肠道杆菌Enterobacteriaceae.ppt

l食源性疾病（foodborne diseases）：指的是通过摄取食物和饮水而获得有毒物质或病原而导致的疾病，包括中毒性和感染性疾病。包括细菌、病毒和寄生虫.l31种病原生物已经纳入食源性病原：大肠埃希菌（如O157:H7）、沙门菌、葡萄球菌、志贺菌、弧菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌（Bacillus cereus）、空肠弯曲菌、单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）、耶尔森菌等细菌病原，诺瓦克病毒、甲型肝炎病毒（HAV）、轮状病毒等病毒病原，微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum）、贾第鞭毛虫、刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）等寄生虫病原。肠肠杆菌科杆菌科 Enterobacteriaceae l一一大大群群主主要要寄寄居居肠肠道道、生生物物学学性性状状近近似似的的-杆杆菌菌；至至少少有有30个个菌菌属，属，120个菌种。个菌种。l大大多多数数是是肠肠道道正正常常菌菌群群或或条条件件致致病病菌菌，少少数数为为病病原原菌菌（伤伤寒寒沙沙门门菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌）。菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌）。3EscherichiaShigella SalmonellaEdwardsiellaCitrobacterKlebsiellaEnterobacterHafniaSerratiaProteusProvidenciaMorganellaYersiniaErwiniaPectinobacterium共同生物学特性共同生物学特性l形态与结构：形态与结构：-杆菌，无芽胞，多有菌毛、鞭毛杆菌，无芽胞，多有菌毛、鞭毛;l培培养养：营营养养要要求求不不高高，常常用用的的选选择择鉴鉴别别培培养养基基有有：、中国蓝培养基、麦康凯培养基和中国蓝培养基、麦康凯培养基和KI；l生化反应：生化反应：活泼，乳糖发酵试验；活泼，乳糖发酵试验；l抵抗力抵抗力：弱；弱；l变异：变异：易发生易发生(耐药性、毒素产生、耐药性、毒素产生、-变异、变异、-变异变异)；l抗原结构：抗原结构：复杂。复杂。5E.coli on SS plate RedNeutral red is the indicator for acid detection,Red and YellowE.coli can ferment lactose and produce acid Pathogenic enterobacteria cannt ferment lactose but can use peptone to produce alkaline.Pathogenic enterobacteria on SS plate Yellow6E.coli on EMB plateE.coli can ferment lactose and produce acid.Eosin and methylene blue combine to form a precipitate at acid pH,and this precipitate appears green-black with metallic sheen(紫黑色或紫红色，带金属光泽）Pathogenic enterobacteria cannt ferment lactose so the precipitate cannt be formed and their colonies still appear transparent7 KIA agarWhen the colonies produce acid from fermentation of glucose and lactose,the column and slant appear Yellow;When the bacteria only ferment glucose,the column appear Yellow,but slant appear Red.Detect whether H2S or gas was produced菌菌体体抗抗原原（抗抗原原）：，具具有有种种属属特特异异性性，失失去去后后产产生生-变变异。刺激机体产生异。刺激机体产生IgM抗体。抗体。鞭鞭毛毛抗抗原原（抗抗原原）：蛋蛋白白质质，失失去去后后不不能能运运动动，外外露露（-变变异异）。刺激机体产生。刺激机体产生IgG抗体。抗体。荚膜抗原（抗原荚膜抗原（抗原/Vi抗原）：抗原）：多糖，位于抗原外围，阻止凝集。多糖，位于抗原外围，阻止凝集。埃希菌属埃希菌属EscherichiaE.coli（大肠杆菌）是最常见的临床分离菌。寄居人或动物肠道；（大肠杆菌）是最常见的临床分离菌。寄居人或动物肠道；依据依据临床致病性和遗传特征分为临床致病性和遗传特征分为：共生型（共生型（commensal group）：正常菌群；正常菌群；条件致病菌；条件致病菌；基因工程中的主要工程菌；基因工程中的主要工程菌；常作为水源、饮水、食物粪便污染的指标常作为水源、饮水、食物粪便污染的指标:细菌总数：细菌总数：100 CFU/ml饮水或饮料；饮水或饮料；大肠菌群数：大肠菌群数：3 CFU/L饮水饮水,5 CFU/100ml汽水或果汁汽水或果汁腹泻型（腹泻型（diarrheal group）肠外型（肠外型（extraintestinal group）一、生物学性状一、生物学性状（一）形态结构（光镜）：（一）形态结构（光镜）：多数周身鞭毛、普通菌毛、性菌毛，多数周身鞭毛、普通菌毛、性菌毛，无芽胞无芽胞，NMEC菌株有微荚膜菌株有微荚膜(K)（二）培养特性：（二）培养特性：营养要求一般，兼性厌氧菌。营养要求一般，兼性厌氧菌。（三）生化反应：（三）生化反应：IMViC()；发酵乳糖产酸、产气。；发酵乳糖产酸、产气。（四）抗原结构（四）抗原结构：、，血清学分型。、，血清学分型。EMB培养基培养基SS 培养基培养基（一）致病物质（一）致病物质1.菌菌细细胞表面胞表面结结构与成分：黏附素，构与成分：黏附素，类类型多（型多（定居因子，菌毛定居因子，菌毛黏附素、黏附素、紧紧密黏附素、集聚性黏附菌毛、密黏附素、集聚性黏附菌毛、P菌毛、菌毛、BFP)2.抗吞噬：抗吞噬：K抗原抗原3.毒素毒素内毒素内毒素外毒素：耐热和不耐热肠毒素外毒素：耐热和不耐热肠毒素(ST and LT)志贺毒素志贺毒素(Stx)或或Vero毒素毒素二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性13种种 类类疾病部位疾病部位临床症状临床症状致病机制致病机制腹泻型腹泻型肠产毒性大肠埃希菌（肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）小肠小肠水样腹泻水样腹泻毒素毒素LT/ST、粘附、粘附肠致病性大肠埃希菌（肠致病性大肠埃希菌（EPEC）小肠小肠水样腹泻水样腹泻粘附粘附肠出血性大肠埃希菌（肠出血性大肠埃希菌（EHEC）结肠结肠出血性结肠炎、出血性结肠炎、溶血性尿毒症溶血性尿毒症毒素毒素Stx肠侵袭性大肠埃希菌（肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）结肠结肠水样腹泻脓血便水样腹泻脓血便侵袭侵袭肠集聚肠集聚性大性大肠埃希菌（肠埃希菌（EAEC）小肠、小肠、结肠结肠水样持续性腹泻水样持续性腹泻粘附粘附弥漫性粘附大肠埃希菌（弥漫性粘附大肠埃希菌（DAEC）小肠小肠水样腹泻水样腹泻粘附粘附肠外型肠外型尿致病性大肠埃希菌（尿致病性大肠埃希菌（UPEC）尿道尿道尿尿道道炎炎、膀膀胱胱炎炎、肾肾盂盂肾炎肾炎粘附、毒素粘附、毒素新生儿新生儿脑脑膜膜炎大炎大肠埃希菌肠埃希菌（NMEC）脑膜脑膜新生儿脑膜炎新生儿脑膜炎侵侵袭袭,K抗原抗原致病性大肠埃希菌的种类和主要特点致病性大肠埃希菌的种类和主要特点二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性15三、微生物学检查法三、微生物学检查法标本采集标本采集分离培养与鉴定：分离培养与鉴定：1、肠外感染：涂片染色镜检、肠外感染：涂片染色镜检 分离培养分离培养 生化鉴定生化鉴定 *尿路感染需计数中段尿细菌总数，尿路感染需计数中段尿细菌总数，10万万/ml 2、肠内感染：肠内感染：SS、麦康凯培养基。麦康凯培养基。（一）（一）ETEC菌毛抗原：家畜腹泻病菌毛抗原：家畜腹泻病（二）治疗：（二）治疗：早期纠正体液平衡，早期纠正体液平衡，庆大霉素、丁胺庆大霉素、丁胺卡那卡那四、防治原则四、防治原则志贺菌属志贺菌属Shigella（一）形态结构：（一）形态结构：无芽胞、无鞭毛，有菌毛无芽胞、无鞭毛，有菌毛（二）生化反应：（二）生化反应：不发酵乳糖不发酵乳糖（三）（三）抗原构造（抗原构造（O Ag)与分类：与分类：一、生物学性状一、生物学性状 A群群、痢疾志贺菌痢疾志贺菌(S.dysenteriae,12 serotypes)B群群、福氏志贺菌福氏志贺菌(S.flexneri,6 serotypes)C群群、鲍氏志贺菌鲍氏志贺菌(S.boydii,18 serotypes)D群群、宋内志贺菌宋内志贺菌(S.sonnei,1 serotype)（一）致病物质（一）致病物质二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性1.侵袭力：菌毛介导的粘附，其粘附、侵袭、扩散等活性编码于侵袭力：菌毛介导的粘附，其粘附、侵袭、扩散等活性编码于140MD的质粒的质粒2.内毒素：内毒素血症内毒素：内毒素血症发热、神志障碍。发热、神志障碍。破坏肠粘膜破坏肠粘膜炎症、溃疡炎症、溃疡、粘液脓血便、粘液脓血便 作用于肠壁植物神经系统。作用于肠壁植物神经系统。3.外毒素：外毒素：A群群、型可产生志贺毒素型可产生志贺毒素ST，具有三种生物学活性，肠毒，具有三种生物学活性，肠毒性、细胞毒性、神经毒性。性、细胞毒性、神经毒性。（二）所致疾病（二）所致疾病:细菌性痢疾细菌性痢疾 shigellosis（三）免疫性：（三）免疫性：感染局限（感染局限（sIgA），故免疫不牢固。），故免疫不牢固。二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性急性：急性：典型菌痢典型菌痢（发热、腹痛、里急后重、脓血便）（发热、腹痛、里急后重、脓血便）中毒型菌痢。中毒型菌痢。慢性：症状不典型。慢性：症状不典型。21三、微生物学检查法三、微生物学检查法标本：挑取粪便的粘液、脓血部分，中毒性痢疾患者可取肛拭。标本：挑取粪便的粘液、脓血部分，中毒性痢疾患者可取肛拭。分离培养与鉴定：分离培养与鉴定：EMB、SS、生化反应和动力学试验。、生化反应和动力学试验。快速诊断法：玻片凝集试验等。快速诊断法：玻片凝集试验等。SS培养基和动力试验培养基和动力试验沙门菌属沙门菌属 Salmonellal寄生在人类和动物肠道中，由一群生物特性与血清学相似或相关的细菌组成。l沙门菌属在自然界分布广泛，种类繁多，已发现2500个以上血清型。有两个种，即肠沙门菌（S.enterica）和邦戈沙门菌（S.bongori）。能感染人类的沙门菌血清型约1400多种，都属于肠沙门菌肠道亚种。l属于致病菌，具有广泛的动物宿主。很多血清型可引起人和/或动物的沙门菌病。是一种重要的人畜共患病（zoonotic infections）l引起人类的肠热症外，也是食物中毒和腹泻最常见的食源性病原菌。（一）形态结构：（一）形态结构：有菌毛有菌毛，周身鞭毛周身鞭毛，一般无荚膜一般无荚膜，无芽胞。无芽胞。（二）变异性：（二）变异性：耐药耐药性、抗原、培养特性以及结构变异性、抗原、培养特性以及结构变异。（三）（三）抗原构造：抗原构造：一、生物学性状一、生物学性状 O抗原：为沙门菌细胞壁中的抗原：为沙门菌细胞壁中的LPS成分。成分。O抗原为抗原为Ti抗原，刺激机体仅产生抗原，刺激机体仅产生IgM型抗体。型抗体。H抗原：存在于沙门菌的鞭毛蛋白中。抗原：存在于沙门菌的鞭毛蛋白中。H抗原为抗原为Td抗原，刺激机体产生的抗体以抗原，刺激机体产生的抗体以IgG为主。为主。Vi抗原：位于菌体最表层，可阻止抗原：位于菌体最表层，可阻止O抗原与其相应抗体的凝集反应。主要见于伤抗原与其相应抗体的凝集反应。主要见于伤寒、希氏和都柏林沙门菌。寒、希氏和都柏林沙门菌。Vi抗原的免疫原性弱，检测抗原的免疫原性弱，检测Vi抗体可用于带菌者的检抗体可用于带菌者的检出。出。（一）致病物质（一）致病物质二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性1、菌毛：黏附、菌毛：黏附2、毒力岛、毒力岛SPI：决定侵入、存活和肠道外播散：决定侵入、存活和肠道外播散3、毒性质粒、毒性质粒SPV：决定在网状内皮系统繁殖：决定在网状内皮系统繁殖4、内毒素：内毒素效应、内毒素：内毒素效应5、肠毒素：如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素、肠毒素：如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素（二）所致疾病（二）所致疾病:（三）免疫性：细胞免疫是主要防御机制。伤寒或副伤寒病后有（三）免疫性：细胞免疫是主要防御机制。伤寒或副伤寒病后有牢固免疫，很少再感染。牢固免疫，很少再感染。二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性1、肠热症：、肠热症：只感染人。只感染人。包括伤寒沙门菌引起的伤寒，甲型副伤寒、氏、希氏沙包括伤寒沙门菌引起的伤寒，甲型副伤寒、氏、希氏沙门菌引起的副伤寒。门菌引起的副伤寒。无症状带菌者：的患者症状消失后，无症状带菌者：的患者症状消失后，1年仍可在粪便中检出沙门菌。年仍可在粪便中检出沙门菌。2、胃肠炎（食物中毒）：由鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌引起，胃肠炎（食物中毒）：由鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌引起，发热、恶心、呕吐、腹痛、水样腹泻。发热、恶心、呕吐、腹痛、水样腹泻。3、败血症：高热、寒战、厌食、贫血、脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎。、败血症：高热、寒战、厌食、贫血、脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎。26三、微生物学检查法三、微生物学检查法标本采集标本采集肠热症：依病程不同采取不同标本肠热症：依病程不同采取不同标本 第第1周取外周血周取外周血 -3周取骨髓液周取骨髓液 第第2周取粪便、尿液周取粪便、尿液胃肠炎：粪便、呕吐物、可疑物胃肠炎：粪便、呕吐物、可疑物败血症：血液败血症：血液肠道致病菌（肠道致病菌（SS培养基）培养基）分离培养与鉴定分离培养与鉴定KI培养基：培养基：A大肠埃希菌大肠埃希菌 B志贺氏菌志贺氏菌 C阴性对照阴性对照KI培养基：培养基：A沙门氏菌沙门氏菌 B变形杆菌变形杆菌 C阴性对照阴性对照 玻片凝集试验玻片凝集试验血清学诊断（血清学诊断（Widal试验）试验）原原理理：用用已已知知伤伤寒寒沙沙门门菌菌抗抗原原和和抗抗原原以以及及甲甲型型副副伤伤寒寒、肖肖氏氏、希希氏氏沙沙门门菌菌抗抗原原的的诊诊断断菌菌液液与与受受检检血血清清做做定定量量凝凝集集试试验验，测测定定受受检检血血清清中中有有无无相相应应抗抗体体及及其其效效价价的的试试验验。辅辅助助诊断肠热症。诊断肠热症。正常值：伤寒正常值：伤寒 1/80 1/80 1/160 1/160副伤寒副伤寒 1/80 1/80意义：抗体意义：抗体IgMIgM，抗体抗体IgGIgG肥达试验结果分析肥达试验结果分析O-Ab、-Ab均升高：肠热症可能性大均升高：肠热症可能性大-Ab、-Ab均低：可能性小均低：可能性小-Ab不高不高-Ab高：预防接种或非特异性回忆反应高：预防接种或非特异性回忆反应-Ab高高-Ab不高：感染早期或交叉反应不高：感染早期或交叉反应1.控制传染源：带菌者检查（控制传染源：带菌者检查（Vi抗体抗体 1：10）；治疗首选阿奇）；治疗首选阿奇霉素。霉素。2.切断传播途径：公共卫生和环境卫生；切断传播途径：公共卫生和环境卫生；3.疫苗接种：伤寒沙门菌疫苗接种：伤寒沙门菌Ty21a活疫苗较好。活疫苗较好。四、防治原则四、防治原则