五种中药醇提药水对铜绿假单胞菌体外抑制作用研究.pdf

第三十三卷第四册 年 月口 腔 护 理 用 品 工 业 五种中药醇提药水对铜绿假单胞菌体外抑制作用研究徐璇谢文俊吴良元姚丞魏韦惠雯（柳州两面针股份有限公司，广西 柳州 ）摘要：目的：研究五种中药醇提药水及其组方后对铜绿假单胞菌的抑制作用。方法：采用试管稀释法分别测定单味和复方醇提药水对铜绿假单胞菌体外抑菌作用。结果：两面针醇提药水、独活醇提药水、甘草醇提药水、板蓝根醇提药水、断血流醇提药水在体外对铜绿假单胞菌均有抑制作用，其中独活醇提药水的抑制作用最显著；将五种醇提药水进行组方使用时，对铜绿假单胞菌的抑制作用优于单味中药醇提药水。结论：两面针、独活、甘草醇、板蓝根、断血流均对铜绿假单胞菌有明显的抑制作用，其中独活的抑制作用最强。当五种中药进行组方，其复方醇提药水对铜绿假单胞菌的抑制具有协同增效作用。关键词：两面针；独活；甘草；断血流；板蓝根；铜绿假单胞菌；抑制作用中图分类号：文献标识码：文章编号：（）前言铜绿假单胞菌（）也称为绿脓杆菌，是一种常见的致病性革兰氏阴性菌，属于非发酵需氧杆菌，广泛存在于自然环境及人体的皮肤、黏膜等处。可通过生物被粘附于人体皮肤、粘膜、呼吸道等表面，在人体免疫功能低下时，诱发呼吸道、泌尿道和血液等部位的感染，进而引发脓毒症或脓毒症休克 。年的监测数据显示，铜绿假单胞菌的耐药率和多药耐药性不断升高，占非发酵菌耐药的首位。这为临床治疗带来极大挑战，严重威胁患者的生命健康 。我们日常使用的口腔护理用品及日用化妆产品，需与皮肤软组织、口腔粘膜进行直接接触。若此类产品遭到铜绿假单胞菌污染，菌体可通过产品直接与人体接触，提升局部皮肤、软组织、粘膜被感染的隐患。为此，年批准颁布的 化妆品安全技术规范 中明确规定，化妆品在出厂销售前，必须进行铜绿假单胞菌检验，且要求不得检出铜绿假单胞菌。中药醇提药水常作为功效型成分被添加到口腔护理产品和化妆品中，起到缓解牙周疾病、抗敏、舒缓等效果 ，。我国从很早就开始研究中药对细菌的抑制作用 ，。随着人们对物质文化需求的不断攀升，对生活品质的追求上升到了一个新的高度，消费者迫切需要添加有中药成分，天然、安全且还具有参考文献 李焉，张缘缘，宋景东 口臭与其他口腔异味浅议 中医药学报，（）：张玮 口臭的分类方法 现代口腔医学杂志，（）：杜永卫，张咪 口内口臭的研究进展 中国洗涤用品工业，（）：陈敏珊，李林，黄丹虹 口气产生机理浅析及去口气牙膏的开发 口腔护理用品工业，（）：王琳 黄芩与茶多酚对口臭致臭菌及致臭底物作用的试验研究 成都：四川大学，赵琛，华红，闫志敏 益生菌预防和治疗口腔疾病的研究进展 口腔医学研究，（）：张环，尹利娟，陆瑜，邓全富，何家俊，陈欣 益生菌在口腔中的应用研究 口腔护理用品工业，（）：陈俊艳，俞锋，范宇 口腔护理产品中减轻口源性口臭功效物的研究和应用进展 口腔护理用品工业，（）：（收稿日期：年 月 日）徐璇，等：五种中药醇提药水对铜绿假单胞菌体外抑制作用研究 年第 期功效性的口腔护理产品和化妆品来替代原有的产品。本研究采用试管稀释法分别测定单方两面针、独活、甘草、板蓝根、断血流和五种中药组成的复方醇提药水对铜绿假单胞菌体外抑制效果，筛选出对铜绿假单胞菌具有明显体外抑制作用的中药组方，为开发功能性日化产品提供依据。材料与方法 材料两面针药材：本公司 种植 基 地，批 号 。独活 药 材：广 西 荣 铠 农 业 有 限 公 司，批 号 。甘草药材：金秀县源升中药材种植有限公司，批号 。板蓝根药材：广西荣铠农业有限公司，批号 。断血流药材：广西南药药业有限公司，批号 。菌种：铜绿假单胞菌（）标准菌种，购自广东省微生物分析检测中心。培养基：胰蛋白胨大豆肉汤培养基（）液体培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基（）固体培养基，十六烷三甲基溴化铵固体培养基，购自广东环凯微生物科技有限公司。方法 中药醇提药水的制备药材经粉碎机粉碎后，取粗粉 置于具塞锥形瓶中，加入 酒精浸泡 ，水浴加热回流 ，纱布过滤，得到单味提取液。复方按五味药材 等份称重。中药醇提药水的浓缩将中药提取液置于置于蒸发皿中，水浴浓缩至约 左右，浓缩后的提取液转移至 容量瓶，酒精定容，得到 中药醇提药水。抑菌效力测定采用试管稀释法，将铜绿假单胞菌保存菌种接种至 液体培养基，培养 进行复苏，重复接种两次以活化菌种。在 液体培养基中接种活化后的铜绿假单胞菌，培养 使铜绿假单胞菌达到对数生长期后备用。取 支无菌试管，每管加入 液体培养基进行梯度稀释：往第 支试管中加入 中药浓缩液并混合均匀，从混合均匀的第 支试管中吸取 混合液至第 个试管中，混合均匀后再吸取 至第 个试管，如此依次进行梯度稀释直至第支试管，第 支试管混合均匀后弃去 。每支试管加入 的菌液，培养 。另取支试管，分别加入 液体培养基，一支加入 菌液做为阳性对照，另一支加入 生理盐水作为空白对照。实验重复 次取平均。肉眼观察法，以培养基中不发生浑浊和沉淀，培养基表面无菌膜生长的最高醇提药水稀释倍数为该醇提药水的最低抑菌浓度（）。若肉眼观察法不易判断菌体的生长情况，可从各管中各取一环培养液，接种于十六烷三甲基溴化铵固体培养基上，培养 ，观察有无铜绿假单胞菌生长。结果将两面针醇提药水、独活醇提药水、甘草醇提药水、板蓝根醇提药水、断血流醇提药水、复方醇提药水进行梯度稀释，稀释后药水浓度如下：、。观察各个醇提药水对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度（值），单方醇提药水结果见表 ，复方醇提药水结果见表 。表 中药单方醇提药水对铜绿假单胞菌的 值浓度醇提药水 阳性对照空白对照两面针醇提药水独活醇提药水甘草醇提药水板蓝根醇提药水断血流醇提药水 年第 期徐璇，等：五种中药醇提药水对铜绿假单胞菌体外抑制作用研究 表 复方中药醇提药水对铜绿假单胞菌的 值浓度（）醇提药水 阳性对照空白对照复方中药醇提药注：“”为培养基中有肉眼可见细菌生长，“”为培养基中无肉眼可见细菌生长。讨论由表 和表 可知，五种中药醇提药水对铜绿假单胞菌的 值分别是：两面针为 ，独活为 ，甘 草 为 ，板 蓝 根 为 ，断血流为 。五种中药组方后的 值为 。其中各单方的 值存在差异，独活醇提药水对铜绿假单胞菌的抑制作用最强。组方后的中药醇提药水的 值小于任意单方，说明这五种药材组方后对铜绿假单胞菌有协同抑制作用。本研究中的五种中药材因其活性成分不同而具有功效。两面针药材含有氯化两面针碱、异崖椒定碱、鹅掌揪碱、二氢白屈菜红碱等数十种活性有效成分，具有抗炎、镇痛等功效 。独活药材中鉴别到蛇床子素、异欧前胡素等多种活性成分，具有祛风除湿、通痹止痛、镇静安眠等功效 。甘草药材含有甘草三萜皂苷类、甘草黄酮类及甘草多糖类等多种活性化合物，具有补益心脾、润肺止咳、调和药性等功效 。板蓝根药材中含有生物碱类包括表告依春、靛玉红等，木脂素类包括直铁线莲宁 ，核苷类包括尿苷、鸟苷等，有机酸类包括丁香酸、水杨酸等，并且还含有多糖类化合物等活性有效成分，具有清热解毒、凉血利咽、抗菌、抗病毒等功效 ，。断血流药材含有黄酮类包括橙皮苷、芹菜素等，皂苷类包括风轮菜皂苷 、等，挥发油包括柠檬烯、反式石竹烯等，具有凉血止血、抗炎、抗菌等功效 。我国从世纪之初就展开了对这五味常见中药材的研究，已在抗菌、抗感染等方面取得了许多成果，但缺乏对这五味中药材组方后对铜绿假单胞菌抑制效果的研究。本研究模拟实际生产工艺，讨论两面针、独活、甘草、板蓝根、断血流醇提药水组方后对铜绿假单胞菌的体外抑制作用，为更好地研发口腔护理用品和化妆品新配方，优化产品防腐体系提供理论支撑。参考文献 ，（）：，（）：，（）：胡付品，郭燕，朱德妹，等 年 中国细菌耐药监测 中国感染与化疗杂志，（）：杨鑫，陆禹河，毛银雪，等 中药美白活性成分及作用机制研究 食品与药品，（）：刘倩，吴震生，王领，亓玉锋 一种抗敏舒缓修复的中药复合醇提药水的研究及应用 山东化工，（）：廖翠怡，邱茹茵，陶松若，马 驿，彭金菊 种中药对沙门菌和金黄色葡萄球菌体外抑制作用的研究 中兽医医药杂志，（）：朱彩莲，李鸣宇 种中药醇提药水对 种牙周可疑致病菌的体外抑菌实验 上海口腔医学，（）：，（），：袁欣 独活主要成分的分离及含量测定研究概况 海峡药学，（）：，（）：（），（）：林丽君，聂黎行，戴忠，等 板蓝根的研究概况 中国药业，（）：杨建昕，李峰，李娜，等 板蓝根抗病毒活性成分研究进展 辽宁中医药大学学报，（）：程霞，陈国广，石绍华 止血中草药断血流的研究进展 安徽医药，（）：（收稿日期：年 月 日）