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食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第4期 313释微粒，结果表明通过改变药载比能方便有效地调节所得载药微粒的形态，进而影响其载药和释药性能，证实涂膜粉碎用于制备载药微粒高效便捷、可控性强。本研究为涂膜粉碎工艺推广用于其他活性成分制剂开发奠定了基础，也对微粒结构和性能的调控策略进行了有益探索。参考文献1 金波.葡萄籽原花青素复合微生态制剂的制备及安全性和有效性评价D.长春:吉林大学,2022.2 刘荣丽,钟碧萍,黄宏南,等.高效液相色谱法测定缓解视疲劳片中原花青素的含量J.食品与药品,2014,16(3):193-195.3 杨亚超,宁梦帆,菅蓁.烟台产区酒渣葡萄籽原花青素含量与抗氧化性研究J.现代食品,2022,28(9):173-175,184.4 冯占芹.原花青素/壳聚糖缓释微粒的构建及对大鼠放射性肺损伤的治疗作用D.潍坊:潍坊医学院,2015.5 方舟,黄凤林,罗来福,等.乙基纤维素用作药物载体的研究进展J.化工设计通讯,2019,45(8):204-205.6 刘梦实.多功能聚合物材料乙基纤维素微粒的制备及其对染料污水的催化降解性能研究D.兰州:西北民族大学,2022.7 姚清艳,王燕清,朱建华,等.微球制剂的研究进展J.食品与药品,2018,20(5):382-386.8 乔洪翔,任红,陈君,等.银杏叶制剂中原花青素含量测定方法比较J.海峡药学,2017,29(8):61-63.9 郭立华,陈野,李秀明,等.玉米醇溶蛋白微胶囊的制备及缓释性能J.食品研究与开发,2013,34(4):61-64.10 陈海珍,施江培,顾笑妍,等.“壳-核”型纳米粒的“壳”组成对克服口服生理屏障及生物利用度的影响J.中国中药杂志,2022,47(13):3475-3480.11 吕凤娇,蔡菊虹,陈西林,等.黄芩苷壳寡糖纳米粒的体外释放与模型J.泉州师范学院学报,2021,39(6):1-6.12 Cui Y,Zhao B,Xie F,et al.Study on the preparation and feasibility of a novel adding-type biological slow-release carbon sourceJ.J Environ Manage,2022,316:115236.13 He P,Davis S S,Illum L.Chitosan microspheres prepared by spray dryingJ.Int J Pharm,1999,187(2):53-65.14 亢思莹,顾宙辉,黄鑫.喷雾干燥技术在固体分散体制备中的应用J.药学与临床研究,2022,30(2):159-161.15 Trasi N S,Taylor L S.Taylor.Thermodynamics of highly supersaturated aqueous solutions of poorly water-soluble drugsimpact of a second drug on the solution phase behavior and implications for combination productsJ.J Pharm Sci,2015,104(8):2583-2593.响应面法优化双柏散中总黄酮的超声波萃取工艺刘建清，林水森，谢志新，谢娜娜（泉州医学高等专科学校 药学院，福建 泉州 362000）摘 要：目的 优化双柏散中总黄酮超声波萃取工艺。方法 以总黄酮提取率为评价指标，采用响应面法优化超声波萃取中乙醇浓度、液料比、超声温度及超声频率。结果 确定超声波萃取条件为乙醇浓度62%、液料比25、超声温度54，总黄酮提取率为8.8%。结论 该方法稳定、可靠、准确，可用于双柏散中总黄酮超声波萃取。关键词：双柏散；总黄酮；响应面法；超声波中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1672-979X（2023）04-0313-05DOI：10.3969/j.issn.1672-979X.2023.04.005Optimization of Ultrasonic Extraction Process of Total Flavonoids from Shuangbai Powder by Response Surface MethodologyLIU Jian-qing,LIN Shui-sen,XIE Zhi-xin,XIE Na-na(College of Pharmacy,Quanzhou Medical College,Quanzhou 362000,China)Abstract:Objective To optimize the ultrasonic extraction technology of total flavonoids from Shuangbai Powder.收稿日期：2023-01-06基金项目：泉州医学高等专科学校校级课题（编号：XJK2013B）作者简介：刘建清，男，硕士，助教，研究方向：药物新剂型与新技术，E-mail:314 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第4期Methods Response surface methodology(RSM)was used to optimize ethanol concentration,liquid-solid ratio,ultrasonic temperature and ultrasonic frequency in ultrasonic extraction.Results The extraction conditions were determined as follows:ethanol concentration of 62%,liquid-solid ratio of 25,ultrasonic temperature of 54.The total flavone extraction rate reached 8.8%.Conclusion The method is stable,reliable and accurate,and can be used for ultrasonic extraction of total flavonoids from Shuangbai Powder.Key Words:Shuangbai Powder；total flavonoids;response surface methodology(RSM);ultrasound双柏散是已故名老中医黄耀燊的经验方，处方由大黄、侧柏叶、黄柏、泽兰、薄荷组成，临床用于跌打损伤、红肿疼痛等症状治疗，因疗效可靠、安全性高被收录于中医伤科学讲义中1-2。为提高双柏散使用方便性，近年，双柏散被研制成软膏剂、喷雾剂、巴布剂等新剂型，其中双柏散的提取是新剂型研发成功的关键，也是后续临床应用安全、有效的保障。目前关于双柏散提取，尤其是提取优化的文章报道较少。超声波萃取是利用超声波具有机械效应、空气效应和热效应等特点，提高萃取溶剂的扩散和渗透能力，从而促进目标成分提取的方法，具有无需高温、常压萃取、萃取率高等优点3-6。本研究以总黄酮为指标，采用响应面法对双柏散超声波萃取工艺进行优化，探究双柏散最佳提取工艺，为后期双柏散新剂型的研究提供技术参数。1 仪器与试药1.1 仪器BSA623S精密电子天平Satorius（北京）；CN-LQC3001电子天平（昆山优科维特）；UV-2700型紫外分光光度计（岛津-苏州）；Scientz-250/500/1000c多功能恒温超声波萃取仪（新芝科技）；80-2电动离心机（常州国宇）。1.2 试药大黄（产地甘肃，批号：220102），侧柏叶（产地江苏，批号：220302），黄柏（产地四川，批号210602），泽兰（产地福建，批号220202），薄荷（产地江苏，批号220102），均购自铭远健康集团有限公司。芦丁对照品（源叶生物，批号：153-18-4），乙醇（西陇科学，批号：2109011）。2 方法与结果2.1 芦丁对照品储备液配制精确称量芦丁对照品0.0323 g，置50 ml量瓶中，加70%乙醇溶解定容，摇匀，即得0.646 mg/ml的对照品储备液。2.2 线性与回归方程精密量取对照品储备液（0.646 mg/ml）0.5，1，1.5，2，2.5 ml，分别置50 ml量瓶中，加70%乙醇定容。采用直接测定法，于254 nm处分别测定各对照品溶液吸光度（A）。以芦丁浓度（mg/ml）为横坐标、A值为纵坐标绘制标准曲线，可得回归方程：Y=31.194X+0.00683，r=0.9997，表明芦丁对照品浓度在0.006460.0323 mg/ml范围内与吸光度呈良好的线性关系。2.3 双柏散总黄酮提取及测定按处方比例称取大黄、侧柏叶等混合，粉碎成粗粉后，按液料比20加入70%乙醇，于40 下超声20 min，经纱布过滤取药液于3000 r/min离心5 min，取上清0.5 ml加70%乙醇定容至50 ml。按2.2项下方法进行测定。2.4 单因素考察影响超声波萃取工艺的因素较多，本试验通过前期考察及参考相关文献7，最终确定乙醇浓度、液料比、超声温度及超声提取功率4个因素进行超声波萃取单因素考察，具体考察条件见表1。表1 单因素考察条件设计单因素条件固定其他提取条件乙醇浓度（50%，60%，70%，80%，90%）液料比20，超声温度50，提取功率900 W液料比（10，15，20，25，30）乙醇浓度70%，超声温度50，提取功率900 W超声温度（30，40，50，60，70）乙醇浓度70%，液料比20，提取功率900 W提取功率（540，720，900，1080，1260 W）乙醇浓度70%，液料比20，超声温度50 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第4期 3152.4.1 不同浓度乙醇对总黄酮超声提取率的影响 结果见图1。图1 不同乙醇浓度对总黄酮提取率的影响由图1可见，当乙醇浓度逐渐升高时，双柏散中总黄酮的提取率呈先增后减趋势。这可能是因为乙醇在低浓度时，随着浓度升高，对总黄酮类化合物的溶解度随之增加，但乙醇达到一定浓度后，乙醇溶液极性大小及溶解范围出现变化，总黄酮类化合物的溶出量下降；同时双柏散中的糅质、色素等杂质溶出增多，也干扰总黄酮的测定，进而影响双柏散的提取率。2.4.2 液料比对双柏散中总黄酮提取率的影响 结果见图2。图2 液料比对双柏散中总黄酮提取率的影响由图2可知，在液料比1025范围内，总黄酮提取率随着提取溶剂量的增加而提高。在液料比2030范围内，总黄酮提取率升高趋势已不明显，当液料比为30时，总黄酮提取率甚至出现了下降趋势，这说明总黄酮的溶出扩散已达到平衡，增加溶剂量对总黄酮提取效果意义不大。2.4.3 超声萃取温度对双柏散中总黄酮提取率的影响 结果见图3。由图3可见，3060 范围内，随着超声温度的升高，总黄酮提取率随之升高。但随着温度进一步升高，超过60 后，总黄酮提取率反而下降，这可能是因为当温度升高到一定程度后，双柏散中总黄酮类化合物被破坏，反而使提取率下降。2.4.4 超声功率对双柏散中总黄酮提取率的影响 结果见图4。图4 超声功率对双柏散中总黄酮提取率的影响由图4可见，当超声功率较低时，如超声功率为540 W时，总黄酮的提取率为7.23%，随着超声功率的提高，当超声功率为720，900，1080，1260 W时，总黄酮的提取率为8.3%8.7%。这说明当超声功率达到720 W后，随着超声功率的提高，对于总黄酮的提取影响较小，最后将提取超声功率定为900 W。2.5 响应面法优化超声波萃取工艺2.5.1 试验设计及结果 根据单因素水平考察结果，选取对总黄酮提取率影响较大的因素，包括乙醇浓度、液料比、温度3个因素，以总黄酮提取率为指标，采用三因素三水平的试验设计，优化双柏散的超声萃取工艺，各因素水平见表2，响应面法结果见表3。表2 三因素三水平响应曲面法试验设计表因素水平-101A 乙醇浓度/%607080B 液料比152025C 温度/4050602.5.2 线性拟合结果 用Design Expert 8.05软件对表3数据进行非线性方程拟合8-9，以提取率（Y）为因变量，各提取因素为自变量，可得Y=8.57-0.71A+0.27B+0.17C+0.02AB-0.35AC-0.07BC-1.22A2-0.082B2-0.21C2，该模型相对应P值0.0001，可知该模型显著，预测好（失拟项P=0.75100.05），变异系数（CV）=0.96%，可知工艺稳定性好，可靠性高，具有一定的实践指导意义，见表4。图3 超声萃取温度对双柏散中总黄酮提取率的影响316 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第4期2.5.3 响应面优化结果 根据回归方程，做不同提取条件的响应面图，结果见图5。从图中可看出不同提取条件相互作用对总黄酮提取率的影响，其中乙醇浓度和温度的相互作用影响较为显著。2.5.4 验证试验 以Design-Expert 8.05软件优化得总黄酮的超声萃取工艺为：乙醇浓度62.26%，液料比24.77，超声温度54.29。为方便试验可操作性，进一步将超声萃取工艺确定为乙醇浓度62%，液料比25，超声温度54，按该工艺进行3批双柏散超声萃取验证，结果显示提取率为8.80%0.13%（RSD=1.45%，n=3），与预测值的相对误差为2.13%，提示模型预测较好。3 讨论现代研究表明黄酮类化合物具有抗炎、抗菌、镇痛等作用，起到消肿止痛之功10-12。双柏散中的大黄、侧柏叶及泽兰均含有黄酮类化合物，因此本试验选择总黄酮为指标优化双柏散的超声萃取工艺。超声波萃取工艺研究中，为保证试验准确性和平行性，在操作中应注意一些细节，减少组间人为差异，包括超声结束后应迅速过滤，防止双柏散继续在乙醇中浸润；超声过程中需用保鲜膜遮盖，防止乙醇在超声过程中挥发，影响总黄酮的测定。本文在单因素考察基础上，通过响应面法优化双柏散中总黄酮的超声萃取工艺，最终确定超声波表3 试验优化双柏散中总黄酮超声萃取试验设计及结果试验号 A 乙醇浓度/%B 液料比 C 温度/提取率/%16015507.7328015506.3136025508.1848025506.8456020407.3768020406.5976020608.3888020606.2297015407.74107025408.47117015608.23127025608.68137020508.54147020508.62157020508.58167020508.44177020508.67图5 不同因素相互作用对双柏散中总黄酮提取效果影响的响应面图表4 方差分析结果来源离差平方和自由度均方F值P值显著性模型12.0891.34235.52 0.0001*A-乙醇浓度4.0614.06712.5 0.0001*B-液料比0.5810.58102.32 0.0001*C-温度0.2210.2239.380.0004*AB1.6010-311.6010-30.280.6126AC0.4810.4883.53 0.0001*BC0.0210.023.440.1061A26.2916.291103.98 0.0001*B20.02910.0295.030.0599C20.1810.1831.810.0008*残差0.0475.7010-3失拟项9.5010-333.1710-30.420.7510ns纯误差0.0347.6010-3总和12.1216R2=0.9967，Adj R2=0.9925 注：*：P0.01，*：P0.05，ns：P0.05食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第4期 317萃取条件为乙醇浓度62%，液料比25，超声温度54，该工艺获得的总黄酮提取率平均约8.8%，与软件预测结果接近，表明建立的响应面法模型可靠。参考文献1 蓝建国.鲜药双柏贴膏外敷治疗Colles骨折早期筋伤的临床及实验研究D.广州:广州中医药大学,2016.2 杨英杰.双柏散浸剂对下肢骨折术后肿痛的疗效观察D.广州:广州中医药大学,2012.3 张贞发,韦馥轩,赵汉民,等.超声波辅助提取大新苦丁茶中总黄酮的工艺研究J.食品研究与开发,2021,42(2):122-126.4 刘璐,付嘉阳,邓红霞.超声波辅助提取泡桐花总黄酮工艺及抑菌活性研究J.东北农业大学学报,2021,53(7):57-66.5 王树宁,宋照军,黄滢洁,等.响应面法优化超声波辅助提取侧柏叶总黄酮工艺J.食品研究与开发,2020,41(9):88-93.6 李丹,汪秀妹,何雅婷,等.橙叶总黄酮的超声波辅助提取工艺优化及性质探究J.莆田学院学报,2022,29(2):50-55.7 张思懿,许宁侠,方晓艾,等.响应面法优化婺源皇菊总黄酮的超声辅助溶剂提取工艺J.化学与生物工程,2022,39(7):32-37.8 黄文静,孙晓春,周瑞,等.响应面法优化黄芪茎叶总黄酮提取工艺及其抗炎活性研究J.中国现代中药,2018,20(7):871-878.9 苏适,王双侠.响应曲面优化超声波辅助提取无花果叶总黄酮的工艺研究J.食品研究与开发,2019,40(9):101-106.10 由淑萍,刘鑫,艾司玛古丽乃买提,等.金莲花总黄酮提取物止咳祛痰、抗炎镇痛作用的实验研究J.新疆医科大学学报,2019,42(4):463-466.11 王雪,史玉柱,司丽君,等.天山堇菜总黄酮抗菌、抗炎、解热、镇咳作用研究J.中国医药导报,2019,16(29):21-24.12 叶勇,覃妮,庾茜,等.壮药战骨总黄酮提取物经皮给药对大鼠/小鼠的抗炎、镇痛作用研究J.中国药房,2018,29(15):2090-2094.收稿日期：2022-07-12基金项目：山东省中医药科技发展计划项目（编号：2019-0214，2019-0289，Q-2023169）；山东省高校中药质量控制 与全产业链建设协同创新中心资助项目（编号：CYLXTCX2021-03）作者简介：化晓凯，硕士，主管药师，研究方向：医院制剂、临床药学，E-mail:*通讯作者：鹿岩，硕士，副主任药师，研究方向：临床药学、药事管理，E-mail:基于AHP-CRITIC混合加权法和星点设计-效应面法的 荆防活血乳膏处方优化研究化晓凯1，陈丽静1，刘启萍1，张丛惠2，苏 酩3，鹿 岩1*（1.山东中医药大学第二附属医院 药学部，山东 济南 250001；2.山东中医药大学附属医院，山东 济南 250014；3.山东省中医药研究院，山东 济南 250014）摘 要：目的 研究并优选荆防活血乳膏剂的制备工艺。方法 以荆防活血乳膏剂的离心稳定性、耐热稳定性、涂抹分散性为考察指标，采用层次分析法（AHP）、基于指标相关性的权重确定方法（CRITIC）、AHP-CRITIC混合加权法确定各评价指标的权重系数，并结合星点设计（central composite design，CCD）-效应面优化法筛选荆防活血乳膏处方中出对基质质量影响较大的3个因素硬脂酸、甘油、混合乳化剂（平平加、三乙醇胺）的用量，验证优化后的最佳处方。结果 按AHP-CRITIC混合加权法得到离心稳定性、耐热稳定性、涂抹分散性的权重系数分别为0.5216，0.3372，0.1412，最佳处方比例为：硬脂酸4.4 g，甘油14.3 g，混合乳化剂4.2 g，单硬脂酸甘油酯2 g，凡士林8.5 g，二甲基硅油10 g，纯化水20 g，冰片1.5 g（2%），苯甲酸钠0.1%，荆防活血方组方药物提取干膏用量7.5 g（每100 g乳膏中含主药量约10 g）。结论 优选出的荆防活血乳膏剂制备工艺经验证简单、合理，所得制剂具有良好的外观性状、涂抹分散性和稳定性。关键词：荆防活血乳膏；星点设计-效应面法；层次分析法；基于指标相关性的指标权重确定方法；处方优化中图分类号：R943 文献标识码：A 文章编号：1672-979X（2023）04-0317-06DOI：10.3969/j.issn.1672-979X.2023.04.006