环状RNA应用于肝细胞癌无创早期诊断的研究进展.pdf

C h i n e s eH e p a t o l o g y,J u n ,V o l ,N o 综述环状R NA应用于肝细胞癌无创早期诊断的研究进展黄梦钱晓寒杨丽华作者单位:江苏南京医科大学第二附属医院消化医学中心通信作者:杨丽华,E m a i l:h u a l i y a n g c o m【摘要】肝细胞癌是我国六大恶性肿瘤之一,病死率高.目前最广泛应用的甲胎蛋白和超声筛查仍会漏诊/的患者,疾病早期诊断率低.近年来随着对肝细胞癌诊断标志物的不断探索,发现存在于体液中且以稳定的共价闭环结构存在的环状R NA(c i r c R NA)对肝细胞癌具有潜在的早期诊断价值.本文就c i r c R NA的功能及在HC C早期诊断中的研究进展做一综述.【关键词】环状R NA;肝细胞癌;早期诊断据 年癌症数据统计,原发性肝癌在癌症发病中位列第六,病 死 率 高 达 第 三,其 中 为 肝 细 胞 癌(h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a,HC C).早 期HC C经 过 手 术 切除,年生存率约为.受困于HC C患者早期临床症状不明显以及甲胎蛋白(A F P)筛查的灵敏度仅约,大多数患者确诊时已处于中晚期,年生存率仅为,.因此寻找HC C的新型生物标志物对提高HC C诊断率意义重大.近年来环状R NA受到越来越多的关注与研究,其大量地稳定存在于体液中,在癌症患者和对照组之间差异性表达,对HC C早期诊断具有潜在价值.一、c i r c R NA简介(一)c i r c R NA的来源与特点c i r c R NA是由mR NA前体反向剪接产生的共价闭环结构,具有稳定、丰富、保守和非随机的特点,在真核转录中表现出组织和阶段特异性表达.随着高通量测序技术的发展,更多的c i r c R NA被发现,其特性与功 能 受 到 重 视.根 据 来 源 分 为 四 类:外 显 子c i r c R NA(e c i r c R NA)、环内 含子R NA(c i R NA)、外 显 子内 含 子R NA(E I c i R NA)和t R NA内含子c i r c R NA s(t r i c R NA),目前研究最多的是e c i r c R NA.(二)c i r c R NA的功能c i r c R NA主要通过以下四种方式参与基因表达调控:作为c e R NA(竞争内源性R NA),充当“m i R NA海绵”与相应的m i R NA结合并抑制其功能,调节靶m R NA的翻译或降解.直接与蛋白质相互作用抑制其活性,从而调节基因转录、促进细胞增殖等.作为翻译成多肽的模板,产生功能性蛋白质.作为转录调节因子调控转 录 和 剪 切 过 程.现 已 发 现 了 多 种 与 癌 症 相 关 的c i r c R NA,包括肝癌、胃癌、肺癌和结直肠癌等,这些c i r c R NA在肿瘤形成、进展、复发和耐药等过程中发挥重要作用.二、c i r c R NA与HC C的发生发展(一)作 为 致 癌 因 子 的c i r c R NA多 数c i r c R NA作 为c e R NA与m i R NA相互作用,阻断m i R NA对靶基因的抑制作用,参与基因表达调控.如L e i等 发现c i r c S Y P L 在HC C组织中高表达,通过海绵作用吸附m i R p从而增强后者靶基因E Z H 的 表 达,促 进HC C细 胞 的 增 殖 和 侵 袭,加 速HC C的进展.部分c i r c R NA通过直接和蛋白质相互作用参与HC C的进展.例如,在细胞核中的c i r c L R I G 在HC C组织和血浆中显著增加,作为蛋白质支架与E Z H 和S TA T 形成三元复合体,促进S T A T 甲基化和磷酸化,激活致癌的S TA T 信号通路,导致HC C的恶性进展.除 了 以 上c i r c R NA,还 有c i r c C P S F 、c i r c Z E B 、c i r c H I P K 等作为致癌因子在HC C中高表达,通过相应的调节机制促进HC C细胞增殖、侵袭与转移,参与HC C的进展,为HC C患者提供了潜在的诊断和治疗靶点.(二)作为抑癌因子的c i r c R NA在HC C中也存在部分c i r c R NA抑制肿瘤的发生发展.J i a n g等 发现,c i r c E P S 在HC C中表达显著降低,进一步研究显示过表达的c i r c E P S 通过抑制T J P/C DH/V I M信号通路,延缓细胞周期进程,影响HC C的发展.还有研究发现,高表达的h s a_c i r c_ 特异性结合m i R a p来增强后者靶基因P P A R A的表达,从而作为抑癌因子通过m i R a p/P P A R A轴来抑制HC C的增殖、迁移与侵袭.除了m i R NA海绵的功能外,c i r c R NA在HC C中还可以作为蛋白质结合分子影响m R NA的表达.例如,c i r c D L C 通过与H u R相互作用,抑制致癌因子MMP 的表达,最终抑制HC C的进展,而沉默c i r c D L C 则起相反的作用.以上c i r c R NA在HC C中呈低表达,并通过相应的机制发挥抑癌作用,与良好的预后密切相关,可能为HC C患者提供潜在的治疗靶点.此外,c i r c R NA在HC C耐药中的作用也得到广泛关注与研究,大部 分研 究 都 是 基 于c e R NA网 络.X u等 发 现c i r c R NA S O R E特 异性 海绵 吸 附m i R a p和m i R 肝脏 年月第 卷第期 p,竞争性地激活Wn t/c a t e n i n途径,促进对索拉非尼的耐药性.c i r c A R N T 、c i r c ME D 等也在对应耐药的HC C中高表达,通过相应机制调节对顺铂、仑伐替尼的耐药性,从而影响HC C的治疗效果.见表.三、c i r c R NA与HC C的无创早期诊断超声因安全、经济、方便成为监测HC C高危人群的首选.但近期一项M e t a分析发现超声检测早期HC C的敏感性仅为 .而C T和MR I检测敏感性尽管优于超声,但因成本效益、辐射以及造影剂等,应用于监测仍存在争议,.除了影像学,A F P临界值 n g/m L时对HC C的敏感性为,n g/m L时则降至 ,而对A F P阴性人群,异常凝血酶原(D C P)、血 清 甲 胎 蛋 白 异 质 体(A F P L)、微 小R NA(m i R NA)可以提高早期诊断率.然而目前研究还不成熟,尚未正式大规模进入临床,.近年来大量国内外的c i r c R NA相关研究发现,其可以作为新的生物标志物用于HC C的诊断.(一)单一c i r c R NA应用于HC C的诊断单一的c i r c R NA在HC C中 表 现 出 较 高 的 诊 断 效 能.L i等 研 究 发 现,c i r c S MA R C A 在HC C患者血浆中表达下调.R O C曲线分析显示,HC C患者中血浆c i r c S MA R C A 的AU C值为 ,A F P n g/m L者则为 ,对A F P水平较低的HC C患者可能是一个很好的预测生物标志物.另一项研究发现,在HC C中显著下调的h s a_c i r c_ 与肝脏生化指标相关,间接反映了HC C的病理状态,可用于评估HC C的侵袭性.其AU C值达 ,并具有 的敏感性和 的特异性,可能成为早期诊断HC C潜在的生物标志物.还有研究发现,在HC C中高表达的c i r c_ 与疾病分期呈正相关,作为c e R NA结合m i R p而上调YA P的表达,刺激肿瘤的形成.其AU C值为 ,最佳临界值时灵敏度为 ,特异性为 ,优于其他诊断生物标志物.(二)多种c i r c R NA联合检测应用于HC C的诊断有些c i r c R NA单独应 用 于HC C的 诊断 时表 现 不够 出色,但多 种c i r c R NA联合检测可以提高诊断效能.J i a n g等 发现h s a_c i r c_ 和h s a_c i r c_ 在HC C组织中低表达,在肝病的不同阶段表达特征也不同,对区分肝硬化和慢性肝炎表现出较好的诊断效能(AU C )、特异性()和灵敏度().多元线性回归分析其联合诊断HC C的AU C值、特异性、灵敏度分别为 、,具有作为HC C无创诊断标志物的潜能.另一项研究选择血浆h s a_c i r c_ 、h s a_c i r c_ 、h s a_c i r c_ 为组合,联合检测显示出非常高的灵敏度()和略高于A F P的特异性(),有望用于HC C的诊断.S u n等 选 择 联 合c i r c 、c i r c 、c i r c ,结果显示其在HC C患者的血液样本中高表达,表达水平与肿瘤的TNM分期和肿瘤大小呈正比.当选择 为截断值时R O C曲线下面积最大(AU C ),显示出 的特异性和 的灵敏度,是诊断HC C有前景的生物标志物.近期 一 项 多 中 心 研 究 鉴 定 并 分 析 了 一 个h s a_c i r c_ 、h s a_c i r c_ 和h s a_c i r c_ 的组合,R O C曲线分析结果为AU C ,特别是对小HC C(孤立型,c m)、甲胎蛋白阴性HC C和甲胎蛋白阴性小HC C的检出效果较好.(三)c i r c R NA联合A F P或者其他指标检测应用于HC C的诊断有些c i r c R NA可与A F P等经典标记物联合使用,以提高诊断水平.Z h a n g等 发现h s a_c i r c_ 在HC C中高表 达,AU C值 为 ,表 现 出 较 高 的 诊 断 价 值.当 与R G S /A F P联合后发现,联合诊断具有更高的敏感性和特异性.另一项研究发现h s a_c i r c_ 在HC C组织中的表达水平显著高于良性肝病患者和正常对照组,且与HC C患者总生存 期 的 缩 短 呈 正 相 关.h s a_c i r c_ 联 合A F P()和h s a_c i r c_ 联合A F P L()的诊断敏感性比单独使用高,尤其是三者联合时灵敏度为 ,因此该组合可作为早期发现或筛查甲胎蛋白阴性HC C的候选指标.表HC C相关的c i r c R NAc i r c R NA表达机制功能文献c i r c S Y P L 上调m i R p/E Z H 促进增殖和侵袭 c i r c L R I G 上调E Z H/S T A T 促进增殖、迁移和侵袭 c i r c C P S F 上调T J P/C DH/V I M促进增殖、迁移和转移 c i r c Z E B 上调m i R a p/P I K C A促进增殖、抑制凋亡 c i r c H I P K 上调m i R o rm i R /P D K 促进增殖和侵袭 c i r c E P S 下调T J P/C DH/V I M抑制侵袭和迁移 h s a_c i r c_ 下调m i R a p/P P A R A抑制恶性表型 c i r c D L C 下调H u R/MMP 抑制增殖和转移 c i r c R NA S O R E上调m i R a po rm i R p/W n t/c a t e n i n维持对索拉非尼耐药 c i r c A R N T 上调m i R p/P D K 促进对顺铂耐药 c i r c ME D 上调m i R p/U S P 促进对仑伐替尼的耐药 C h i n e s eH e p a t o l o g y,J u n ,V o l ,N o Q i a o等 发 现,h s a_c i r c_ 与A F P联 合 检 测 的AU C值高达 ,灵敏度和特异性分别为 和.其上调与A F P、肿瘤直径、分化程度及微血管密度指数相关,可作为HC C患者早期诊断及预后的一种新的生物标志物.HC C患者血浆h s a_c i r c_ 表达明显低于肝硬化患者、乙肝患者和健康对照组,联合A F P诊断HC C的AU C值为 ,对HC C的诊断也是非常敏感的方法.这些研究提示将单个或多个c i r c R NA,以及联合其他生物标记物用于HC C的早期诊断具有广阔的前景,但将其应用于临床仍需要大量的研究和技术支持(表).四、小结与展望随着高通量测序技术和生物信息学的发展,对c i r c R NA的结构与功能,我们有了越来越深入的了解,从而发现了它在肿瘤中发挥重要作用.在HC C中,一些c i r c R NA可以充当致癌因子促进肿瘤的增殖、侵袭与转移,而另一些c i r c R NA又可以作为抑 癌 因 子 诱 导 细 胞 的 凋 亡,并 且 介 导HC C的 耐 药.c i r c R NA在HC C诊断中作用的研究更是具有广阔的前景,对HC C的早期诊断意义重大.然而仍存在一些问题需要解决,第一,c i r c R NA的研究正处于起步阶段,目前的研究侧重于表达和诊断,在HC C中的具体机制并不十分清楚.第二,大多数研究的样本数量较少,特别是血液中的样本数量,可能会导致选择偏差.未来将需要对已知特定作用的c i r c R NA进行更多样本的研究进一步证实.第三,目前的研究仍停留在细胞和动物水平,转化为临床应用仍需要更多的试验与技术.由于c i r c R NA是稳定且丰富的,并能在多种体液中检测到,在正常人群和HC C患者中差异表达,因此对HC C相关c i r c R NA有必要进行深入的研究,以确认它们作为诊断标志物和治疗靶点的潜力,以期未来能够在早期与传统诊断手段联合使用,提高HC C的早期诊断率,改善HC C患者的预后.利益冲突声明:所有作者均声明不存在利益冲突.参考文献S u n gH,F e r l a yJ,S i e g e lR L,e ta l G l o b a lc a n c e rs t a t i s t i c s :g l o b o c a ne s t i m a t e so fi n c i d e n c ea n d m o r t a l i t yw o r l d w i d ef o r c a n c e r s i n c o u n t r i e s C AC a n c e r JC l i n,():F o r n e rA,R e i gM,B r u i xJ H e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a L a n c e t,():M c G l y n n KA,L o n d o n WT T h e g l o b a l e p i d e m i o l o g y o fh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a:p r e s e n ta n df u t u r e C l i n L i v e rD i s,():,v i i xG a l l eP R,F o e r s t e rF,K u d oM,e ta l B i o l o g ya n ds i g n i f i c a n c eo fa l p h a f e t o p r o t e i ni n h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a L i v e rI n t,():W a n gS,Z h a n gK,T a nS,e ta l C i r c u l a rRNA s i nb o d yf l u i d sa sc a n c e rb i o m a r k e r s:t h en e wf r o n t i e ro fl i q u i db i o p s i e s,M o lC a n c e r,():C h e nL L,Y a n g LR e g u l a t i o no fc i r c RNA b i o g e n e s i s,R NAB i o l,():J e c kWR,S o r r e n t i n oJ A,W a n gK,e ta l C i r c u l a rR NA sa r ea b u n d a n t,c o n s e r v e d,a n da s s o c i a t e dw i t hA L Ur e p e a t s R NA,():M e m c z a kS,J e n sM,E l e f s i n i o t iA,e ta l C i r c u l a rR NA sa r eal a r g ec l a s so fa n i m a lR NA sw i t hr e g u l a t o r yp o t e n c y N a t u r e,():M e n gX,L iX,Z h a n gP,e t a l C i r c u l a rRNA:a ne m e r g i n gk e yp l a y e r i nR NAw o r l d B r i e fB i o i n f o r m,():T h o m s o nDW,D i n g e r MEE n d o g e n o u s m i c r o R NA s p o n g e s:e v i d e n c ea n dc o n t r o v e r s y N a tR e vG e n e t,():H u a n g A,Z h e n g H,W u Z,e ta l C i r c u l a r R NA p r o t e i ni n t e r a c t i o n s:f u n c t i o n s,m e c h a n i s m s,a n d i d e n t i f i c a t i o n T h e r a n o s t i c s,():Z h a n gM,H u a n gN,Y a n gX,e t a l An o v e l p r o t e i ne n c o d e db yt h e c i r c u l a r f o r m o f t h e S H P RH g e n e s u p p r e s s e s g l i o m at u m o r i g e n e s i s,O n c o g e n e,():表c i r c R NA在HC C中的诊断效能c i r c R NAAU C值敏感度特异性文献c i r c S MA R C A h s a_c i r c_ c i r c_ h s a_c i r c_ h s a_c i r c_ h s a_c i r c_ h s a_c i r c_ h s a_c i r c_ c i r c c i r c c i r c h s a_c i r c_ h s a_c i r c_ h s a_c i r c_ h s a_c i r c_ A F PA F P L h s a_c i r c_ A F P h s a_c i r c_ A F P 肝脏 年月第 卷第期 L iZ,H u a n g C,B a o C,e ta l E x o n i n t r o nc i r c u l a r R NA sr e g u l a t et r a n s c r i p t i o n i n t h en u c l e u s N a t S t r u c tM o l B i o l,():T a n gX,R e nH,G u oM,e ta l R e v i e wo nc i r c u l a rR NA sa n dn e wi n s i g h t s i n t o t h e i r r o l e s i nc a n c e r C o m p u tS t r u c tB i o t e c h n o lJ,:L e iD,W a n g Tc i r c S Y P L p r o m o t e st h e p r o l i f e r a t i o n a n dm e t a s t a s i so fh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m av i at h eu p r e g u l a t i o no fE Z H e x p r e s s i o nb yc o m p e t i n gw i t hh s a m i R p JO n c o l,:S u nS,G a oJ,Z h o uS,e t a l An o v e l c i r c u l a rR NAc i r c L R I G f a c i l i t a t e s t h em a l i g n a n tp r o g r e s s i o no fh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m ab ym o d u l a t i n gt h eE Z H/S T A T s i g n a l i n g JE x pC l i nC a n c e rR e s,():C h e nY,L i n gZ,C a iX,e ta l A c t i v a t i o no fYA P b y N m e t h y l a d e n o s i n e m o d i f i e d c i r c C P S F d r i v e sm a l i g n a n c y i nh e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a C a n c e rR e s,():L i uW,Z h e n gL,Z h a n gR,e t a l C i r c Z E B p r o m o t e sP I K C Ae x p r e s s i o nb ys i l e n c i n gm i R a pa n da f f e c t s t h ep r o l i f e r a t i o na n da p o p t o s i s o f h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a M o l C a n c e r,():Y uQ,C h e n W,L iY,e ta l T h en o v e lc i r c u l a rR NA H I P K a c c e l e r a t e s t h e p r o l i f e r a t i o n a n d i n v a s i o n o f h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m ac e l l sb ys p o n g i n gt h em i c r oR NA o rm i c r oR NA /p y r u v a t e d e h y d r o g e n a s e k i n a s e a x i s B i o e n g i n e e r e d,():J i a n gB,T i a n M,L iG,e ta l c i r c E P S O v e r e x p r e s s i o ni nh e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m am o d u l a t e s t u m o r i n v a s i o n a n dm i g r a t i o n F r o n tG e n e t,:L u oY Y,T a oK G,L uY T,e t a l H s a_C i r c_ s u p p r e s s e sh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m ab ys p o n g i n gm i R a pa n dt a r g e t i n gP P A R A F r o n tP h a r m a c o l,:L i u H,L a nT,L iH,e ta l C i r c u l a rR NAc i r c D L C i n h i b i t sMMP m e d i a t e dl i v e rc a n c e rp r o g r e s s i o n v i ai n t e r a c t i o n w i t hH u R T h e r a n o s t i c s,():M uQ,L vY,L u oC,e t a l R e s e a r c hp r o g r e s so nt h ef u n c t i o n sa n dm e c h a n i s m o fc i r c R NAi nc i s p l a t i nr e s i s t a n c ei nt u m o r s F r o n tP h a r m a c o l,:X uJ,W a nZ,T a n g M,e ta l N m e t h y l a d e n o s i n e m o d i f i e dC i r c R NA S O R Es u s t a i n ss o r a f e n i br e s i s t a n c ei nh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m ab yr e g u l a t i n g c a t e n i ns i g n a l i n g M o lC a n c e r,():L i Y,Z h a n g Y,Z h a n g S,e t a l c i r c R NA c i r c A RN T s u p p r e s s e dt h es e n s i t i v i t yo fh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m ac e l l st oc i s p l a t i nb yt a r g e t i n gt h e m i R p/P D K a x i s M o lT h e rN u c l e i cA c i d s,:Z h a n gP,S u nH,W e nP,e ta l c i r c R NAc i r c ME D a c t sa sap r o g n o s t i c f a c t o r a n dm e d i a t o r t op r o m o t e l e n v a t i n i b r e s i s t a n c e o fh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a M o lT h e rN u c l e i cA c i d s,:T z a r t z e v aK,O b iJ,R i c hN E,e ta l S u r v e i l l a n c ei m a g i n ga n da l p h a f e t o p r o t e i nf o re a r l yd e t e c t i o no fh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m ai np a t i e n t sw i t hc i r r h o s i s:A m e t a a n a l y s i s G a s t r o e n t e r o l o g y,():e Y o o nJ H,L e eJ M,L e eDH,e ta l Ac o m p a r i s o no fb i a n n u a lt w o p h a s e l o w d o s e l i v e rC Ta n dU Sf o rHC Cs u r v e i l l a n c ei nag r o u pa th i g hr i s ko fHC Cd e v e l o p m e n t L i v e rC a n c e r,():G u p t aP,S o u n d a r a r a j a nR,P a t e lA,e t a l A b b r e v i a t e dMR I f o rh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m as c r e e n i n g:A s y s t e m a t i cr e v i e w a n dm e t a a n a l y s i s JH e p a t o l,():C o l l iA,N a d a r e v i cT,M i l e t i cD,e ta l A b d o m i n a lu l t r a s o u n da n d a l p h a f o e t o p r o t e i n f o r t h e d i a g n o s i s o f h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a?i n a d u l t s w i t h c h r o n i c l i v e r d i s e a s e C o c h r a n eD a t a b a s eS y s tR e v,():C D B e s t J,B i l g iH,H e i d e rD,e t a l T h eGA L A Ds c o r i n ga l g o r i t h mb a s e d o n A F P,A F P L,a n d D C P s i g n i f i c a n t l y i m p r o v e sd e t e c t i o n o f B C L C e a r l y s t a g e h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a ZG a s t r o e n t e r o l,():Y a m a m o t oY,K o n d oS,M a t s u z a k iJ,e ta l H i g h l ys e n s i t i v ec i r c u l a t i n gm i c r o r n ap a n e l f o r a c c u r a t ed e t e c t i o no f h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m ai n p a t i e n t s w i t hl i v e rd i s e a s e H e p a t o l C o mm u n,():L iZ,Z h o uY,Y a n gG,e ta l U s i n gc i r c u l a rR NAS MA R C A a sap o t e n t i a l n o v e l b i o m a r k e r f o rh e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a C l i nC h i m A c t a,:E lS h a r k a w iF Z,Aw a dM S,E l a g a w yW,e ta l C i r c u l a rR NA s a n d :P o t e n t i a l d i a g n o s t i c b i o m a r k e r s i nh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a A s i a nP a cJC a n c e rP r e v,():Z h a n gX,X u Y,Q i a nZ,e ta l c i r c R NA_ s t i m u l a t e sYA P d e p e n d e n t t u m o r i g e n e s i s t h r o u g ht h er e g u l a t i o no fHN F aa n d m a y s e r v e a s a d i a g n o s t i c m a r k e r i n h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a C e l lD e a t hD i s,():J i a n gZ,S h e nL,W a n gS,e t a l H s a_c i r c_ a n dh s a_c i r c_ a r e p o t e n t i a l n o v e l b i o m a r k e r sf o r h e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a C a n c e rM e d,():M a t b o l iM,S h a f e iA E,A l iMA,e ta l c i r c R NA s(h s a_c i r c_ ,h s a_c i r c_ ,a n dh s a_c i r c_ )a r en o v e lp o t e n t i a l b i o m a r k e r s i n h e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a J C e l lB i o c h e m,():S u nXH,W a n gY T,L iG F,e t a l S e r u m d e r i v e d t h r e e c i r c R NAs i g n a t u r ea s ad i a g n o s t i cb i o m a r k e r f o rh e p a t o c e l l u l a r c a r c i n o m a C a n c e rC e l l I n t,:Y uJ,D i n gWB,W a n gMC,e t a l P l a s m a c i r c u l a rR NAp a n e l t od i a g n o s eh e p a t i t i sBv i r u s r e l a t e dh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a:Al a r g e s c a l e,m u l t i c e n t e rs t u d y I n tJC a n c e r,():Z h a n gY,L i J,C u iQ,e t a l C i r c u l a rR NAh s a_c i r c_ a san o v e lb i o m a r k e rf o rh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m a B i o e n g i n e e r e d,():L i uR,L iY,W 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