炭疽致死毒素的克隆表达及应用研究的开题报告.docx

优秀毕业论文开题报告炭疽致死毒素的克隆表达及应用研究的开题报告一、选题背景炭疽病是由炭疽菌引起的一种急性、高传染性的动物疾病，同时也是一种人畜共患病。炭疽菌的致病机理是通过其所分泌的毒素引起机体感染后的病理反应，其中炭疽致死毒素（anthrax lethal toxin，LT）是导致炭疽病死亡的主要因素。因此，对LT的研究既有助于深入了解炭疽病的发病机理，又有助于开发相关的诊断和治疗方法。二、研究目的本研究旨在通过基因工程技术，克隆表达炭疽致死毒素的基因，进而制备出LT的纯化蛋白，并对其进行生物学特性及应用价值的研究。三、研究内容1. 构建LT的基因表达载体将LT的基因序列克隆到适合于大肠杆菌表达的载体上，构建出LT的基因表达载体。2. 利用大肠杆菌表达LT蛋白将构建好的LT基因表达载体转化到大肠杆菌中，利用大肠杆菌表达LT蛋白，并通过SDS-PAGE和Western blot等方法进行蛋白表达情况的鉴定。3. 纯化LT蛋白利用亲和层析、离子交换层析等方法对表达的LT蛋白进行纯化。4. 对LT蛋白的生物学特性进行研究通过Western blot、酶联免疫吸附试验等方法对纯化后的LT蛋白进行生物学特性的研究。5. 对LT蛋白的应用价值进行探究通过动物实验等方法，探究LT蛋白在炭疽病的诊断和治疗方面的应用价值。四、研究意义本研究的结果将有助于深入了解炭疽致死毒素的生物学特性及其在炭疽病发病机理中的作用，为炭疽病的诊断和治疗提供基础研究支持。同时，本研究还将为LT的生产提供技术支持，为LT的应用开发打下基础。