DB32∕T 3652-2019 铁皮石斛嫩茎液体培育生产技术规程.pdf

DB32/T 1 铁皮石斛嫩茎液体培育生产技术规程 Technical regulation of the cultivation for tender stems of Dendrobium officinale in submerged culture 2019-09-19 发布 2019-10-31 实施 ICS 65.020.20 B 31 DB32 江苏省地方标准 DB32/T 3652-2019 江苏省市场监督管理局 发布 DB32/T36522019 2 前前 言言 本标准按 GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构与编写规则给出的规则编写。 本标准由江苏省农业科学院提出并归口。 本标准起草单位：苏州天成新农生物科技有限公司，江苏省农业科学院。 本标准起草人：张杰、周燕群、关剑、余向阳、杜平、王昕怡、吴红升。 DB32/T36522019 3 铁皮石斛嫩茎液体培育生产技术规程铁皮石斛嫩茎液体培育生产技术规程 1 范围 本标准规定了铁皮石斛嫩茎液体培育的术语和定义、生产条件、种源培育、培育生产、规模化生产、日常管理、采收、质量等划分和包装、运输及贮存。 本标准适用于铁皮石斛嫩茎液体培育。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期引用文件， 仅所注日期版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 铁皮石斛嫩茎液体培育（The cultivation for tender stems of Dendrobium officinale in submerged culture） 从铁皮石斛中分离植物愈伤组织，经诱导分化及驯化筛选，利用离体培养生物技术扩增培育的无农药残留、重金属含量较低、高醇浸出物含量铁皮石斛幼嫩茎的培育技术。 4 生产条件 室内环境为十万级以上洁净度的洁净间。保持室温 25oC28oC。均匀柔和人工光，增补 4:1 红蓝光，光照强度为 2000Lux，光暗周期 8h:16h。空气相对湿度 40%70%。生产环境、生产用水和过滤水应分别符合 GB 5749 和 GB/T 6682 的规定。 5 种源培育与增殖 5.1 培养基配制 采用MS培养基+0.5mg/L NAA+0.5mg/L KT+20 g/L葡萄糖+10g/L琼脂固体培养基进行种源细胞固体培养。采用 MS 培养基+0.5mg/L NAA+0.5mg/L KT+20g/L 葡萄糖培养液进行种源细胞液体培养。 5.2 种源细胞增殖 DB32/T36522019 4 将成熟铁皮石斛茎段插入固体培养基中培养，获得愈伤组织细胞。在相同固体培养基条件下增殖种源细胞。 5.3 种源细胞培育 按照鲜重 20g/L30g/L 接种量， 采用无菌操作， 将种源细胞转接至 2L5L 玻璃瓶中进行液体培养。培养过程中向培养液中通入无菌空气，空气流速为 0.75L/min1L/min，培养周期为 30d45d。 6 培育生产 6.1 培养基配制 采用 MS 培养基+0.5mg/L NAA+1mg/L KT+20g/L 葡萄糖+5%麦芽糖培养基进行培养。 6.2 培育操作 按 40g/L50g/L 接种量，将种源细胞转接至 10L 玻璃瓶中。在培养过程中，将无菌空气通入培养瓶中，空气流速为 0.75L/min1L/min，培养周期为 30d45d。待嫩茎生长总体积至培养瓶总体积的 2/3时，采收或留做下一阶段种源。 7 规模化生产 按 40 g/L50 g/L 接种量，将采收的种源细胞转接至 50L100L 生物反应器中培养生产，其它按本标准第 6 章的规定执行。 8 日常管理 一旦发现细菌或真菌的污染，立即将污染品移出培育生产间并进行湿热高温灭菌。 9 采收 采收时剔除褐化植株，用过滤水缓慢冲洗嫩茎 3min5min，300rpm/min 脱水离心 3min，甩脱浮水后可直接制备成铁皮石斛嫩茎鲜品，或 65烘干制备为干品。 10 质量等级划分 铁皮石斛嫩茎质量等级划分要求见表 1。 表 1 铁皮石斛嫩茎质量等级划分要求 等级 要 求 特一级 足干，形态规则，长度大于 6mm，嫩茎分枝簇状均一排列，翠绿色。 特级 足干，形态基本规则，长度在 36mm，嫩茎偶见小嫩叶，黄绿或翠绿色。 DB32/T36522019 5 一级 足干，形态相似，长度在 13mm，嫩茎混有嫩叶，黄绿或翠绿色。 工业级 足干，形态相似，长度小于 1mm，嫩茎混有嫩叶，黄绿或翠绿色。 11 包装、运输、储存 11.1 包装 分级后分别密封包装，包装上应标注品名、规格、产地、生产批号、合格标志。 11.2 运输 运输工具应清洁、卫生，无毒、无污染。运输时应防潮、防暴晒、防污染。 11.3 贮存 贮存于阴凉、通风、清洁、干燥室内，不得与有毒、有害和有异味的物品同仓存放。