基因修饰小鼠实验室生物安全管理体系建设.pdf

第卷 第期 年月 实 验 教 学 示 范 中 心 建 设：基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 建 设王 芊 芊，刘冲，傅军，陈 若 宁，刘 迪 文，汪洌，（浙 江 大 学实 验 动 物 中 心；医 学 院，杭 州）摘要：随 着 中 华 人 民 共 和 国 生 物 安 全 法 的 实 施，实 验 室 生 物 安 全 问 题 越 来 越 受到 关 注。基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 属 于 复 杂、综 合 性 实 验 室，在 生 物 安 全 管 理 方 面 难 度较 大。现 结 合 基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室，分 析 基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 在 建 设 使 用 中 存 在的 生 物 安 全 风 险，介 绍 了 实 验 室 在 生 物 安 全 管 理 体 系 建 设 中 的 实 践 经 验，包 括 管 理组 织 构 架、制 度 建 设、监 督 机 制、人 员 培 训 等 方 面 的 内 容，为 高 校 同 类 型 实 验 室 安 全管 理 提 供 借 鉴 和 参 考。关 键 词：基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室；生 物 安 全；风 险 评 估；安 全 管 理中 图 分 类 号：；文 献 标 志 码：文 章 编 号：（），（；，）：，：；收 稿 日 期：基 金 项 目：国 家 杰 出 青 年 科 学 基 金 项 目（）作 者 简 介：王 芊 芊（），女，湖 北 荆 州 人，硕 士，中 级，主 要 研 究方 向 为 基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 运 行 和 维 护，基 因 修 饰 小 鼠 研 制 技 术，小 鼠生 物 净 化，小 鼠 胚 胎 冷 冻 复 苏 等。：；：通 信 作 者：汪洌（），男，浙 江 杭 州 人，博 士，教 授，实 验 动 物中 心 主 任，主 要 研 究 方 向 为 免 疫 学。：；：引言自年月日，中 华 人 民 共 和 国 生 物 安 全法 正 式 施 行，预 示 着 生 物 安 全 自 此 由 规 范 约 束 上升 到 法 律 约 束 的 高 度。生 物 安 全 是 指 国 家 有 效 防 范 和应 对 危 险 生 物 因 子 及 相 关 因 素 威 胁，生 物 技 术 能 够 稳定 健 康 发 展，人 民 生 命 健 康 和 生 态 系 统 相 对 处 于 没 有危 险 和 不 受 威 胁 的 状 态，生 物 领 域 具 备 维 护 国 家 安 全和 持 续 发 展 的 能 力。实 验 室 生 物 安 全 是 指 以 实 验室 为 科 研 和 工 作 场 所 时，实 验 室 的 生 物 安 全 条 件 和 状态 不 低 于 容 许 水 平，避 免 危 险 生 物 因 子 造 成 实 验 室 人员 暴 露，向 实 验 室 外 扩 散 并 导 致 危 害 的 综 合 措 施。基 因 修 饰 小 鼠 模 型 在 生 物 学、基 础 医 学、肿 瘤 学、新 药 研 发 和 疾 病 治 疗 等 诸 多 领 域 已 显 示 出 其 优 势 与 应用 前 景。基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 的 建 设 也 方 兴 未艾，相 比 于 发 展 基 因 修 饰 技 术，实 验 室 生 物 安 全 一 直 是第期王 芊 芊，等：基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 建 设容 易 被 忽 视 的 问 题。近 年 来，多 起 生 物 类 科 研 院 所 和高 校 实 验 室 引 发 的 生 物 安 全 事 件 已 严 重 威 胁 甚 至 危 害到 公 众 的 生 命 安 全，因 此 建 立 健 全 基 因 修 饰 实 验 室 生物 安 全 管 理 系 统 迫 在 眉 睫。基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 从 性质 上 并 不 属 于 单 一 结 构 的 实 验 室，其 涵 盖 分 子 生 物 学、细 胞 生 物 学、小 鼠 胚 胎 操 作 和 基 因 修 饰 小 鼠 饲 养 繁 育实 验 室 等 功 能 区 块，属 于 综 合 性 实 验 室，在 管 理 上 难 度更 大，所 面 临 的 生 物 安 全 风 险 相 较 于 单 一 功 能 实 验 室更 高。以 结 合 基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室，在 生 物 安 全 管 理体 系 建 设 中 的 管 理 组 织 构 架、制 度 建 设、风 险 评 估、监督 机 制 和 人 员 培 训 等 方 面 进 行 了 有 益 探 索，以 期 为 同类 型 实 验 室 生 物 安 全 管 理 提 供 一 定 的 借 鉴 和 参 考。基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 风 险 评 估 基 因 编 辑 技 术 的 风 险许 多 人 工 重 组分 子 都 存 在 着 生 物 安 全 危 害。例 如 用 于 重 组 和 扩 增分 子 的 大 肠 杆 菌 可 能 与 其他 细 菌 的 基 因 信 息 发 生 交 换，而 其 中 的 某 些 细 菌 对 人类 是 具 有 致 病 性 的。再 如，将 全 部 或 部 分 癌 基 因片 段 连 接 到 细 菌 质 粒 上，这 种 重 组 的分 子 很 可 能更 易 在 人 类 或 其 他 物 种 中 传 播，从 而 增 加 患 癌 或 其 他疾 病 的 风 险。此 外，在 操 作 重 组 微 生 物 的 工 作 中，还 需 要 考 虑 的 风 险 包 括 插 入 基 因 编 码 是 一 种 已 知 的 毒素 还 是 相 对 特 征 不 明 的 毒 素？修 饰 作 用 是 改 变 宿 主 的类 别 还 是 病 毒 的 细 胞 趋 向 性？修 饰 作 用 能 否 增 加 病 毒的 复 制 能 力？插 入 基 因 能 否 改 变 细 胞 周 期？等，。由 于 科 学 界 对 基 因 修 饰 技 术 的 担 忧 促 使年对 重 组分 子 研 究 指 南 的 开 发。指 南 同 时 指 导 成立 了 生 物 安 全 委 员 会（，），对 使 用 重 组 或 人 工 合 成 技 术 的 研 究 进 行 审 核 和监 督，并 对 研 究 人 员 在 设 计 基 因 治 疗 的 实 验 给 出 总 体框 架。在 我 国，使 用 基 因 编 辑 技 术 必 须 遵 照 生物 安 全 法 和 基 因 工 程 安 全 管 理 办 法 等 法 律 法 规，并 在 实 验 开 展 前 通 过 实 验 动 物 福 利 伦 理 审 查。通 过 基 因 工 程 技 术 研 制 基 因 修 饰 小 鼠 的 风 险通 过 基 因 工 程 技 术 研 制 对 特 定 病 原 体 易 感 的 基 因修 饰 小 鼠 存 在 很 大 的 风 险。例 如，利 用转 基 因小 鼠 研 究 新 型 冠 状 病 毒（）的 感 染 机 制、疫 苗开 发 和 治 疗。在 造 模 以 及 后 续 的 研 究 中 稍 有 不慎 都 极 有 可 能 感 染 研 究 人 员 或 进 而 危 害 公 共 安 全。不涉 及 感 染 性 基 因 修 饰 小 鼠 的 实 验 绝 不 意 味 着 就 不 存 在生 物 安 全 的 风 险。基 因 修 饰 小 鼠 主 要 可 分 为 转 基 因 小鼠 和 基 因 敲 除敲 入 小 鼠，分 别 是 通 过 基 因 工 程 的 手 段将 一 段 外 源 基 因 片 段 导 入 小 鼠 生 殖 细 胞、胚 胎 干 细 胞或 早 期 胚 胎 中，使 其 整 合 进 小 鼠 基 因 组 中 并 使 其 表 达某 一 遗 传 性 状 和 通 过 同 源 重 组 原 理 敲 除敲 入 某 一 个或 某 一 段 特 定 基 因 片 段 使 其 丧 失 或 获 得 某 些 遗 传 性状。基 因 敲 除 小 鼠 一 般 不 表 达 特 殊 的 生 物 危 害，而 转基 因 小 鼠 和 基 因 敲 入 小 鼠 因 引 入 外 源 的 基 因 片 段，会表 达 不 同 于 野 生 型 小 鼠 的 外 源 基 因 的 蛋 白，这 些 蛋 白是 否 会 对 人 类 产 生 威 胁？基 因 在 不 同 物 种 间 的 漂 移 会破 坏 野 生 近 缘 种 的 遗 传 多 样 性，如 果 基 因 修 饰 小 鼠 逃逸 很 有 可 能 污 染 野 生 型 小 鼠 的 基 因 库 也 是 很 大 的 风险。此 外 还 有 增 加 人 畜 共 患 病 的 传 播 机 会，甚 至 给 人类 带 来 灾 难 性 的 后 果，。因 此，基 因 编 辑 技 术 和 基 因 修 饰 小 鼠 研 制 存 在 着一 定 的 生 物 安 全 风 险，需 制 定 详 细 地 审 核 和 监 督 机 制。故 实 验 室 在 应 用 基 因 编 辑 技 术 之 前 必 须 通 过 学 校 实 验动 物 福 利 伦 理 审 查 委 员 会 的 审 批（该 委 员 会 审 核 范 围包 含 了 生 物 安 全 相 关 内 容），获 批 后 方 可 开 展 相 应 的实 验，且 委 员 会 会 对 全 实 验 流 程 进 行 监 督。基 因 修 饰 小 鼠 运 输、饲 养、繁 育 及 实 验 中 的 生 物安 全 风 险基 因 修 饰 小 鼠 的 进 口、引 种 和 运 输 以 及 到 达 动 物饲 养 设 施 后 的 隔 离 检 疫 过 程 中 都 有 可 能 存 在 感 染 未 知病 原 微 生 物 的 风 险。在 基 因 修 饰 小 鼠 的 运 输 中，要 特别 注 意 运 输 盒 的 牢 固 性，以 免 基 因 修 饰 小 鼠 逃 逸，并 制定 相 应 的 动 物 逃 逸 处 理 应 急 预 案。基 因 修 饰 小 鼠 饲 养及 繁 育 过 程 中，小 鼠 本 身 的 活 动 会 产 生 气 溶 胶，饲 养 人员 更 换 小 鼠 笼 盒 时，会 吸 入 大 量 的 气 溶 胶。如 果 基 因修 饰 小 鼠 被 病 原 微 生 物 污 染，则 可 能 感 染 实 验 人 员。动 物 实 验 活 动 中 可 能 会 出 现 特 别 的 生 物 安 全 问 题，如实 验 人 员 可 能 会 被 小 鼠 抓 伤 或 咬 伤，或 因 实 验 中 操作 不 当 受 到 的 伤 害。因 此，基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 从 动物 引 种、运 输、饲 养、繁 育 和 研 制 直 至 实 验 动 物 人 道 终点 都 必 须 建 立 全 流 程、严 格 的 管 理 制 度。基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 的建 立 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 的 建 立 是 一 个 系 统 性 工程，必 须 符 合年 颁 布 的 国 标 实 验 室 生 物 安 全 通用 要 求 （）。在 体 系 的 建 立 和 维 护 过程 中，要 随 时 根 据 国 家 相 关 法 律、法 规 和 标 准 的 变 化，以 及 卫 生 行 政 主 管 部 门 的 要 求 予 以 修 订，在 此 基 础 上还 可 以 参 考实 验 室 生 物 安 全 手 册 等 资 料。单 位 和 实 验 室 领 导 对 于 实 验 室 安 全 管 理 体 系 建 立、机构 设 置 和 职 能 划 分 以 及 资 源 配 置 等 起 着 决 定 性 作 用。实 验 室 生 物 安 全 最 高 管 理 者 应 确 定 方 针 和 目 标。建 立 相 对 完 善 的 基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 生 物 安 全管 理 体 系基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 是 学 校 大 型 公 共 技 术 服 务 平台，由 医 学 院 和 实 验 动 物 中 心（以 下 简 称“中 心”）共建。生 物 安 全 管 理 工 作 分 为个 层 级。第级 学校 成 立 有 实 验 室 技 术 安 全 管 理 办 公 室，管 理 全 校 的 实第卷验 室 安 全，包 括 实 验 室 生 物 安 全；第级 是 实 验 室 所 属的 医 学 院 的 实 验 室 技 术 安 全 管 理 办 公 室，由 院 长 为 第一 责 任 人；第级 即 为 实 验 室，由 实 验 动 物 中 心 主 任 负责。中 心 主 任 在 充 分 掌 握 国 家 相 关 法 规 和 标 准 的 要 求下，负 责 制 定 实 验 室 制 度 和 管 理 实 验 室 所 有 的 实 验 活动，并 明 确 实 验 室 的 组 织 构 架 和 其 他 部 门 的 关 系；负 责定 期 组 织 人 员 参 加 安 全 培 训 并 制 定 监 督 健 康 计 划；保障 实 验 室 所 有 安 全 设 施 设 备 的 落 实 到 位 和 定 期 检 修；确 保 所 有 实 验 人 员 熟 悉 并 掌 握 实 验 流 程，了 解 所 有 可能 存 在 的 生 物 安 全 风 险。中 心 主 任 指 定名 实 验 室 技术 负 责 人，负 责 提 交 实 验 计 划 和 安 全 评 估 报 告 并 负 责实 验 室 所 有 实 验 项 目 的 具 体 实 施。另 外 指 定名 安 全负 责 人，负 责 监 督 实 验 室 的 一 切 实 验 活 动 是 否 存 在 安全 风 险 并 有 权 阻 止 一 切 不 安 全 的 实 验 行 为（见 图）。图基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 构 架 编 制 基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系文 件按 照 生 物 安 全 管 理 体 系 文 件 的 框 架 依 次 编 写 实 验室 生 物 安 全 管 理 手 册（包 含 组 织 构 架、人 员 职 责、生 物安 全 管 理 方 针 和 目 标、管 理 责 任 和 个 人 责 任 等 内 容）、实 验 室 程 序 文 件（含个）、标 准 操 作 程 序（份 操 作规 程 和 规 范）以 及 生 物 安 全 记 录 表 格（共项）和 应急 预 案（见 表）。实 验 室 生 物 安 全 管 理 手 册 由 实验 动 物 中 心 主 任 审 核 后 实 施，并 根 据 实 验 室 实 际 运 行情 况 定 期 修 订。基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 的 设 计 与 管 理 实 验 室 的 设 计分 子 细 胞 学 实 验 室 主 要 功 能 是 完 成 基 因 修 饰 小 鼠研 制 的 上 游 和 下 游 实 验，包 括 载 体 构 建、载 体 的 验 证、细 胞 培 养 和 传 代、打 靶细 胞 的 筛 选 和 基 因 修 饰小 鼠 的 基 因 型 鉴 定 等 工 作。实 验 室 属 于 生 物 安 全级实 验 室，设 计 符 合的 建 设 要 求，根 据 主 要 实验 内 容 进 行 必 要 的 分 区：样 本 制 备 区、试 剂 配 置 区、清洗 灭 菌 区、试 剂 存 放 区 和区。小 鼠 饲 养 和 胚 胎 操 作 实 验 室 设 置 在 中 心 的 屏 障 系统 内，使 用 许 可 证 编 号：（浙）。属 于 动物 生 物 安 全级 实 验 室，符 合的 建 设 要求。屏 障 区 域 为走 廊 设 计，采 用级 空 气 过 滤系 统（初、中、高 效 空 气 过 滤 器），屏 障 内 空 气 可 达 万 级净 化 标 准。所 有 实 验 小 鼠 均 为级 小 鼠，并 采 用 独立 通 气 式 笼 具（，）饲 养。饲 料 经辐 照，饮 水 采 用，高 温 高 压 的灭 菌。屏 障 内 设 置 监 控 系 统，接 入 中 心 监 控 室，除 第 一更 衣 室、第 二 更 衣 室 和 风 淋 室 外，每 间 实 验 室 和 走 廊 均为 监 控 全 覆 盖。实 验 室 安 全 防 护 设 备 配 置分 子 细 胞 学 实 验 室 配 有 应 急 喷 淋 和 洗 眼 设 备，小鼠 饲 养 和 胚 胎 操 作 实 验 室 的 生 物 安 全 防 护 设 备 主 要 有生 物 安 全 柜 和 脉 动 真 空 压 力 蒸 汽 灭 菌 器。灭 菌 器 每 年由 杭 州 市 特 种 设 备 检 测 研 究 院 检 测 并 出 具 质 检 报 告。每 半 年 由 中 心 兽 医 团 队 用压 力 蒸 汽 灭 菌 生 物 培养 指 示 剂 对 实 际 压 力 蒸 汽 灭 菌 效 果 进 行 生 物 监 测。个 人 防 护 装 备 主 要 有 防 静 电 全 身 隔 离 衣、手 套、医用 外 科 口 罩、口 罩、面 罩、护 目 镜 和 厚 底 工 作 鞋 等。实 验 室 安 全 员 会 定 期 检 查 和 更 换 所 有 的 防 护 设 备 和 个人 防 护 装 备。实 验 室 消 毒 与 卫 生 管 理实 验 室 和 屏 障 设 施 初 效 过 滤 器 每 月 更 换 一 次，中效 过 滤 器 每个 月 更 换 一 次，高 效 过 滤 器 每 年 定 期 更换 一 次。每 天 至 少 用 消 毒 药 水 全 面 消 毒 一 次 分 子 实 验室 工 作 台 面，清 洁 实 验 室 地 面，所 用 的 消 毒 剂 根 据 潜 在微 生 物 的 类 别 使 用乙 醇 或 次 氯 酸 钠 等。实 验 过 程 中 如 有 活 性 物 质 溅 出 要 及 时 清 理 并 消 毒，所有 操 作 参 照 浙 大 实 验 动 物 中 心 编 制 的“分 子 细 胞 生 物学 实 验 室 洗 涤、污 物 处 理 操 作 规 程”（）。实 验 小 鼠 饲 养 台 面 在 操 作 前 后 均 需 用 消 毒 剂 擦拭，饲 养 间 每 天 需 用 消 毒 水 拖 地，定 期 擦 拭 墙 面 和 顶面，消 毒 剂 需 轮 换 使 用 以 防 长 期 使 用 同 一 种 消 毒 剂 导致 细 菌 产 生 耐 药 性。所 有 操 作 参 照 浙 大 实 验 动 物 中 心编 制 的“屏 障 系 统 的 日 常 卫 生 与 消 毒 的 操 作 规 程”（）。新 的笼 架 运 至 中 心 后，在 特 定房 间 内 进 行 过 氧 化 氢 消 毒 后 推 至 屏 障 系 统 内。所 有 饲养 实 验 小 鼠 的笼 架 和 主 管 道 每个 月 全 面 清 洗 消毒。所 有 操 作 参 照 浙 大 实 验 动 物 中 心 编 制 的“实 验 小鼠笼 架 清 洗 消 毒 的 操 作 规 程”（）。实 验 室 仪 器 和 试 剂 的 安 全 管 理为 加 强 实 验 室 仪 器 设 备 和 试 剂 管 理，实 验 室 设 置专 人 管 理 所 有 的 仪 器 设 备，负 责 试 剂 耗 材 的 采 购 和 保第期王 芊 芊，等：基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 建 设表浙 江 大 学 基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 生 物 安 全 管 理 手 册 目 录序 号 生 物 安 全 管 理 手 册实 验 室 程 序 文 件实 验 室 标 准 操 作 程 序（）生 物 安 全 记 录 表 格组 织 构 架实 验 室 生 物 安 全 管 理 程 序生 物 安 全 柜 操 作 规 程实 验 活 动 安 全 监 督 记 录 表管 理 责 任风 险 评 估 与 控 制 程 序超 净 工 作 台 操 作 规 程上 岗 人 员 考 核 记 录 表人 员 职 责实 验 人 员 安 全 培 训 程 序 台 式 超 速 离 心 机 操 作 规 程实 验 室 人 员 生 物 安 全 培 训 记 录 表文 件 控 制文 件 控 制 程 序二 氧 化 碳 培 养 箱 操 作 规 程实 验 室 人 员 个 人 素 质 评 价 表安 全 计 划实 验 室 安 全 计 划 程 序小 型 高 压 灭 菌 器 操 作 规 程生 物 因 子 生 物 安 全 风 险 评 估 评 审 记录 表生 物 安 全 监 督 检 查 制 度 实 验 室 检 查 程 序液 氮 生 物 容 器 操 作 规 程实 验 室 常 用 试 剂 目 录 和 分 类 表不 符 合 项 的 识 别 与 控 制 不 符 合 项 的 识 别 与 控 制程 序自 动 凝 胶 成 像 系 统 操 作 规 程实 验 室 危 险 化 学 品 购 买 记 录 表内 部 审 核内 部 审 核 程 序小 鼠 基 因 型 鉴 定 操 作 程 序实 验 室 危 险 化 学 品 取 用 记 录 表实 验 人 员 管 理实 验 室 人 员 管 理 程 序分 子 细 胞 生 物 学 实 验 室 洗 涤、污 物 处 理操 作 规 程实 验 室 仪 器 设 备 维 护 记 录 表实 验 材 料 管 理实 验 室 材 料 管 理 程 序屏 障 系 统级 实 验 动 物 饲 养 管 理 操 作规 程实 验 废 弃 物 交 接 记 录 表实 验 活 动 管 理实 验 活 动 管 理 程 序屏 障 系 统 的 日 常 卫 生 与 消 毒 操 作 规 程 实 验 废 弃 物 处 置 记 录 表实 验 室 内 务 管 理实 验 室 内 务 管 理 程 序屏 障 系 统 消 毒 液 的 配 制 与 使 用 方 法 操 作规 程实 验 小 鼠 尸 体 处 置 记 录 表废 弃 物 管 理废 弃 物 处 置 程 序屏 障 系 统 内 动 物 房 设 施 每 日 巡 查 操 作规 程实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 文 件 发 放回 收 登 记 表危 险 材 料（生 物 材 料）管 理危 险 材 料 运 输 程 序屏 障 系 统 内 空 气 过 滤 材 料 的 更 换 操 作规 程实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 文 件 销 毁 记录 表应 急 措 施紧 急 处 置 程 序实 验 动 物 进 出 屏 障 设 施 操 作 规 程实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 内 审 报 告消 防 安 全 管 理消 防 安 全 管 理 程 序基 因 修 饰 小 鼠 隔 离 检 疫 操 作 规 程实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 内 审 不 符 合项 汇 总 表事 故 报 告事 故 报 告 程 序基 因 修 饰 小 鼠 生 物 净 化 操 作 规 程实 验 室 改 进 措 施 要 求 及 实 施 情 况 表实 验 方 法 管 理 程 序实 验 人 员 进 出 屏 障 设 施 操 作 规 程实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 内 审 检 查 表实 验 人 员 防 护 程 序物 品 进 出 屏 障 设 施 与 流 转 的 操 作 规 程 实 验 室 安 全 事 故（事 件）登 记 表实 验 室 设 施 设 备 管 理 程 序中 心 不 同 区 域 间 人 员 与 实 验 动 物 流 动 控制 的 操 作 规 程实 验 室 意 外 事 故（事 件）记 录 表仪 器 设 备 维 修 保 养 安 全程 序高 压 蒸 汽 灭 菌 器 操 作 规 程实 验 室 生 物 安 全 自 查 登 记 表安 全 操 作 利 器 及 有 关 装 置程 序高 压 蒸 汽 灭 菌 器 生 物 指 示 剂 验 证 标 准 操作 程 序滤 器 的 更 换 与 消 毒程 序屏 障 系 统 传 递 舱 的 操 作 规 程未 知 风 险 材 料 操 作 程 序 实 验 小 鼠使 用 与 清 洗 消 毒 操 作 规 程实 验 室 标 识 管 理 程 序小 型 动 物 运 输 盒 灭 菌 操 作 规 程实 验 动 物 饲 料 与 垫 料 质 量 控 制 操 作 规 范实 验 动 物 饲 料 与 垫 料 的 储 存 与 使 用 操 作规 范常 规 药 品、生 物 试 剂 使 用 管 理 规 范虫 害 鼠 害 防 治 规 范实 验 动 物 健 康 监 测 与 定 期 检 测 标 准 操 作规 范实 验 动 物 人 道 终 点、安 乐 死 与 尸 体 处 理操 作 规 程屏 障 设 施 内 实 验 动 物 健 康 与 福 利 监 控规 范第卷管。建 立 实 验 室 仪 器 设 备 台 账，对 供 电 的 仪 器 采取 双 路 供 电，且 连 接 报 警 系 统。分 子 生 物 学 所 涉 及 的试 剂 复 杂 多 样、危 害 性 强，很 多 都 具 有 强 腐 蚀 性、毒 性和 致 畸 性。因 此 实 验 室 建 有 试 剂 目 录 和 分 类 表（），整 理 了 各 种 实 验 试 剂 的 理 化 特性、使 用 注 意 事 项 和 存 储 要 求 等 信 息。设 有 专 人 负 责试 剂 订 购、分 类 和 发 放 工 作。对 于 像 溴 化 乙 啶 等 毒 性强、有 致 癌 性 的 试 剂 有 专 用 存 储 柜。实 验 室 所 用 的 危险 化 学 品 均 为 双 人 双 锁 保 管，并 有 购 买、取 用 记 录（，）。实 验 小 鼠 疾 病 预 防 控 制实 验 小 鼠 的 饲 养 和 繁 育 要 严 把 实 验 动 物 质 量 关，严 防 人 畜 共 患 病。措 施 主 要 包 括：中 心 对 实 验 动 物供 应 商 通 过 问 卷 调 查 和 实 地 考 察 的 方 式 进 行 审 核 和 评价，不 定 期 对 供 应 商 的 产 品 进 行 抽 样 检 查。对 引 入中 心 的 实 验 小 鼠 有 严 格 的 质 量 审 核、隔 离 检 疫 和 生 物净 化 等 流 程。参 照 浙 大 实 验 动 物 中 心 编 制 的“实 验 动物 进 出 动 物 设 施 操 作 规 程”（）、“基 因 修饰 小 鼠 隔 离 检 疫 操 作 规 程”（）和“基 因修 饰 小 鼠 生 物 净 化 操 作 规 程”（）。对屏 障 内 日 常 饲 养 的 实 验 小 鼠 定 期 进 行 微 生 物 质 量 监测，参 照 国 标“实 验 动 物 微 生 物 学 等 级 及 监 测”（）。实 验 人 员 管 理 与 培 训 实 验 人 员 资 质 管 理实 验 室 实 验 人 员 管 理 依 托 于 浙 江 大 学 实 验 动 物 中心。人 员 招 聘 严 格 按 照 浙 江 大 学 事 业 性 质 岗 位 聘 用 人才（劳 务）派 遣 员 工 操 作 程 序。所 有 实 验 人 员 均 具 有分 子 生 物 学、细 胞 生 物 学、医 学、实 验 动 物 学、动 物 医 学和 微 生 物 学 等 相 关 学 科 的 专 业 背 景，入 职 后 经 专 业 技术 培 训 后 方 可 上 岗。在的 工 作 人 员 均 通 过 浙江 省 实 验 动 物 技 术 人 员 培 训 并 获 得 合 格 证。操 作 脉 动真 空 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 的 工 作 人 员 需 取 得 中 华 人 民 共和 国 特 种 设 备 作 业 人 员 证 ，持 证 上 岗。实 验 室名技 术 人 员 已 参 加 由 杭 州 市 卫 生 健 康 委 员 会 组 织 的年 杭 州 市 病 原 微 生 物 实 验 室 生 物 安 全 培 训 班 并已 通 过 考 试，成 绩 合 格。实 验 人 员 进 出 管 理分 子 细 胞 生 物 学 实 验 室 工 作 人 员 经 培 训 授 权 持 有门 禁 卡，凭 本 人 门 禁 卡 进 出 实 验 室。屏 障 区 域 采 取 封闭 式 管 理，出 入 口 处 及 屏 障 内 每 个 房 间 均 设 有 门 禁 系统，实 验 技 术 人 员 培 训 获 得 中 心 指 纹 权 限 和 门 禁 密 码，凭 本 人 指 纹 和 门 禁 密 码 进 出 屏 障 系 统 内 的 实 验 室。实验 人 员 进 出 屏 障 系 统 必 须 严 格 按 照 浙 大 实 验 动 物 中 心编 制 的“实 验 人 员 进 出 屏 障 设 施 操 作 规 程”（）进 行 个 人 防 护 装 备 的 穿 戴 与 更 换。实 验 人 员 健 康 管 理实 验 室 新 进 人 员 入 职 前 需 完 成 入 职 健 康 体 检，对于 有 相 应 疾 病 或 对 动 物 毛 发 过 敏 等 不 适 宜 从 事 实 验 动物 饲 养 管 理 和 操 作 的 人 员，中 心 人 事 部 门 将 及 时 调 整其 工 作 岗 位。实 验 室 所 有 工 作 人 员 每 年 至 少 进 行 一 次体 检，并 建 立 员 工 健 康 档 案。实 验 人 员 培 训 管 理绝 大 多 数 实 验 室 生 物 安 全 事 故 发 生 的 根 本 原 因 在于 缺 乏 生 物 安 全 意 识 和 疏 于 管 理。有 调 查 表 明，很 多受 访 大 学 生 不 了 解 病 原 微 生 物 分 类、生 物 安 全 实 验 室等 级 的 分 类、动 物 抓 伤 和 咬 伤 后 处 理、生 物 安 全 柜 的 正常 使 用 方 法 和 生 物 安 全 防 范 等。因 此 对 从 业 人员 的 培 训 和 教 育 至 关 重 要。中 心 定 期 和 不 定 期 组 织 各项 生 物 安 全 培 训 讲 座，包 括 每 年 组 织 人 员 参 与 学 校 和学 院 举 办 的 消 防 安 全 知 识 讲 座 和 演 习。通 过 组 织 实 验人 员 参 与 各 种 培 训 和 讲 座 不 断 强 化 人 员 的 安 全 意 识，降 低 生 物 安 全 风 险。生 化 固 废液 和 动 物 尸 体 的 处 理高 校 中 常 见 的 生 化 固 废液 有 放 射 性 物 质、化 学 试剂 和 实 验 器 械 和 耗 材 等，基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 涉 及化 学 试 剂 种 类 较 多，有 些 具 有 很 大 毒 性，或 具 有 致 癌 致突 变 性，比 如 溴 化 乙 啶（）染 料，不 能 直 接 排 放。实验 器 械 和 耗 材 主 要 有 注 射 器 及 针 头、口 罩、手 套、敷 料、培 养 皿、离 心 管、移 液 管 和 培 养 基 等，可 能 会 沾 染 有 毒有 害 物 质，决 不 能 与 生 活 垃 圾 混 放。基 因 修 饰 小 鼠 实验 室 还 涉 及 实 验 小 鼠 的 尸 体 和 组 织 材 料 处 理。目 前 中 心 管 理 模 式 是 所 有 的 生 化 固 废液 全 部 放入 指 定 的 生 化 固 废液 废 弃 物 桶，用 特 定 的 生 化 固 废 垃圾 袋 盛 装，当 废 弃 物 达 到 容 器 的时，即 由 相 关 人 员封 口。所 有 在 实 验 中 产 生 的 碎 玻 璃、针 头 和 刀 片 等 锐器 一 律 投 入 利 器 盒。学 校 的 生 化 固 废液 现 已 实 行 网络 化 管 理 模 式，各 实 验 室 的 生 化 固 废液 和 锐 器 盒 由 指定 人 员 封 扎 并 收 集，在 校 网 园 实 验 室 与 设 备 管 理 处 平台 上 提 交 申 请，审 核 通 过 后 在 指 定 时 间 将 生 化 固 废液送 到 校 指 定 回 收 点。实 验 小 鼠 的 尸 体 和 组 织 材 料 使 用 专 用 的 生 物 安 全袋 密 封 包 装，称 重 登 记 后 送 学 校 指 定 的 动 物 尸 体 存 放间，放 入 冰 柜 内，由 具 备 专 业 资 质 的 相 关 公 司统 一 定 期 清 运 至 校 外 进 行 无 公 害 化 处 理。所 有 操 作 参照 浙 大 实 验 动 物 中 心 编 制 的“实 验 动 物 人 道 终 点、安乐 死 与 尸 体 处 理 操 作 规 程”（）。结语高 校 实 验 室 生 物 安 全 因 隐 蔽 性 强、人 员 密 集 和 潜在 有 毒 有 害 试 剂 较 多 等 因 素 往 往 很 容 易 被 忽 视，而 一旦 发 生 事 故 又 会 引 起 极 大 的 危 害。所 以 建 立 完 善 的 生第期王 芊 芊，等：基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 建 设物 安 全 防 范 体 系，提 前 做 好 生 物 安 全 风 险 评 估，制 定 严格 的 生 物 安 全 管 理 制 度 和 监 管 机 制 对 于 高 校 实 验 室 工作 的 开 展 至 关 重 要。基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室 始 建 于年 底，随 着 近年 的 发 展 在 专 业 技 术 上 已 取 得 重 大 突 破，建 成 了 稳 定的 专 业 技 术 队 伍，已 为 本 校 多 个 科 研 团 队 提 供 了 基 因修 饰 小 鼠 研 制 技 术 服 务，相 关 成 果 已 发 表 在 自 然 等国 际 顶 级 学 术 期 刊。在 浙 江 省 实 验 动 物 管 理 办 公 室、校 实 验 室 与 设 备 管 理 处、医 学 院、实 验 室 技 术 安 全 管 理办 公 室 和 院 领 导 的 多 方 指 导 下，基 因 修 饰 小 鼠 实 验 室生 物 安 全 体 系 已 初 步 建 成，在 实 验 试 剂 管 理、实 验 动 物疾 病 预 防 控 制 和 实 验 人 员 管 理 与 培 训 等 方 面 也 已 初 见成 效。通 过 该 体 系 的 建 立 和 运 行，有 效 保 障 了 实 验 室的 安 全 运 转，为 学 校 基 因 修 饰 技 术 服 务 需 求 保 驾 护 航。但 同 时，在 生 物 安 全 制 度 的 落 实 和 监 管、实 验 人 员 安 全意 识、危 化 品 管 理 上 仍 需 不 断 完 善。生 物 安 全 关 系 到每 一 个 人 的 生 命 健 康 和 家 庭 幸 福，在 建 设“双 一 流”大学 的 征 程 上，不 仅 要 全 面 提 升 专 业 技 术 服 务 水 平 为 科研 支 撑 做 出 贡 献，更 要 以 人 为 本，重 视 生 物 安 全，加 强管 理，防 患 未 然，为 助 力 医 药 和 生 命 科 学 等 各 学 科 发 展做 好 有 力 支 撑。致 谢：感 谢 浙 江 大 学 动 物 科 学 学 院 曾 卫 东 教 授 对 本 论 文的 修 改。参 考 文 献（）：中 华 人 民 共 和 国 主 席 令（第 五 十 六 号）中 华 人 民 共 和 国 生 物 安 全法 全 国 人 民 代 表 大 会 常 务 委 员 会 公 报，：中 华 人 民 共 和 国 生 物 安 全 法 北 京：中 国 法 制 出 版 社，叶 冬 青实 验 室 生 物 安 全 版北 京：人 民 卫 生 出 版社，：，（）：，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：？（），（）：陆兵，吕京，郑涛实 验 室 生 物 安 全 基 础 知 识 北 京：中 国 计 量 出 版 社，（）：李 建 军前 沿 生 物 技 术 领 域 安 全 风 险 治 理 的 历 史 经 验 和 重 要 启示 山 东 科 技 大 学 学 报（社 会 科 学 版），（）：，（）：，（）：，（）：王超基 因 修 饰 小 鼠 制 备 常 用 技 术 北 京：中 国 农 业 大 学出 版 社，范 宪 周，孟 宪 敏医 学 与 生 物 学 实 验 室 安 全 技 术 指 南 北京：北 京 大 学 医 学 出 版 社，刘 丽 艳，韩 艳 梅，李 文 超，等实 验 动 物 潜 在 生 物 安 全 威 胁 及 降低 风 险 的 建 议 实 验 技 术 与 管 理，（）：世 界 卫 生 组 织实 验 室 生 物 安 全 手 册 版日 内 瓦：世 界卫 生 组 织，曹 启 峰，蒋 健 敏二 级 生 物 安 全 实 验 室 管 理 体 系 文 件 编 制 实 用手 册 杭 州：浙 江 人 民 出 版 社，魏强动 物 生 物 安 全 实 验 室 管 理 和 技 术 要 点 中 国 比 较 医学 杂 志，（）：江轶，黄 开 胜，艾 德 生，等高 校 非 高 等 级 病 原 微 生 物 实 验 室生 物 安 全 管 理 研 究 实 验 技 术 与 管 理，（）：夏 建 潮，孙平高 校 实 验 室 生 物 安 全 管 理 体 系 探 讨 实 验技 术 与 管