瑶药白背清风藤三萜类化学成分及降血糖活性.pdf

年月南宁师范大学学报(自然科学版)J u n 第 卷 第期J o u r n a l o fN a n n i n gN o r m a lU n i v e r s i t y(N a t u r a l S c i e n c eE d i t i o n)V o l N o D O I:/j c n k i i s s n 文章编号:()瑶药白背清风藤三萜类化学成分及降血糖活性周文景,黄艳,胡筱希,袁健童,宋志钊,刘布鸣,李力,(南宁师范大学 化学与材料学院,广西 南宁 ;广西中医药研究院 广西中药质量标准研究重点实验室,广西 南宁 )摘要:为研究白背清风藤(S a b i ad i s c o l o rD u n n)的化学成分及其对降血糖活性的体外抑制作用.该文采用硅胶柱层析、凝胶柱层析和半制备液相色谱等方法对白背清风藤进行分离纯化,运用H NMR、CNMR和M S等波谱技术对化合物进行结构鉴定;并对所有化合物的 葡萄糖苷酶的体外抑制作用进行测定.结果表明:()从白背清风藤干燥枝叶中分离得到 个五环三萜类化合物,分别鉴定为:羟基 齐墩果酸甲酯()、二 羟基 蒲 公英 烷()、(S)o x o h y d r o x y t a r a x a s t a n e()、白桦 脂醇()、t a r a x a s t e n e ,d i o l()、s a b i a d i s c o l o rA()、o x o e r y t h r o d i o l()、e p i b e t u l i n()、蒲公英烷,二醇()、,t r i h y d r o x y l u p ()e n e()、p a r a c a s e o l i n A()、s a b i a d i s c o l o r C()、h y d r o x y o l e a n e n o i ca c i d()、乌苏酸()、o l e a n ,d i e n o n e()和j u g l a n g e n i nA().其中化合物、和 为首次从该植物中分离得到.()药理活性结果表明,化合物、和 均对 葡萄糖苷酶具有显著的抑制活性,I C 值分别为()、()和()m o l/L,抑制活性与阳性药阿卡波糖相当(I C m o l/L).该研究结果丰富了白背清风藤降血糖的活性物质基础,为其进一步开发利用提供了科学依据.关键词:清风藤属;白背清风藤;三萜类,化学成分;葡萄糖苷酶中图分类号:Q 文献标志码:A引 言糖尿病(以高血糖为主要特征)现已成为一种全球性的代谢性疾病,我国的糖尿病发病率居世界之首.葡萄糖苷酶是一种催化低聚糖转化为葡萄糖的水解酶,其活性的升高会造成血糖的上升.目前,使用 葡萄糖苷酶抑制剂是临床治疗糖尿病及其并发症的一种重要手段之一.葡萄糖苷酶抑制剂可抑制小肠内 葡萄糖苷酶的活性,延缓或抑制葡萄糖在肠道的吸收,从而有效降低餐后高血糖.然而,这些临床使用的抑制剂如阿卡波糖等为合成药物,具有一定的毒副作用,这限制了它们的应用.因此,寻找毒副作用小、活性强的新型天然产物 葡萄糖苷酶抑制剂,对于早期预防或治疗糖尿病并发症具有重要的理论和实践意义.天然植物有效成分具有良好的药理活性和很小的毒副作用,因而已成为研究与开发抗糖尿病及其并发症药物的重要资源.白背清风藤(S a b i ad i s c o l o rD u n n)为清风藤科清风藤属植物,广泛分布在广西、浙江、福建、湖南、广东等地.其根茎入药,既是中药“广藤根”,也是传统瑶药“七十二风”中的大发散,瑶医方面性味苦、涩、平,属打药,常用于外敷,具有祛风除湿,活血止痛,散毒消肿功效,主要用于崩闭闷(风湿、类风湿性关节炎),碰辘(骨质增生症),布醒蕹(肾炎水肿),布标(甲状腺肿大),播冲(跌打损伤).据报道,目前白背清风藤分离鉴定的化学成分主要有三萜类和黄酮类,有关白背清风藤化学成分文献报道较少,对收稿日期:基金项目:广西重点研发计划“中药材外源性污染物快速检测技术研究”(桂科A B );广西科技厅重点研发计划;广西中药质量标准研究重点实验室自主研究课题(桂中重自 )第一作者:周文景(),硕士生,中药资源保护与利用方向(q q c o m)通信作者:李力,博士,二级研究员,主要从事中药资源保护与利用研究(q q c o m)南宁师范大学学报(自然科学版)第 卷其化学成分的活性研究更少,除已报道的植物提取部位有抗氧化活性外,未见该植物其他药理作用的有关报道.近年来,三萜类化合物因其降血糖功效引起研究者的高度关注,但其对 葡萄糖苷酶的抑制作用及机理研究还很少.本课题组前期发现白背清风藤的乙酸乙酯和二氯甲烷萃取部位对 葡萄糖苷酶活性有抑制作用,为了进一步揭示白背清风藤的降血糖活性物质基础,挖掘出更多具有降血糖活性的化合物,本研究以白背清风藤为研究对象,依托广西中药药材资源的道地产区的优势和现代先进的仪器设备,采用多种色谱分离技术、现代波谱学鉴定技术以及现代药理学技术探讨问题:()白背清风藤的化学成分;()分离得到的化合物对 葡萄糖苷酶的体外抑制作用.材料、仪器与方法实验药材白背清风藤在广西金秀采集并自然晾干,经广西中医药研究院黄云峰主任药师鉴定为白背清风藤(S a b i ad i s c o l o rD u n n),凭证标本已保存于广西中医药研究院标本室(N o ).实验仪器W a t e r s 高效液相色谱仪(美国W a t e r s公司);W a t e r s 高压制备液相色谱仪(美国W a t e r s公司);Z F I I紫外分析仪(上海嘉鹏科技有限公司);X S 电子天平(瑞士梅特勒 托利多公司);D Z F 真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司);HH S恒温水浴锅(江苏金坛市医疗仪器厂);R E A旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);E s q u i r e P l u s液相色谱 质谱联用仪(美国布鲁克 道尔顿公司);B r u k e rD r e M核磁共振仪(瑞士布鲁克公司);B r u k e rAm M核磁共振仪(瑞士布鲁克公司);M i l l i Q超纯水;细胞培养箱B J J (上海博迅医疗生物仪器股份有限公司);全波长酶标仪M u l t i s k a nG o(美国T h e r m o公司);倒置相差显微镜C K X (日本O l y m p u s公司);紫外分光光度计UV P C(日本岛津公司).试剂 目硅胶(青岛海洋化工有限公司);硅胶板G n m(青岛海洋化工集团);葡聚糖凝胶S e p h a d e xLH (瑞典P h a r m a c i a公司);二氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚、乙醇、甲醇均为分析纯(广东光华科技股份有限公司);甲醇、乙腈均为色谱级(赛默飞世尔科技(中国)有限公司).阿卡波糖(北京索莱宝科技有限公司批 号:M );对硝 基苯 D 吡喃葡 萄糖苷(北 京索莱宝科 技有限 公 司 批 号:Q ).实验方法提取与分离取白背清风藤枝叶 k g,用 乙醇(药材乙醇)回流提取次,每次小时,减压浓缩,得到浸膏 k g.将浸膏分散于水中,分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取并将溶剂回收,得到石油醚部位(g)、二氯甲烷部位(g)、乙酸乙酯部位(g)以及正丁醇部位(g).经过筛选不同部位对 葡萄糖苷酶的抑制活性,发现乙酸乙酯部位和二氯甲烷部位的活性最好,故选择乙酸乙酯部位和二氯甲烷部位进行研究.取乙酸乙酯萃取物(g)经硅胶柱层析,以石油醚 乙酸乙酯系统(,VV)梯度洗脱,共得到个组分F r AF r A.F r A经硅胶柱层析,用石油醚乙酸乙酯()进行洗脱,析出化合物(m g);F r A经硅胶柱层析,以石油醚 乙酸乙酯(,VV)梯度洗脱,共得到个组分F r A F r 第期周文景,等:瑶药白背清风藤三萜类化学成分及降血糖活性 A,其中,F r A经半制备H P L C(甲醇水 ,VV)分离纯化后得到化合物(m g,tR m i n),F r A经半制备H P L C(甲醇:甲酸水,VV)分离纯化后得到化合物(m g,tR m i n),F r A经半制备H P L C(甲醇:甲酸水 ,VV)分离纯化后得到化合物(m g,tR m i n)和化合物(m g,tR m i n).取二氯甲烷部位(g)经MC I柱层析以水甲醇系统梯度洗脱,共得到个组分:F r B,F r B.取F r B经过S e p h a d e xLH 柱层析,用甲醇洗脱,得到个组分F r B F r B,取F r B经过中压制备(水 乙腈)梯度洗脱,分离得到 个组分F r B F r B,其中,F r B经半制备H P L C(乙腈水 ,VV)分离纯化得到化合物(m g,tR m i n)、化合物(m g,tR m i n)和化合物(m g,tR m i n),F r B经半制备H P L C(乙腈水 ,VV)分离纯化后得到化合物(m g,tR m i n),F r B 经半制备H P L C(乙腈水 ,VV)分离纯化后得到化合物(m g,tR m i n),F r B 经半制备H P L C(乙腈:水 ,VV)分离纯化后得到化合物(m g,tR m i n),F r B 经半制备H P L C(乙腈水 ,VV)分离纯化后得到化合物(m g,tR m i n)和化合物(m g,tR m i n),F r B 经半制备H P L C(乙腈:水 ,VV)分离纯化后得到化合物(m g,tR m i n)和化合物(m g,tR m i n),F r B 经半制备H P L C(乙腈:水 )分离纯化后得到化合物(m g,tR m i n).葡萄糖苷酶抑制活性筛选以对硝基苯 D 吡喃葡萄糖苷(P N P G)为底物,阿卡波糖为阳性对照,根据文献 实验方法:将实验分为样品空白组(待测化合物P B S酶)、酶空白组(P B S酶)、酶活性组(P B SP N P G酶)、对照组(阿卡波糖P B SP N P G酶)和样品组(待测化合物P B SP N P G酶).操作步骤如下:先在 微孔板中加入 葡萄糖苷酶液(U/m L)溶液 L,再加入浓度依次为(、(M)的样品溶液 L,低速震荡混匀,于 恒温反应 m i n后,加入P N P G L,低速震荡混匀,恒温条件下再反应 m i n,加入m o l/LN aC O L中止反应,将反应液置于酶标仪 n m波长下测定其吸光度值,按以下公式计算化合物对 葡萄糖苷酶液活性的抑制率:葡萄糖苷酶抑制率()(A样A样空)(A酶A酶空).每一组重复次,用S P S S 计算其I C 值.结果与分析结构鉴定化合 物白 色 粉 末.E S I M S m/z:MH,分 子 式C H O.H NMR(MH z,C D C l),(H,t,JH z,H ),(H,s,C OO CH),(H,d,J H z,H ),(H,d d,J ,H z,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C OOM e).以上数据与文献 基本一致,故鉴定为 羟基齐墩果酸甲酯.化合物白色无定型粉末.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,d d,J,H z,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),南宁师范大学学报(自然科学版)第 卷(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为二羟基蒲公英烷.化合物白色粉末.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为(S)o x o h y d r o x y t a r a x a s t a n e.化合物白色针状结晶.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,d d,J,H z,H b),(H,d t,J,H z,H a),(H,d d,J,H z,H b),(H,d,J H z,H a),(H,d d,J,H z,H),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,d,J H z,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为白桦脂醇.化合物白色无定型粉末.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,b rd,JH z,H ),(H,d,J H z,H ),(H,d,J H z,H a),(H,t,JH z,H b),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,d,J H z,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH)CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为 t a r a x a s t e n e ,d i o l.化合物白色固体.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,t,JH z,H ),(H,m,H ),(H,d,J H z,H a),(H,d,J H z,H b),(H,d d,J ,H z,H ),(H,d,J H z,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为s a b i a d i s c o l o rA.化合物无色油状物.E S I M S m/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,t,JH z,H ),(H,d,J H z,H b),(H,m,H),(H,d,J H z,H a),(H,t,J H z,H b),(H,d d,J,H z,H a),(H,d t,J,H z,H ),(H,d d,J,H z,H ),(H,s,第期周文景,等:瑶药白背清风藤三萜类化学成分及降血糖活性 CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为 o x o e r y t h r o d i o l.化合物无定型淡黄色固体.E S I M S m/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,d,JH z,H a),(H,t,JH z,H b),(H,d d,J ,H z,H a),(H,t,JH z,H b),(H,d,J H z,H ),(H,t d,J,H z,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为 e p i b e t u l i n.化合物无色晶体.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,d d,J,H z,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为蒲公英烷,二醇.化合物 无色针状晶体.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,d,JH z,H a),(H,t,J H z,H b),(H,t,J H z,H ),(H,d,JH z,H ),(H,d,J H z,H ),(H,t d,J,H z,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);C NMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C )以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为,t r i h y d r o x y l u p ()e n e.化合物 白色无定形粉末.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.HNMR(MH z,C D C l)(H,d,JH z,H a),(H,m,H b),(H,d,J H z,H a),(H,d,J H z,H b),(H,d,J H z,H ),(H,d d,J,H z,H ),(H,t d,J ,H z,H ),(H,m,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,d d,J,H z,H );CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴 南宁师范大学学报(自然科学版)第 卷定为p a r a c a s e o l i nA.化合物 白色固体.E S I M S m/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,d,J H z,H ),(H,d,J H z,H ),(H,d,J H z,H ),(H,d d,J,H z,H ),(H,d t,J,H z,H ),(H,s,JH z,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以 上 数 据 均 与 文 献 基 本 一 致,故 鉴 定 为S a b i a d i s c o l o rC.化合物 白色针状晶体.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,m,H ),(H,d d,J,H z,H ),(H,d d,J,H z,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);C NMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为齐墩果酸.化合物 白色粉末.E S I M S m/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,d,JH z,H ),(H,d,J H z,H ),(H,t,JH z,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,H),(s,H),(s,H);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为乌苏酸.化合物 白色粉末.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,d,J H z,H ),(H,d,J H z,H ),(H,d d,J,H z,H ),(H,d t,J ,H z,H ),(H,m,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为o l e a n ,d i e n o n e.化合物 无色针状晶体.E S I M Sm/z:MH,分子式C H O.H NMR(MH z,C D C l)(H,d,JH z,H ),(H,d,JH z,H ),(H,d,JH z,H ),(H,d d,J,H z,H ),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH),(H,s,CH);CNMR(MH z,C D C l)(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C 第期周文景,等:瑶药白背清风藤三萜类化学成分及降血糖活性 ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ),(C ).以上数据均与文献 基本一致,故鉴定为j u g l a n g e n i nA.图化合物 的结构式表化合物 的 葡萄糖苷酶抑制活性xs,n)化合物半抑制浓度I C(M)A c a r b o s e 葡萄糖苷酶抑制活性筛选结果以P N P G为底物,阿卡波糖为阳性对照,对所有化合物进行 葡萄糖苷酶抑制活性筛选,结果显示化合物、和 均显示良好的降糖活性(表),I C 值分别为()、()和()m o l/L,其活性和阳性药阿卡波糖相当(I C m o l/L).这对于进 一步深度 开发该药用 资源提供 参 考依据.讨论和结论本研究采用多种现代色谱分离技术和波谱鉴定手段从白背清风藤枝叶分离鉴定了 个五环三萜类化合物,包括个齐墩果烷型(,),个羽扇豆烷型(,)和个乌苏烷型(,和).近年来,三萜类化合物在预防糖尿病和降血糖活性方面的研究取得了较大进展,已成为抗糖尿病药物研究的重要先导化合物之一.例如,L i等 采用齐墩果酸(m g/k g)灌胃果糖水诱导的胰岛素抵抗大鼠 周,发现齐墩果酸可显著降低血清 南宁师范大学学报(自然科学版)第 卷胰岛素浓度和胰岛素抵抗指数;芒果中分离得到的蒲公英萜醇可修复由地塞米松诱导的P I K和G L UT 的低表达,改善 T L 脂肪细胞胰岛素抵抗,促进脂肪细胞对葡萄糖的摄取;科罗索酸对 葡萄糖苷酶的半数抑制浓度(I C)为 g/m L.研究发现,三萜类化合物能够通过多种途径降低血糖,包括促进胰岛素分泌,增胰岛素敏感性,抑制蛋白酪氨酸磷酸酶 B(P T P B),激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMP K)促进糖摄取,减少肝脏糖原分解与糖异生,抑制 糖苷酶、醛糖还原酶(A R)和二肽基肽酶(D P P )的活性等 .本实验药理活性结果表明,化合物 t a r a x a s t e n e ,d i o l()、e p i b e t u l i n()和p a r a c a s e o l i nA()对 葡萄糖苷酶具有较好地抑制作用,I C 值在 M之间,其抑制作用和阳性对照阿卡波糖相当(I C m o l/L).对构效关系进行了探讨,化合物属于乌苏烷型三萜,化合物和 属于羽扇豆烷型三萜,而且三者的结构中C 位都是羟甲基基团,说明乌苏烷型和羽扇豆烷型三萜的C 位为羟甲基基团可能是抑制 葡萄糖苷酶的活性基团.这些化合物具有作为降糖药物的潜力,这为研发新型高效的降糖药物提供了思路和方向.本研究对白背清风藤进行了化学成分和降血糖活性研究,一定程度上丰富了白背清风藤的化学成分,初步探明五环三萜类是其发挥降血糖活性作用的活性成分,未来可进一步对活性化合物、和 进行网络药理学、细胞转录组学、体内降血糖活性及作用机制研究,探索其信号通路及作用靶点,为白背清风藤应用于降血糖治疗提供现代药理学依据.参考文献:M e n gY,S uA,Y u a nS,e t a l E v a l u a t i o no f t o t a l f l a v o n o i d s,m y r i c e t i n,a n dq u e r c e t i n f r o mH o v e n i ad u l c i sT h u n b a s i n h i b i t o r so f a m y l a s e a n d g l u c o s i d a s eJP l a n tF o o dH u mN u t r,():叶华谷,曾飞燕,叶育石中国药用植物第册M武汉:华中科技大学出版社,:韦波,刘华钢,黄汉儒,等广西壮族自治区瑶药材质量标准第一卷M南宁:广西科学技术出版社,:刘布鸣,黄艳,李齐修,等瑶药白背清风藤的化学成分研究J广西科学,():朱丽丽白背清风藤的化学成分研究D湖南:中南林业科技大学:丁花芳,五环三萜类化合物对 葡萄糖苷酶及蛋白质非酶糖基化的抑制作用D江西:南昌大学,:L iY,W a n gJW,G uTG,e t a l O l e a n o l i ca c i ds u p p l e m e n t a t t e n u a t e s l i q u i df r u c t o s e i n d u c e da d i p o s e t i s s u e i n s u l i nr e s i s t a n c et h r o u g ht h ei n s u l i nr e c e p t o rs u b s t r a t e /p h o s p h a t i d y l i n o s i t o l k i n a s e/A k ts i g n a l i n gp a t h w a yi nr a t sJ T o x i c o l A p p lP h a r m c o l,():王曌,尹跃,边媛媛,等绞股蓝三萜类化合物及其抑 葡萄糖苷酶和蛋白酪氨酸磷酸酶 B的活性研究J中草药,():Z h a n gJ,L iY n,G u oLB,e t a l D i v e r s eg a l l o t a n n i n sw i t h g l u c o s i d a s e a n d a m y l a s e i n h i b i t o r ya c t i v i t yf r o mt h er o o t so fEu p h o r b i af i s c h e r i a n as t e u dJP h y t o c h e m i s t r y,:陈谨,邓赟,唐天君,等小花清风藤三萜成分的研究J中草药,():魏光璞,孟启,徐淼,等雀儿舌头石油醚提取物的化学成分及其抗肿瘤活性研究 J时珍国医国药,():邵泰明,宋小平,陈光英,等大果榕茎化学成分研究J中草药,():方玉春,邵长伦,曹秀萍,等枫桦抗肿瘤活性化学成分的追踪分离研究J中草药,(S):L e eCK,C h a n gH F o u rn e wt r i t e r p e n e sf r o mt h eh e a r t w o o do fm e l a l e u c al e u c a d e n d r o nJJN a tP r o d,():M aJH,H uD,D e n gLL,e t a l P e n t a c y c l i c t r i t e r p e n o i d s f r o mS a b i ad i s c o l o rD u n na n d t h e i r a g l y c o s i d a s e i n h i b i t o r ya c t i v i t i e sJ M o l,():K a g a w aM,M i n a m iH,N a k a h a r aM,e t a l O l e a n a n e t y p e t r i t e r p e n e s f r o mV i b u r n u ma w a b u k iJP h y t o c h e m i s t r y,():P i s t e l l iL,N o c c i o l iC,G i a c h i I,e t a l L u p a n e t r i t e r p e n e s f r o mB u p l e u r u mf l a v u mJ N a tP r oR e s,():邓赟,李翔,吴风锷,等云南清风藤化学成分的研究J中草药,():M e iWL,M aYB,W uSH,e t a l An e wt r i t e r p e n e f r o mC e p h a l o m a p p a s i n e n s i sJC h i nC h e mL e t t,():G o n gKK,L i PL,Q i a oD,e t a l C y t o t o x i c a n d a n t i v i r a l t r i t e r p e n o i d s f r o mt h em a n g r o v e p l a n tS o n n e r a t i ap a r a c a s e o l a r i sJM o l,():宋仕鹏,江凡,李春晖,等羊耳蒜化学成分的研究J中国药学杂志,():杨希楠,马培舰金毛耳草的化学成分研究J中药材,():S u nJW,L iCQ,M aZ,e t a l C h e m i c a l c o n s t i t u e n t so fS t a c h y u r u s c h i n e n s i sJC h e mN a tC o m p,():Z h a n gY W,L i nH,B a oYL,e t a l An e wt r i t e r p e n o i da n do t h e r c o n s t i t u e n t s f r o mt h es t e mb a r ko fJ u g l a n sm a n d s h u r i c a第期周文景,等:瑶药白背清风藤三萜类化学成分及降血糖活性 JB i o c h e mS y s tE c o l,:傅增辉,姜岩,刘晶,等白桦脂醇对脂多糖诱导小胶质细胞炎症反应的抑制作用J免疫学杂志,():S a n g e e t h aK,S h i l p aK,K u m a r iPJ,e t a l R e v e r s a l o f d e x a m e t h a s o n e i n d u c e d i n s u l i nr e s i s t a n c e i n T L a d i p o c y t e sb yt a r a x e r o l o fM a n g i f e r a i n d i c aJP h y t o m e d i c i n e,():H o uW,L iY,Z h a n gQ,e ta l T r i t e r p e n ea c