苯唑西林耐药金黄色葡萄球分子流行病学调查及糖肽类抗生素对葡萄球菌体外活性研究ppt课件.ppt

苯唑西林耐药金黄色葡萄球分子流行病学调查苯唑西林耐药金黄色葡萄球分子流行病学调查及及糖肽类抗生素对葡萄球菌体外活性研究糖肽类抗生素对葡萄球菌体外活性研究 1 1孙宏莉孙宏莉 王王 辉辉 陈民陈民钧钧 研究背景研究背景2 2Evolution of Drug Resistance in S.aureusEvolution of Drug Resistance in S.aureus3 3S.aureusS.aureusPenicillinPenicillin19441944Penicillin-resistantPenicillin-resistantS.aureusS.aureusMethicillinMethicillin19621962Methicillin-Methicillin-resistantresistantS.aureus S.aureus(MRSA)(MRSA)Vancomycin-resistantVancomycin-resistantenterococci(VRE)enterococci(VRE)VancomycinVancomycin19901990ss19971997VancomycinVancomycinintermediateintermediateS.aureusS.aureus(VISA)(VISA)20022002 VancomycinVancomycin-resistantresistantS.aureusS.aureusCDC,MMWR 2002;51(26):565-567CDC,MMWR 2002;51(26):565-567研究背景研究背景研究背景研究背景苯苯唑唑西西林林耐耐药药的的金金黄黄色色葡葡萄萄球球（MRSAMRSA）是是引引起起医医院院感感染染的的主要病因，常发生于免疫力低下的住院患者。主要病因，常发生于免疫力低下的住院患者。世界首例世界首例MRSAMRSA ：19611961年，英国年，英国目前在许多国家仍在增长：目前在许多国家仍在增长：4 4研究背景研究背景研究背景研究背景世界约世界约100,000100,000人人/年感染年感染MRSAMRSA 国疾病控制和预防中心（国疾病控制和预防中心（CDCCDC）统统计计5 5研究背景研究背景研究背景研究背景6 6欧洲部分国家欧洲部分国家MRSAMRSA发生率比较发生率比较%Tiemersma EW,et al.MRSA in Europe 1999-2002.Tiemersma EW,et al.MRSA in Europe 1999-2002.Emerging infetious Diseases,2004,10(9)1627-1634Emerging infetious Diseases,2004,10(9)1627-1634研究背景研究背景1989-20011989-2001年美国年美国ICUICU病房病房MRSAMRSA发病率发病率7 7 美国国家医院感染监测中心美国国家医院感染监测中心美国国家医院感染监测中心美国国家医院感染监测中心（NNISNNISNNISNNIS）提供提供提供提供研究背景研究背景研究背景研究背景2001-20032001-2003年协和医院年协和医院MRSAMRSA发生率比较发生率比较8 8研究背景研究背景 内酰胺类抗生素对金黄色葡萄球菌的作用机制内酰胺类抗生素对金黄色葡萄球菌的作用机制 青青霉霉素素结结合合蛋蛋白白（PBPPBP）是是参参与与细细胞胞壁壁肽肽聚聚糖糖成成分分合合成成的的酶酶。-内内酰酰胺胺类类抗抗生生素素能能与与细细菌菌胞胞膜膜的的PBPPBP结结合合使使其其失失活活，从而细胞壁合成受到抑制，导致细菌死亡从而细胞壁合成受到抑制，导致细菌死亡9 9研究背景研究背景研究背景研究背景对对 内酰胺类抗生素（如苯唑西林）耐药机制：内酰胺类抗生素（如苯唑西林）耐药机制：低低水水平平耐耐药药：产产生生过过量量的的 内内酰酰胺胺酶酶、PBPsPBPs过过量量表表达达、PBPPBP与与苯苯唑西林亲和力下降；唑西林亲和力下降；高高水水平平耐耐药药：产产生生由由mecAmecA基基因因编编码码的的PBP2aPBP2a，可可替替代代其其它它PBPPBP合成细胞壁，但与合成细胞壁，但与 内酰胺类抗生素亲和力差，而产生耐药。内酰胺类抗生素亲和力差，而产生耐药。对其它抗生素耐药机制：对其它抗生素耐药机制：mecAmecA基基因因位位于于一一个个可可移移动动元元件件SCCmecDNASCCmecDNA，该该元元件件由由不不同同的整合子、转座子等组成，分别编码不同抗生素的耐药基因。的整合子、转座子等组成，分别编码不同抗生素的耐药基因。1010MRSAMRSAMRSAMRSA耐药机制耐药机制耐药机制耐药机制研究背景研究背景研究背景研究背景MRSAMRSA治疗上的困难治疗上的困难 多重耐药多重耐药有有效效治治疗疗药药物物：万万古古霉霉素素、替替考考拉拉宁宁、利利萘萘唑唑烷烷、链链阳阳霉霉素素、甲氧苄啶甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、氯霉素等磺胺甲恶唑、氯霉素等已出现对万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌：多为已出现对万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌：多为MRSAMRSA 在住院患者间易传播，造成爆发流行在住院患者间易传播，造成爆发流行1111研究背景研究背景研究背景研究背景MRSAMRSA耐药性及流行病学研究对于正确治疗其引起的感染、耐药性及流行病学研究对于正确治疗其引起的感染、防止其播散有重要意义。防止其播散有重要意义。1212研究意义研究意义研究意义研究意义技术路线技术路线1313 从协和医院从协和医院20022002年住院患者分离年住院患者分离212212株株MRSAMRSA（表型测定）表型测定）MRSAMRSA的确证（苯唑西林盐琼脂的确证（苯唑西林盐琼脂筛选法筛选法 mecAmecA-femB femB 双重双重PCRPCR法法)ICU ICU、RCURCU病房的病房的MRSAMRSA 耐药性检测耐药性检测 回顾性分子流行病学调查回顾性分子流行病学调查 （琼琼脂脂稀稀释释法法；抗抗生生素素纸纸片片琼琼脂脂扩扩散散法法）（脉脉冲冲场场凝胶电泳）凝胶电泳）替考拉宁和万古霉素对葡萄球体外活性替考拉宁和万古霉素对葡萄球体外活性 1414技术路线技术路线技术路线技术路线为为临临床床正正确确防防治治并并减减少少MRSAMRSA的的感感染染提供参考依据提供参考依据同源性分析，跟踪爆发流行趋同源性分析，跟踪爆发流行趋势，势，区分新生感染区分新生感染/复发感染、复发感染、污染菌污染菌/病原菌病原菌1515MRSAMRSA的筛选及耐药性检测的筛选及耐药性检测MRSAMRSA医院流行病学调查医院流行病学调查MRSAMRSA感染病例临床资料分析感染病例临床资料分析 Part 1 Part 1Part 2Part 2Part 3Part 3第一部分：第一部分：MRSAMRSA的筛选及耐药性检测的筛选及耐药性检测16161717MRSAMRSAMRSAMRSA的表型鉴定的表型鉴定的表型鉴定的表型鉴定MRSAMRSAMRSAMRSA的确证试验的确证试验的确证试验的确证试验,平板平板平板平板/PCRPCRPCRPCRMRSAMRSAMRSAMRSA耐药性检测耐药性检测耐药性检测耐药性检测药敏结果数据分析及处理药敏结果数据分析及处理药敏结果数据分析及处理药敏结果数据分析及处理 一、一、MRSAMRSA的表型鉴定的表型鉴定 待测菌株待测菌株 革兰氏染色革兰氏染色 触酶试验（）触酶试验（）（阳性且呈双、链、葡萄状球菌）（阳性且呈双、链、葡萄状球菌）胶乳凝集试验（测凝集因子、蛋白胶乳凝集试验（测凝集因子、蛋白A A）（）（）疑难菌：疑难菌：APIAPI系统和系统和VITEKVITEK系统鉴定系统鉴定 苯唑西林药敏试验苯唑西林药敏试验 （抑菌圈直径（抑菌圈直径 10 10mmmm）1818二、二、MRSAMRSA的确证试验的确证试验1919mecAmecAfemBfemB双重双重PCRPCR法法苯唑西林苯唑西林-盐琼脂筛选法盐琼脂筛选法苯唑西林盐琼脂筛选试验检测苯唑西林盐琼脂筛选试验检测MRSA MRSA 方法：方法：（参照（参照NCCLS M100-S13NCCLS M100-S13文件中的规定）文件中的规定）待测新鲜菌悬液（待测新鲜菌悬液（0.50.5号比浊管浊度）号比浊管浊度）点点种种于于苯苯唑唑西西林林盐盐琼琼脂脂筛筛选平皿选平皿 （含含4%4%NaClNaCl、6 6 g/ml g/ml 苯苯唑唑西林的西林的M-HM-H平皿平皿 ）空空气气，3535孵孵育育24-24-4848小时小时 生生 长长菌落数菌落数11检测结果：检测结果：212212株中有株中有165165株金葡菌在筛选平皿生长株金葡菌在筛选平皿生长2020MRSAMRSAMRSAMRSA检测检测检测检测mecAmecAfemB femB 双重双重PCRPCR法检测法检测MRSAMRSA（原理及方法）原理及方法）mecAmecA：编码编码PBP2aPBP2a，苯唑西林耐药的决定子。苯唑西林耐药的决定子。femBfemB：某些葡萄球菌属染色体辅助基因，编码细胞壁合某些葡萄球菌属染色体辅助基因，编码细胞壁合成所需的一种重要酶。成所需的一种重要酶。2121MRSAMRSAMRSAMRSA检测检测检测检测mecAmecAfemB femB 双重双重PCRPCR法检测法检测MRSAMRSA（原理及方法）原理及方法）mecA mecA、femBfemB基因在不同种类葡萄球菌中的表基因在不同种类葡萄球菌中的表达达*MRSA MRSA MSSA MSSA MRSCoN MRSCoN MSSCoNMSSCoN mecA mecA femB femB 注注：MRSAMRSA苯苯唑唑西西林林耐耐药药的的金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌；MRSCoNMRSCoN苯唑西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌苯唑西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌 MSSAMSSA苯苯唑唑西西林林敏敏感感的的金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌；菌；MSSCoNMSSCoN苯唑西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌苯唑西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌 *JCMJCM.May 2002May 2002,P.1821-1823P.1821-18232222MRSAMRSAMRSAMRSA检测检测检测检测 mecA mecAfemB femB 双重双重PCRPCR法检测法检测MRSAMRSA（原理及方法）原理及方法）PCR PCR扩增扩增mecAmecA和和femBfemB基因所用引物基因所用引物*引引 物物 名名 引引 物物 序序 列列 扩增片段长度扩增片段长度 MecA1 MecA1 5 5-GTA-GTA GAA GAA ATG ATG ACT ACT GAA GAA CGT CGT CCG CCG ATA ATA A A 3 3 310bp 310bp MecA2 MecA2 5 5-CCA-CCA ATT ATT CCA CCA CAT CAT TGT TGT TTC TTC GGT GGT CTA CTA A-A-3 3 FemB1 FemB1 5 5-TTA-TTA CAG CAG AGT AGT TAA TAA CTG CTG TTA TTA CC CC-3-3 651bp651bp FemB2 5 FemB2 5-ATA CAA ATC CAG CAC GCT CT-3-ATA CAA ATC CAG CAC GCT CT-3 PCR PCR产物产物310310bpbp、651b651b处出现荧光条带为阳性处出现荧光条带为阳性 *Eur J Clin Microbiol Infect Dis,1999,18:643-647.Eur J Clin Microbiol Infect Dis,1999,18:643-647.2323MRSAMRSAMRSAMRSA检测检测检测检测mecAmecAfemB femB 双重双重PCRPCR法检测法检测MRSAMRSA （结果）结果）165 165株筛选平皿确证的株筛选平皿确证的MRSAMRSA经双重经双重PCRPCR法进一步确证，均为法进一步确证，均为MRSAMRSA。M:M:marker;marker;1 16:6:PCR PCR producs producs of of MRSA;MRSA;7 7:ATCC25923ATCC25923（MSSAMSSA）2424MRSAMRSAMRSAMRSA检测检测检测检测M 1 2 3 4 M 1 2 3 4 5 6 75 6 7 三、三、MRSAMRSA的耐药性检测（方法）的耐药性检测（方法）抗抗生生素素纸纸片片琼琼脂脂扩扩散散法法：万万古古霉霉素素、替替考考拉拉宁宁、复复方方新诺明、四环素新诺明、四环素 琼琼脂脂稀稀释释法法：万万古古霉霉素素、替替考考拉拉宁宁、苯苯唑唑西西林林、庆庆大大霉霉素、左氧氟沙星、红霉素、氯霉素素、左氧氟沙星、红霉素、氯霉素参照参照NCCLS M100-S13NCCLS M100-S13文件：文件：待测菌悬液：待测菌悬液：0.50.5号比浊管浊度号比浊管浊度 药敏培养基：药敏培养基：M-HM-H平皿平皿 培养条件：培养条件：35 35，空气，孵育，空气，孵育2424小时小时 判读结果：判读结果：按按NCCLS M100-S13NCCLS M100-S13文件规定的标准文件规定的标准数据分析及处理：数据分析及处理：WHONET-5.3WHONET-5.3软件软件2525MRSAMRSAMRSAMRSA检测检测检测检测MRSAMRSA的耐药性检测（结果的耐药性检测（结果1 1）2626165165165165种种种种MRSAMRSAMRSAMRSA对对对对9 9 9 9种抗生素的药敏结果：种抗生素的药敏结果：种抗生素的药敏结果：种抗生素的药敏结果：抗生素抗生素 R%I%S%MIC50 MIC90 MICR%I%S%MIC50 MIC90 MIC值范值范围围苯唑西林苯唑西林1001000 00 06464646432-6432-64替考拉宁替考拉宁0 00 01001002 22 20.5-80.5-8万古霉素万古霉素0 00 0100 100 0.50.51 10.25-20.25-2庆大霉素庆大霉素1001000 00 025625651251232-51232-512红霉素红霉素93.993.9 1.81.84.24.2128128128128125-128125-128氯霉素氯霉素0.60.60.60.698.898.88 88 84-644-64左氧氟沙星左氧氟沙星98.298.2 1.81.80 016163232 4-1284-128甲氧苄啶甲氧苄啶3.63.60.60.695.895.8 /磺胺甲恶唑磺胺甲恶唑四环素四环素96.396.3 1.21.22.52.5耐药性检测耐药性检测耐药性检测耐药性检测MRSAMRSA的耐药性检测（结果的耐药性检测（结果2 2）2727 MICMIC法法测测定定的的万万古古霉霉素素和和替考拉宁对替考拉宁对165165株株MRSAMRSA的的MICsMICs的散点图的散点图耐药性检测耐药性检测耐药性检测耐药性检测第二部分：第二部分：MRSAMRSA医院流行病学调查医院流行病学调查 （ICUICU、RCURCU病房）病房）28282929脉冲场凝胶电泳（脉冲场凝胶电泳（PFGEPFGE）耐药表型和基因型比较耐药表型和基因型比较 一、一、MRSAMRSA的脉冲场凝胶电泳（原理）的脉冲场凝胶电泳（原理）3030PFGEPFGEPFGEPFGE5 5KbKb5050KbKb500500KbKbMRSAMRSA的脉冲场凝胶电泳（结果分型的脉冲场凝胶电泳（结果分型2 2）3131 1 1 2 2 3 3 4 4 5 5 6 6 7 7 8 8 9 9 M M 10 11 12 13 1410 11 12 13 14 2002 2002年年ICUICU及及RCURCU病房病房MRSAMRSA主要流行株主要流行株(A1A1亚型亚型)1 114 14 lanes:lanes:A1A1亚亚型型（共共5555株株）;M:M:ladder ladder markermarkerPFGEPFGEPFGEPFGEMRSAMRSA的脉冲场凝胶电泳（结果判读）的脉冲场凝胶电泳（结果判读）3232PFGEPFGEPFGEPFGE CDC Tenover CDC Tenover*等人推荐的方法判读：等人推荐的方法判读：突变位点数突变位点数 酶切后酶切后DNADNA片断区别片断区别 亲缘关系亲缘关系 基因分型基因分型 0 0 无区无区别别 同型同型 1 1 2-32-3条条 亲缘关系密切亲缘关系密切 同型但不同亚同型但不同亚型型 2 2 4-64-6条条 可能存在亲缘关系可能存在亲缘关系 同型但不同亚型同型但不同亚型 3 3 7 7条条 无亲缘关系无亲缘关系 不同型不同型1.1.*Tenover FC,JCM,1995,33:2233-2239.Tenover FC,JCM,1995,33:2233-2239.MRSAMRSA的脉冲场凝胶电泳（结果分型的脉冲场凝胶电泳（结果分型1 1）5 5种：种：A A（A1A1、A2A2）、）、B B（B1B1、B2B2、B3B3）C C、D D、E E型型 3333 ICU ICU及及RCURCU病房病房6565株株MRSA MRSA 的的PFGEPFGE图谱图谱 M A1 A2 B1 B1 B2 B2 B3 D D C M A1 A2 B1 B1 B2 B2 B3 D D C E M E M PFGEPFGEPFGEPFGE MRSA MRSA部分病例调查结果（三）部分病例调查结果（三）A1 A1亚型爆发流行株（亚型爆发流行株（55/6555/65株）分离时间遍布株）分离时间遍布20022002全全年年3434临床资料临床资料二、二、MRSAMRSA的耐药表型和基因型比较的耐药表型和基因型比较3535不同基因型（不同克隆来源）不同基因型（不同克隆来源）相同耐药谱相同耐药谱表型表型与与基因型基因型3636 序号序号 病房病房 分离时间分离时间 标本类型标本类型 耐药谱耐药谱 PFGEPFGE分型分型 1 1 RCURCU 2002-2-1 2002-2-1 痰痰 OGLER OGLER A1A1 2 ICU 2002-8-1 2 ICU 2002-8-1 痰痰 OGLER OGLER A1A1 3 ICU 3 ICU 2002-10-3 2002-10-3 痰痰 OGLER OGLER A1A1 4 ICU 4 ICU 2002-10-8 2002-10-8 痰痰 OGLER OGLER A1A1 5 ICU 5 ICU 2002-10-2002-10-14 14 痰痰 OGLER A1OGLER A1 6 ICU 6 ICU 2002-1-2 2002-1-2 血液血液 OGLER OGLER A1A1 7 ICU 7 ICU 2002-1-8 2002-1-8 痰痰 OGLER OGLER A1A1 8 ICU 8 ICU 2002-2-4 2002-2-4 痰痰 OGLER OGLER A1A1 9 ICU 9 ICU 2002-4-8 2002-4-8 痰痰 OGLER OGLER A1A1 10 ICU 10 ICU 2002-4-10 2002-4-10 导管导管 OGLER OGLER A1A1 11 ICU 2 11 ICU 2002-10-3 002-10-3 痰痰 OGLER OGLER A2A2 12 RCU 12 RCU 2002-10-3 2002-10-3 痰痰 OGLER OGLER B1B1 13 RCU 13 RCU 2002-1-14 2002-1-14 痰痰 OGLER OGLER B1B1 14 RCU 14 RCU 2002-6-2 2002-6-2 痰痰 OGLER OGLER B2B2 15 RCU 15 RCU 2002-12-2 2002-12-2 痰痰 OGLER OGLER B2B2 16 ICU 16 ICU 2002-2-5 2002-2-5 腹水腹水 OGLER OGLER B3B3 17 RCU 17 RCU 2002-5-10 2002-5-10 导尿管导尿管 OGLER OGLER C C 18 RCU 2002-11-10 18 RCU 2002-11-10 痰痰 OGLER OGLER D D 19 ICU 2002-7-4 19 ICU 2002-7-4 痰痰 OGLER OGLER D D 20 ICU 2002-3-2 20 ICU 2002-3-2 痰痰 OGLER OGLER E E表型表型与与基因型基因型注注：O O苯苯唑唑西西林林、G G庆庆大大霉霉素素、L L左左氧氧氟氟沙沙星星、E E红霉素、红霉素、R R四环素四环素MRSAMRSA的脉冲场凝胶电泳（结果小结）的脉冲场凝胶电泳（结果小结）ICUICU和和RCURCU病房病房20022002全年都在流行着全年都在流行着A1A1亚型亚型MRSAMRSA。耐药谱分型与耐药谱分型与PFGEPFGE分型可不一致。分型可不一致。3737 第三部分：临床资料分析第三部分：临床资料分析3838本研究本研究MRSAMRSA为多重耐药，基因分型同源性高，造成治疗困难。为多重耐药，基因分型同源性高，造成治疗困难。为为找找到到合合理理使使用用抗抗生生素素策策略略及及爆爆发发流流行行源源头头和和传传播播途途径径，对对部分病例进行了回顾性调查分析，结果发现：部分病例进行了回顾性调查分析，结果发现：3939临床资料临床资料MRSAMRSA部分病例调查结果（一）部分病例调查结果（一）调查项目调查项目 调查调查结果结果 疾疾病病 严严重重感感染染12/30;12/30;癌癌症症7/30;7/30;多多器器官官功功能能衰衰竭竭6/30;6/30;心心、肺肺、肾肾衰衰各各1/301/30年年龄龄 2020岁岁以以下下1/351/35;20-4020-40岁岁4/354/35;40-7040-70岁岁21/3521/35;7070岁以上岁以上9/359/35标标本本来来源源 痰痰51/6551/65;血血液液4/654/65;导导尿尿管管3/653/65;支气管刷、洁尿支气管刷、洁尿各各2/652/65；其它；其它3/653/65器器械械治治疗疗 呼呼吸吸机机17/3017/30；置置管管18/3018/30；大大手手术术11/3011/304040临床资料临床资料MRSAMRSA部分病例调查结果（二）部分病例调查结果（二）调查项目调查项目 调查调查结果结果 抗抗菌菌素素使使用用史史 25/3025/30住住院院期期间间使使用用过过第第三三、四四代代头头孢孢菌菌素素、氟氟喹诺酮类、碳青霉烯类等广谱抗生素。喹诺酮类、碳青霉烯类等广谱抗生素。改改用用万万古古霉霉素素或或替替考考拉拉宁宁后后转转归归 MRSAMRSA所所致致感感染染好好转转者者占占23/2923/29；未好转者未好转者6/296/29同同一一患患者者不不同同分分离离株株时时间间间间隔隔 8/658/65采采集集到到不不止止一一株株MRSAMRSA（间隔至少二周，其中一位长达半年）。间隔至少二周，其中一位长达半年）。MRSAMRSA分离时间分离时间 2002 2002年年1 1月月1212月间月间无明显波动无明显波动4141临床资料临床资料第四部分：替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌第四部分：替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌4242的体外活性检测的体外活性检测替考拉宁和万古霉素对葡萄球体外活性检测替考拉宁和万古霉素对葡萄球体外活性检测（方法）（方法）4343 测定替考拉宁和万古霉素的测定替考拉宁和万古霉素的MICMIC及抑菌圈直径及抑菌圈直径 （琼脂稀释法、（琼脂稀释法、K-BK-B法）法）不不同同种种葡葡萄萄球球菌菌 （MRSAMRSA、溶溶血血葡葡萄萄球球菌菌、表皮葡萄球菌）表皮葡萄球菌）不同接种浓度菌液不同接种浓度菌液（10104 4 cfucfu、10106 6 cfucfu）活性区别活性区别 对对MICMIC结果的影响结果的影响琼脂稀释法与抗生素纸片扩散法药敏结果的相关性琼脂稀释法与抗生素纸片扩散法药敏结果的相关性替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌体外活性检测（结果替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌体外活性检测（结果1 1）不同接种浓度菌液对二种抗生素外活性影响不同接种浓度菌液对二种抗生素外活性影响二种抗生素对不同葡萄球菌的活性区别二种抗生素对不同葡萄球菌的活性区别4444 菌菌名名（各（各1010株）株）接接种浓度种浓度 （cfucfu）Van Van MIC(ug/ml)MIC(ug/ml)Tei Tei MIC(ug/ml)MIC(ug/ml)平均值平均值 MICMIC值范围值范围平均值平均值 MICMIC值范围值范围溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌10104 41.61.61-21-211.611.62-322-3210106 65.45.42-82-846.446.416-6416-64表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌10104 41.21.20.5-20.5-22.272.27 0.125-160.125-1610106 62.152.150.5-40.5-417.8517.850.5-640.5-64MRSAMRSA10104 40.850.850.5-10.5-11.451.450.25-40.25-410106 61.71.71-21-27.87.82-162-16替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌的体外活性检测（结果替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌的体外活性检测（结果2 2）TECTEC、VANVAN对葡萄球菌的对葡萄球菌的MICMIC法与纸片扩散法之间的相关性法与纸片扩散法之间的相关性4545菌种菌种 标本标本类型类型TECTECVANVANK-B(mm)K-B(mm)MIC(ug/ml)MIC(ug/ml)K-B(mm)K-B(mm)MIC(ug/ml)MIC(ug/ml)EtestEtest法法 琼脂稀释法琼脂稀释法EtestEtest法法 琼琼脂稀释法脂稀释法判读折点判读折点10-1410-148-328-328-328-32 15 15 4-324-324-324-32溶葡溶葡 痰痰8 8r r24i24i16i16i18s18s3s3s2s2s溶葡溶葡 脑脊液脑脊液 8 8r r24i24i16i16i19s19s2s2s1s1s溶葡溶葡 痰痰8 8r r24i24i16i16i18s18s3s3s2s2s溶葡溶葡 痰痰1010r 12ir 12i16i16i18s18s4s4s2s2s溶葡溶葡 脓液脓液1010r r8s8s8s8s18s18s1.5s1.5s2s2s溶葡溶葡 血液血液10.510.5i i12s12s8s8s18.5s18.5s 1.5s1.5s1.s1.s表葡表葡 脓肿脓肿1212i i4s4s4s4s18.5s18.5s 2s2s2s2s溶葡溶葡 脓液脓液8 8r r32r32r16i16i19s19s3s3s1s1s溶葡溶葡 分泌物分泌物 1313i i12i12i32r32r19s19s3s3s2s2s溶葡溶葡 血液血液1111i i24i24i16i16i18.5s18.5s 4s4s2s2s表葡表葡 脓液脓液1313i i8s8s16i16i20s20s2s2s1s1s替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌的体外活性检测（结果小结）替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌的体外活性检测（结果小结）4646万古霉万古霉素素替考拉替考拉宁宁MRSA MRSA 表葡表葡 溶葡溶葡MRSA MRSA 表葡表葡 溶葡溶葡活性区别（活性区别（MICMIC）接种浓度升高，接种浓度升高，MICMIC 升高幅度升高幅度MICMIC法与法与K-BK-B法相符性法相符性 较好较好不好不好 讨讨 论论4747 MRSAMRSA引起的医院感染与治疗（一）引起的医院感染与治疗（一）是医院感染主要病因，常发生抵抗力低下的住院患者。是医院感染主要病因，常发生抵抗力低下的住院患者。可引起住院患者的长期感染，不易消除。可引起住院患者的长期感染，不易消除。爆发流行主要途径：爆发流行主要途径：共用的医疗器械（如呼吸机）、共用的医疗器械（如呼吸机）、MRSAMRSA携带者携带者 （患者、医护人员等）（患者、医护人员等）4848讨论讨论MRSAMRSA引起的医院感染与治疗（二）引起的医院感染与治疗（二）抗生素选择压力下的后果。抗生素选择压力下的后果。使用或改用合理抗生素治疗：使用或改用合理抗生素治疗：多数病人迅速好转；多数病人迅速好转；抗抗生生素素治治疗疗无无效效组组：病病人人身身体体状状况况太太差差，药药物物很很难难到到达达有有效效部部位位或或到到达达有有效效部部位位的的抗抗生生素素浓浓度度不不足足，不不能能完全杀灭耐药菌。完全杀灭耐药菌。4949讨论讨论 替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌的体外抗菌活性替考拉宁和万古霉素对葡萄球菌的体外抗菌活性替考拉宁替考拉宁受多种因素影响：受多种因素影响：在琼脂中扩散系数在琼脂中扩散系数接种菌量接种菌量以以K-BK-B法法检检测测的的替替考考拉拉宁宁耐耐药药菌菌株株，应应进进一一步步测测定定其其MICMIC。通常敏感株通常敏感株 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 不不稳稳定定敏敏感感株株 凝凝固固酶酶阴阴性性葡葡萄萄球球菌菌（如如溶溶血葡萄球菌）：血葡萄球菌）：细细胞胞膜膜3939kDkD的的蛋蛋白白质质，阻阻碍碍替替考考拉拉宁与靶位的结合。宁与靶位的结合。万万古古霉霉素素 对对葡葡萄萄球球菌菌活活性性较较稳稳定定，但但对对肠肠球球菌菌活活性性较差。较差。5050讨论讨论结论结论5151MRSAMRSA耐药性特点耐药性特点万古霉素和替考拉宁高敏万古霉素和替考拉宁高敏100100复方新诺明和氯霉素敏感率较高复方新诺明和氯霉素敏感率较高 其它所测抗生素多重高耐其它所测抗生素多重高耐20022002年年ICUICU、RCURCU病房发生了病房发生了A1A1基因型基因型MRSAMRSA流行流行 MRSA MRSA流行病学调查流行病学调查 治疗及预防治疗及预防MRSAMRSA感染及爆发流行的关键：感染及爆发流行的关键：5252合理使用抗生素合理使用抗生素合理使用抗生素合理使用抗生素加强消毒隔离观念加强消毒隔离观念加强消毒隔离观念加强消毒隔离观念正确的药敏实验正确的药敏实验正确的药敏实验正确的药敏实验MRSAMRSA的检测的检测5353MRSA MRSA：homohomoMRSA MICMRSA MIC 100mg/l100mg/l hetero-MRSA MIC 1-100mg/l hetero-MRSA MIC 1-100mg/l 生长缓慢，常生长缓慢，常规检测易漏检规检测易漏检 5454PBP2aPBP2a的表达的表达 mecA mecA FOX FOX：better inductor of mecAbetter inductor of mecA OXA OXA：weak inductor of mecAweak inductor of mecA5555 OXA(1ug)OXA(1ug)FOX(30ug)FOX(30ug)MRSA 30 100%MRSA 30 100%100%100%35 93.3%35 93.3%94.7%94.7%MRCNS 30 100%MRCNS 30 100%100%100%35 100%35 100%100%100%最佳检测方法最佳检测方法FOX(30ug)30 FOX(30ug)30 5656FOXFOX（K-B)K-B)筛选筛选MRSAMRSA20mm20mmMRSAMRSA20-23mm20-23mm中度敏感中度敏感 PCRPCR、乳胶凝集试验乳胶凝集试验 24 24mmmmMSSAMSSA57575858后面内容直接删除就行后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用主要经营：网络软件设计、图文设计制作、主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等发布广告等公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！到让客户满意！致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPTPPT设计、计划书、策划案、学习课件、各设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求类模板等方方面面，打造全网一站式需求The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a and make it into a film to be used in a wider fieldwider field