云南地方小麦种质资源条锈病抗性鉴定与抗病基因分子检测.pdf

农业大数据学报 2023,5(2):27-35 Journal of Agricultural Big Data DOI:10.19788/j.issn.2096-6369.230205 收稿日期：2023-05-10 基金项目：国家自然科学基金项目（32260477），云南省基础研究计划项目-面上项目（2019FB054），科技部、财政部国家科技资源共享服务平台-云南农作物种质资源收集保存与共享利用（NCGRC-2022-030），云南省重大科技专项(生物医药)子项目-生物资源数字化开发应用（202002AA100007），2022 年省农业发展专项资金-现代种业发展项目-云南省省级农作物种质资源库建设 作者简介：陈丹，博士，研究方向：作物种质资源保存与评价；E-mail：。共同第一作者杜娟，本科，普洱学院；E-mail：。通信作者蔡青，研究方向：作物种质资源保存与利用；E-mail：。共同通信作者伍少云，研究方向：作物种质资源保存与利用；E-mail：。云南地方小麦种质资源条锈病抗性鉴定与抗病基因分子检测 陈丹1，杜娟2，周国雁1，武晓阳1，白晓东3，伍少云1*，蔡青1*1.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所/国家农作物种质资源库-云南分库/农业农村部西南作物基因资源与种质创制重点实验室/云南省农业生物技术重点实验室，昆明 650205；2.普洱学院生物与化学学院，云南 普洱 665000；3.云南省楚雄州武定县猫街镇农业农村服务中心，云南 楚雄 651607 摘要：作物种质资源深入鉴定是育种利用的前提和基础。云南省农作物种质资源库保存了丰富的云南地方小麦种质资源，但其条锈病抗性特征尚不明确。本研究通过开展田间成株期条锈病抗性鉴定及 3 个已知抗病基因Yr5、Yr10、Yr15的基因型分析，明确云南省农作物种质资源库保存的 260 份云南地方小麦种质资源条锈病抗性水平及 3 个已知抗病基因位点分布，为小麦条锈病优异抗性资源筛选与抗病基因发掘利用提供理论参考。结果表明：260 份云南地方小麦种质资源在 2022 年嵩明试验点的田间成株期条锈病抗性表现免疫和近免疫材料 38 份，占 14.62%；高抗材料 93 份，占 35.77%；中抗材料 46 份，占17.69%；中感和高感材料 83 份，占 31.92%。同时利用毛细管电泳检测技术，明确 260 份云南地方小麦种质资源中携带Yr10抗病基因的材料为 11 份，占比为 4.23%，携带Yr5和Yr15抗病基因的材料均为 0 份。综上，260 份云南地方小麦资源中具有较为丰富的条锈病抗性材料，免疫、近免疫及高抗材料占比为 50.39%，并且未检测出已知抗病基因Yr5和Yr15，推测上述材料很可能携带有未知抗病新基因。关键词：云南地方小麦资源；条锈病；抗性鉴定；抗病基因分子检测 引用格式：陈丹,杜娟,周国雁,等.云南地方小麦种质资源条锈病抗性鉴定与抗病基因分子检测J.农业大数据学报,2023,5(2):27-35.CHEN Dan,DU Juan,ZHOU GuoYan,et al.Identification of Stripe Rust Resistance and Molecular Detection of Resistance Genes in Yunnan Wheat Landrace Germplasm Resources J.Journal of Agricultural Big Data,2023,5(2):27-35.Identification of Stripe Rust Resistance and Molecular Detection of Resistance Genes in Yunnan Wheat Landrace Germplasm Resources CHEN Dan1,DU Juan2,ZHOU GuoYan1,WU XiaoYang1,BAI XiaoDong3,WU ShaoYun1*,CAI Qing1*1.Institute of Biotechnology and Germplasm Resources,Yunnan Academy of Agricultural Sciences/National Crop Germplasm Bank-Yunnan Branch/Key Laboratory of Crop Gene Resources and Germplasm Enhancement in Southwest China,Ministry of Agriculture and Rural Affairs/Yunnan Key Laboratory of Agricultural Biotechnology,Kunming 650205,China;2.School of Biology and Chemistry,Puer University,Puer 665000,Yunnan,China;3.Wuding County Maojie Town Agricultural and Rural Service Center,Chuxiong 651607,Yunnan,China 28 农 业 大 数 据 学 报 第5卷 Abstract:In-depth identification of crop germplasm resources is the premise and basis for breeding and utilization.The Crop Genebank of Yunnan Province has preserved abundant wheat germplasm resources in Yunnan,but the resistance characteristics of stripe rust are still unclear.In this study,260 Yunnan landrace wheat germplasm resources preserved in the Crop Genebank were determined by carrying out the identification of stripe rust resistance at adult plant stage in the field and the genotype analysis of three known resistance genes Yr5,Yr10 and Yr15,to clear the resistance level of stripe rust and the distribution of three known resistance genes Yr5,Yr10 and Yr15,which provided a theoretical reference for the screening of excellent resistance resources and the exploration and utilization of resistance genes.The results showed that 38 of 260 Yunnan landrace wheat germplasm resources showed immune and near immune resistance to stripe rust at adult stage in Songming experimental site in 2022,accounting for 14.62%.There were 93 high resistance materials,accounting for 35.77%,46 medium resistance materials,accounting for 17.69%,and 83 medium and high susceptible materials,accounting for 31.92%.At the same time,using capillary electrophoresis detection technology,there were 11 materials carrying Yr10 resistance gene in 260 Yunnan landrace wheat germplasm resources,accounting for 4.23%,and 0 materials carrying Yr5 and Yr15 resistance genes.In summary,260 Yunnan landrace wheat resources are rich in stripe rust resistance materials.The proportion of immune,near immune and high resistance materials are 50.39%,and resistance genes Yr5 and Yr15 are undetected.It is speculated that the above materials are likely to carry unknown new resistance genes.Key words:Yunnan landrace wheat resources;rust disease;resistance identification;molecular detection of resistance genes 1 引言 小麦条锈病是严重威胁世界小麦粮食安全生产重大真菌病害之一，一直是全球小麦主产国最具威胁性的生物灾害1。防控小麦条锈病最安全有效和经济环保的首选途径始终是选育和推广利用抗条锈病小麦品种2。但是现代小麦育成品种抗源单一，遗传基础狭窄。地方品种作为种质资源的重要组成部分，具有对当地生态环境适应性佳、抗逆性强等优点，是种质扩增、遗传改良和创新的重要源泉之一3。开展地方品种抗条锈病性鉴定是新抗源筛选及抗病基因发掘的重要前提。目前，国际上以 Yr 系统正式命名的小麦抗条锈病基因有 83 个位点，即 Yr1Yr834。在上述已正式命名的抗条锈病基因中，目前仅有 Yr5、Yr15 等5-6少数基因对我国小麦条锈菌流行小种保持良好抗性。通过已知抗病基因分子标记检测抗病基因在小麦种质资源中的分布，是快捷有效的分析方法。韩德俊等7对 1980 份小麦地方品种和国外种质进行了连续3 年的成株期抗病性鉴定，筛选出 8 份具有全生育期抗性和 42 份具成株期抗性的小麦条锈病抗源。其中，6 份材料可能带有 Yr9；2 份材料可能带有 Yr10；21份材料可能带有 Yr18；未发现携带 Yr5、Yr15 和 Yr26的抗源；品冬 34、青春 39 等 6 份材料可能携带未发掘的全生育期抗条锈病新基因。董淑静等8利用与已知基因紧密连锁的分子标记对 43 个河南小麦品种进行抗条锈病基因分子检测，结果发现 Yr1、Yr2、Yr5、Yr7、Yr9、Yr10、Yr24、YrZH84 等基因的检出频率分别为 14.0%、95.3%、11.6%、4.7%、16.3%、7.0%、2.3%、11.6%。云南省农作物种质资源库保存了丰富的云南地方小麦种质资源，本团队前期已对部分地方资源开展了条锈病抗性鉴定，但是尚未完成全部库存地方小麦资源条锈病抗性水平鉴定。因此，本研究在前期基础上，针对库存资源中尚未开展条锈病抗性鉴定的地方小麦资源，通过田间成株期抗性鉴定及毛细管电泳检测抗病基因位点，以明确云南地方小麦种质资源条锈病抗性水平及抗病基因分布，为云南乃至全国小麦条锈病抗性育种改良提供新抗源。2 材料与方法 2.1 试验材料 国家农作物种质资源库-云南分库/云南省农作物种质资源库保存的云南地方小麦资源 260 份。感病对照材料 Avocet S 以及携带已知抗病基因的近等基因系材料 Avocet S*6/Yr5、Avocet S*6/Yr10、Avocet S*6/Yr15。2.2 试验方法 2.2.1 田间成株期条锈病抗性鉴定 试验材料于 2021 年 11 月在云南省昆明市嵩明县小街镇云南省农业科学院科研试验基地播种。每份材料种植 5 行，行长 1 m，行距 30 cm，每行 20株。2022 年 2 月，采用涂抹法在田间小麦拔节期开展人工混合小种接种试验。菌种由目前国内小麦生第 2 期 陈丹等：云南地方小麦种质资源条锈病抗性鉴定与抗病基因分子检测 29 产上主要流行的、致病性强的生理小种 CYR32、CYR33、CYR34、贵 22-14、水源和贵农致病类群组成。待对照充分发病时，开展病害调查，调查时每份材料随机抽样 20 个叶片（主要为旗叶），根据农业部颁布 小麦抗条锈病评价技术规范（2007NY/T 1443.1）9标准，逐一调查叶片侵染型、严重度和普遍率，并统计小麦的病情指数，共调查 2 次，分别为 4 月 12 日和 4 月 26 日，2 次调查间隔 14 天。所有性状分析均使用最后一次的调查数据。（1）侵染型（Infection type）：按 0、0；、1、2、3、4 等 6 个类型划分。（2）严重度（Severity，S）：用分级法表示，设0、5%、10%、20%、40%、60%、80%、100%等 8 级。并根据每个单株的严重度，计算平均严重度。100X)S(X(%)Sn1iin1iii=其中，S 为平均严重度，i 为病级数（1n)，Xi 为病情 i 级的单元数，Si 为病情 i 级的严重度值（如小麦条锈病各级的百分数）。（3）普遍率（Incidence）：普遍率（%）=（发病叶片数/调查总叶片数）100（4）病情指数（Disease index，DI）：DI=IS100 其中，I 为普遍率，S 为平均严重度，并且，进一步依据鉴定材料发病程度（病情指数和侵染型）确定其对条锈病的抗性水平，抗性水平分为 7 个等级：免疫(I)、近免疫(NIM)、高抗(HR)、中抗（MR)、慢锈(SR)、中感(MS)、高感(HS)。评价标准见表 1。2.2.2 已知抗病基因检测 采用CTAB方法10提取小麦2 周龄幼苗叶片基因组 DNA，并用 ddH2O 稀释为浓度 30 ng/L 备用。PCR扩增的反应体系为 10 L，包括 2Taq Master Mix 5 L，10 molL 特异引物各 0.2 L，DNA 模板 1 L，ddH2O 3.6 L。扩增程序为 94预变性 5 min，94变性 1 min，退火温度 1 min（具体退火温度详见表 2），72延伸 1 min，35 个循环，72延伸 10 min，4保存。PCR扩增产物采用毛细管电泳技术分离目的片段，对 Yr5、Yr10、Yr15 3 个已知小麦抗条锈病基因位点进行检测。荧光引物合成和毛细管电泳检测均由北京擎科生物科技有限公司完成。表 1 小麦条锈病抗性评价标准 Table 1 Evaluation criteria of wheat resistance to stripe rust侵染型侵染型 病情指数病情指数 抗性评价抗性评价 0 免疫(I)0；近免疫(NIM)1 高抗(HR)2 中抗(MR)34 25 慢锈(SR)3 25 中感(MS)4 25 高感(HS)表 2 小麦条锈病抗性基因检测的分子标记 Table 2 Molecular markers for detection of wheat stripe rust resistance genes 基因基因 标记名称标记名称 引物序列引物序列 连锁距离连锁距离(cM)退火温度退火温度()5修饰修饰 文献文献 Yr5 wmc175 F:GCTCAGTCAAACCGCTACTTCT R:CACTACTCCAATCTATCGCCGT 1.4、9 60 FAM 11-13 Yr10 xpsp3000 F:GCAGACCTGTGTCATTGGTC R:GATATAGTGGCAGCAGGATACG 1.88 57 HEX 14 Yr15 barc8 F:GCGGGAATCATGCATAGGAAAACAGAA R:GCGGGGGCGAAACATACACATAAAAACA 9.00 50 TAMAR 15 3 结果与分析 3.1 云南地方小麦种质资源田间成株期条锈病抗性鉴定 云南地方小麦种质资源 2021-2022 年度嵩明试 验点田间成株期条锈病抗性鉴定结果表明，侵染型从 0 到 4 级均有分布，平均严重度的范围为 01，平均值为 0.19。普遍率的范围为 0100%，平均值为 68.17%。病情指数的范围为 01，平均值为 0.18（表 3）。30 农 业 大 数 据 学 报 第5卷 表 3 云南地方小麦种质资源田间抗病性部分鉴定结果 Table 3 Part of field resistance identification results of Yunnan wheat landrace 种质编号种质编号 No.侵染型侵染型 普遍率普遍率(%)平均严重度平均严重度(%)病情指数病情指数 2107 1-100.00 3.00 0.03 2112 1 100.00 1.00 0.01 2117 2 100.00 15.00 0.15 2132 4 100.00 75.00 0.75 2137 3+95.24 21.00 0.20 2142 2+31.82 3.00 0.01 2147 0；0.00 0.00 0 2152 3+95.65 39.00 0.38 2157 1 66.67 4.00 0.03 2162 3 81.82 31.00 0.25 2167 2+100.00 13.00 0.13 2172 0 0.00 0.00 0 2177 3+100.00 40.00 0.40 2192 1-100.00 2.00 0.02 2197 3+100.00 65.00 0.65 2202 3+100.00 0.38 0.38 2207 1-5.00 0.00 0 2212 0；0.00 0.00 0 2217 3 100.00 44.00 0.44 2222 1-75.00 1.00 0.01 2227 1-75.00 1.00 0.01 2232 4 100.00 91.00 0.91 Avocet S*6/Yr5 0 0.00 0.00 0 Avocet S*6/Yr10 2 8.00 100.00 0.08 Avocet S*6/Yr15 0 0.00 0.00 0 Avocet S 4 100.00 100.00 1 进一步根据侵染型和病情指数，确定各材料的条锈病抗性水平。260 份云南地方小麦种质资源中，表现免疫和近免疫材料 38 份，占 14.62%；高抗材料 93 份，占 35.77%；中抗材料 46 份，占 17.69%；中感和高感材料 83 份，占 31.92%（表 4）。免疫、近免疫、高抗和中抗材料总计 177 份，占比为68.08%。可以看出，云南地方小麦资源中抗条锈病材料较为丰富，其中，2147、2172、2212、2444、2464、2549、2579、2594、2664、2711、2716、2784、2968、2973、2993、2998、3043、3048、3073、3078、3083、3088、3093、3103、3123、3128、3133、3138、3148、3153、3183、3193、3238、3243、3293、3347、3465、3485 等材料表现免疫或近免疫，在育种利用上值得关注16。3.2 云南地方小麦种质资源已知抗条锈病基因位点的分子检测 结果发现，在 260 份云南地方小麦种质资源均中未检测出 wmc175（Yr5）和 barc8（Yr15）扩增条带，第 2 期 陈丹等：云南地方小麦种质资源条锈病抗性鉴定与抗病基因分子检测 31 表 4 云南地方小麦资源田间不同抗病类型材料数量统计 Table 4 Number of strip rust resistance germplasm of Yunnan wheat landrace 抗性类型抗性类型 种质资源种质资源 免疫免疫/近免疫近免疫 高抗高抗 中抗中抗 感病感病 总计总计 数量 38.00 93.00 46.00 83.00 260 占比（%）14.62 35.77 17.69 31.92 100 而在 11 份材料中，检测出 xpsp3000（Yr10）扩增条带。由此表明，260 份云南地方小麦种质资源可能均不携带 Yr5 和 Yr15 基因（表 5）。11 份云南地方小麦种质资源可能携带 Yr10 基因，占比 4.23%（表 6）。表 5 云南地方小麦种质资源中Yr5、Yr10和Yr15基因位点的分布 Table 5 Distribution of Yr5,Yr10 and Yr15 gene loci in Yunnan landrace wheat germplasm resources Yr5 Yr10 Yr15 Yr5 Yr10 Yr15 Yr5 Yr10 Yr15Yr5 Yr10 Yr15供试材料供试材料 种质编号种质编号 wmc175 xpsp3000 barc8 供试材料供试材料 种质编号种质编号 wmc175 xpsp3000barc8供试材料供试材料种质编号种质编号wmc175 xpsp3000 barc8供试材料供试材料 种质编号种质编号 wmc175 xpsp3000 barc82107 2469 2863 3253 2112 2474 2868 3258 2117 2494 2873 3263 2132 2509 2878 3268 2137 2514 2883 3273 2142 2519 2888 3278 2147 2524 2893 3283 2152 2529 2898 3288 2157 2534 2903 3293 2162 2539 2908 3298 2167 2544 2913 3303 2172 2549 2918 3308 2177 2554 2928 3313 2192 2559 2933 3318 2197 2564 2938 3323 2202 2574 2943 3327 2207 2579 2948 3332 2212 2584 2968 3342 2217 2589 2973 3347 2222 2594 2978 3352 2227 2599 2983 3357 2232 2604 2988 3362 2237 2609 2993 3367 2242 2614 2998 3372 2247 2624 3003 3377 2252 2629 [phone] 2634 3018 3392 32 农 业 大 数 据 学 报 第5卷 续表 5 Yr5 Yr10 Yr15 Yr5 Yr10 Yr15 Yr5 Yr10 Yr15Yr5 Yr10 Yr15供试材料供试材料 种质编号种质编号 wmc175 xpsp3000 barc8 供试材料供试材料 种质编号种质编号 wmc175 xpsp3000barc8供试材料供试材料种质编号种质编号wmc175 xpsp3000 barc8供试材料供试材料 种质编号种质编号 wmc175 xpsp3000 barc82262 2639 3023 3397 2267 2644 [phone] 2649 [phone] 2654 3038 3417 2282 2659 3043 3427 2287 2664 3048 3432 2292 2674 3053 3437 2297 2679 3058 3446 2302 2684 3063 3451 2307 2689 3073 3455 2312 2694 3078 3460 2317 2698 3083 3465 2322 2703 3088 3470 2332 2707 3093 3475 2337 2711 3098 3480 2341 2716 3103 3485 2346 2721 3113 3490 2351 2726 3118 3495 2355 2731 3123 3500 2360 2741 3128 3505 2364 2746 3133 3510 [phone] 3515 [phone] [phone] [phone] [phone] 2770 3158 3529 2394 2775 3163 3534 2399 2784 3168 3539 2404 2799 3173 3544 2409 2809 3178 [phone] 3183 3554 2419 2819 3188 3559 2424 2824 3193 3564 2429 2829 3203 3569 [phone] 3579 2439 2838 [phone] 2843 3218 Avocet S-2449 2848 3223 阳性对照+2459 2853 3238 2464 2858 3243 第 2 期 陈丹等：云南地方小麦种质资源条锈病抗性鉴定与抗病基因分子检测 33 表 6 Yr5、Yr10和Yr15抗性基因在云南地方小麦种质资源中的分布 Table 6 Distribution of Yr5,Yr10 and Yr15 resistance genes in Yunnan wheat landrace 携带目标条带类型携带目标条带类型 种质资源种质资源 Yr5 Yr10 Yr15 无带无带 合计合计 数量 0 11.00 0 249.00 260 占比（%）0 4.23 0 95.77 100 4 讨论 4.1 云南地方小麦种质资源条锈病抗性水平 小麦条锈病是全球及我国最为严重的真菌病害之一。云南省是我国重要的条锈病越冬区和初菌源产生区之一。由于其地形地貌复杂，气候类型多样，因此小麦条锈菌群体毒性在云南省易发多变17。对 2009年、2010 年和 2011 年开展云南小麦条锈病流行趋势研究表明，2009 年全省小麦条锈病大流行，发生面积约 26.7104 hm2，占种植面积的 50%；2010 年全省发生面积为 4.94104 hm2；2011 年全省小麦条锈病中等程度发生，发生面积 8.49104 hm2，比 2010 年增加3.55104 hm218。以往学者对云南地方小麦品种的抗条锈病开展了较多研究，发现了具有较强抗性的材料。李菁等19对 213 份中国特有小麦种质(包括 117 份西藏半野生小麦、78 份云南铁壳麦和 18 份新疆稻麦)进行苗期和成株期抗性表型鉴定。结果表明，共有 18 份中国特有小麦种质对混合生理小种表现苗期抗性，89 份表现成株期抗性。进一步分析发现，成株期抗性种质主要来源于云南铁壳麦。习玲等20通过对 243 个云南地方小麦品种苗期和成株期条锈病抗性分析，筛选出具有稳定成株期抗性材料 174 个。本研究通过对260 份云南地方小麦种质资源开展一年田间成株期条锈病抗性鉴定，也发现云南地方小麦资源条锈病抗性水平分布较广，表现高抗及以上的材料数量较多，从中筛选出表现稳定的免疫和近免疫材料 38 份，高抗材料 93 份。4.2 云南地方小麦种质资源抗条锈病基因分布 以往大量研究表明，分子标记技术是能够快速、准确鉴定待测材料中是否含有已知目的基因的有效方法21-24。目前，Yr5 和 Yr15 是近年来少数几个对当前小麦条锈病菌主要流行小种 CYR32、CYR33、CYR34等仍可保持较高抗性的已知基因，具有重要的应用价值。而其他已知 Yr 基因抗性已完全丧失或逐渐减弱。其中，Yr5 基因具有持久广谱抗性，对目前几乎所有条锈病菌系具有抗性，已被成功克隆5；Yr15 是一个广谱抗小麦条锈病基因，对国内外 2000 余个条锈菌生理小种表现抗性，也已从野生二粒小麦中成功克隆6。因此，本研究对 260 份供试材料主要开展 Yr5 和Yr15 基因位点的检测研究。在本团队前期研究中，已完成了近 200 份云南地方小麦种质资源的多个已知抗病基因位点检测，也发现 Yr5 和 Yr15 分布非常稀少（文章已录用）。以往研究结果与本研究一致，普通六倍体地方小麦种质资源中较少分布上述 2 个基因位点。习玲等20对 243 份云南小麦地方品种携带的重要抗条锈病基因分子检测发现，携带 Yr10、Yr18、Yr29、Yr30、Yr65 和 Yr81 抗性基因的材料分别有 48、44、4、6、4 和 101 份。但是所有供试材料均未检测到 Yr5、Yr15、Yr26、Yr28、Yr36、Yr39、Yr41、Yr48、Yr67 和 Yr80。综上，本研究发现较多免疫、近免疫和高抗材料，并未携带有 Yr5、Yr10 和 Yr15 基因目的条带，但仍然保持较高抗性，比如材料编号 2147、2172、2212、2444和 2464 等。由于 Yr5 和 Yr15 是目前少数几个仍可保持抗性的已知基因，大部分其他已知基因抗性已逐渐丧失。因此，我们推测这些材料可能携带未知抗病新基因，很可能在未来小麦抗条锈病育种中具有重要的应用价值，是非常值得关注的优异抗源材料。5 结论 本文通过对 260 份云南地方小麦种质资源田间成株期条锈病抗性鉴定及 3 个已知抗病基因 Yr5、Yr10、Yr15 的基因型检测，发现云南地方小麦资源中具有较为丰富的条锈病抗性材料，共筛选出免疫、近免疫及高抗材料 131 份，且上述材料均不携带有已知抗病基因 Yr5 和 Yr15，推测很可能携带有未知抗病新基因。34 农 业 大 数 据 学 报 第5卷 致谢：感谢国家作物种质资源库-云南分库提供实验材料，感谢华中农业大学兰彩霞教授提供Avocet S等对照材料，感谢四川农业大学陈国跃教授提供病害鉴定技术指导，感谢甘肃省农业科学院植物保护研究所贾秋珍研究员提供实验菌种。参考文献 1 康振生,王晓杰,赵杰,等.小麦条锈菌致病性及其变异研究进展J.中国农业科学,2015,48(17):3439-3453.Kang Z S,Wang X J,Zhao J,et al.Advances in research of pathogenicity and virulence variation of the wheat stripe rust fungus Puccinia striiformis.f.sp.triticiJ.Scientia Agricultura Sinica,2015,48(17):3439-3453.(in Chinese)2 韩德俊,康振生.中国小麦品种抗条锈病现状及存在问题与对策J.植物保护,2018,44(5):1-12.Han D J,Kang Z S.Current status and future strategy in breeding wheat for resistance to stripe rust in ChinaJ.Plant Protection,2018,44(5):1-12.(in Chinese)3 李春辉,王天宇,黎裕,等.基于地方品种的种质创新现状及展望J.植物遗传资源学报,2019,20(6):1372-1379.Li C H,Wang T Y,Li Y,et al.Germplasm innovation of landraces:current status and future prospectJ.Journal of Plant Genetic Resources,2019,20(6):1372-1379.(in Chinese)4 陈万权,康振生,马占鸿,等.中国小麦条锈病综合治理理论与实践J.中国农业科学,2013,46(20):4254-4262.Chen W Q,Kang Z S,Ma Z H,et al.Integrated management of wheat stripe rust caused by Puccinia striiformis.f.sp.tritici in ChinaJ.Scientia Agricultura Sinica,2013,46(20):4254-4262.(in Chinese)5 Marchal C,Zhang J P,Zhang P,et al.BED-domain-containing immune receptors confer diverse resistance spectra to yellow rustJ.Nature Plants,2018,4:662-668.6 Klymiuk V,Yaniv E,Huang L,et al.Cloning of the wheat Yr15 resistance gene sheds light on the plant tandem kinase-pseudokinase familyJ.Nature Communications,2018,9:3735.7 韩德俊,张培禹,王琪琳,等.1980 份小麦地方品种和国外种质抗条锈性鉴定与评价J.中国农业科学,2012,45(24):5013-5023.Han D J,Zhang P Y,Wang Q L,et al.Identification and evaluation of resistance to stripe rust in 1980 wheat landraces and abroad germplasmJ.Scientia Agricultura Sinica,2012,45(24):5013-5023.(in Chinese)8 董淑静,许为钢,胡琳,等.43 个河南主推小麦品种抗条锈病基因的分子检测J.华北农学报,2012,27(5):157-162.Dong S J,Xu W G,Hu L,et al.Molecular detection of stripe rust resistant genes in 43 wheat varieties planted in Henan ProvinceJ.Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2012,27(5):157-162.(in Chinese)9 小麦抗病虫性评价技术规范第1部分:小麦抗条锈病评价技术规范,NY/T 1443.1-2007.Rules for resistance evaluation of wheat to diseases and insect pests part1:rule for resistance evaluation of wheat to yellow rust(Puccinia striiformis West.f.sp.tritici Eriks.et Henn.),NY/T 1443.1-2007.(in Chinese)10 张晓祥,王玲,寿路路.一种快速提取小麦基因组 DNA 的改良CTAB 方法J.中国农学通报,2012,28(36):46-49.Zhang X X,Wang L,Shou L L.A rapid modified CTAB method of extracting genomic DNA from wheat leafJ.Chinese Agricultural Science Bulletin,2012,28(36):46-49.(in Chinese)11 Zhang P,McIntosh