化学药品杂质谱研究及控制ppt课件.pptx

化学药品杂质谱研究及控制化学药品杂质谱研究及控制王震王震2013-7-222013-7-22目录目录一、基本概念一、基本概念二、杂质研究的重要地位二、杂质研究的重要地位三、杂质研究的基本要求及研究思路三、杂质研究的基本要求及研究思路四、杂质对照品的使用四、杂质对照品的使用五、药品质量标准中杂质的命名五、药品质量标准中杂质的命名六、复方制剂杂质控制的思考内容六、复方制剂杂质控制的思考内容七、化学药品杂质的药理毒理问题七、化学药品杂质的药理毒理问题一、基本概念一、基本概念杂质（杂质（foreign substanceforeign substance）：是指药物在生产或贮藏过程中引入的，无治疗作：是指药物在生产或贮藏过程中引入的，无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人健康有害的物质。任何影响药品纯用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人健康有害的物质。任何影响药品纯度的物质都是杂质。度的物质都是杂质。杂质谱（杂质谱（Impurity ProfileImpurity Profile）：是药品中有机杂质是药品中有机杂质 起始原料、中间体、降解产物起始原料、中间体、降解产物如水解、氧化、开环、聚合等反应产物如水解、氧化、开环、聚合等反应产物、副产物、聚合物、异构体、多晶型、副产物、聚合物、异构体、多晶型杂质）、无机杂质（阴离子、阳离子、金属催化剂、过滤介质、活性炭）、杂质）、无机杂质（阴离子、阳离子、金属催化剂、过滤介质、活性炭）、有机挥发性化合物（各种溶剂）、其他杂质、外来物质的总称。有机挥发性化合物（各种溶剂）、其他杂质、外来物质的总称。有关物质有关物质(Related Substance)(Related Substance)：是在生产过程中带入的起始原料、中间体、聚：是在生产过程中带入的起始原料、中间体、聚合体、副反应产物，以及贮藏过程中的降解产物等，可能是已知的或未知的、合体、副反应产物，以及贮藏过程中的降解产物等，可能是已知的或未知的、挥发性的或不挥发性的。由于这类杂质的化学结构一般与活性成分类似或具挥发性的或不挥发性的。由于这类杂质的化学结构一般与活性成分类似或具渊源关系，故通常又可称之为有关物质。渊源关系，故通常又可称之为有关物质。无机杂质（无机杂质（Inorganic impurities Inorganic impurities）：是指在原料药及制剂生产或传递过程中：是指在原料药及制剂生产或传递过程中产生的杂质，这些杂质通常是已知的，主要包括：反应试剂、配位体、催化产生的杂质，这些杂质通常是已知的，主要包括：反应试剂、配位体、催化剂、重金属、其它残留的金属、无机盐、助滤剂、活性炭等。剂、重金属、其它残留的金属、无机盐、助滤剂、活性炭等。异构体（异构体（isomerisomer）：分子组成相同、：分子组成相同、但结构和性质不同的两种或多种化合物之但结构和性质不同的两种或多种化合物之一。异构体的构型由一。异构体的构型由D D 或或L L表示。表示。一、基本概念一、基本概念残留溶剂残留溶剂(Residual solvent)(Residual solvent)：在原料药、辅：在原料药、辅料以及制剂生产中使用的，但在工艺过程中未料以及制剂生产中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机挥发性化合物。在原料药合能完全去除的有机挥发性化合物。在原料药合成工艺中，选择适当的溶剂可提高产量或决定成工艺中，选择适当的溶剂可提高产量或决定药物的性质，如晶型、纯度、溶解速率等。药物的性质，如晶型、纯度、溶解速率等。重金属重金属(Heavy metals)Heavy metals)：指比重大于：指比重大于5 5的金属，的金属，目前列入重金属的为目前列入重金属的为1010种金属元素是种金属元素是铜铜、铅铅、锌锌、锡锡、镍镍、钴钴、锑锑、汞汞、镉镉、铋铋和类重金属和类重金属砷。砷。重金属危害重金属危害名称名称 危害危害汞汞HgHg食入后直接沉入肝脏，对大脑视力神经破坏极大。天然水每升水中含食入后直接沉入肝脏，对大脑视力神经破坏极大。天然水每升水中含0.010.01毫克，就毫克，就会强烈中毒。含有微量的汞饮用水，长期食用会引起蓄积性中毒。会强烈中毒。含有微量的汞饮用水，长期食用会引起蓄积性中毒。镉镉CdCd可在人体中积累引起急、慢性中毒，急性中毒可使人呕血、腹痛、最后导致死亡，可在人体中积累引起急、慢性中毒，急性中毒可使人呕血、腹痛、最后导致死亡，慢性中毒能使肾功能损伤，破坏骨胳、致使骨痛、骨质软化、瘫痪慢性中毒能使肾功能损伤，破坏骨胳、致使骨痛、骨质软化、瘫痪铅铅PbPb是重金属污染中毒性较大的一种，一但进入人体很难排除。直接伤害人的脑细胞，是重金属污染中毒性较大的一种，一但进入人体很难排除。直接伤害人的脑细胞，特别是胎儿的神经板，可造成先天大脑沟回浅，智力低下；对老年人造成痴呆、脑特别是胎儿的神经板，可造成先天大脑沟回浅，智力低下；对老年人造成痴呆、脑死亡等。主要对神经、造血系统和肾脏的危害，损害骨胳造血系统引起贫血，脑缺死亡等。主要对神经、造血系统和肾脏的危害，损害骨胳造血系统引起贫血，脑缺氧、脑水肿、出现运动和感觉异氧、脑水肿、出现运动和感觉异铬铬CrCr对皮肤、粘膜、消化道有刺激和腐蚀性，致使皮肤充血、糜烂、溃疡、鼻穿孔，患对皮肤、粘膜、消化道有刺激和腐蚀性，致使皮肤充血、糜烂、溃疡、鼻穿孔，患皮肤癌。可在肝、肾、肺积聚。皮肤癌。可在肝、肾、肺积聚。砷砷AsAs慢性中毒可引起皮肤病变、神经、消化和心血管系统障碍，有积累性毒性作用，破慢性中毒可引起皮肤病变、神经、消化和心血管系统障碍，有积累性毒性作用，破坏人体细胞的代谢系统。坏人体细胞的代谢系统。Qualification(Qualification(界定界定)：是获得和评价与研发新药相关：是获得和评价与研发新药相关的杂质的数据的过程，这些数据用于建立新药的安的杂质的数据的过程，这些数据用于建立新药的安全阈值（水平），单个的或一些已确定的杂质的含全阈值（水平），单个的或一些已确定的杂质的含量在这个阈值下可以确保药品的生物安全性。量在这个阈值下可以确保药品的生物安全性。Reporting threshold Reporting threshold 或或 Reporting level(Reporting level(报告阈值报告阈值或报告水平）或报告水平）：新药注册时杂质应被报告的限度。：新药注册时杂质应被报告的限度。Identified threshold(Identified threshold(鉴别阈值）鉴别阈值）：新药注册时杂质：新药注册时杂质应被鉴别的限度。应被鉴别的限度。Qualificated threshold(Qualificated threshold(界定阈值）界定阈值）：新药注册时：新药注册时杂质应被界定的限度。杂质应被界定的限度。药物晶型药物晶型物质在结晶时由于受各种因素影响，使分子内或分子间键合方式发生改变，物质在结晶时由于受各种因素影响，使分子内或分子间键合方式发生改变，致使分子或原子在晶格空间排列不同，形成不同的晶体结构。同一物质具有致使分子或原子在晶格空间排列不同，形成不同的晶体结构。同一物质具有两种或两种以上的空间排列和晶胞参数，形成多种晶型的现象称为多晶现象两种或两种以上的空间排列和晶胞参数，形成多种晶型的现象称为多晶现象(polymorphism)(polymorphism)。降解产物降解产物degradation product degradation product 有机化合物在辐照或化学试剂作用下引起分解或产生化学反应，形成较小分有机化合物在辐照或化学试剂作用下引起分解或产生化学反应，形成较小分子的过程称为降解，降解生成的物质称为降解产物。子的过程称为降解，降解生成的物质称为降解产物。前体药物（前体药物（prodrugprodrug）也称前药、药物前体、前驱药物等，是指经过生物体内转化后才具有药理作也称前药、药物前体、前驱药物等，是指经过生物体内转化后才具有药理作用的化合物。前体药物本身没有生物活性或活性很低，经过体内代谢后变为用的化合物。前体药物本身没有生物活性或活性很低，经过体内代谢后变为有活性的物质，这一过程的目的在于增加药物的生物利用度，加强靶向性，有活性的物质，这一过程的目的在于增加药物的生物利用度，加强靶向性，降低药物的毒性和副作用。目前前体药物分为两大类：载体前体药物降低药物的毒性和副作用。目前前体药物分为两大类：载体前体药物(carrier-prodrug)(carrier-prodrug)和生物前体和生物前体(bioprecursor)(bioprecursor)。此外农药中也有许多前体药。此外农药中也有许多前体药物。物。代谢物：代谢物：亦称中间代谢物。指通过代谢过程亦称中间代谢物。指通过代谢过程产生或消耗的物质，生物大分子不包括在产生或消耗的物质，生物大分子不包括在内。生物大分子的前体及降解产物是真正内。生物大分子的前体及降解产物是真正的代谢物。代谢过程中在酶作用下生成或的代谢物。代谢过程中在酶作用下生成或转变的小分子化合物也称作代谢物。转变的小分子化合物也称作代谢物。抗代谢物（抗代谢物（AntimetaboliteAntimetabolite）:指化学结构与指化学结构与天然代谢产物相似的化合物，在代谢反应天然代谢产物相似的化合物，在代谢反应中能与正常代谢产物相拮抗，减少正常代中能与正常代谢产物相拮抗，减少正常代谢物参与反应的机会，抑制正常代谢过程。谢物参与反应的机会，抑制正常代谢过程。结晶水结晶水crystal watercrystal water释一释一:又称结合水。结晶水是结合在化合物中的水分子，它们并不是液态水。很多晶体含有结晶水又称结合水。结晶水是结合在化合物中的水分子，它们并不是液态水。很多晶体含有结晶水.但但并不是所有的晶体都含有结晶水。溶质从溶液里结晶析出时，晶体里结合着一定数目的水分子，这并不是所有的晶体都含有结晶水。溶质从溶液里结晶析出时，晶体里结合着一定数目的水分子，这样的水分子叫结晶水。在结晶物质中，以化学键力与离子或分子相结合的、数量一定的水分子。例样的水分子叫结晶水。在结晶物质中，以化学键力与离子或分子相结合的、数量一定的水分子。例如如,从硫酸铜溶液中结晶出来的蓝色晶体从硫酸铜溶液中结晶出来的蓝色晶体,含有含有5 5个结晶水个结晶水,其组成为其组成为CuSOCuSO4 45H5H2 2OO。释二释二:在晶体物质中与离子或分子结合的一定数量的水分子在晶体物质中与离子或分子结合的一定数量的水分子 。又称结合水。例如五水合硫酸铜（分子式。又称结合水。例如五水合硫酸铜（分子式CuSOCuSO4 45H5H2 2O)O)晶体中就含有晶体中就含有 5 5个结晶水。个结晶水。释三释三:在矿物晶格中占有确定位置的中性水分子在矿物晶格中占有确定位置的中性水分子HH2 2OO；水分子的数量与该化合物中其他组分之间有一定；水分子的数量与该化合物中其他组分之间有一定的比例。如石膏的比例。如石膏CaCaSOSO4 42H2H2 2OO、胆矾、胆矾CuCuSOSO4 45H5H2 2OO、苏打、苏打NaNa2 2COCO3 310H10H2 2OO，分，分别表示其中含有别表示其中含有2 2、5 5、1010分子的结晶水。由于在不同的矿物的晶格中，水分子结合的紧密程度不分子的结晶水。由于在不同的矿物的晶格中，水分子结合的紧密程度不同，因此结晶水脱离晶格所需的温度也就不同，但一般不超过同，因此结晶水脱离晶格所需的温度也就不同，但一般不超过600600。通常为。通常为100100200200。当结。当结晶水逸出时，原矿物晶格便被破坏；其他原子可重新组合，形成另一种化合物。晶水逸出时，原矿物晶格便被破坏；其他原子可重新组合，形成另一种化合物。二、杂质研究的重要地位二、杂质研究的重要地位保证药品保证药品安全有效安全有效是研发及评价所要遵循是研发及评价所要遵循的基本原则的基本原则杂质研究是药学研究（杂质研究是药学研究（CMCCMC）的重要内容，）的重要内容，同时也直接涉及到药品的安全有效性同时也直接涉及到药品的安全有效性 药理活性或毒性杂质药理活性或毒性杂质安全性安全性 普通杂质，控制纯度普通杂质，控制纯度有效性有效性二、杂质研究的重要地位二、杂质研究的重要地位三、杂质研究的基本要求三、杂质研究的基本要求 及研究思路及研究思路1.1.相关技术指导原则相关技术指导原则2.2.杂质谱分析杂质谱分析3.3.杂质谱研究检查方法杂质谱研究检查方法4.4.杂质谱分析方法验证杂质谱分析方法验证5.5.确定合理的杂质限度确定合理的杂质限度6.6.超过目标限度时的考虑超过目标限度时的考虑7.7.仿制药杂质研究的特点仿制药杂质研究的特点8.8.杂质研究与其它研究工作的关系杂质研究与其它研究工作的关系1 1、相关技术指导原则、相关技术指导原则1 1）化学药物（原料药和制剂）稳定性研究技术指导）化学药物（原料药和制剂）稳定性研究技术指导原则征求意见稿原则征求意见稿 2013.02.06 2013.02.06 征求意见征求意见2 2）药物相互作用研究指导原则）药物相互作用研究指导原则 2012.05.152012.05.153 3）药物代谢产物安全性试验技术指导原则）药物代谢产物安全性试验技术指导原则 2012.05.152012.05.154 4）新药用辅料非临床安全性评价指导原则）新药用辅料非临床安全性评价指导原则 2012.05.152012.05.155 5）手性药物质量控制研究技术指导原则）手性药物质量控制研究技术指导原则 2012.03.232012.03.236 6）已上市中药变更研究技术指导原则（一）已上市中药变更研究技术指导原则（一）2011.12.082011.12.081 1、相关技术指导原则、相关技术指导原则7 7）化学药物临床药代动力学研究技术指导原则）化学药物临床药代动力学研究技术指导原则 2007-2007-08-2308-238 8）化学药物稳定性研究技术指导原则化学药物稳定性研究技术指导原则 2007-08-232007-08-239 9）化学药物原料药制备和结构确证研究技术指导原则）化学药物原料药制备和结构确证研究技术指导原则 2007-08-232007-08-2310)10)化学药物残留溶剂研究技术指导原则化学药物残留溶剂研究技术指导原则 2007-08-232007-08-2311)11)化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则 2007-08-23 2007-08-2312).12).化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则 2007-08-232007-08-2313).13).化学药物制剂研究技术指导原则化学药物制剂研究技术指导原则 2007-08-232007-08-2314).14).化学药物杂质研究技术指导原则化学药物杂质研究技术指导原则 2007-08-232007-08-231 1、相关技术指导原则、相关技术指导原则15).15).质量标准建立的规范化过程技术指导原则；质量标准建立的规范化过程技术指导原则；16).ANDAs16).ANDAs：Impurities in Drug SubstancesImpurities in Drug Substances，FDAFDA17).ANDAs17).ANDAs：Impurities in Drug ProductsImpurities in Drug Products，FDAFDA18).Q2A Text on Validation of Analytical 18).Q2A Text on Validation of Analytical ProceduresProcedures19).Q2B Validation of Analytical Procedures19).Q2B Validation of Analytical Procedures：MethodologyMethodology20).Q3A (R)Impurities in New Drug Substances20).Q3A (R)Impurities in New Drug Substances21).Q3B (R)Impurities in New Drug Products21).Q3B (R)Impurities in New Drug Products2222）.美国美国FDAFDA分析方法验证指南分析方法验证指南23).23).仿制药的晶型研究技术指导原则仿制药的晶型研究技术指导原则2 2、杂质谱分析、杂质谱分析1 1、药典中杂质分析：根据最新国际药典，认真分析其中有关物质、残留溶剂、药典中杂质分析：根据最新国际药典，认真分析其中有关物质、残留溶剂、晶型、异构体、旋光度、重金属、干燥失重等项目。晶型、异构体、旋光度、重金属、干燥失重等项目。2 2、原料药合成工艺分析：根据合成工艺，确定起始原料、中间体、副产物、催、原料药合成工艺分析：根据合成工艺，确定起始原料、中间体、副产物、催化剂、所使用的溶剂进行杂质归属，注意所有阶段均需要样品（供试品、对化剂、所使用的溶剂进行杂质归属，注意所有阶段均需要样品（供试品、对照品）。照品）。通过不同结晶方式试验可能产生的晶型。通过不同结晶方式试验可能产生的晶型。3 3、原料药结构分析：通过原料药化学结构式，分析手型碳原子个数，进而确定、原料药结构分析：通过原料药化学结构式，分析手型碳原子个数，进而确定可能的异构体种类。可能的异构体种类。根据官能团推测可能降解的结构。根据官能团推测可能降解的结构。4 4、原料药稳定性分析：通过强制降解试验来分析产品中潜在的降解产物。、原料药稳定性分析：通过强制降解试验来分析产品中潜在的降解产物。可考察样品在一定的酸、碱、高温、光照、氧化等因素影响下的降解产物。可考察样品在一定的酸、碱、高温、光照、氧化等因素影响下的降解产物。对于固体原料药，需分别考察在固体和溶液状态下的降解产物。必要时，可对于固体原料药，需分别考察在固体和溶液状态下的降解产物。必要时，可以根据情况进行以上因素综合存在时的强制降解试验。观察分析外观、有关以根据情况进行以上因素综合存在时的强制降解试验。观察分析外观、有关物质、熔程、干燥失重变化情况。物质、熔程、干燥失重变化情况。5 5、制剂处方工艺分析：分析主药、辅料杂质谱，分析主药及辅料是否有相互作、制剂处方工艺分析：分析主药、辅料杂质谱，分析主药及辅料是否有相互作用，制剂在光热湿酸碱环境中的稳定性。用，制剂在光热湿酸碱环境中的稳定性。通过上述方法对杂质谱进行归属。通过上述方法对杂质谱进行归属。3 3、杂质谱研究检查方法、杂质谱研究检查方法检测波长的选择检测波长的选择 a.a.对产品中可能存在的杂质（合成原料、中间体、副产物对产品中可能存在的杂质（合成原料、中间体、副产物以及降解产物）的紫外吸收特性进行研究。以及降解产物）的紫外吸收特性进行研究。-已知杂质的紫外吸收特性可采用对其流动相溶液直接已知杂质的紫外吸收特性可采用对其流动相溶液直接进行扫描的方法考察进行扫描的方法考察;-未知杂质（如未知降解产物等）可通过二极管阵列检未知杂质（如未知降解产物等）可通过二极管阵列检测器考察其紫外吸收情况。测器考察其紫外吸收情况。b.b.根据各主要杂质及主成分的紫外吸收特性，选取响应根据各主要杂质及主成分的紫外吸收特性，选取响应值基本一致的波长作为有关物质的检测波长。值基本一致的波长作为有关物质的检测波长。若对不同杂质难于找到均适宜的检测波长：若对不同杂质难于找到均适宜的检测波长：-可选择在不同波长下分别测定，可选择在不同波长下分别测定，-或采用加校正因子的主成分自身对照法。或采用加校正因子的主成分自身对照法。在杂质研究和检查之前在杂质研究和检查之前:-对所有主药的理化性质、稳定性影响因素对所有主药的理化性质、稳定性影响因素等进行较详细的文献调研或进行必要的预试验等进行较详细的文献调研或进行必要的预试验;-结合处方筛选和工艺研究的结果结合处方筛选和工艺研究的结果;-了解各处方中主药的稳定性情况了解各处方中主药的稳定性情况;-掌握各主药杂质产生的原因及主要的降解掌握各主药杂质产生的原因及主要的降解产物产物;-明确在处方条件和生产工艺中不同成分是明确在处方条件和生产工艺中不同成分是否存在相互作用否存在相互作用;-辅料是否影响主要成分的稳定性等。辅料是否影响主要成分的稳定性等。在此研究或调研的基础上在此研究或调研的基础上:-对稳定性较差或在生产制备过程中容易降解的主药成分采对稳定性较差或在生产制备过程中容易降解的主药成分采用恰当的方法进行重点研究和检查，并对杂质峰进行必要的归属。用恰当的方法进行重点研究和检查，并对杂质峰进行必要的归属。如处方中的对乙酰氨基酚在制粒过程中容易降解，产生有毒如处方中的对乙酰氨基酚在制粒过程中容易降解，产生有毒性的对氨基酚，所以应该对已知降解产物性的对氨基酚，所以应该对已知降解产物对氨基酚的检查作对氨基酚的检查作为已知杂质严格的控制。为已知杂质严格的控制。-对处方中较稳定成分的杂质可视研究结果不作为重点检查对处方中较稳定成分的杂质可视研究结果不作为重点检查对象。对象。如处方中的愈创木酚甘油醚（该成分非常稳定，在制剂的生如处方中的愈创木酚甘油醚（该成分非常稳定，在制剂的生产和储存条件下一般不降解）一般可不要求质量标准中对其杂质产和储存条件下一般不降解）一般可不要求质量标准中对其杂质进行检查。进行检查。如果主药以及各降解产物的色谱行为相如果主药以及各降解产物的色谱行为相差较大，可以选择两种或两种以上的色谱差较大，可以选择两种或两种以上的色谱条件分别检查不同的降解产物，并分别对条件分别检查不同的降解产物，并分别对这些色谱条件进行详细完整的方法学验证，这些色谱条件进行详细完整的方法学验证，在测定条件方面，应该保证主药在检测在测定条件方面，应该保证主药在检测波长条件下与各降解产物均能较好分离，波长条件下与各降解产物均能较好分离，并具有较好的检出限和定量限。并具有较好的检出限和定量限。4 4、杂质谱分析方法验证、杂质谱分析方法验证p 指导原则指导原则p 药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证p 药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则原则p 药物稳定性试验指导原则药物稳定性试验指导原则p 缓释、控释制剂指导原则缓释、控释制剂指导原则p 微囊、微球与脂质体制剂指导原则微囊、微球与脂质体制剂指导原则p 细菌内毒素检查法应用指导原则细菌内毒素检查法应用指导原则目的：目的：证明所采用的分析方法适合于相应的证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求检测要求效能指标：效能指标：评价分析方法的尺度评价分析方法的尺度效能指标包括效能指标包括:精密度精密度,准确度准确度,检测限检测限,定定量限量限,选择性选择性,线性与范围线性与范围,耐用性耐用性(1)(1)准确度准确度（AccuracyAccuracy）：概念概念：测量值与真实值接近的程度：测量值与真实值接近的程度 表表 示示:回收率回收率 测定方法测定方法：回收试验：回收试验+加样回收试验加样回收试验 操作方法操作方法：根据供试品的定量限与质量标准中该项目的限度分：根据供试品的定量限与质量标准中该项目的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某项目的限度为别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某项目的限度为0.2%0.2%，则可分别配制该杂质浓度为，则可分别配制该杂质浓度为0.10.1、0.20.2和和0.30.3的的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算算回收率，并计算9 9个回收率数据的相对标准差（个回收率数据的相对标准差（RSDRSD）。）。可接受的标准可接受的标准：各浓度下的平均回收率均应在：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%80%-120%之间，之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%70%-130%，相对标准差应不大于，相对标准差应不大于10%10%。(2)(2)精密度（精密度（Precision Precision）：定定 义义:同一样品多次测量值之间相互接近的程度同一样品多次测量值之间相互接近的程度表表 示：示：标准偏差标准偏差(s),(s),相对标准偏差相对标准偏差(RSD)(RSD)重复性重复性:同一实验室同一实验室,同一人多次测定的精密度。同一人多次测定的精密度。eg.eg.配制配制6 6份杂质浓度（一般为份杂质浓度（一般为0.1%0.1%）相同的供试品溶液，）相同的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6 6份供试液含量的相对标准差应不大于份供试液含量的相对标准差应不大于15%15%。中间精密度中间精密度:同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度 。Eg.Eg.配制配制6 6份杂质浓度（一般为份杂质浓度（一般为0.1%0.1%）相同的供试品溶）相同的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得所得1212个含量数据的相对标准差应不大于个含量数据的相对标准差应不大于20%20%。重现性重现性:不同实验室，不同人测定的精密度不同实验室，不同人测定的精密度(3)(3)专属性（专属性（specificityspecificity）概念：概念：指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性的方法能准确测定出被测物的特性)。可接受的标准为：可接受的标准为：空白对照应无干扰，该杂质峰与其它峰应能完全分空白对照应无干扰，该杂质峰与其它峰应能完全分离，分离度不得小于离，分离度不得小于2.02.0。(4)(4)检测限检测限（limit of detectionlimit of detection，LODLOD）概念：概念：药物能被检出的最低浓度药物能被检出的最低浓度(g/ml)(g/ml)测测 定定:信噪比法信噪比法(S:N=3:1)(S:N=3:1)可接受的标准：可接受的标准：杂质峰与噪音峰信号的强度比应不得小于杂质峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3 3。(5)(5)定量限定量限（1imit of quantitation1imit of quantitation，LOQLOQ）概念：概念：药物能被定量测出的最低浓度药物能被定量测出的最低浓度(g/ml)(g/ml)测测 定定:信噪比法信噪比法(S:N=10:1)(S:N=10:1)可接受的标准：可接受的标准：杂质峰与噪音峰信号的强度比应不得小于杂质峰与噪音峰信号的强度比应不得小于1010。另外，。另外，配制配制6 6份最低定量限浓度的溶液，所测份最低定量限浓度的溶液，所测6 6份溶液杂质峰保留时间的相对份溶液杂质峰保留时间的相对标准差应不大于标准差应不大于2.0%2.0%，峰面积的相对标准差应不大于，峰面积的相对标准差应不大于5.0%5.0%。(6)(6)线性与范围线性与范围（linearity and rangelinearity and range）：）：概念：概念：待测物浓度与响应值成线性关系的浓度范围待测物浓度与响应值成线性关系的浓度范围 线性关系线性关系：Y=a+bx Y=a+bx （r=0.9999)r=0.9999)线性程度线性程度：相关系数：相关系数 具体的验证方法具体的验证方法：在定量限至一定的浓度范围内配制：在定量限至一定的浓度范围内配制6 6份浓度不同的供试液，分别测定该份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（杂质峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X X），峰面积为纵坐标（），峰面积为纵坐标（Y Y），进），进行线性回归分析。行线性回归分析。可接受的标准可接受的标准：回归线的相关系数（回归线的相关系数（R R）不得小于）不得小于0.9900.990，Y Y轴截距应在轴截距应在100100响应值的响应值的2525以内，响应因子的相对标准差应不大于以内，响应因子的相对标准差应不大于10%10%。(7)(7)耐用性耐用性（robustnessrobustness）:测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度 影响因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成和影响因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成和pHpH，商品柱的品牌，柱温等。，商品柱的品牌，柱温等。分别考察流动相比例变化分别考察流动相比例变化5 5、流动相、流动相pHpH值变化值变化0.20.2、柱温变化、柱温变化5 5、检测波长、检测波长变化变化5nm5nm、流速相对值变化、流速相对值变化2020以及采用三根不同批号的色谱柱进行测定时，仪以及采用三根不同批号的色谱柱进行测定时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：各杂质峰的拖尾因子不得大于可接受的标准为：各杂质峰的拖尾因子不得大于2.02.0，杂质峰与其他成分峰必须达到基，杂质峰与其他成分峰必须达到基线分离；各条件下的杂质含量数据（线分离；各条件下的杂质含量数据（n=6n=6）的相对标准差应不大于）的相对标准差应不大于2.0%2.0%，杂质含量的，杂质含量的绝对值在绝对值在0.10.1以内。以内。（8 8）系统适应性：）系统适应性：配制配制6 6份相同浓度的杂质溶液进行分析，份相同浓度的杂质溶液进行分析，该杂质峰峰面积的相对标准差应不大于该杂质峰峰面积的相对标准差应不大于2.0%2.0%，保留时，保留时间的相对标准差应不大于间的相对标准差应不大于1.0%1.0%。另外，杂质峰的拖尾。另外，杂质峰的拖尾因子不得大于因子不得大于2.02.0，理论塔板数应符合质量标准的规定。，理论塔板数应符合质量标准的规定。（9 9）溶液稳定性：）溶液稳定性：按照分析方法分别配置对照品溶液与按照分析方法分别配置对照品溶液与供试品溶液，平行测定两次主成分与杂质的含量，然后供试品溶液，平行测定两次主成分与杂质的含量，然后将上述溶液分别贮存在室温与冰箱冷藏室（将上述溶液分别贮存在室温与冰箱冷藏室（4 4）中，）中，在在1 1、2 2、3 3、5 5和和7 7天时分别平行测定两次主成分与杂质天时分别平行测定两次主成分与杂质的含量。的含量。可接受的标准为：可接受的标准为：主成分的含量变化的绝对值应不大主成分的含量变化的绝对值应不大于于2.0%2.0%，杂质含量的绝对值在，杂质含量的绝对值在0.10.1以内，并不得出以内，并不得出现新的大于报告限度的杂质。现新的大于报告限度的杂质。5 5、确定合理的杂质限度、确定合理的杂质限度5 5、确定合理的杂质限度、确定合理的杂质限度核心是杂质的安全性核心是杂质的安全性 相关技术指导原则的要求（决策树）相关技术指导原则的要求（决策树）论证杂质安全性的相关文献资料论证杂质安全性的相关文献资料 杂质安全性研究资料杂质安全性研究资料 上市产品中杂质量不能超过进行安全性研究样品中杂质量上市产品中杂质量不能超过进行安全性研究样品中杂质量 被仿药品的质量标准，杂质种类和水平（仿制药）被仿药品的质量标准，杂质种类和水平（仿制药）杂质限度的确定杂质限度的确定 指导原则要求指导原则要求 被仿品质量标准（该质量标准是否完善）被仿品质量标准（该质量标准是否完善）被仿品实测结果（杂质种类、杂质含量）被仿品实测结果（杂质种类、杂质含量）试制样品研究结果（杂质种类、杂质含量）试制样品研究结果（杂质种类、杂质含量）相关文献资料相关文献资料5 5、确定合理的杂质限度、确定合理的杂质限度限度的确定原则限度的确定原则1 1）除除理理化化常常数数例例外外，其其它它项项目目限限度度的的确确定定首首先先考考虑虑安安全全性数据、临床研究数据、人体耐受性。性数据、临床研究数据、人体耐受性。2 2）适适度度考考虑虑生生产产的的可可行行性性和和质质量量的的波波动动、药药品品的的稳稳定定性性、分析方法的误差及检测能力等。分析方法的误差及检测能力等。3 3）注意规模化生产产品与进行安全性、有效性研究样品）注意规模化生产产品与进行安全性、有效性研究样品质量的一致性。质量的一致性。实际生产产品的质量不能低于进行安全性和有效性试实际生产产品的质量不能低于进行安全性和有效性试验样品的质量，否则要重新进行安全性和有效性的评价。验样品的质量，否则要重新进行安全性和有效性的评价。5 5、确定合理的杂质限度、确定合理的杂质限度5 5、确定合理的杂质限度、确定合理的杂质限度6 6、超过目标限度时的考虑、超过目标限度时的考虑采取措施降低杂质至目标限度以下（首选）采取措施降低杂质至目标限度以下（首选）完善精制方法 优化合成工艺 控制原料及中间体的纯度 变更合成路线 完善包装及贮藏条件（针对降解产物）完善制剂处方工艺（针对降解产物）进行杂质安全性研究进行杂质安全性研究 采用含有杂质的原料药或制剂 采用分离的杂质单体6 6、超过目标限度时的考虑、超过目标限度时的考虑7 7、仿制药杂质研究的特点、仿制药杂质研究的特点参考信息：被仿产品的相关信息（质量标准、实测结果等）参考信息：被仿产品的相关信息（质量标准、实测结果等）目标：杂质水平不超过被仿产品目标：杂质水平不超过被仿产品杂质对比研究：重要的研究手段杂质对比研究：重要的研究手段 前提：被仿品的杂质已得到充分研究，安全性已得到论证前提：被仿品的杂质已得到充分研究，安全性已得到论证杂质对比研究结果分析杂质对比研究结果分析杂质谱与被仿品一致或杂质种类较被仿品少，无超过鉴定限度的新杂质；各杂质含量不超过被仿杂质谱与被仿品一致或杂质种类较被仿品少，无超过鉴定限度的新杂质；各杂质含量不超过被仿品品试制品的杂质控制达到了研究目标试制品的杂质控制达到了研究目标杂质谱与被仿品一致或杂质种类较被仿品少，无超过鉴定限度的新杂质；但已知杂质含量超过了杂质谱与被仿品一致或杂质种类较被仿品少，无超过鉴定限度的新杂质；但已知杂质含量超过了被仿品被仿品改进工艺，降低杂质含量杂质谱与被仿品不一致，有超过鉴定限度的新杂质；但已知杂质含改进工艺，降低杂质含量杂质谱与被仿品不一致，有超过鉴定限度的新杂质；但已知杂质含量不超过被仿品量不超过被仿品鉴定新杂质结构鉴定新杂质结构分析其产生原因，改进工艺，降低杂质含量至鉴定限度以下分析其产生原因，改进工艺，降低杂质含量至鉴定限度以下若通过改进工艺，杂质含量不能降低至鉴定限度以下，应根据杂质研究决策树，进行后续研若通过改进工艺，杂质含量不能降低至鉴定限度以下，应根据杂质研究决策树，进行后续研究。究。杂质谱与被仿品不一致，有超过鉴定限度的新杂质；且已知杂质含量亦超过被仿品杂质谱与被仿品不一致，有超过鉴定限度的新杂质；且已知杂质含量亦超过被仿品改进工艺，降低杂质水平改进工艺，降低杂质水平工艺路线：起始原料，中间体质量控制；反应条件的控制；精制方法等。工艺路线：起始原料，中间体质量控制；反应条件的控制；精制方法等。8 8、杂质研究与其它研究工作的关系、杂质研究与其它研究工作的关系与原料药制备工艺研究与原料药制备工艺研究 制备工艺决定杂质水平（杂质种类、杂质含量）制备工艺决定杂质水平（杂质种类、杂质含量）杂质研究结果验证制备工艺的可行性杂质研究结果验证制备工艺的可行性 杂质结构结果为优化制备工艺提供重要信息杂质结构结果为优化制备工艺提供重要信息 杂质检查方法的验证需制备工艺相关信息的支持杂质检查方法的验证需制备工艺相关信息的支持与制剂处方工艺研究与制剂处方工艺研究 处方工艺对杂质水平有重要影响处方工艺对杂质水平有重要影响 在原料药符合要求的前提下，制剂的处方工艺实际上决定了产品在原料药符合要