高效液相色谱-荧光检测法测定分散黄82的含量.pdf

【化学工程与材料】:./.高效液相色谱 荧光检测法测定分散黄 的含量李刚 赵龙(.辽东学院 化工与机械学院 辽宁 丹东 .辽东学院 工程技术学院 辽宁 丹东)摘 要:建立利用高效液相色谱 荧光检测法测定分散黄 含量的方法 色谱柱为 (.)荧光检测器的激发波长为 发射波长 流动相为乙腈 四氢呋喃 水(体积比 )流速为./柱温 进样体积 分散黄 的进样质量浓度在 /时峰面积与进样浓度呈良好的线性关系相关系数为 .回收率为.回收率测定结果的相对标准偏差为.()关键词:高效液相色谱 荧光检测法 分散黄 荧光检测器 外标法中图分类号:.文献标志码:文章编号:()分散黄 又名香豆素、荧光染料分散黄.或溶剂黄 学名为 (苯并咪唑基)二乙氨基香豆素 登记号:该分散染料荧光强烈 色泽鲜艳 可对聚酯、酰胺纤维荧光染色 能用于荧光黄 染料、激光染料 和荧光墨水的合成或制备可对塑料或热塑性树脂进行透明着色 还可用于制备香豆素 形貌调节层 以提升全聚合物太阳能电池性能 生物活性测试发现 分散黄 对癌细胞也有一定抑制作用 有人采用高效液相色谱 紫外检测法测定分散黄 含量 利用紫外检测器进行液相色谱分析 但是荧光检测器的检测灵敏度约高于紫外检测器 个数量级 故用此方法进行痕量分析或超痕量分析时 其灵敏度和最小测定限很难取得更好的检测效果 为此 本研究建立了利用高效液相色谱 荧光检测法测定分散黄 含量的方法 该方法检测灵敏度高、最小测定限低、重现性好 实验部分.仪器及材料 二元泵、荧光检测器、色谱工作站、柱温控制箱 美国 公司 荧光分光光度计 美国 公司 手 动 进 样 阀 美 国 公 司 型数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司.滤膜分散黄 标准品(纯度.上海阿拉丁生化科技股份有限公司)实验室合成的分散黄 样品 乙腈(级)四氢呋喃(级使用之前进行回流和蒸馏纯化处理)二次重蒸馏水:自制.色谱条件色谱柱:(.)荧光检测器的激发波长为 发射波长为 流动相:乙腈 四氢呋喃 水(体积比 )流动相使用之前用.滤膜过滤 流速为./柱温为 进样体积为 .实验方法.乙腈四氢呋喃混合溶液的配制用等体积的乙腈和四氢呋喃配制出乙腈四氢呋喃混合溶液 备用.标准品溶液的配制分散黄 标准品溶液:精密称取.(精确第 卷第 期 辽东学院学报(自然科学版).年 月 ().收稿日期:作者简介:李刚()男 辽宁海城人 高级实验师 研究方向:液相色谱分析到.)分散黄 标准品 用乙腈四氢呋喃混合溶液定容于 容量瓶中 得到质量浓度为 /的标准品储备液 再将此储备液用乙腈四氢呋喃混合溶液配制出质量浓度为、/系列标准品溶液.样品溶液的配制分散黄 样品溶液:精密称取.(精确到.)实验室合成的分散黄 样品用乙腈四氢呋喃混合溶液定容于 容量瓶中得到质量浓度为 /的样品储备液 再将此储备液用乙腈四氢呋喃混合溶液配制出质量浓度为 /的分散黄 样品溶液.定量方法分别取系列标准品溶液和样品溶液 依次逐个进样 记录色谱峰的峰面积数据以系列标准品溶液中分散黄 的质量浓度为横坐标 以色谱峰面积为纵坐标 绘制标准工作曲线 采用外标法定量分析 由样品溶液的分散黄 峰面积求出样品溶液中分散黄 的实际浓度.色谱图按.色谱条件分别取质量浓度为 /的分散黄 的标准品溶液和样品溶液各 进样分析测得标准品溶液和样品溶液中分散黄 的色谱保留时间分别为.和.对应的色谱图见图 和图 图 中的峰 为分散黄 峰 为未知物 图 中的峰 为分散黄 峰、峰 和峰 为未知物辽东学院学报(自然科学版)第 卷 结果与讨论.流动相的选择分散黄 属于非极性化合物 不溶于水 易溶于乙腈、四氢呋喃和三氯甲烷有机溶剂中 在固定其他实验条件不变情况下 本文比较了乙腈 水、乙腈 四氢呋喃 水、乙腈 三氯甲烷 水 种流动相体系的色谱分离效果 当流动相中水的体积比较小时 该化合物在 色谱柱上的出峰时间过早或分离效果差 而水的体积比过大时 色谱峰出现拖尾 由实验得知 乙腈 四氢呋喃 水为流动相体系的色谱分离效果好于其他 种流动相体系当流动相选用乙腈 四氢呋喃 水(体积比 )时 分散黄 的色谱峰形对称 分离效果最佳因而本实验选用该流动相进行色谱分析.色谱柱柱温的选择柱温从室温上升到 的过程中 分离效果变化不大 从样品的热稳定性、色谱柱压力、色谱分离效果和实际操作等因素方面考虑 实验选择柱温为 .检测波长的选择利用荧光分光光度计对质量浓度为 /的分散黄 标准品溶液进行扫描 发现分散黄 的 个荧光激发波长范围分别为 和 荧光发射波长范围为 当以 波长的滤光片作激发光光源、波长的滤光片作发射光光源时 检测的灵敏度高且干扰少 可得到满意的色谱分离效果.线性方程、线性范围取不同质量浓度分散黄 系列标准品溶液按.中所规定的色谱条件 依次逐个进样进行色谱分析 线性回归处理结果表明 分散黄 的进样质量浓度在 /范围内时 其色谱峰面积 与进样浓度 呈良好线性关系 线性方程为 相关系数 .检出限取质量浓度为 /的分散黄 标准品储备液多次稀释 并依次逐个进行色谱分析 选择合适的基线噪声范围 当信噪比/时 计算出仪器的最小检测限为 /信噪比/时仪器的最小测定限为 /.精密度和回收率的测定实验依照.所规定的色谱条件 重复进样分散黄 标准品溶液进行色谱定量分析 得到分散黄 的质量分数测定结果相对标准偏差为.()在已准确测得质量分数的分散黄 样品溶液中 加入已知质量分数的分散黄 标准品溶液进行加标回收实验 所得结果见表 测得回收率为.回收率测定结果的相对标准偏差为.()表 分散黄 的加标回收率测定取样量/样品中分散黄 的质量分数/(/)加标量/(/)测得量/(/)加标回收率/加标回收率平均值/相对标准偏差/.分散黄 样品的质量分数测定在同样的色谱条件下 对实验室合成的分散黄 样品进行了 次质量分数测定 结果见表 测得样品中分散黄 的平均质量分数为.测定结果的相对标准偏差为.表 样品中分散黄 的质量分数测定质量分数测定结果()/平均值/相对标准偏差/.、.、.、.、.第 期 李 刚 赵 龙:高效液相色谱 荧光检测法测定分散黄 的含量 结论应用高效液相色谱 荧光检测法可以对分散黄 的含量进行测定 结果表明 分散黄 的进样质量浓度在 /时 峰面积与进样浓度呈良好的线性关系 相关系数 .分散黄 标准品质量分数测定结果的相对标准偏差为.()加标回收率为.加标回收率测定结果的相对标准偏差为.()本方法具有检测灵敏度高、最小测定限低、重现性好等优点 可用于荧光染料分散黄 的含量测定参考文献:秦传香 秦志忠.纺织用荧光染料的研究.印染助剂 ():.韩耀君.一种用于涤纶织物染色用的分散剂及其生产工艺:.冉兴.香豆素荧光分散染料的合成研究.大连:大连理工大学.郭伟 唐人成 秦传香.锦纶的酸性和分散荧光染料染色性能.印染 ():.赵龙 李刚.荧光黄 染料的合成.辽宁丝绸():.王贤丰 曲杨 顾梵.香豆素类激光染料研究的进展.精细石油化工 ():.张淑珍.香豆素 的制备方法:.罗 荣 邱 伟 伟.荧 光 分 散 墨 水 及 其 制 备 方 法:.高本春 徐飒英 王玉茹.香豆素系高档荧光溶剂染料合成工艺 .染料工业 ():.陶斯禄 张倩 等.基于香豆素 的全聚合物太阳能电池活性层形貌调节方法:.():.高春香 刁杰 王蕾.香豆素系列荧光染料的液相色谱分析 .染料与染色 ():.方惠群 于俊生 史坚.仪器分析.北京:科学出版社:.()().():.罗先金 宋健 程侣柏 等.新型香豆素荧光染料的合成及应用.中国科学(辑)():.(.):.:(.)()././.().:(责任编辑:鞠衍清)辽东学院学报(自然科学版)第 卷