溶液的配制.doc

7% PAGE变性胶的配制
1、UREA 210.6g x 2 403.2g
2、Formamide 192ml x 2 382g
3、40%丙烯酰胺 105ml x 2 210ml
4、5 x TBE 120ml x 2 240ml
取 500ml锥形瓶（放一磁转子），依次加入，磁转子搅拌，过滤，4℃。

10%过硫酸铵的配制
过硫酸铵1g加水1ml

银染液的配制
1、10% 乙酸 50 ml HAC+400ml ddH2O
2、1.5%HNO3 500 ml 的浓HNO3加入500 ml水
3、0.2%AgNO3 500 ml （1 g AgNO3加入500 ml ddH2O）
4、3%Na2CO3
500 ml
0.075%甲醛（375 ml）

PAGE 加样缓冲液 Binding （25 ml）
98%去离子甲酰胺 4.5 ddH2O
10 nM EDTA（PH8.0） 20 ml 无水乙醇
0.025% 溴酚兰 0.5 ml 冰乙酸
70 μl Binding

FISH 所用溶液的配制
70% FA 40 ml 50 ml
FA 28 ml 35 ml
20 x SSC 4 ml →终浓度为 2 x SSC 5 ml
ddH2O 8 ml 10 ml

着丝粒探针变性所用的60%FA
60% FA 50 ml
FA 30ml
20 x SSC 5ml →终浓度为 2 x SSC
ddH2O 15ml

20 x SSC 1000 ml
Nacl 175.3 g
柠檬酸钠 88.2 g
ddH2O 800 ml
10 M NaOH调至PH=7.0 加水1000 ml

10 x PBS 500 ml
Nacl 40 g
Kcl 1 g
Na2HPO4-12H2O 14.35 g / Na2HPO4-7H2O 10.85 g
KH2PO4 1 g
加水到500 ml

1 x Pepsin x ： 0.01 N Hcl =0.5 ml ：1 ml
75% 乙醇 （分装） 75μl （100% 乙醇）+ 25μl（ddH2O）
25 ml FA 20
50% FA 5 ml 20 x SSC 4
20 ml ddH2O 16

75% 乙醇 50 ml ddH2O
150 ml 100% 乙醇

0.075 mol / l Kcl
母液 ： Kcl分子量 ：74.55 M =74.55 mol /l
100 ml H2O +11.2 g kcl→ 20 x
工作液：10 ml母液 + 190 ml ddH2O

一次配制0.075mol/l kcl
kcl 1.11825g （74.55g/mol）1.11825 / 74.55 = 0.015 mol
ddH2O 200 ml

1 % 多聚甲醛
多聚甲醛 1g
1 x PBS 100 ml
（注：多聚甲醛难溶，要放在50-60℃的水浴锅里溶解）
4 x SSC /0.05% Tween20配制
20 x SSC 200 ml
ddH2O 800 ml PH=7.6
Tween20 0.5 ml

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一
1 M Tris-HCl (pH7.4，7.6，8.0)
组份浓度 1 M Tris-HCl
配制量 1L
配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。
pH值        浓HCl
7.4        约70 ml
7.6        约60 ml
8.0        约42ml
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
二
1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)
组份浓度 100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA
配制量 1 L
配制方法 1.量取下列溶液，置于l L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4，7.6，8.0)        100 ml
500 mM EDTA(pH8.0)        20 ml
2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
三
3 M醋酸钠(pH5.2)
组份浓度 3 M醋酸钠
配制量 100 ml
配制方法 1.称量40.8 g NaOAc•3H2O置于100~200 ml烧杯中，加入约40 ml的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。
3.加去离子水将溶液定容至100 ml。
4.高温高压灭菌后，室温保存。

1×TE缓冲液(10mmol/L, pH7.5. Tris-HCl, 1mmol/L EDTA)
称取0.12g Tris，加适量蒸馏水溶解，用1mol/L盐酸调至pH8.0并定容至100mL，加入0.037gEDTA·Na2·2H2O，高压灭菌20min.
2 M醋酸钠(pH5.2)
组份浓度 3 M醋酸钠
配制量 100 ml
配制方法 1.称量27.2 g NaOAc•3H2O置于100~200 ml烧杯中，加入约40 ml的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。
3.加去离子水将溶液定容至100 ml。
4.高温高压灭菌后，室温保存。