GB 31656.7-2021 食品安全国家标准 水产品中氯硝柳胺残留量的测定 液相色谱－串联质谱法.pdf

食品安全国家标准水产品中氯硝柳胺残留量的测定液相色谱-串联质谱法20中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准备案号：XXXX-XXXX67.120.30CCS X31656.72021National food safety standardDetermination of niclosamide residues in aquatic products byliquid chromatography-tandem mass spectrometryGB2021?09?16发布2022?02?01实施中华人民共和国国家卫生健康委员会发 布国 家 市 场 监 督 管 理 总 局中 华 人 民 共 和 国 农 业 农 村 部G B 前言本文件按照G B/T 标准化工作导则第部分: 标准化文件的结构和起草规则 的规定起草.本文件系首次发布.G B 食品安全国家标准水产品中氯硝柳胺残留量的测定液相色谱串联质谱法范围本文件规定了水产品中氯硝柳胺残留量检测的制样和液相色谱串联质谱测定方法.本文件适用于鱼、 虾、 鳖等水产品可食组织中氯硝柳胺残留量的检测.规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中, 注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件; 不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改单) 适用于本文件.G B/T 分析实验室用水规格和试验方法G B/T 水产品抽样规范术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义.原理试料中残留的氯硝柳胺, 用氨化乙腈提取,C 吸附剂净化, 液相色谱串联质谱仪检测, 外标法定量.试剂和材料除另有规定外, 所有试剂均为分析纯, 水为符合G B/T 规定的一级水. 试剂 乙腈(CHN) : 色谱纯. 氨水(NHHO) . 无水硫酸镁(M g S O) . 溶液配制 氨水使用液: 取氨水mL, 加水mL, 混匀. 氨化乙腈溶液: 取氨水使用液 L, 加乙腈至 mL, 混匀. 乙腈水溶液: 取乙腈 mL, 加水 mL, 混匀. 标准品氯硝柳胺(N i c l o s a m i d e,C HC lNO,C A S号: ) ,含量 . 标准溶液制备 标准储备液( m g/mL) : 取氯硝柳胺标准品 m g, 精密称定, 加乙腈 mL, 超声使溶解, 用乙腈稀释定容至 mL棕色容量瓶, 摇匀, 即得. 以下保存, 有效期个月. 标准工作液(g/mL) : 准确量取标准储备液mL, 于 mL棕色容量瓶中, 用乙腈稀释至刻度, 摇匀, 即得. 以下保存, 有效期个月. 材料C 吸附剂: 粒径 m m, 或相当者.G B 仪器和设备 液相色谱串联质谱仪: 配有电喷雾离子源(E S I) . 分析天平: 感量 g和感量 g. 离心机: r/m i n或以上. 涡旋混合器. 超声波清洗仪. 氮吹仪. 具塞聚丙烯离心管: mL. 具塞离心管: mL、 mL.试料的制备与保存 试料的制备按G B/T 中附录B的要求制样.a)取均质的供试样品, 作为供试试料;b)取均质的空白样品, 作为空白试料;c)取均质的空白样品, 添加适宜浓度的标准工作液, 作为空白添加试料. 试料的保存 以下保存.测定步骤 提取取试料g( 准确至 g) , 于 mL具塞离心管中, 加氨化乙腈溶液 mL, 涡旋混合m i n, 超声 m i n, 加无水硫酸镁g, 涡旋混合m i n, r/m i n离心m i n, 取上清液移至 mL容量瓶中, 残渣用氨化乙腈 mL重复提取一次, 合并上清液, 用乙腈稀释定容至刻度, 混匀, 备用. 净化准确量取上述备用液mL于 mL离心管中, 下氮气吹干, 用 乙腈水溶液 mL溶解残渣, 再加入C 吸附剂 m g涡旋振荡 s, r/m i n离心m i n, 取上清液过 m有机系滤膜,供L C M S/M S测定. 基质匹配标准曲线的制备取空白样品份, 按照 步骤提取, 准确量取氯硝柳胺标准工作液L、 L、 L、 L、 L、 L分别加入到份空白样品提取液中, 按照 步骤净化, 取上清液, 配制成氯硝柳胺浓度为 n g/m L、n g/mL、 n g/mL、n g/mL、 n g/mL、 n g/mL的系列基质匹配标准溶液, 过滤, 供L C M S/M S测定.以测得的氯硝柳胺定量离子峰面积为纵坐标、 对应的浓度为横坐标, 绘制基质标准曲线.求回归方程和相关系数. 测定 液相色谱参考条件a)色谱柱:C ( mm mm,m) , 或相当者;b)柱温: ;c)流速: mL/m i n;d)进样量: L;e)流动相:A为乙腈,B为水, 梯度洗脱程序见表.G B 表流动相及梯度洗脱条件时间m i nAB 质谱参考条件a)离子化模式: 电喷雾离子源(E S I) , 负离子模式;b)喷雾电压: V;c)鞘气压力: L/m i n;d)辅助气压力:L/m i n;e)离子传输管温度: ;f)扫描模式: 选择反应监测(S RM) , 选择反应监测母离子、 子离子和碰撞能量见表;表母离子、 子离子和碰撞能量目标化合物母离子m/z子离子m/z碰撞能量e V氯硝柳胺 a a为定量离子.g)碰撞气: 氩气. 测定法取试料溶液和基质匹配标准溶液, 作单点或多点校准, 以色谱峰面积定量, 外标法计算.试料溶液和基质匹配标准溶液中氯硝柳胺的特征离子质量色谱峰面积均应在仪器检测的线性范围之内.试料液中氯硝柳胺的保留时间与基质匹配标准工作液中氯硝柳胺的保留时间之比, 偏差在 以内.试料溶液中的相对离子丰度与基质匹配标准溶液中的相对离子丰度相比, 符合表的要求.标准溶液特征离子质量色谱图见附录A.表定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差单位为百分号相对离子丰度 允许的相对偏差 空白试验取空白试料, 除不加标准溶液外, 采用相同的测定步骤进行平行操作.结果计算和表述试料中氯硝柳胺的残留量按标准曲线或公式() 计算.XACSVVASVm()式中:X 试料中氯硝柳胺残留量的数值, 单位为微克每千克(g/k g) ;CS 试样溶液中氯硝柳胺浓度的数值, 单位为纳克每毫升(n g/mL) ;G B A 试样溶液色谱图中氯硝柳胺峰峰面积;AS 标准溶液色谱图中氯硝柳胺峰峰面积;V 试料提取液体积的数值, 单位为毫升(mL) ;V 准确移取的备用液体积的数值, 单位为毫升(mL) ;V 最终溶解残渣液体积的数值, 单位为毫升(mL) ;m 供试试料质量的数值, 单位为克(g). 检测方法灵敏度、 准确度、 精密度 灵敏度本方法的检测限为 g/k g, 定量限为 g/k g. 准确度本方法在 g/k g g/k g添加浓度水平上的回收率为 . 精密度本方法的批内相对标准偏差 , 批间相对标准偏差 .G B 附录A( 资料性)氯硝柳胺标准溶液特征离子质量色谱图氯硝柳胺标准溶液特征离子质量色谱图见图A .图A 氯硝柳胺标准溶液特征离子质量色谱图(n g/m L)31656.72021GBGB31656.72021书 书 书1 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?