基于网络药理学和分子对接技术探讨狼毒大戟治疗肺癌的作用机制.pdf

第4 9卷 第2期2 0 2 3年6月延 边 大 学 学 报(自然科学版)J o u r n a l o f Y a n b i a n U n i v e r s i t y(N a t u r a l S c i e n c e E d i t i o n)V o l.4 9 N o.2J u n.2 0 2 3收稿日期:2 0 2 3 0 1 0 5基金项目:吉林省科技发展计划项目(Y D Z J 2 0 2 2 0 1 Z Y T S 1 8 6);吉林省第十九批创新创业人才资助项目(2 0 2 3 QN 3 4)第一作者:孙悦(1 9 9 8),女,硕士研究生,研究方向为中药药效物质分析.通信作者:臧皓(1 9 8 4),男,博士,教授,研究方向为中药药效物质分析;金莉莉(1 9 7 8),女,博士,副教授,研究方向为中药现代化.文章编号:1 0 0 4-4 3 5 3(2 0 2 3)0 2-0 1 7 5-0 8基于网络药理学和分子对接技术探讨狼毒大戟治疗肺癌的作用机制孙悦1,封佳欣1,何旭1,陈美华1,臧皓1,2,金莉莉1(1.延边大学 药学院,吉林 延吉 1 3 3 0 0 2;2.通化师范学院 医药学院,吉林 通化 1 3 4 0 0 2)摘要:为了探究狼毒大戟治疗肺癌的作用机制,采用网络药理学和分子对接技术预测了狼毒大戟治疗肺癌的潜在靶点及其作用机制.研究结果显示:狼毒大戟治疗肺癌的核心活性成分可能是a r a u c a r o n e、e n t-(1 3 S)-h y d r o x y-1 6-a t i s e n e-3,1 4-d i o n e、e n t-3-(1 3 S)-d i h y d r o x y a t i s-1 6-e n-1 4-o n e、e n t-(1 3 S)-1 3-h y d r o x y a t i s-1 6-e n e-3,1 4-d i o n e、c a u d i c i f o l i n等;作用靶点可能为肿瘤蛋白5 3(T P 5 3)、肿瘤坏死因子(T N F)、表皮生长因子受体(E G F R)、信号转导因子和转录激活因子3(S TA T 3)、促分裂原活化蛋白激酶3(MA P K 3);狼毒大戟治疗肺癌的生物过程主要包含蛋白质磷酸化、对激素反应、细胞迁移的正调节等,相关信号通路包括癌症通路、AG E-R AG E信号通路、P I 3 K-A k t信号通路和癌细胞的蛋白聚糖的表达等.狼毒大戟治疗肺癌的核心活性成分与核心靶点的结合能在-2 1.8-3 6.8k J/m o l范围内,表明其结合效果良好.该研究结果可为狼毒大戟在肺癌治疗中的应用提供理论参考.关键词:狼毒大戟;网络药理学;分子对接;肺癌;靶点;作用机制中图分类号:R 9 6 3 文献标识码:AS t u d y o n t h e m e c h a n i s m o f E u p h o r b i a f i s c h e r i a n a i n t h e t r e a t m e n t o f l u n g c a n c e r u s i n g n e t w o r k p h a r m a c o l o g y a n d m o l e c u l a r d o c k i n g t e c h n o l o g yS UN Y u e1,F E NG J i a x i n1,HE X u1,CHE N M e i h u a1,Z ANG H a o1,2,J I N L i l i1(1.C o l l e g e o f P h a r m a c y,Y a n b i a n U n i v e r s i t y,Y a n j i 1 3 3 0 0 2,C h i n a;2.S c h o o l o f P h a r m a c y a n d M e d i c i n e,T o n g h u a N o r m a l U n i v e r s i t y,T o n g h u a 1 3 4 0 0 2,C h i n a)A b s t r a c t:I n o r d e r t o f u r t h e r e x p l o r e t h e m e c h a n i s m o f E u p h o r b i a f i s c h e r i a n a i n t h e t r e a t m e n t o f l u n g c a n c e r,t h e n e t w o r k p h a r m a c o l o g y a n d m o l e c u l a r d o c k i n g t e c h n o l o g y w e r e u s e d t o p r e d i c t t h e p o t e n t i a l t a r g e t s a n d m e c h a n i s m s o f E u p h o r b i a f i s c h e r i a n a a g a i n s t l u n g c a n c e r.T h e r e s u l t s s h o w t h a t t h e c o r e a c t i v e c o m p o n e n t s o f E u p h o r b i a f i s c h e r i a n a i n t h e t r e a t m e n t o f l u n g c a n c e r m a y b e a r a u c a r o n e,e n t-1 3 S-h y d r o x y-1 6-a t i s e n e-3,1 4-d i o n e,e n t-3-(1 3 S)-d i h y d r o x y a t i s-1 6-e n-1 4-o n e,e n t-(1 3 S)-1 3-h y d r o x y a t i s-1 6-e n e-3,1 4-d i o n e,c a u d i c i f o-l i n a n d t h e i r a c t i o n t a r g e t s m a y b e t u m o r p r o t e i n 5 3(T P 5 3),t u m o r n e c r o s i s f a c t o r(T N F),e p i d e r m a l g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r(E G F R),s i g n a l t r a n s d u c e r a n d a c t i v a t o r o f t r a n s c r i p t i o n 3(S T A T 3),m i t o g e n-a c t i v a t e d p r o t e i n k i n a s e 3(MA P K 3),e t c.T h e b i o l o g i c a l l y p o s s i b l e p r o c e s s e s m a i n l y i n c l u d e p r o t e i n p h o s p h o r y l a t i o n,r e s p o n s e t o h o r m o n e s,a n d p o s i t i v e r e g u l a t i o n o f c e l l m i g r a t i o n.R e l e v a n t s i g n a l p a t h w a y s i n c l u d e c a n c e r p a t h w a y s,t h e 延边大学学报(自然科学版)第4 9卷 e x p r e s s i o n o f p r o t e o g l y c a n s i n c a n c e r,A G E-R AG E,a n d P I 3 K-A k t.T h e b i n d i n g e n e r g y o f c o r e a c t i v e c o m p o-n e n t s t o c o r e t a r g e t p r o t e i n s i s b e t w e e n-2 1.8 k J/m o l a n d-3 6.8 k J/m o l,i m p l i e d w i t h a g o o d b i n d i n g e f f e c t.T h e r e s e a r c h r e s u l t s c a n p r o v i d e t h e o r e t i c a l r e f e r e n c e f o r t h e a p p l i c a t i o n o f E u p h o r b i a f i s c h e r i a n a i n t h e t r e a t m e n t o f l u n g c a n c e r.K e y w o r d s:E u p h o r b i a f i s c h e r i a n a;n e t w o r k p h a r m a c o l o g y;m o l e c u l a r d o c k i n g;l u n g c a n c e r;t a r g e t;a c t i n g m e c h a n i s m s0 引言肺癌(l u n g c a n c e r)是常见的癌症之一.目前,肺癌主要分为非小细胞肺癌和小细胞肺癌两类1.近年来一些学者对狼毒大戟(E u p h o r b i a f i s c h e r i-a n a)进行了研究,发现其含有二萜、三萜、黄酮、香豆素、类固醇、酚酸等2 4 1种成分2-4,其中二萜类成分对治疗乳腺癌5-6、前列腺癌7-8、肝癌9以及肺癌1 0-1 3等具有很好的疗效.2 0 0 8年,Y a n等1 4研究发现,狼毒大戟中的成分1 7-a c e t o x y j o l k i n o l i d e B(结构式见图1)可有效抑制N F-B信号通路;2 0 0 9年,W a n g等1 5研究发现,狼毒大戟中的成分i n g e n o l 3-m y r i s t i n a t e和i n g e n o l 3-p a l m i t a t e(结构式见图1)对肺癌A 5 4 9细胞具有明显的抑制作用,同时发现1 7-h y d r o x y j o l k i n o l i d e B(结构式见图1)可通过抑制S T AT 3信号通路治疗肺癌.为了进一步探讨狼毒大戟治疗肺癌的疗效及其作用机制,本文利用网络药理学和分子对接技术对狼毒大戟治疗肺癌的作用机制进行了探讨,以期为利用狼毒大戟治疗肺癌提供理论依据和研究方向.图1 狼毒大戟中4种抗肺癌活性成分的结构式1 研究流程1.1 潜在活性成分的筛选及其靶点预测为了得到狼毒大戟抗肺癌的潜在活性成分及 其靶点,本文首先利用C h e m d r a w画出其2 D结 构;然后将得到的2 D结构导入S w i s s A DME(h t t p:/www.s w i s s a d m e.c h/)中,并以胃肠道吸收为“h i g h”和类药性中至少有2个“y e s”为标准对狼毒大戟的化学成分进行筛选,以此得到具有类药性高和能够被胃肠道吸收的潜在活性成分;最后利用S w i s s T a r g e t P r e d i c t i o n(h t t p:/www.s w i s s t a r g e t p r e d i c t i o n.c h/)数据库对上述狼毒大戟的潜在活性成分进行靶点预测,并在预测结果中选取可能性0.1的靶点作为狼毒大戟的潜在活性成分靶点.1.2 肺癌疾病靶点的收集利用G e n e C a r d s数据库(h t t p s:/w w w.g e n e-c a r d s.o r g/)、T h e r a p e u t i c T a r g e t D a t a b a s e(T T D)药物 靶 标 数 据 库(h t t p s:/d b.i d r b l a b.n e t/t t d/)和D r u g b a n k数据库(h t t p s:/g o.d r u g b a n k.c o m/)中的药物数据和药物目标信息对肺癌疾病靶点进行预测.预测时首先以“l u n g c a n c e r”为关键词进行检索,然后将检索得到的肺癌疾病靶点进行合并和去除重复项,由此即得肺癌疾病靶点.1.3 潜在活性成分靶点与肺癌疾病靶点的交集靶点的预测将狼毒大戟的潜在活性成分靶点和肺癌疾病 靶点输入到V e n n y 2.1.0在线平台(h t t p s:/b i o i n f o g p.c n b.c s i c.e s/t o o l s/v e n n y/i n d e x.h t m l)中,由此可得到两者的韦恩图.在韦恩图中,潜在活性成分靶点与肺癌疾病靶点的相交部分即为潜在活性成分与肺癌疾病的交集靶点,这些交集靶点即可认为是狼毒大戟治疗肺癌的潜在靶点.1.4“药物 潜在活性成分 交集靶点”网络的构建及核心活性成分的筛选首先用狼毒大戟的潜在活性成分和交集靶点671 第2期孙悦,等:基于网络药理学和分子对接技术探讨狼毒大戟治疗肺癌的作用机制建立两者的“网络”和“类型”文件,然后将所得的文件导入到C y t o s c a p e 3.7.2软件中构建狼毒大戟治疗肺癌的“药物 潜在活性成分 交集靶点”网络,最后对该网络进行拓扑学分析即可得到狼毒大戟治疗肺癌的潜在活性成分.将所得结果按自由度值进行大小排序,并将排名前1 0的潜在活性成分作为狼毒大戟治疗肺癌的核心活性成分1 6.1.5 蛋白 蛋白互作(P P I)网络的构建和核心靶点的筛选构建P P I网络的方法:将潜在活性成分与肺癌疾病的交集靶点导入到S T R I NG v 1 1.5数据平台(h t t p s:/c n.s t r i n g-d b.o r g/)中后,通过检索即可得到P P I网络.检索条件为:以“智人”为限定物种,置信度分数为0.4,其他参数为默认值.核心靶点的筛选方法:首先将构建好的P P I网络图导入到C y t o s c a p e中;然后利用C y t o N C A插件计算P P I网络的自由度、接近中心性(c l o s e n e s s c e n t r a l i t y)和介度中心性(b e t w e e n e s s c e n t r a l i t y),并同时筛选出大于其各自平均值的靶点;最后按自由度值的大小进行排序,并将排名前1 0的靶点作为狼毒大戟治疗肺癌的核心靶点1 7.1.6 G O富集和K E G G富集分析M e t a s c a p e数据库是一个数据丰富且可对基因功能进行注释的数据库,因此本研究利用其对交集靶点进行GO(g e n e o n t o l o g y)和K E G G(k y o t o e n c y l o p a e d i a o f g e n e s a n d g e n o m e s)富集分析,以此获取交集靶点的生物信息以及分析狼毒大戟治疗肺癌的潜在作用通路.为了便于对富集分析的结果进行分析,本文对富集分析的结果进行了可视化,即利用微生信(b i o i n f o r m a t i c s)在线作图平台(h t t p:/www.b i o i n f o r m a t i c s.c o m.c n/)对P值最小的1 0个富集分析结果进行了作图.1.7 狼毒大戟对肺癌相关靶点的分子对接验证首先,在P P I网络中将自由度值排名前5的核心靶点T P 5 3(5 o 1 f)、T N F(7 j r a)、E G F R(5 u g 9)、S T AT 3(6 n j s)和MA P K 3(6 g e s)作为分子 对接的受体;然后,在药物 潜在活性成分 交集靶点中将自由度值排名前5的核心活性成分a r a u c a r o n e(L D 1 1,d=3 5)、e n t-1 3 S-h y d r o x y-1 6-a t i s e n e-3,1 4-d i o n e(L D 1 4,d=3 3)、e n t-3-(1 3 S)-d i h y d r o x y a t i s-1 6-e n-1 4-o n e(L D 8,d=3 1)、e n t-(1 3 S)-1 3-h y d r o x y a t i s-1 6-e n e-3,1 4-d i o n e(L D 1 8,d=3 1)、c a u d i c i f o l i n(L D 1 2,d=3 0)和4个已被证明具有抗肺癌活性的化学成分1 7-a c e t o x y-j o l k i n o l i d e B(L D 6,d=2 5)、i n g e n o l 3-m y r i s t i-n a t e(L D 3 6)、i n g e n o l3-p a l m i t a t e(L D 3 7)和1 7-h y d r o x y j o l k i n o l i d e B(L D 3 9)作为分子对接的配体;最后,将上述得到的潜在活性成分的2 D结构导入到C h e m 3 D中进行结构优化,由此得到能量最小的3 D结构.本文利用A u t o D o c k V i n a 1.1.2软件对配体和受体进行分子对接.在进行分子对接操作时,首先在A u t o D o c k T o o l中对配体和受体进行去水和加氢等操作,然后设置对接g r i d参数(L D 6-T P 5 3(c e n t e rx=1 1 5.5 7 7,c e n t e ry=8 7.1 3 1,c e n t e rz=-3 0.1 7 4;s i z ex=7 4.0,s i z ey=6 2.0,s i z ez=5 2.0);L D 3 6-E G F R(c e n t e rx=-2.1 0 9,c e n t e ry=1 8.8 0 8,c e n t e rz=-2 5.6 1 6;s i z ex=4 4.0,s i z ey=5 0.0,s i z ez=6 0.0);L D 3 7-E G F R(c e n t e rx=-2.1 0 9,c e n t e ry=1 8.8 0 8,c e n t e rz=-2 5.6 1 6;s i z ex=4 4.0,s i z ey=5 0.0,s i z ez=6 0.0);L D 3 9-MA P K 3(c e n t e rx=4 6.3 9 1,c e n t e ry=4.4 8,c e n t e rz=-8.1 1 6;s i z ex=8 7.0,s i z ey=6 8.0,s i z ez=1 0 2.0);对接次数为1 0次),最后运行V i n a进行分子对接.为了更直观地展示配体和受体的结合情况,本文采用P y m o l软件将对接结果进行了可视化(以3 D图的形式).1.8 操作流程本研究的具体操作流程见图2.图2 研究狼毒大戟治疗肺癌作用机制的流程图2 结果与分析2.1 潜在活性成分的筛选和靶点的预测结果利用S w i s s A DME数据库对已分离出的狼毒大戟中的化学成分进行筛选后得到3 8个潜在活771延边大学学报(自然科学版)第4 9卷 性成分,见表1.利用S w i s s T a r g e t P r e d i c t i o n数据库对狼毒大戟的潜在活性成分靶点进行预测,由此共得到1 4 9 3个靶点.表1 狼毒大戟的潜在活性成分序号 英文名L D 1(4S,8S)-2-p h e n a n t h r e n e c a r b o x y l i c a c i d,4,5,6,7,8,8,9,1 0-o c t a h y d r o-3-h y d r o x y-4,8,8-t r i m e t h y l-m e t h y l e s t e rL D 22,4-d i h y d r o x y-6-m e t h o x y a c e t o p h e n o n eL D 33-o x o a t i s a n e-1 6,1 7-d i o lL D 43-h y d r o x y-e n t-1 6-k a u r e nL D 51 5-h y d r o x y d e h y d r o a b i e t i c a c i dL D 61 7-a c e t o x y j o l k i n o l i d e BL D 72-p h e n a n t h r e n y l e t h a-n o n eL D 8e n t-3-(1 3 S)-d i h y d r o x y a t i s-1 6-e n-1 4-o n eL D 9a n t i q u o r i nL D 1 0 a r a u c a r o lL D 1 1 a r a u c a r o n eL D 1 2 c a u d i c i f o l i nL D 1 3 e b r a c t e n o i d FL D 1 4e n t-(1 3 S)-h y d r o x y-1 6-a t i s e n e-3,1 4-d i o n eL D 1 5e n t-t i s a n e-3,1 6,1 7-t r i o lL D 1 6e n t-k a u r a n e-3-o x o-1 6,1 7-d i o lL D 1 7e n t-(1 3 R,1 4 R)-1 3,1 4-d i h y d r o x y a t i s-1 6-e n-3-o n eL D 1 8e n t-(1 3 S)-1 3-h y d r o x y a t i s-1 6-e n e-3,1 4-d i o n eL D 1 9e n t-1 6-H-3-o x o k a u r a n-1 7-o lL D 2 0e n t-a t i s-1 6-e n e-3,1 4-d i o n eL D 2 1e n t-k a u r a n e-3,1 6,1 7-t r i o 1L D 2 2 e u p h o n o i d BL D 2 3 e u p h o n o i d CL D 2 4 e u p h o n o i d DL D 2 5 e u p h o n o i d EL D 2 6 e u p h o n o i d FL D 2 7 e u p h o n o i d GL D 2 8 f i s c h e r i a b i e t a n e AL D 2 9 h e l i o s c o p i n o l i d e AL D 3 0 i s o p i m a r a-7,1 5-d i e n-3-o n eL D 3 1 j o l k i n o l i d e AL D 3 2 j o l k i n o l i d e BL D 3 3 j o l k i n o l i d e EL D 3 4 l a n g d u i n DL D 3 5 1 2-d e o x y p h o r b o l 1 3-p a l m i t a t eL D 3 6 i n g e n o l 3-m y r i s t i n a t eL D 3 7 i n g e n o l 3-p a l m i t a t eL D 3 8 s y r i n g i c a c i d2.2 肺癌疾病靶点的收集结果利用G e n e C a r d s数据库、T T D药物靶标数据库和D r u g b a n k数据库检索肺癌疾病靶点,对所得的靶点进行去重后共得到1 5 6 1个靶点.2.3 交集靶点的预测结果将去 重 后 的4 1 9个 潜 在 活 性 成 分 靶 点 与1 5 6 1个肺癌疾病靶点进行韦恩分析后获得了1 3 9个交集靶点(占潜在活性成分靶点和疾病靶点总数的7.6%),如图3所示.图3 狼毒大戟的潜在活性成分靶点与肺癌疾病靶点的韦恩图2.4“药物 潜在活性成分 交集靶点”网络的构建结果利用C y t o s c a p e,以1 3 9个肺癌靶基因(作为抗癌靶点)和3 8个狼毒大戟的潜在活性成分(作为狼毒大戟抗肺癌的潜在活性成分)构建“药物潜在活性成分 交集靶点”网络图,结果如图4所示.图4中:绿色代表狼毒大戟,粉色代表狼毒大戟的潜在活性成分,紫色代表交集靶点;节点体积越大,表示自由度值越大,即其在治疗肺癌中的作用越大.由图4可见,图中共有1 7 6个节点,5 7 6条相互作用的边.由该网络可知,狼毒大戟治疗肺癌的核心活性成分为L D 1 1(d=3 5)、L D 1 4(d=3 3)、L D 1 8(d=3 1)、L D 8(d=3 1)、L D 1 2(d=3 0)、L D 1 0(d=2 7)、L D 1 6(d=2 6)、L D 2 0(d=2 6)、L D 6(d=2 5)和L D 9(d=2 5).2.5 P P I网络的分析结果首先将1 3 9个交集靶点导入到S T R I NG数据库中,以此获取肺癌疾病的蛋白互作信息和构建P P I网络图.为了更直观地展示P P I网络的结果,本文利用C y t o s c a p e软件对P P I网络图进行了筛选和优化,并将蛋白按自由度值从大到小进行了排序(见图5).由图5可见,P P I网络图中含有1 3 9个相互作用的节点,2 0 7 4条相互作用的边,平均节点度为2 9.8.由图5得出的核心靶点见表2.871 第2期孙悦,等:基于网络药理学和分子对接技术探讨狼毒大戟治疗肺癌的作用机制图4“药物 潜在活性成分 交集靶点”网络图图5 按自由度值大小排列的P P I网络图表2 核心靶点的名称及其相关信息序号靶点名称自由度接近中心性 介度中心性1T P 5 31 0 10.7 81 4 1 2.1 12T N F8 80.7 31 1 0 5.0 63E G F R8 70.7 28 1 7.1 34S T A T 38 50.7 26 0 9.5 45MA P K 38 20.7 07 2 8.4 86J UN8 20.7 05 0 3.3 97S R C7 80.6 85 0 2.0 18E S R 17 70.6 91 0 0 7.5 19H I F 1 A7 50.6 73 4 1.8 31 0C C N D 17 40.6 73 8 8.9 72.6 G O富集和K E G G富集的分析结果GO富集包括生物过程(b i o l o g i c a l p r o c e s s,B P)、细胞组分(c e l l u l a r c o m p o n e n t,C C)、分子功能(m o l e c u l a r f u n c t i o n,MF)3部分.对潜在活性成分与肺癌疾病的交集靶点进行GO富集分析显示:B P共有1 6 8 4个条目(P0.0 5),主要涉及蛋白磷酸化、对激素反应、细胞迁移的正调节等;C C共有7 8个条目(P0.0 5),主要涉及薄膜筏、膜微区部分等;MF共有1 6 1个条目(P0.0 5),主要涉及蛋白激酶活性、蛋白质丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性和磷酸转移酶活性等.图6为对狼毒大戟进行GO富集分析得到的三合一柱状图.由图6可以看出,狼毒大戟可通过调控多种生物学过程来发挥其治疗肺癌的作用.对潜在活性成分与肺癌疾病的交集靶点进行K E G G富集分析显示,其共有1 8 2条K E G G条目(P0.0 5).图7为对狼毒大戟进行K E G G富集分析得到的气泡图(图中的圆点越大,表示在通路上富集的靶点越多;图中的圆点越红,表示P值越小).由图7可知,交集靶点主要富集在癌症通路、AG E-R AG E信号通路、P I 3 K-A k t信号通路以及癌细胞的蛋白聚糖的表达上.2.7 肺癌相关靶点的分子对接结果的验证研究1 8-1 9表明,结合能越低表明配体受体的结合构象越稳定.图8为核心活性成分与靶点分子对接的结合能图(图中的颜色块越红,表示结971延边大学学报(自然科学版)第4 9卷 合能的值越小,即结合效果越好).由图8可以看出,根据分子对接所选取的核心活性成分与核心靶点的结合能均小于-5.0k J/m o l,由此说明这些成分与靶点形成了良好的对接.图6 G O富集分析的三合一柱状图图7 K E G G富集分析的气泡图081 第2期孙悦,等:基于网络药理学和分子对接技术探讨狼毒大戟治疗肺癌的作用机制图8 核心活性成分与靶点分子对接的结合能图由图9可以看出,L D 1 2-T P 5 3中的L D 1 2与T P 5 3中的ME T 7 9 3和C Y S 7 9 7,L D 3 9-T P 5 3中的L D 3 9与T P 5 3中 的THR-2 5 6、A R G 2 6 7、S E R 9 9,L D 3 9-MA P K 3中的L D 3 9与MA P K 3中的A L A 3 6 9和P R O 3 1 5,L D 3 9-S T A T3中的L D 3 9与S T A T3中的A L A 2 4 1和A S N 4 8 5,L D 3 9-E G F R中 的L D 3 9与E G F R中 的A L A 7 2 2、A S N 8 4 2、A R G 8 4 1,L D 3 9-T N F中的L D 3 9与T N F中的P R O 1 7 6、G L U 1 9 2都各形成了1条氢键.由此进一步表明,狼毒大戟的核心活性成分与核心靶点形成了良好的对接.图9肺癌靶点分子对接的3 D图(A为L D 1 2-E G F R;B为L D 3 9-T P 5 3;C为L D 3 9-T N F;D为L D 3 9-E G F R;E为L D 3 9-S T A T 3;F为L D 3 9-MA P K 3)研究表明:T P 5 3为抑癌基因2 0-2 1,且其高表达对癌 基 因B I R C 5具 有 明 显 的 抑 制 作 用2 2;T N F-可促进T h 9细胞的生长(T h 9具有抗肿瘤的作用)2 3-2 4;E G F R可通过I L-6/S T AT 3信号通路对肺癌细胞的增殖和凋亡产生影响2 5-2 6;S T AT 3对肺癌具有明显的抑制作用2 7-2 8.在图8中,由于L D 1 2与E G F R的结合能最低(为-3 6.8k J/m o l),因此可推测狼毒大戟极有可能通过影响I L-6/S T AT 3信号通路发挥其抗肺癌活性.3 结论本研究利用网络药理学和分子对接技术探讨了狼毒大戟治疗肺癌的作用机制,研究结果表明:狼毒大戟的抗癌作用主要是通过其a r a u c a r o n e、e n t-1 3 S-h y d r o x y-1 6-a t i s e n e-3,1 4-d i o n e、e n t-3-(1 3 S)-d i h y d r o x y a t i s-1 6-e n-1 4-o n e、e n t-(1 3 S)-1 3-h y d r o x y a t i s-1 6-e n e-3,1 4-d i o n e和c a u d i c i f o l i n等核心活性成分与T P 5 3、T N F、E G F R、S T AT 3、MA P K 3等靶点共同作用(通过调节癌症通路、A G E-R A G E信号通路、P I 3 K-A k t信号通路以及抑制癌细胞的蛋白聚糖的表达)来实现的.本研究可为后续深入研究狼毒大戟在肺癌治疗中的应用提供良好参考.但由于网络药理学和分子对接技术存在一定的局限性,所以在今后的研究中我们将通过实验对其作用机制做进一步探讨.参考文献:1 S I E G E L R L,M I L L E R K D,J EMA L A.C a n c e r s t a t i s t i c s,2 0 2 0J.A C a n c e r J o u r n a l f o r C l i n i-c i a n s,2 0 2 0,7 0(1):7-3 0.2 L I Y N,HE J,Z HANG J,e t a l.E x i s t i n g k n o w l e d g e o n E u p h o r b i a f i s c h e r i a n a S t e u d(E u p h o r b i a c e a e):T r a d i t i o n a l u s e s,c l i n i c a l a p p l i c a t i o n s,p h y t o c h e m i s-t r y,p h a r m a c o l o g y a n d t o x i c o l o g yJ.J o u r n a l o f E t h n o p h a r m a c o l o g y,2 0 2 1,2 7 5:1 1 4 0 9 5.3 WAN G C,Z HANG X,YAN X,e t a l.C h e m i c a l p r o-f i l i n g o f E u p h o r b i a f i s c h e r i a n a S t e u d b y UHP L C-Q/T O F-M SJ.J o u r n a l o f P h a r m a c e u t i c a l a n d B i o m e d i c a l A n a l y s i s,2 0 1 8,1 5 1:1 2 6-1 3 2.4 王晓阳,康廷国,孟宪生.狼毒大戟萜类化学成分及抗肿瘤活性研究进展 J.中华中医药学刊,2 0 2 1,3 9(8):3 0-3 5.5 S UN C,C U I H,YANG H,e t a l.A n t i-m e t a s t a t i c e f f e c t o f j o l k i n o l i d e B a n d t h e m e c h a n i s m o f a c t i v i t y 181延边大学学报(自然科学版)第4 9卷 i n b r e a s t c a n c e r MD A-MB-2 3 1 c e l l sJ.O n c o l o g y L e t t e r s,2 0 1 5,1 0(2):1 1 1 7-1 1 2 2.6 L I N Y,C U I H,X U H,e t a l.J o l k i n o l i d e B i n d u c e s a p o p t o s i s i n MD A-MB-2 3 1 c e l l s t h r o u g h i n h i b i t i o n o f t h e P I 3 K/A k t s i g n a l i n g p a t h w a yJ.O