慢性前列腺炎病人EPS中炎症相关生物标志物检测.pdf

第5 9卷 第3期2 0 2 3年0 6月青 岛 大 学 学 报(医 学 版)J OUR NA LO FQ I N G D AOUN I V E R S I T Y(ME D I C A LS C I E N C E S)V o l.5 9,N o.3J u n e 2 0 2 3 收稿日期2 0 2 3-0 4-1 4;修订日期2 0 2 3-0 5-0 9 基金项目国家自然科学基金资助项目(8 1 1 0 1 9 3 2)第一作者姜涵中(1 9 9 6-),男,硕士研究生。通信作者孙立江(1 9 6 3-),男,博士,教授,主任医师。E-m a i l:s l i j i a n g q d 1 6 3.c o m。慢性前列腺炎病人E P S中炎症相关生物标志物检测姜涵中,孙立江(青岛大学附属医院泌尿外科,山东 青岛 2 6 6 0 0 3)摘要 目的 探讨慢性前列腺炎(C P)病人趋化因子、白细胞(WB C)、卵磷脂小体(S P L)、神经生长因子(N G F)的表达水平及其临床意义。方法 根据美国国立卫生研究院的分类标准,收集2 0 2 0年2月2 0 2 1年5月就诊的9 3例型C P病人,其中A型4 4例,B型4 9例,另外选择5 0例健康体检者作为对照组。采用C P症状指数评分表(C P S I)评估病人临床症状,采用酶联免疫吸附法检测前列腺液(E P S)中趋化因子单核细胞趋化因子(MC P-1)、巨噬细胞炎症因子(M I P-1)和N G F水平,E P S镜检WB C及S P L计数,分析不同分型病人E P S中趋化因子、WB C、S P L和NG F水平差异。结果 A型和B型病人的WB C计数等级和S P L计数差异有统计学意义(Z=-9.0 5 3、-3.0 5 6,P0.0 5)。与对照组相比,A型和B型病人E P S中趋化因子MC P-1、M I P-1 及NG F水平均升高(F=1 0 1.3 9 71 9 6.7 0 7,P0.0 5);与A型相比,B型病人趋化因子MC P-1、M I P-1 水平降低(P0.0 5),N G F水平及C P S I总分升高(P0.0 5)。C P病人趋化因子MC P-1、M I P-1 与C P S I量表中疼痛和不适评分存在正相关(r=0.4 0 5、0.4 2 7,P0.0 5)。结论 型C P病人E P S中趋化因子及NG F均高于对照组。A型与B型E P S镜检WB C及S P L计数存在差异,WB C和S P L可以用来对C P进行分型,但与C P S I症状评分无相关性。MC P-1和M I P-1 可用来评估C P病人的分型和严重程度。关键词 前列腺炎;趋化因子类;白细胞计数;神经生长因子 中图分类号 R 6 9 7.3 3;R 9 7 7.9 文献标志码 A 文章编号 2 0 9 6-5 5 3 2(2 0 2 3)0 3-0 3 9 7-0 4d o i:1 0.1 1 7 1 2/j m s.2 0 9 6-5 5 3 2.2 0 2 3.5 9.0 8 1 开放科学(资源服务)标识码(O S I D)网络出版 h t t p s:/k n s.c n k i.n e t/k c m s 2/d e t a i l/3 7.1 5 1 7.R.2 0 2 3 0 7 2 5.0 9 3 6.0 0 1.h t m l;2 0 2 3-0 7-2 6 1 1:4 7:5 4ME A S U R EME N TO FI N F L AMMA T O R YB I OMA R K E R SI NE X P R E S S E DP R O S T A T I CS E C R E T I O NO FP A T I E N T SW I T HC H R O-N I CP R O S T A T I T I S J I ANG H a n z h o n g,S UN L i j i a n g(D e p a r t m e n to fU r o l o g y,T h eA f f i l i a t e dH o s p i t a lo fQ i n g d a oU n i v e r-s i t y,Q i n g d a o2 6 6 0 0 3,C h i n a)A B S T R A C T O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h ee x p r e s s i o n l e v e l s o f c h e m o k i n e s,w h i t eb l o o dc e l l(WB C)c o u n t,s m a l l p a r t i c l e so f l e c i t h i n(S P L),a n dn e r v eg r o w t hf a c t o r(NG F)a n dt h e i rc l i n i c a l s i g n i f i c a n c e i np a t i e n t sw i t hc h r o n i cp r o s t a t i t i s(C P).M e-t h o d s A c c o r d i n gt ot h ec l a s s i f i c a t i o nc r i t e r i a e s t a b l i s h e db y t h eN a t i o n a l I n s t i t u t e s o fH e a l t h,9 3p a t i e n t sw i t h t y p e C Pw h oa t-t e n d e dt h eh o s p i t a l f r o mF e b r u a r y2 0 2 0t oM a y2 0 2 1w e r e e n r o l l e d,a m o n gw h o m4 4p a t i e n t sh a d t y p eAC Pa n d4 9h a d t y p eBC P.At o t a l o f 5 0 i n d i v i d u a l sw h ou n d e r w e n tp h y s i c a l e x a m i n a t i o nw e r ee n r o l l e da s c o n t r o l g r o u p.C h r o n i cP r o s t a t i t i sS y m p t o m sI n d e x(C P S I)w a su s e d t oe v a l u a t e t h e c l i n i c a l s y m p t o m s o f p a t i e n t s,E L I S Aw a su s e d t om e a s u r e t h e l e v e l s o f c h e m o k i n e sm o n o-c y t ec h e m o a t t r a c t a n tp r o t e i n-1(MC P-1)a n dm a c r o p h a g e i n f l a mm a t o r yp r o t e i n-1a l p h a(M I P-1)a n dNG F i ne x p r e s s e dp r o s t a t i cs e c r e t i o n(E P S),a n dE P Sm i c r o s c o p yw a su s e d t om e a s u r eWB Ca n dS P Lc o u n t.T h e l e v e l s o f c h e m o k i n e s,WB C,S P L,a n dN G Fw e r ec o m p a r e db e t w e e nt h ep a t i e n t sw i t hd i f f e r e n tt y p e so fC P.R e s u l t s T h e r ew e r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s i n WB Ca n dS P Lc o u n tb e t w e e nt h ep a t i e n t sw i t h t y p eAC Pa n d t h o s ew i t h t y p eBC P(Z=-9.0 5 3,-3.0 5 6;P0.0 5).C o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o lg r o u p,t h ep a t i e n t sw i t h t y p eA/BC Ph a ds i g n i f i c a n t i n c r e a s e s i n t h e l e v e l s o f t h e c h e m o k i n e sMC P-1a n dM I P-1 a n dN G F i nE P S(F=1 0 1.3 9 7-1 9 6.7 0 7,P0.0 5).C o m p a r e dw i t ht h ep a t i e n t sw i t ht y p eAC P,t h ep a t i e n t sw i t ht y p eBC Ph a ds i g n i f i-c a n t r e d u c t i o n s i nt h e l e v e l so f t h e c h e m o k i n e sMC P-1a n dM I P-1(P0.0 5)a n ds i g n i f i c a n t i n c r e a s e s i n t h e l e v e l o fN G Fa n d t h et o t a l s c o r eo fC P S I(P0.0 5).T h ec o r r e l a t i o na n a l y s i ss h o w e dt h a t i nt h ep a t i e n t sw i t hC P,t h ec h e m o k i n e sMC P-1a n dM I P-1 w e r ep o s i t i v e l yc o r r e l a t e dw i t h t h e s c o r e so f p a i na n dd i s c o m f o r t i nC P S I s c a l e(r=0.4 0 5,0.4 2 7;P0.0 5)。所有纳入研究的病人及其家属均已签署知情同意书。1.1.2 纳入标准 慢性非细菌性前列腺炎,符合N I H5制定的C P(型)诊断标准的病人;病人骨盆区域各部位出现慢性或反复发作疼痛感,可伴有排尿异常症状,持续时间3个月;E P S细菌培养无菌生长;E P S中镜检WB C异常升高。1.1.3 排除标准 N I H标准中的、和型C P病人;合并睾丸炎等其他类型的泌尿系统炎症感染病人;前列腺癌、前列腺结石或急性膀胱炎;合并其他类型自身免疫性疾病;近3个月接受过免疫治疗。1.2 研究方法1.2.1 E P S标本采集 收集E P S标本前,嘱咐病人多饮水,用浸湿生理盐水的棉球清洗尿道口,用碘附消毒,由同一位从事相关工作1 0年以上泌尿科医生对病人经直肠进行前列腺按摩,收集第1滴E P S置玻片上送常规检查,其余E P S置于E p p e n d o r f管中进行病原学检查。1.2.2 C P分型和分组 参考N I H制定的分类标准,根据病原学分类原则,均诊断为型慢性非细菌性前列腺炎、慢性骨盆疼痛综合征。同时,根据有无炎症反应分为A型(炎症性C P)和B型(非炎症性C P)。1.3 观察指标1.3.1 WB C和S P L计数 临床检验时取出标本,以湿玻片法在4 0 0倍显微镜下观察5个高倍镜视野(H P)下WB C、S P L计数,取平均值,根据平均计数进行分组。WB C计数:计数4 0/H P记为。S P L计数:未见S P L或稀疏少见S P L,记为-;S P L分布占视野1/4,记为+;占视野1/41/2,记为;占视野1/23/4,记为;分布满视野,记为6。1.3.2 C P S I量表检测 由具有相关培训经验1 0年以上泌尿科医师进行指导,由病人根据自身情况填写C P S I量表。量表主要症状项目包括排尿、疼痛、生活质量及症状严重程度等,每个项目包括9个条目,总分4 3分,评分越高表明症状越严重7-8。1.3.3 趋化因子和NG F检测 采用酶联免疫吸附检测(E L I S A)试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司),以双抗体夹心酶联免疫吸附法(A B C-E L I S A)检测E P S中趋化因子单核细胞趋化因子(MC P-1)、巨噬细胞炎症因子(M I P-1)水平和NG F水平9。1.4 统计学处理采用S P S S2 2.0统计软件进行数据分析。计数资料用例数表示,等级资料比较行M a n n-Wh i t n e y检验;计量资料用xs表示,2组均数的比较采用两独立样本的t检验,3组均数比较采用单因素方差分析,均数间两两比较采用S NK(S t u d e n t-N e w-m a n-K e u l s)法;采用P e r s o n相关系数分析WB C计数、S P L计数、趋化因子与病人C P S I量表评分的相关性。以P0.0 5为差异有统计学意义。2 结 果2.1 镜检WB C、S P L计数及其与C P S I量表评分的关系A型和B型病人的WB C计数等级和S P L计数差异具有统计学意义(Z=-9.0 5 3、-3.0 5 6,P0.0 5),但B型C P S I总评分高于A型 3期姜涵中,等.慢性前列腺炎病人E P S中炎症相关生物标志物检测3 9 9(t=2.0 1 8,P0.0 5)。表1 A型和B型病人镜检WB C及S P L计数(例)组别nWB C计数*少见+S P L计数*-+A型4 402 01 49111 11 91 2 1B型4 94 90000182 51 4 1 与A型比较,*Z=-9.0 5 3、-3.0 5 6,P0.0 5。表2 A型和B型病人C P S I量表评分(xs)组别n疼痛和不适排尿症状生活质量影响总评分A型4 47.4 62.4 73.0 23.0 06.8 02.3 7 1 6.2 25.1 2B型4 97.5 22.9 43.5 13.0 57.4 72.4 5 1 8.4 45.4 5*与A型比较,*t=2.0 1 8,P0.0 5。2.2 两组趋化因子水平比较A型病人、B型病人及对照组的趋化因子MC P-1、M I P-1 差异有统计学意义(F=1 0 1.3 9 7、1 9 6.7 0 7,P0.0 5),与对照组相比,A型及B型病人E P S中趋化因子MC P-1、M I P-1 水平均升高(P0.0 5);与A型相比,B型病人MC P-1、M I P-1 水平降低(P0.0 5)。见表3。C P病人趋化因子与C P S I量表中疼痛和不适评分存在正相关(r=0.4 0 5、0.4 2 7,P0.0 5),M I P-1 与生活质量影响评分呈正相关(r=0.2 6 6,P0.0 5)。2.3 两组NG F水平比较A型病人、B型病人及对照组的NG F差异有统计学意义(F=1 1 2.7 6 7,P0.0 5),与对照组相比,A型及B型病人E P S中的NG F水平均升高(P0.0 5);与A型相比,B型病人NG F水平升高(P0.0 5)。见表3。表3 E P S中趋化因子MC P-1、M I P-1 和N G F水平对比(/n gL-1,xs)组别nMC P-1M I P-1 N G F对照组5 02 0 5.9 12 0.2 3 1 3 2.5 6 9.3 6 3 1 4.0 05 1.9 9 A型4 42 8 6.8 93 0.1 8*#1 7 9.7 91 3.7 3*#4 5 4.1 36 0.4 0*#B型4 92 3 7.1 73 1.5 3*1 5 3.5 31 1.3 6*4 8 1.2 16 4.9 4*注:3组间比较,F=1 0 1.3 9 71 9 6.7 0 7,P0.0 0 1。与对照组相比,*P0.0 0 1;与B型相比,#P0.0 0 1。3 讨 论C P是由各种病因引起的前列腺组织慢性炎症,可刺激尿道并引发骨盆或会阴区域疼痛,并伴有不同程度的排尿症状和性功能障碍,严重影响病人生活质量1 0-1 8。虽然目前还未确定C P的特异性标志物,但多项研究发现C P病人的E P S、尿液和血清中存在多种相关生物标志物。马成泉等1 2的研究显示,E P S中的趋化因子、炎性因子和NG F等对C P的实验室诊断具有重要作用,且C P病情与自身免疫机制也存在一定关系1 9-2 1。N I H根据E P S中WB C计数,将型C P分为A及B两个亚型。本文研究分析了两个亚型的WB C、S P L计数,并将之与C P S I评分进行相关分析,结果显示,两个亚型之间WB C、S P L计数差异较大。但相关性分析结果显示,A型、B型病人WB C、S P L计数与C P S I各项评分均无相关性,表明仅依靠WB C、S P L计数无法评判病情严重程度,也不能就此评价哪种亚型的病情更严重2 2。趋化因子是由细胞分泌的小细胞因子或信号蛋白,在机体免疫防御时可使免疫细胞定向趋化,调节机体炎症状态1 3-1 4。本研究中,A型及B型病人E P S中趋化因子MC P-1、M I P-1 水平均较对照组升高,且A型趋化因子水平高于B型。A型、B型病人趋化因子与C P S I量表中疼痛和不适评分存在中等程度正相关。由此来看,E P S中趋化因子水平可以作为C P初步诊断和分型的参考依据,且其水平可以显性表达病人的生理疼痛和不适感,以此可为临床采取相应干预措施提供一定参考。NG F作为一种神经营养因子,可刺激细胞生长,延缓神经退行性病变,成为免疫调节的重要一环1 5-1 6。从炎症反应和牵涉痛角度看,神经纤维在外周神经丛交汇,牵涉多种支配内脏和体壁的神经纤维束,分布至盆腔及其以下多个器官。当外来刺激传入神经纤维,体壁结构接受到的神经冲动可能使伤害感受器致敏,进而形成痛觉过敏。而此时,NG F可促进中枢和外周神经元的生长发育,加快神经系统损伤后的修复,缓解痛觉过敏2 3。本研究中,A型及B型病人E P S中的NG F水平高于对照组,两种亚型的NG F因子差异也有统计学意义,B型病人的NG F水平高于A型病人,且B型病人C P S I总评分高于A型,临床症状疼痛程度更高2 4-2 5。表明炎症水平增高会引起NG F水平增高,但由前列腺局部引发的炎症刺激在A型和B型C P中存在不同的NG F调控机制,甚至二者可能存在不同的发病机制,需要循此思路作进一步探究。综上所述,A型和B型C P病人E P S中的WB C、S P L、趋化因子和N G F表达均与其分型有关,4 0 0青 岛 大 学 学 报(医 学 版)5 9卷可以用这些指标来评估临床分型;趋化因子还与C P病人的C P S I评分相关,可用来评估病人临床症状的严重程度。B型病人的C P S I总评分和E P S中NG F水平明显高于A型,二者可能存在不同的发生或作用机制,需要进一步的研究来探索。参考文献1AN D E R S ONR U,W I S E D,NA THAN S ON B H.C h r o n i cp r o s t a t i t i sa n d/o rc h r o n i cp e l v i cp a i na sap s y c h o n e u r o m u s c u-l a rd i s o r d e ram e t a-a n a l y s i sJ.U r o l o g y,2 0 1 8,1 2 0:2 3-2 9.2Z HAN GK,L I UYX,YAN G WB,e t a l.E f f i c a c ya n ds a f e t yo fn i n g m i t a i c a p s u l e i np a t i e n t sw i t hc h r o n i c p r o s t a t i t i s/c h r o n i cp e l v i cp a i ns y n d r o m e:a m u l t i c e n t e r,r a n d o m i z e d,d o u b l e-b l i n d,p l a c e b o-c o n t r o l l e dt r i a lJ.U r o l o g y,2 0 2 1,1 5 3:2 6 4-2 6 9.3 朱云海,许云飞,陈耀武,等.高龄型前列腺炎患者血清和前列腺液中神经生长因子、炎性因子的表达水平及临床意义J.现代生物医学进展,2 0 1 8,1 8(2):2 7 2-2 7 5.4 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n c-t i o n i na m e l i o r a t i n go x i d a t i v es t r e s sJ.B i o m e d i c i n e&P h a r-m a c o t h e r a p y,2 0 1 8,1 0 6:7 1 4-7 2 3.1 1MO T R I C H R,B R E S E R M L,MO L I NA R,e ta l.P a t i e n t sw i t hc h r o n i cp r o s t a t i t i s/c h r o n i cp e l v i cp a i ns y n d r o m es h o w Th e l p e r t y p e1(T h 1)a n dT h 1 7s e l fr e a c t i v e i mm u n e r e s p o n-s e ss p e c i f i c t op r o s t a t e a n ds e m i n a l a n t i g e n s a n dd i m i n i s h e ds e-m e nq u a l i t yJ.B J UI n t e r n a t i o n a l,2 0 2 0,1 2 6(3):3 7 9-3 8 7.1 2马成泉,熊健,李宏军.慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征实验室诊断特殊生物标志物的研究进展J.中华男科学杂志,2 0 2 0,2 6(7):6 6 0-6 6 5.1 3 刁建军,吴波,张 姝红,等.慢 性前列腺炎患 者前列腺液中WB C、S P L、I g及趋化因子 水平变化及意义 J.重 庆 医 学,2 0 2 2,5 1(1 0):1 6 6 5-1 6 6 9.1 4徐国良,焦志灵,李路鹏,等.慢性前列腺炎患者前列腺液免疫球蛋白和炎性因子及趋化因子水平变化及意义J.中华实用诊断与治疗杂志,2 0 1 8,3 2(9):8 8 7-8 8 9.1 5姜丰泽,于洋,王炜,等.氯美扎酮联合索利那新治疗型前列腺炎临床疗效及对前列腺液神经生长因子、巨噬细胞炎性蛋白-1、干扰素-影响J.临床军医杂志,2 0 1 9,4 7(1):9 9-1 0 0.1 6董德河,段瑞华,张毅,等.中医药治疗慢性前列腺炎的研究现状J.中国性科学,2 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et h e r a p yf o rc h r o n i cp r o s t a t i t i st y p e b/c h r o n i cp e l v i cp a i ns y n d r o m e:ad o u b l e-b l i n dr a n d o m i z e ds h a m-c o n-t r o l l e dc l i n i c a l t r i a lJ.P r o s t a t eC a n c e ra n dP r o s t a t i cD i s e a-s e s,2 0 2 0,2 4(2):3 7 0-3 7 9.(本文编辑 周晓彬)