂盒（批号：QPK-201）购自日本TOYOBO公司；RNA simpleTotal RNA Kit（批号：DP419）购自中国天根生化公司。1.3细胞培养将HepG2细胞培养于含10%FBS、100 IU/mL链霉素和100 IU/mL青霉素的DMEM培养基中，置于37、体积分数5%的CO2培养箱中。显微镜下观察细胞生长状态，当细胞长至铺满培养瓶底80%90%时，进行后续实验。1.4BaP及抑制剂处理HepG2细胞取HepG2细胞接种于六孔板，分为Control组、tor group(P 0.05).Conclusions BaP can increase the expression of GSTP1 through AhR and Nrf2 signaling pathways,andNrf2signalingpathwaymaydominatetheexpressionofGSTP1.【Keywords】Benzoapyrene;Aryl hydrocarbon receptor;Subcellular localization of nuclear factor E2-related factor2;Glutathione-S-transferases P1;Grug metabolizing enzyme 236内蒙古医科大学学报2023 年 6 月第 45 卷第 3 期BaP 组（10 mol/L）、BaP（10 mol/L）+AhR 抑制组（1mol/L），通过以上分组观察BaP通过AhR对GSTP1的影响。将细胞分为Control组、BaP组（10 mol/L）、BaP（10 mol/L）+Nrf2抑制组（1 mol/L）17，观察BaP通过Nrf2对GSTP1的影响。将细胞分为Control组，BaP 组（10 mol/L）、BaP（10 mol/L）+AhR 抑制组（1 mol/L）18、BaP（10 mol/L）+Nrf2抑制组（1 mol/L），观察BaP影响HepG2细胞中GSTP1表达的较为主要通路。分别检测AhR、CYP1A1、Nrf2、HO-1和GSTP1的mRNA和蛋白表达情况，重复实验3次。1.5实时荧光定量PCR（qPCR）法检测mRNA表达收集各组细胞，按照说明书裂解细胞提取总RNA，检测 RNA 样品的含量，逆转录为 cDNA。将cDNA和相关试剂混合均匀配成20 L反应体系，反应结束后，对所得数据进行比较分析，目标基因的相对定量用2-CT计算。引物序列见表1。1.6Western Blot检测蛋白水平提取全蛋白，用 BCA（bicinchonininc acid）法测定蛋白质浓度。取约20 g蛋白样品进行SDS-PAGE电泳120 min分离蛋白后转移到PVDF膜，在封闭液中于室温封闭1 h，依次加入一抗，4 孵育过夜，次日取出条带，二抗室温避光孵育1 h，Odyssey红外荧光扫描系统进行扫膜。结果用Image J软件进行分析统计，以目标蛋白与内参-actin条带的灰度比值作为目标蛋白的相对表达水平。1.7统计学方法采用GraphPad Prism7.0软件分析，符合正态分布的计量资料数据均以（xs）表示。检验水准为0.05，P 0.05表示差异具有统计学意义。2结果2.1BaP通过AhR信号通路激活GSTP1BaP通过AhR信号通路影响GSTP1的表达如图1 所示。与 Control 组相比，BaP 组的 AhR、CYP1A1和GSTP1的mRNA和蛋白的表达均升高，差异具有统计学意义（P0.05）；与BaP组相比，BaP+AhR抑制剂组的AhR、CYP1A1和GSTP1的mRNA和蛋白的表达均降低，差异具有统计学意义（P0.05）。基因GSTP1AhRCYP1A1Nrf2HO-1-actinForwardprimerReverseprimerForwardprimerReverseprimerForwardprimerReverseprimerForwardprimerReverseprimerForwardprimerReverseprimerForwardprimerReverseprimer引物序列（5 3）5-CATCTACACCAACTATGAGGCG-35-AGCAGGGTCTCAAAAGGCTTC-35-CTTAGGCTCAGCGTCAGTTAC-35-CGTTTCTTTCAGTAGGGGAGGAT-35-ACATGCTGACCCTGGGAAAG-35-GGTGTGGAGCCAATTCGGAT-35-TCCAGTCAGAAACCAGTGGAT-35-GAATGTCTGCGCCAAAAGCTG-35-AAGACTGCGTTCCTGCTCAAC-35-AAAGCCCTACAGCAACTGTCG-35-TTAGCACCCCTGGCCAAG-35-CTTACTCCTTGGAGGCCAT-3表1引物序列Tab.1Primer sequence图1BaP通过AhR对GSTP1基因和蛋白表达影响Fig.1Effect of BaP on the expression of GSTP1 gene and protein through AhR（A：蛋白表达情况；B：AhRmRNA表达统计图；C：CYP1A1mRNA表达统计图；D：GSTP1mRNA表达统计图；E：AhR蛋白表达统计图；F：CYP1A1蛋白表达统计图；G：GSTP1蛋白表达统计图*P0.05，*P0.01，*P0.001，n=3）（A:Protein expression;B:AhR mRNA expression statistics;C:CYP1A1 mRNA expression statistics;D:GSTP1 mRNA expressionstatistics;E:AhR protein expression statistics;F:CYP1A1 protein expression statistics;G:GSTP1 protein expression statistics*P0.05，*P0.01，*P0.001，n=3）237Journal of Inner Mongolia Medical UniversityJune.2023Vol.45No.32.2BaP通过Nrf2信号通路激活GSTP1BaP通过Nrf2信号通路影响GSTP1的表达如图2所示。与Control 组相比，BaP 组的Nrf2、HO-1和GSTP1的mRNA和蛋白的表达均升高，差异具有统计学意义（P0.05）；与BaP组相比较，BaP+Nrf2抑制剂组的Nrf2、HO-1和GSTP1的mRNA和蛋白的表达均降低，差异具有统计学意义（P0.05）（见图2）。2.3BaP通过AhR、Nrf2信号通路对GSTP1的影响BaP通过AhR和Nrf2两条信号通路调控GSTP1的表达。与Control组相比，BaP组GSTP1的mRNA和蛋白的表达均升高，差异具有统计学意义（P0.05）；与BaP组相比较，BaP+AhR抑制剂组和BaP+Nrf2抑制剂组GSTP1的表达均降低，差异具有统计学意义（P0.05），其中与 BaP+AhR 抑制剂组相比，BaP+Nrf2抑制剂组GSTP1表达降低，差异具有统计学意义（P 0.05）（见图3）。3讨论药物代谢酶广泛存在于自然界，其中I相药物代谢酶主要发挥氧化作用，II相药物代谢酶主要发挥结合作用，III相酶系统由各种ABC转运蛋白家族组成，药物代谢酶均参与药物和异生物质及其代谢物的代谢作用24。BaP是一种化学类环境污染物，常见于大气、烟草烟雾、汽车尾气和熏烤制食物，长时间接触BaP会造成癌症、免疫抑制和致畸等各种不良影响19。本实验中BaP可以激活AhR-XRE和Nrf2-ARE通路，增加 AhR、Nrf2、CYP1A1、HO-1 和 GSTP1 的 mRNA 蛋白的表达，差异具有统计学意义（P 0.05）。BaP在体内的代谢往往是个复杂的过程，BaP可激活AhR进而激活I相酶和II相酶的转录5，10，BaP在体内代谢的同时可引起氧化应激反应，激活II相代谢酶的转录11，12。GSTs由一组同工酶组成，药物、食物、环境污染物等外源性物质影响其在体内的表达20。GSTP1是GSTs中的pi类，GSTP1具有广泛的生理功能，可参图2BaP通过Nrf2对GSTP1基因和蛋白表达影响Fig.2Effect of BaP on the expression of GSTP1 gene and protein through Nrf2（A：蛋白表达情况；B：Nrf2mRNA表达统计图；C：HO-1mRNA表达统计图；D：GSTP1mRNA表达统计图；E：Nrf2蛋白表达统计图；F：HO-1蛋白表达统计图；G：GSTP1蛋白表达统计图*P0.05，*P0.01，*P0.001，n=3）（A:Proteinexpression;B:Nrf2mRNAexpressionstatistics;C:HO-1mRNAexpressionstatistics;D:GSTP1mRNAexpressionstatis-tics;E:Nrf2 protein expression statistics;F:HO-1 protein expression statistics;G:GSTP1 protein expression statistics*P0.05，*P0.01，*P0.001，n=3）图3BaP通过AhR、Nrf2对GSTP1基因和蛋白表达影响Fig.3Effect of BaP on the expression of GSTP1 gene and protein through AhR and Nrf2（A：蛋白表达情况；B：GSTP1mRNA表达统计图；C：GSTP1蛋白表达统计图*P0.05，*P0.01，*P0.001，n=3）（A:Proteinexpression;B:GSTP1mRNAexpressionstatistics;C:GSTP1proteinexpressionstatistics*P0.05，*P0.01，*P0.001，n=3）238内蒙古医科大学学报2023 年 6 月第 45 卷第 3 期与代谢、解毒、调节氧化应激、保护细胞免受DNA损伤和癌变等功能21，22。GSTP1可通过促进亲电中心与亲脂化合物结合，减轻外源性药物和氧化应激产物对人体的危害，抑制胶质细胞瘤的增殖23；GSTP1可将不稳定的分子转化为稳定分子来减轻氧化应激对机体的伤害，影响肝细胞癌的增殖和转移24；GSTP1还可以消除烟草中的致癌物，在正常细胞和癌细胞中均可发挥清除有毒物质的作用25，26。GSTP1作为一种II相药物代谢酶，在机体的代谢、解毒和抗氧化中起着重要的调节作用，在治疗癌症和维持抗肿瘤药物的活性同样必不可少，GSTP1是机体维持健康运转必不可少的关键调节蛋白。Zhang 等27认为BaP 通过AhR通路增加GSTP1蛋白的表达，而Nguyen等28认为BaP通过Nrf2信号通路增加GSTP1蛋白的表达，AhR和Nrf2两条信号通路可能有一定的交互作用，在BaP代谢过程中可以通过AhR直接激活Nrf2的表达，或通过代谢所产生ROS激活抗氧化通道，Nrf2也可以通过调节AhR及下游CYP代谢酶的表达来影响脂肪分化29。本实验探究 BaP 通过 AhR 和 Nrf2 信号通路对GSTP1药物代谢酶的调节作用，根据实验室前期研究选择10 mol/L的BaP作为实验浓度。实验结果表明 BaP 可通过 AhR 和 Nrf2 两条信号通路调控HepG2细胞中GSTP1的表达，可能主要以Nrf2信号通路调控GSTP1的表达。GSTP1在多种癌症类型的发生和发展及机体氧化应激中起着关键的作用。本实验可以为研究BaP的致癌机制提供一定理论依据和实验基础，为针对GSTP1新药的研究和临床治疗方法的改善提供一定的依据，也为寻找GSTP1防治肿瘤的研究提供了一定的理论基础，后续将继续进行GSTP1与肝癌相关的研究，寻找GSTP1影响肝癌发生发展的相关机制和信号通路。参考文献1Chhour M，Perio P，Gayon R，et al.Association of NQO2 withUDP-glucuronosyltransferases reduces menadione toxicity inneuroblastoma cellsJ.Front Pharmacol，2021，12（5）：e6606412Cobbina E，Akhlaghi F.Non-alcoholic fatty liver disease（NAFLD）-pathogenesis，classification，and effect on drugmetabolizing enzymes and transportersJ.Drug Metab Rev，2017，49（2）：197-2113Truong VL，Jun M，Jeong WS.Phytochemical and over-the-counter drug interactions:involvement of phase I and II drug-metabolizing enzymes and phase III transportersJ.J Med Food，2021，24（8）：786-8054Pathania S，Bhatia R，Baldi A，et al.Drug metabolizingenzymes and their inhibitors role in cancer resistanceJ.Biomed Pharmacother，2018，105（11）：53-655Brauze D，Kiwerska K，Bednarek K，et al.Expression of serpinpeptidase inhibitor B2（SERPINB2）is regulated by Aryl hydr-ocarbon receptor（AhR）J.Chem Biol Interact，2019，309（44）：e1087006Fang Y，Ye J，Zhao B，et al.Formononetin ameliorates oxalipl-atin-induced peripheral neuropathy via the KEAP1-NRF2-GSTP1 axisJ.Redox Biol，2020，36（7）：e1016777Kitakaze T，Makiyama A，Nakai R，et al.Kaempferol modulatesTCDD-and t-BHQ-induced drug-metabolizing enzymes andluteolin enhances this effectJ.Food Funct，2020，11（4）：3668-36808Stoddard EG，Nag S，Martin J，et al.Exposure to an environ-mental mixture of polycyclic aromatic hydrocarbons induceshepaticcytochromeP450enzymesinmiceJ.ChemResToxicol，2021，34（9）：2145-21569Stading R，Gastelum G，Chu C，et al.Molecular mechanisms ofpulmonary carcinogenesis by polycyclic aromatic hydrocarbons（PAHs）:implications for human lung cancerJ.Semin CancerBiol，2021，76：3-1610Li X，Lu Y，Ou X，et al.Changes and sex-and age-relateddifferences in the expression of drug metabolizing enzymes in aKRAS-mutant mouse model of lung cancerJ.Peer J，2020，8：e1018211Wufuer R，Fan Z，Liu K，et al.Differential yet integral contri-butions of Nrf1 and Nrf2 in the human HepG2 cells on antioxi-dant cytoprotective response against tert-butylhydroquinone asa Pro-Oxidative stressorJ.Antioxidants（Basel），2021，10（10）：161012Wang H，Pan L，Xu R，et al.The molecular mechanism ofNrf2-Keap1 signaling pathway in the antioxidant defenseresponse induced by BaP in the scallop chlamys farreriJ.FishShellfish Immunol，2019，92：489-49913Gurioli G，Martignano F，Salvi S，et al.GSTP1 methylation incancer:a liquid biopsy biomarkerJ.Clin Chem Lab Med，2018，56（5）：702-71714Sau A，Pellizzari TF，Valentino F，et al.Glutathione transfer-ases and development of new principles to overcome drug resis-tanceJ.Arch Biochem Biophys，2010，500（2）：116-12215Ren F，Huang Y，Tao Y，et al.Resveratrol protects againstPM2.5-induced heart defects in zebrafish embryos as an antio-xidant rather than as an AHR antagonistJ.Toxicol Appl Phar-macol，2020，398：e11502916Khan A，Zaman T，Fahad TM，et al.Carbofuran affects cellularautophagyanddevelopmentalsenescencethroughtheimpairmentof Nrf2 signallingJ.J Cell Mol Med，2022，26（1）：35-4717Dang R，Wang M，Li X，et al.Edaravone ameliorates depres-sive and anxiety-like behaviors via Sirt1/Nrf2/HO-1/Gpx4pathwayJ.J Neuroinflammation，2022，19（1）：4118Eleftheriadis T，Pissas G，Filippidis G，et al.Reoxygenationinduces reactive oxygen species production and ferroptosis inrenal tubular epithelial cells by activating aryl hydrocarbonreceptorJ.MolMedRep，2021，23（1）：41（下转第256页）239Journal of Inner Mongolia Medical UniversityJune.2023Vol.45No.3（上接第239页）19Kim KS，Kim NY，Son JY，et al.Curcumin ameliorates benzoapyrene-induced DNA damages in stomach tissues of sprague-dawley ratsJ.Int J Mol Sci，2019，20（22）：553320Park JC，Hagiwara A，Park HG，et al.The glutathioneS-transferase genes in marine rotifers and copepods:Identifica-tion of GSTs and applications for ecotoxicological studiesJ.Mar Pollut Bull，2020，156（18）：e11108021Cui J，Li G，Yin J，et al.GSTP1 and cancer:expression，methylation，polymorphisms and signaling（Review）J.Int JOncol，2020，56（4）：867-87822Bocedi A，Noce A，Marrone G，et al.Glutathione transferaseP1-1 an enzyme useful in biomedicine and as biomarker inclinical practice and in environmental pollutionJ.Nutrients，2019，11（8）：1741-174323Lei K，Gu X，Alvarado AG，et al.Discovery of a dual inhibitorof NQO1 and GSTP1 for treating glioblastomaJ.J HematolOncol，2020，13（1）：141-14224Elofey SGH，Shafik NF，Radwan NH，et al.Relation betweenGSTP1 polymorphism and oxidative stress in patients withhepatocellular carcinomaJ.J Egypt Natl Canc Inst，2020，32（1）：38-4025Ganbold C，Jamiyansuren J，Tumurbaatar A，et al.The cumu-lative effect of gene-gene interactions between GSTM1，CHR-NA3，CHRNA5 and SOD3 gene polymorphisms combined withsmoking on COPD riskJ.Int J Chron Obstruct Pulmon Dis，2021，16（5）：2857-286826Ryu CS，Choi YJ，Nam HS，et al.Short-term regulation of thehepatic activities of cytochrome P450 and glutathione S-trans-ferase by nose-only cigarette smoke exposure in miceJ.FoodChem Toxicol，2018，125：182-18927Zhang T，Kimura Y，Jiang S，et al.Luteolin modulates expres-sion of drug-metabolizing enzymes through the AhR and Nrf2pathways in hepatic cellsJ.Arch Biochem Biophys，2014，557（11）：36-4628Nguyen PM，Park MS，Chow M，et al.Benzoapyrene increasesthe Nrf2 content by downregulating the keap1 messageJ.Toxi-col Sci，2010，116（2）：549-56129刘婷婷，陈琪，常福厚，等.AhR与Nrf2基因相互作用的分子机制研究进展J.生物信息学，202