酱香型白酒除杂后长期大剂量饮用对小鼠生长的影响研究.pdf

酿酒科技2023年第8期（总第350期）LIQUOR-MAKING SCIENCE&TECHNOLOGY2023 No.8(Tol.350)DOI：10.13746/j.njkj.2023073酱香型白酒除杂后长期大剂量饮用对小鼠生长的影响研究杜莎，邓文飞，赵玉珍，杨荣增，孙晓东（力天酒业研究院（西安）有限公司，陕西 西安 710014）摘要：为探讨长期大剂量饮用经酒用除杂炭分子筛处理后的53%vol酱香酒与普通53%vol酱香酒对KM小白鼠体重、生育、脏体系数及死亡率的影响，将60只KM小白鼠（雌雄各半）随机分为组（53%vol酱香酒）、组（除杂后53%vol酱香酒）、对照组三组，每组20只（雌雄各半），每日灌胃给酒1次，连续5 d后停灌2 d而后继续灌胃5 d，连续60 d，剂量20 mL/kg d。结果表明，组、组与对照组相比体重增长显著降低(P0.01)，组体重增长显著高于组(P0.01)；组、组与对照组生育率分别为64.9%、70.5%、81.3%；组的心脏系数和肾脏系数显著高于对照组(P0.01，P0.05)，脾脏系数和胸腺系数显著低于对照组(P0.05，P0.01)，组的各脏器系数与对照组无显著差异(P0.05)；组、组死亡率分别为70%、55%。53%vol酱香经酒用除杂炭分子筛除杂后显著降低了对小鼠的影响。关键词：酒用除杂炭分子筛；53%vol酱香酒；小白鼠；除杂；脏器系数中图分类号：TS262.3；R446文献标识码：A文章编号：1001-9286（2023）08-0032-06Effect of Long-Term and High-Dose Drinking of 53%vol JiangxiangBaijiu after Impurity Removal on the Growth of MiceDU Sha,DENG Wenfei,ZHAO Yuzhen,YANG Rongzeng and SUN Xiaodong(Litian Liquor Research Institute(Xian)Co.Ltd.,Xian,Shaanxi 710014,China)Abstract:In this study we explored the effect of long-term and high-dose drinking of 53%vol Jiangxiang Baijiu treated by impurity-removing carbon molecular sieve on the body weight,fertility,organ coefficients and mortality of KM mice.Sixty KM mice(halfmale and half female)were randomly divided into three groups:group I(53%vol Jiangxiang Baijiu),group II(53%vol JiangxiangBaijiu after impurity removal),and control group.Each group had 20 mice(half male and half female),and the mice in group I andgroup II were fed with liquor by gavage once a day.After 5 days of continuous gavage,stop gavage for 2 days,and then continue ga-vage for 5 days until day 60.The dose was 20 mL/kg d.The results showed that compared with the control group,the weight gain ofgroup I and group II was significantly lower(P0.01);the weight gain of group II was significantly higher than that of group I(P0.01).The fertility rate of group I,group II and the control group was 64.9%,70.5%,and 81.3%,respectively.The cardiac and renalcoefficients of group I were significantly higher than those of the control group(P0.01,P0.05),while the spleen and thymus coeffi-cients were significantly lower than those of the control group(P0.05,P0.05).The mortality rate of group I and group II was 70%and 55%,respectively.In conclusion,the toxicity of 53%vol Jiangxiang Baijiu was significantly reduced by impurity-removing carbon molecular sieve treat-ment.Key words:impurity-removing carbon molecular sieve for liquor;53%vol Jiangxiang Baijiu;white mouse;impurity removal;organcoefficient3232白酒作为我国传统的酒精饮料而广受关注，近年来随着“健康中国”战略的实施，白酒健康也成了人们关注的重点1。活性炭是一种疏水吸附剂，常被用于去除白酒中的有害物质和异杂味2，传统的活性炭有着较大缺陷，在吸附酒中有害物质成分的同时也会吸附相当量的有益呈香呈味物质成分，导致酒水口味变得寡淡3-4。为了保证酒水除杂效果明显的同时克服传统活性炭除杂的缺陷，近年来行业内研制了新型炭制吸附剂。炭分子筛是通过对传统活性炭进行破碎、多级清洗、毡制成型、干燥、碳化活化，脱除传统活性炭自身的灰分、杂质、杂味，重组其孔隙，堵塞其吸附白酒有益物质的孔径，使其成为专用于吸附白酒中甲醇、甲醛、正丙醇、各种醛类物质、塑化剂、氰化物、重金属等有害物质的新 型 材 料5。Q/SLT0001S2022 与 GB 292152012 相比各项关键指标均优于 GB 292152012，见表16。本试验通过研究经酒用炭分子筛处理前后的53%vol酱香酒对小白鼠生长的影响，对比白酒的除杂处理对小鼠毒性的影响，为白酒的健康化发展和酒民的饮酒健康提供理论依据。1材料与方法1.1材料、试剂及仪器1.1.1动物清洁级 KM 小白鼠 60 只，雌雄各半，体质量(202)g，购自西安交通大学医学院SPF实验动物中心，动物合格证号：SCXK(陕)2018-001，饲养温度2126，湿度45%55%，光暗交替12 h，可自由饮水摄食。1.1.2样品酒样：53%vol酱香酒，市场随机购买的某知名品牌酱香酒；除杂处理后53%vol酱香酒，由力天酒业研究院（西安）有限公司除杂技术处理。纯净水。1.1.3仪器设备电子秤、分析天平、灌胃针管、解剖器具。1.2实验方法1.2.1实验分组将60只小白鼠随机分为3组，每组各20只（雌雄各半），分别为组（53%vol酱香酒）、组（除杂后53%vol酱香酒）和对照组（纯净水），试验时长60 d，试验期间雌雄分开饲养一周然后混合饲养一周，如此往复直至实验结束。1.2.2小白鼠标记使用染色标记法对小白鼠进行标记，用0.5%的甲紫溶液标记雄鼠，用3%苦味酸乙醇溶液标记雌鼠，分别标记110号。1.2.3给样形式使用普通灌胃针管进行灌胃给样，剂量各组均为20 mL/kg d，连续灌胃5 d，然后休息2 d，如此反复直至试验结束。试验期间食、水均正常饮用。1.2.4生育鼠处理通过观察各组中雌鼠阴道口有无白色阴道栓、体重是否骤增作为雌鼠受孕依据，将明显受孕的雌鼠单独饲养，给样正常，安装夜间记录仪，观察并记录雌鼠生崽个数。雌鼠生崽后继续放回原组，正常实验。1.2.5小白鼠死亡与处死对实验过程中死亡的小白鼠进行及时解剖，实验结束时对所有小白鼠采用颈椎脱臼法处死并解表1两标准理化指标差异技术指标色泽状态碘吸附值(以干基计，mg/g)硫酸盐灰分(以干基计，w%)氰化物高级芳香烃水溶物(以干基计，w%)砷(As，mg/kg)铅(Pb，mg/kg)GB 292152012黑色粉末或颗粒4007.0通过试验通过试验4.03.05.0Q/SLT 0001S2022黑色粉末或颗粒4004.0通过试验通过试验1.01.01.0杜莎，邓文飞，赵玉珍，杨荣增，孙晓东 酱香型白酒除杂后长期大剂量饮用对小鼠生长的影响研究3333酿酒科技2023年第8期（总第350期）LIQUOR-MAKING SCIENCE&TECHNOLOGY2023 No.8(Tol.350)剖，解剖的脏器存放于防腐剂中。1.3数据记录分析记录：每日饲养房温湿度；每只小白鼠给样日的给样前体重；各组死亡鼠的死亡体重及解剖脏体（心脏、脾脏、肝脏、肺脏、肾脏、胸腺）重量并计算脏器系数；各组生育鼠的崽鼠数目。数据分析：数据处理及描述统计分析采用Ex-cel 2016完成，t检验、相关性分析等采用SPSS 23.0完成。2结果与分析2.1小白鼠的体重特征为研究试验过程中小白鼠的体重变化特征，计算各组每隔5天小白鼠体重的平均值，变化特征见图1。三组小白鼠体重在实验过程中整体增长，组和组给样第 1 天体重明显下降，随后逐渐上升，组的整体体重水平明显优于组。对照组在第36天和实验组在第41天以后的体重明显浮动是怀孕雌鼠与生育影响。由表 2 配对样本 t 检验可知，随着实验进行，组、组与对照组比较体重增长显著降低(t0，P0.01)，差异具有统计学意义；组体重增长显著高于组(t0，P0.01)，差异具有统计学意义，结果表明除杂后减弱了饮用普通53%vol酱香酒对小白鼠体重的影响。2.2试验鼠生育百分率表3结果表明，组共有3只雌鼠生育，生育崽鼠总数为37只，生育率为64.9%；组共有4只雌鼠生育，生育崽鼠总数为48只，生育率为70.6%；对照组有9只雌鼠生育，生育崽鼠总数为87只，生育率为 81.3%。结果表明，除杂处理减弱了普通53%vol酱香酒对小白鼠生育率的影响。2.3试验鼠脏器脏体比特征表4结果表明，组的心脏体比显著高于组(t0，P0.01)，差异具有统计学意义，脾脏系数显著低于组(t0，P0.05)，差异具有统计学意义，其余脏器系数与组无显著差异性(P0.05)。由图1小鼠体重变化结果表2小鼠体重变化对比编号配对1配对2配对3组合组-对照组组-对照组组-组配对样本相关性相关性0.9420.9600.995显著性0.0000.0000.000配对样本t检验t值-7.259-5.378-6.845P值(双尾)0.000*0.000*0.000*注：*表示显著水平在0.05下呈现差异，*表示显著水平在0.01下呈现差异。表3小鼠生育状况表（只）组别组组组生育只数349生育崽鼠数374887生育率(%)64.970.681.33434表5可知，组的各脏器系数与组相比无显著差异性(P0.05)。结果表明，普通53%vol酱香酒对小白鼠心脏与脾脏造成一定影响，除杂后的53%vol酱香酒与对照组没有显著性差异。为进一步研究两实验组脏器系数与对照组的差异性，以对照组各脏器系数的均值为检验值，对两实验组进行单样本t检验（表6）可知，组心脏系数显著高于对照组平均水平(t0，P0.01)，差异具有统计学意义，脾脏系数、胸腺系数显著低于对照组平均水平(t0，P0.01)，差异具有统计学意义，肾脏系数显著高于对照组(t0，P0.05)，差异具有统计学意义；组各脏器系数相比于对照组平均水平无显著差异(P0.05)。结果表明，普通53%vol酱香酒对实验鼠的脏器影响较大，除杂后的53%vol酱香酒降低了对实验鼠脏器的影响。2.4试验小白鼠死亡率表7结果表明，截至实验结束，组小鼠共计死亡 14 只，其中雌雄各占 7 只，总体死亡率为70%；组小鼠共计死亡11只，其中雄鼠死亡5只，雌鼠死亡6只，总体死亡率为55%；对照组死亡0只。以上数据看出53%vol酱香酒组的死亡率要高于给样除杂后53%vol酱香酒组的死亡率。3讨论白酒中可能会带有甲醇、甲醛、正丙醇、各种醛类物质、塑化剂、氰化物、重金属等有害物质，以上物质可能是从原料中带入，生产过程中产生及受生产设备的影响进入酒中7-8，通过特有的除杂工艺可以有效去除白酒中的一些有害物质。本试验利用日龄5周的1822 g小白鼠研究经酒用除杂炭分表4组与对照组脏体比比较项目心脏系数肝脏系数脾脏系数肺脏系数肾脏系数胸腺系数组别组对照组组对照组组对照组组对照组组对照组组对照组脏器系数(xs)0.00670.00240.00510.00090.05840.01360.05480.01110.00290.00140.00390.00140.01300.01480.00970.00290.01590.00220.01470.00200.00220.00080.00270.0008独立样本t检验t值2.8350.916-2.1650.9851.678-1.831P值(双尾)0.009*0.3660.037*0.3310.1020.075注：*表示显著水平在0.05下呈现差异，*表示显著水平在0.01下呈现差异。表5组与对照组脏体比比较项目心脏系数肝脏系数脾脏系数肺脏系数肾脏系数胸腺系数组别组对照组组对照组组对照组组对照组组对照组组对照组脏器系数(xs)0.00570.00240.00510.00090.05640.01360.05480.01110.00680.00140.00390.00140.00980.01480.00970.00290.01530.00220.01470.00200.00400.00080.00270.0008独立样本t检验t值1.7600.3821.0120.1780.7501.355P值(双尾)0.0870.7050.3180.8600.4580.190注：*表示显著水平在0.05下呈现差异，*表示显著水平在0.01下呈现差异。表6组、组与对照组脏器系数均值的比较项目心脏系数肝脏系数脾脏系数肺脏系数肾脏系数胸腺系数组别组组组组组组组组组组组组脏体比(xs)0.00670.00240.00570.00140.05830.01360.05640.01530.00290.00140.00680.01280.01300.01480.00980.00310.01590.00220.01530.00250.00210.00220.00400.0045单样本t检验检验值0.00510.05480.00390.00960.01480.0027t值2.9391.9221.1770.467-3.0831.0151.0190.3162.2710.955-2.8991.318P值(双尾)0.008*0.0700.2540.6460.006*0.3230.3210.7550.035*0.3510.010*0.203注：*表示显著水平在0.05下呈现差异，*表示显著水平在0.01下呈现差异。表7小鼠死亡状况表(只)组别组组对照组起始数目202020死亡数目雄性750雌性760合计14110死亡率(%)70550杜莎，邓文飞，赵玉珍，杨荣增，孙晓东 酱香型白酒除杂后长期大剂量饮用对小鼠生长的影响研究3535酿酒科技2023年第8期（总第350期）LIQUOR-MAKING SCIENCE&TECHNOLOGY2023 No.8(Tol.350)子筛除杂后的53%vol酱香酒在饮用60 d过程中与未除杂的 53%vol 酱香酒比较对小鼠生长影响的特点。体重变化是衡量动物是否正常生长发育的重要指标9，本研究过程中组和组体重显著低于对照组，表明大量饮酒抑制了小白鼠的生长发育，组的体重增长显著高于组，说明除杂处理后的53%vol酱香酒降低了对小白鼠生长发育的抑制作用。在灌胃给酒第 21 天后两实验组体重正常增长，表明机体对白酒产生了一定的耐受性，第41天以后体重增减幅度大是由于各组均有雌鼠怀孕，从而影响各组体重变化。长期大量饮酒会推迟雌鼠的阴道开张日龄，抑制雌鼠子宫发育与卵巢功能10-11，长期大量的饮酒也会导致雄鼠精子密度降低，增加雄鼠的精子畸形率，抑制雄鼠睾丸的生长发育12-13，造成睾丸病变，从而导致睾丸生成精子、合成并分泌雄性激素的能力受到抑制14-15，进而影响小白鼠正常的生殖机能，本研究中组的生育率大于组，表明除杂后的53%vol酱香酒降低了对小白鼠的生殖毒性。心脏作为人体的重要器官，心脏健康一直是人们关注的热点之一，长期大量饮酒会导致人体心腔扩大、心肌增厚，从而导致心脏质量增加16-18，张丽等19通过长期大量给大鼠饮酒研究得到大剂量饮酒5个月后心脏主要表现为离心性肥大。脾脏和胸腺作为重要的免疫器官，直接决定机体全身的免疫水平，免疫器官重量的降低是免疫抑制所导致，反之则表示免疫增强，生长发育较快20，研究表明，长期大量饮酒会抑制脾脏和胸腺的生长发育12。肾脏是仅次于肝脏的酒精代谢和排泄器官21，临床研究表明长期饮酒会导致肾质量和肾脏指数升高，肾小球系膜细胞增生，肾小管上皮细胞肿胀，间质内小血管增生、扩张、水肿22-24。本研究通过统计学分析各脏器系数可知，组小白鼠心脏系数和肾脏系数显著高于对照组，脾脏系数和胸腺系数显著低于对照组，组的小鼠各脏器系数均与对照组无显著差异。死亡率可以直观比较两实验组的毒性强弱，由于大剂量连续灌胃，足够引起小白鼠急性、慢性酒精性中毒25-26，急性酒精中毒是在一次饮用过量酒精后中枢神经系统处于先兴奋后抑制状态，严重会导致呼吸、心跳受到抑制而死亡27。慢性酒精中毒是指长期大量饮用酒精造成的精神、神经系统和多器官的损害28，随着饮酒时间增长导致死亡，此外就是酒中其他有害物质对机体的影响29。本研究组的死亡率为70%，组的死亡率为55%，表明除杂处理降低了53%vol酱香酒对小白鼠的毒性。综上所述，经酒用除杂炭分子筛除杂后的53%vol酱香酒相比于普通53%vol酱香酒增进了小白鼠的生长发育能力，增进了小白鼠的生育能力，降低了长期大量饮酒对小白鼠心脏、脾脏、肾脏、胸腺等脏器的毒性，降低了小白鼠的死亡率。本研究验证了酒用除杂炭分子筛除杂后的53%vol酱香酒降低了对小白鼠的生长毒性，然而与对照组相比，长期大量饮酒对机体的危害仍然不可忽视。目前在白酒生产过程中，国内白酒行业关注重点多在白酒生产工艺，对白酒后处理技术研究不多，未来加大对于白酒后处理技术的研究及科学合理的宣传饮酒知识，控制合理的饮用量及饮用频次对于白酒行业长期健康发展有不可估量的作用。参考文献：1吴继红,黄明泉,郑福平,等.健康白酒的研究进展J.食品科学技术学报,2019,37(2)：17-23.2胡莉,鲁珍,李伟,等.酒用活性炭对粮食白酒的催熟J.酿酒,2017,44(2)：3.3沈庆春,余玲,吴春燕,等.活性炭的应用J.酿酒,2005,32(3)：2.4董榕贵,张洁,杨树江,等.活性炭脱除塑化剂(DBP)对白酒品质的影响研究J.酿酒科技,2022(3)：54-57.5力天酒业研究院（西安）有限公司.酒用除杂炭分子筛：Q/SLT 0001S2022S.2022.6中华人民共和国卫生部.食品安全国家标准 食品添加剂 植物活性炭（木质活性炭）：GB 292152012S.北京：中国标准出版社,2013.7张明赞,何腊平,张义明.白酒中甲醇、甲醛、氰化物和金属离子的研究进展J.食品安全质量检测学报,2015(9)：3563-3568.8周筱春,王仪信.白酒中有害成分的性状和毒性剖析J.江西食品工业,2007(1)：2.36369姜长斌,尹琳,苏文华,等.慢性酒精中毒性神经病的诊断标准和分型J.中风与神经疾病杂志,1994,11(5)：297-298.10王正朝,钟灵秀,郭宁,等.慢性饮酒对小鼠卵巢功能及其对eCG反应性的影响J.南京农业大学学报,2008,31(3)：155-158.11邓雪冰,张江霖,廖英,等.不同浓度酒精对雌鼠卵巢功能的影响J.湖南师范大学学报：医学版,2020(4)：3.12杨郑州.长期饮酒对小鼠性腺及免疫器官的影响D.南京：南京农业大学,2009.13ABEL E L,SOKOL R J.Incidence of fetal alcoholsyndrome and economic impact of FAS-relatedanomaliesJ.Drug alcohol 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