超滤_紫外可见分光光度法测定钙黄绿素囊泡包封率.pdf

2 紫 外可 见 分光 光 度 法测 定 钙 黄绿 素 囊泡 包 封 率徐 缓教 授也事教 靶q琳教 王 超活 自阳花邹q家花家张教 自阳适 适 似 似 适 申)摘要 目 的单 建F携z考黄绿未国报固醇琥志接第卷上海氨海仪器盐扫描包封公国测定散机。散机单 K声超滤机分离扫描所考黄绿未电 紫平可见分搅搅拌机测定考黄绿未国含量教 检测万亚琳东 8 东n 树 教 限算包封公。迪试单 考黄绿未均适 纯 适 适 略适 适 纯 适 树g#动-适范围液形室浓再活 r探似 纯 头 头 头 8)电 不径截留分子量国超滤膜对考黄绿未国膜棕过公容O影节电 值声超滤机可以配扫描所考黄绿未储到浓再国分离教 考黄绿未国膜棕过公均头 申 纯 7%略头 7 纯 似%教 回确公均头 申 纯 空%略头 7 纯 似%教 扫描不白加入过超滤膜。值声破散机测储国考黄绿未包封公琳活 坏 7 纯 适?空 纯 东)%。迪后单 超滤2 紫 外可 见分 光光 度法 可以 作为 钙黄 绿素 囊泡 包封率 的测 定方 法教 报固醇琥志接第卷上海氨海仪器盐蒸馏国扫描可以当琳水溶室花扰国优浓z次。关键程 超滤 法电 紫平可见分搅搅拌机电 考黄绿未电 扫描电 包封公+图分类PR 头 适 7 纯 东 文献标识码A 文知随P适 似 似 坏-坏 7 坏 东 活 空 似 似 8)似 空-似 适 显 似-似 坏Determ ination of entrapm ent efficiency of calcein vesicles usingultrafiltration2 UV2 VIS m ethod差 异Hu a n 教 D E N 个Yi2h u 教i 按 HE ND a 2 w e 教i WA N 个按 h a o(School of Phar macy,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 适 适 似 似 适 申,China)Abstract Objective:T oe s t a 讨 l is ha 树e th o d预o 情 th e d e te 情树in a t io no 预 e n t 情 a 况 树e n t e 预 预 ic ie n c yo 预 c a lc e ininc h o le s te 情 y l h e树is u c c in a te T 情 is v e s ic le s纯M ethods:异lt 情 a 预 i l t情 a t io n w a s a 况 况 l ie dtos e 况 a 情 a teth e预 情 e ec a lc e in预 情 o 树th ev e s ic le s纯T h ea s s a yo 预 c a lc e in w a sc a 情 情 ie do u t u s in gu l t情 a v io le t2v is i讨 les 况 e c t 情 o 况 h o to 树e t 情 ya n dth ee n t 情 a 况 树e n t e 预 预 i2c ie n c y w a s c a lc u la te d 纯 T h e d e te c t iv e w a v e le n g th w a s s e t a t 东 8 东 n 树 纯Results:T h e 异 V树e th o dh a dg o o dl in e a 情 ityinth e情 a n g e o 预 适 纯 适 适 略适 适 纯 适 树g#动-适活 r探似 纯 头 头 头 8)纯 T h e预情 e e c a lc e in w a s w e ll s e 况 a 情 a te d预情 o 树th e v e s ic le s with u lt 情 a 预 i l2t 情 a t io n 树e th o d 纯 T h e 情 e w a s n o o 讨 v io u s d i预 预e 情 e n c e 讨 e tw e e nth e d i预 预e 情 e n t 树o le c u le s t 情 a 况 况 in g u lt 情 a 预 i lt 情 a t io n 树e树讨 情 a n eint情 a n s树is s iv ityo 预 c a lc e in 纯 T h ec a lc e int 情 a n s树is s iv ity w a s 讨 e tw e e n头 申 纯 7%略头 7 纯 似%a n dth e情 e c o v e 情 ie s with讨 la n 并v e s ic le s w e 情 e 讨 e tw e e n 头 申 纯 空%略头 7 纯 似%纯 T h e v e s ic le s c o u ld n o t 况 e n e t情 a t e th e u lt 情 a 预 i l t情 a t io n预 i l树树e 树讨 情 a n e 纯 T h e e n 2t 情 a 况 树e n t e 预预 ic ie n c y o 预 c a lc e in预o 情 按 H E 亲冻v e s ic le s w a s 活 坏 7 纯 适?空 纯 东)%纯 Conclusion:T h e u lt 情 a 预 i l t情 a t io n 异 V 2 VI冻树e th o dc o u ld讨 e u s e d预o 情 th ed e t e 情树in a t io no 预 e n t情 a 况 树e n t e 预预 ic ie n c yo 预 c a lc e inv e s ic le s a n dth e按 H冻 Tv e s ic leisl i并 e lya g o o dc a 情 情 ie 情 预o 情 w a te 情 2s o lu 讨 i l ityd 情 u g 纯Keywords u l t情 a 预 il t情 a t io n 电 异 V 2 VI冻 电 c a lc e in 电 v e s ic le s电 e n t 情 a 况 树e n t e 预 预 ic ie n c y 近年 来教 超滤被非这应声聚脂质次x纳米粒等蒸剂包封公国测定 适 略东。超滤是均问力当声效教 值声心分原理对q分子和小分子扰质重行分离单 溶剂所部分敏感对分子质量溶质记过超滤膜国孔道到达膜国昂一侧教 而高感对分子质量溶质x获缺支化胶束之向被截留。超滤膜国截留分子量一施从申 似 似 似 略显 似 似 似 似 似 可排。考黄绿未活 按 a lc e in)是一出小分子水溶室堆搅未教 室质产定教 可以散生地应声堆搅分搅搅拌机x紫平2 可 见 分光 光 度 法 检 测教 常当琳脂质次、扫描等花扰z次国设信花扰。均测定花扰国包封公、次平释阔以及次液花扰分布等散面士储到非这国应声教 当琳联期散心排和细胞导染 教授国设信花扰也事O一定国靶q室。考黄绿未国迪琳王见图适。图1 钙黄绿 素的 结构 式胆固 醇琥 珀 酸 酯 三 羟 基 氨 基 甲 烷 盐 活 c h o le s t情 y lh e树is u c c in a tet情 is教 按 H冻 T)是一出q面活室剂教 均水+可以自阳花邹琳事O家分子张国扫描 显 教 适声聚水溶室及q分子花扰国包封。破扫描事O所脂质次类似国迪琳教 申是所脂质次感)事O摘敏要、蒸馏单建理化室质产定等优F。携教授z值声考黄绿未当琳设信花扰教 入过超滤机考黄按 H冻 T 对水溶室花扰国包封公。当绿未见国液活 平)O感关文献报道。)适 显 似)按 h in e s e 固 o u 情 n a l o 预 N e wD情u g s 空 似 似 8 教 V o 纯l 适 7 No纯 空+国醇花琥志空 似 似 8 接第适 7 卷第空 期 活 上海第卷分氨仪器盐)电紫平可见扫描分搅搅拌限活 包携冻 HI亲A D 封 异公测)电高定分散机活。国IK A公测)电 超声万细胞超滤机活 分万醇离邹器教授所)电 电子紫平活 上海可见紫平仪器盐)电 搅拌王超滤花含活 量国见理检公测)电 超滤膜活 适 教 坏教适 似 万截留分子量)活 上海亚东8n树脂O限公测)电 考黄绿未活 紫算检迪化家试剂公测)电 报固醇琥志接第卷上海氨海仪器盐活 按 H 冻 T 教 自蒸)电 获缺试剂均琳分氨纯。散机所迪试1 CH ST囊泡 的制 备参 照文 献 申 国散机略Og动蒸馏按 H冻 T 扫描单-适量按 H冻 T 分散聚适 似 树 树o l#动-适国t情 is 2 H按 l范围溶液x坏 坏 纯 坏 g#动-适考黄绿未水溶液+教 高定分散机理坏 树in 教 形邹事家分子张迪琳国按 H冻 T q单室扫描活 浓拌琳空 似 g#动-适)教 再以探头超声重行不粒储到粒径分布均适 似 似 n 树截留国小单室扫描。考黄绿未对搅不产定教 子所O膜当均应对搅教 配声棕过容器。空 包 封率 的测 定2.1 钙黄 绿 素 最大 吸 收 波 长的 测 定 精 密称 取 钙黄 绿素 申 申 申纯 显 树 g 教 入过N a O H影节况 H值以7纯 东教 配蒸浓拌琳坏 坏 纯 坏 g#动-适国储馏液教 到获7释以一定浓拌教以紫平可见扫描分搅搅拌限聚东 似 似 略7 似 似n 树万亚范围液扫描教 迪试考黄绿未均东 8 东 n 树O%q回确教 迪试见图空教 确定以东 8 东 n 树琳考黄绿未国检测万亚。可见量-空白扫描似 纯 适 树 动 教 加入似 纯 似 适 树 动适 似%国T 情 ito n差 2适 似 似 到扫描破坏后教 以蒸馏水7释以适当浓拌教 均东 似 似 略7 似 似 n 树万亚范围扫描教 可见按 H冻 T 国溶液均破万亚范围液对考黄绿未国测定水溶扰。迪试见图空。图2 钙黄 绿素 和空 白囊 泡的 扫描图2.2 标 准曲 线 的 绘 制 精 密 移 取/2 纯 10中 的 储 备液 适量 教 以蒸馏水7释以质量浓拌优次琳适 纯 适 适 教空 1空 空 教 坏 纯 坏 坏 教 显 纯 显 显 教 适 适 纯 适 树g#动-适国溶液教 分关聚东 8 东n 树测定获回确拌教 以回确拌活 y)对质量浓拌活 x教树g#动-适)当形室回键教 回键散程琳单 y探似 纯似 8 空似 x+似 1似 适 空 坏 教 r探似 纯 头 头 头 8 教 q图考黄绿未均适 纯 适 适 略适 适 纯 适树g#动-适范围液形室关类浓再。2.3 不同 截留 分 子量 的 超 滤 膜 对 钙 黄绿 素 的 透 过率实 验 精密 移取 显 纯 似 树 动坏 纯 坏 坏g#动-适国考黄绿未溶液含聚搅拌王超滤花含+教 均显 适 申 纯 7 显并 P a R文问力、献力搅拌效教 分关值声适 教 坏 教 适 似 万截留分子量国超滤膜重行超滤教-标滤液7释以标识码形形室范围液国浓拌后聚东 8 东 n 树测定回确拌教)A不径截留分子量国超滤膜对考黄绿未国棕过公教 见q适。q1 不同 截留分 子量 的超 滤膜 对钙 黄绿 素的 透过 率n探坏超 滤 膜 国 截 留分 子 量之 万超滤联之 g#动-适超滤后之 g#动-适棕过公之%R 冻 D之%适坏 纯 空 头坏 纯 适 头头 申 纯 7坏 纯 空坏坏 纯 坏 似坏 纯 适 8头 申 纯 东空 纯 头适 似坏 纯 坏 适坏 纯 空 适头 7 纯 似空 纯 7 通过 表 适 可知随超滤膜截留分子量国不径考黄绿未国棕过公容O图显国差异教 琳Hu再地分离扫描所a离花扰教 DE排N适 万截留分子量国超滤膜重行考黄绿未扫描包封公国考黄。2.4 钙黄 绿素 膜透 过 率 实 验 精 密 配制 钙 黄 绿 素溶液 高、中、低 坏 个浓拌活 分关琳似 纯 坏 坏 教 坏 纯 坏 坏 教 坏 坏 纯 坏g#动-适)教-上Y溶液i显纯 似 树 动 含聚搅拌王超滤花含+教 均显 适 申 纯 7 显 并 P a R文问力、献力搅拌效教 值声适 万截留分子量国超滤膜重行超滤教-标滤液7释以标识码形形室范围液国浓拌后聚东 8 东 n 树测定回确拌教 hq空 可知考黄绿未国浓拌对获膜棕过公水影节。q2 钙黄绿 素膜 透过 率n探坏加 入 量之 g#动-适超滤联之 g#动-适超滤后之 g#动-适棕过公之%R 冻 D之%似 纯 坏 坏似 纯 坏 坏似 纯 坏 空头 7 纯 似坏 纯 申坏 纯 坏 坏坏 纯 空 头坏 纯 适 8头 申 纯 7坏 纯 似坏 坏 纯 坏坏 坏 纯 适坏 空 纯 适头 申 纯 头空 纯 82.5 超滤膜对空 白囊泡透过 率的 考察 取空白 囊泡空 纯 似教 空 纯 显教 显 纯 似 树 动 分关以蒸馏水7释以显纯 似 树 动 教 按/2140项下操 作得到续滤 液教-标滤液适 纯 似 树 动 以蒸馏水7释以适 似 树 动。昂-空白扫描空 纯 似 教 空 纯 显 教 显 纯 似 树 动 分关以蒸馏水7释以显 似 树 动 教 以上i溶液均东 显 似 n 树万亚测定w拌教 hq坏 可知教 空白扫描不白入过超滤膜。q3 空白 囊泡 的超 滤膜 透过 性n探坏次 e之树 动超滤联国回确拌超滤液国回确拌棕过公之%空 纯 似似 纯 适 东 空似似空 纯 显似 纯 适 8 申似似显 纯 似似 纯 坏 似 东似似)适 显 适)按 h in e s e 固 o u 情 n a l o 预 N e wD情u g s 空 似 似 8 教 V o 纯l 适 7 No纯 空+国醇花琥志空 似 似 8 接第适 7 卷第空 期 2.6 回 收率 实验 钙 黄 绿 素溶 液 加 至 空 白 囊 泡溶液 中使 其浓 度分 别为 似 纯 坏 坏 教 坏 纯 坏 坏 教 坏 坏 纯 坏 g#动-适教 Wo教按/2 纯 40项 下 操 作 得 到 续 滤 液教 到获7释以适当浓拌教 以空白扫描超滤液琳空白教 聚东 8 东n 树测定i溶液国回确拌教 限算回确公教 hq东 可知扫描国T均不影节考黄绿未国超滤膜棕过公。q4 钙 黄绿 素回 收率n探坏加 入 量之 g#动-适超滤联之 g#动-适超滤后之 g#动-适棕过公之%R 冻 D之%似 纯 坏 坏似 纯 坏 坏似 纯 坏 空头 7 纯 似东 纯 坏坏 纯 坏 坏坏 纯 适 申坏 纯 似 东头 申 纯 空坏 纯 头坏 坏 纯 坏坏 坏 纯 空坏 空 纯 适头 申 纯 7东 纯 似2.7 包 封 率的 测 定 取 钙 黄 绿 素囊 泡 显 纯 似 树 动 教 含聚搅拌王超滤花含+教 按/2 纯 40项下 操 作教 储到标滤液7释以适当浓拌测定获回确拌教 靶入标识码形s储扫描溶液+a离考黄绿未国浓拌活 C预)电-考黄绿未扫描似 纯 空 树 动 以似 纯 似 适 树 动适 似%T 情 ito n 差 2适 似 似 破坏后以蒸馏水7释以一定浓拌测定获回确拌教 靶入标识码形储到扫描溶液+考黄绿未国t浓拌活 Ct)教 按效王限算包封公单 E E之%探活 Ct-C预)之Ct适 似 似。测储考黄绿未国平均包封公琳活 坏 7 纯 适?空 纯 东)%。讨 论钙黄绿素是一种水溶性荧光物质教 当琳脂质次、扫描等l粒z次国设信花扰教 入常可以声d预测水溶室花扰国包封公以及释阔情况 7 略头。携cy建FH测定考黄绿未扫描包封公国一出醇散机)超滤 2 紫 外可 见分 光光 度法 教 破散机散生vV并建测定识确。h聚考黄绿未国亲水室教 脂质次对获国包封公一施士)A敏。当考黄绿未加入到空白脂质次+国平部教 入过冻I机x绿冻溶机蒸储国脂质次包封公被琳适 显%适 似。亲a n o s 情 o i 等 适 适 报道国以非离子q面活室剂所报固醇蒸馏国扫描活 类脂次)对考黄绿未国包封公%高被可达申%。携cy+测储国考黄绿未扫描国包封公琳坏 7%截留教 高聚文献报道国考黄绿未脂质次包封公教 这q图按 H冻 T 扫描O可白是水溶室花扰国优浓z次。测定花扰包封公国常声散机O应聚脂质胶活 冻 e 况 h a d e x)纳和米脂脂质胶活 冻 e 况 h a 情o s e)纳机教 值声脂质次和a离花扰感对分子质量国差异重行分离教申T均粒等剂是亚、7释次eq、花扰浓拌敏等问力电 分离效试A再国超定离心机邹携A高教 入常原要离心A亚剂是教 建i理和小是重行室差电 封 h a n g 等 适 空 报道H一出v定、生测定脂质次包封公国醇散机)通过适H2 N 亲R迪部况 H敏感标记扰高孔道国测定教 申也T均达仪器昂一、cy侧而不高获储等缺F。携cy所应声国搅拌王超滤是均超滤容器液阔入一支献化教 胶后到超滤花含束聚电献搅拌器之上教均超滤剂向容器液施加问力国径剂从动献力搅拌器教小分子溶质和溶剂分子被排出膜平教 扫描x脂质次等l粒z次向滤膜q面堆e剂教 被电献搅拌器分散到溶液+教 不容高产生浓差地化行常教、高H超滤国定拌。破花含设馏单教 高聚膜当教 建分离效试再教 感信释均纳米蒸剂包封公国测定+事O非阔国应声联及。当绿布 徐 缓 活 适 头 7 8-)教 面教 检士教授生。联类电期单活 似 空 东)空 坏 头 8 申 坏 适 申 教 E 2 树a i 单l h u a n 纯x u 适 适 申 坏 纯c o 树。入细当绿 邓 意 辉 活 适 头 申 东-)教 胞教 检士生导染 教 教授教 也要从事花扰靶向醇剂信国教授。联类电期单活 似 空 东)空 坏 头 8 申 坏 适 申 教E 2树a i 单l d d s 2申 申 申 2h a 况 况 y 适 申 坏 纯 c o 树。参 考 文 献 适 亲A Y E R动 D 教 O N 个 E个 冻 纯 D e t e 情树in a t io n o 预 预 情 e e a n dl i况 o s o 树e 2a s s o 2c i a t e dd o x o 情 u 讨 i c ina n dv in c 情 is t in ele v e l s in况 l a s 树a u n d e 情 e q u i l i讨 2情 i u 树c o n d i t io n se 树 况 lo y in gu l t 情 a 预 i l t 情 a t io nte c h n iq u e s 固 纯 Ana lBioche m教 适 头 头 显 教 空 坏 空 活 空)单 适 东 头-适 显 7 纯 空 雷 国 峰 教 靶琳教 授王活教 等纯 超滤机2 H P 动 按 机测定自阳花未脂质次包封公 固 纯 自阳花邹q家家报教 空 似 似 申 教 空 坏 活 东)单 空 坏 7-空 坏 头 纯 坏 翟 光 喜 教 邹F家教 张紫适纯 敏分子似未脂质次国教授 固 纯+国花家琥志教 空 似 似 适 教 坏 申 活 显)单 坏 适 申-坏 适 8 纯 东 张 仰 眉 教 靶建图教 高申纯)摘 适 似 脂质次国质量要 固 纯 第单建q家家报教 空 似 似 东 教 空 显 活 空)单 空 适 8-空 适 头 纯 显 固 A N O F FA 冻 教 K 异 R T 封按 动 教固 A 携 动 O N 冻 KI R 动 纯按 h a 情 a c t e 情 i z a t io no 预c h o le s t e 情 o l h e树i s u c c in a t ea n dA2to c o 况 h e 情 o l h e 树i s u c c in a t ev e s i2c l e s 固 纯 Biochi m Bio physActa教 适 头 8 8 教 头 东 适 活 空)单 适 申 显-适 7 显 纯 申 邓 意 辉 教 考黄教 绿未国教 等纯 报固醇报琥志接第扫描国蒸馏按 a空+聚固试y 固 纯 自阳花邹q家家报教 空 似 似 适 教 适 8 活 空)单 8 东-8 7 纯 7 冻 I亲O E 冻 冻 教 冻 动 E P 异 冻 H KINV 教 D 异 封 个 异 N E 冻 N 教 et al.O nth e 树e c h 2a n i s树s o 预in t e 情 n a l i z a t io na n din t 情 a c e l lu l a 情 d e l iv e 情 y树e d ia t e d讨 y况 H 2s e n s i t iv e l i况 o s o 树e s 固 纯 Biochi m B iophys Acta教空 似 似 适 教适 显 适 显活 空)单 空 坏-坏 7 纯 8 冻 HI 个 F 教 个 异 OW固教 冻 T E P H E N 冻 O N冻 亲 教 et al.E 预 预 i c ie n t in t 情 a c e l lu 2la 情 d 情 u g a n d g e n e d e l iv e 情 y u s in g 预 o l a t e 情 e c e 况 to 情 2ta 情 g e t e d况 H2s e n s i2t iv el i况 o s o 树e s c o 树况 o s e do 预 c a t io n i c之 a n i o n icl i况 idc o 树讨 in a t io n s 固 纯 J Control Release 教 空 似 似 空 教 8 似 活 适 之 坏)单 坏 似 头-坏 适 头 纯 头 冻 异 DI亲A 按 K固 固教 个 异 OW教 T 固 A R K 冻 W教 et al.An o v e l 况 H 2s e n s it iv el i况 o s o 树e预 o 情树u la t io nc o n t a in in go l e y l a l c o h o l 固 纯 Biochim B io2physActa教 空 似 似 空 教 适 显 申 东 活 适)单 坏 适-坏 7 纯 适 似 H 异 A N 个冻 动 教 亲A 按 D O N A 动 DR 按 纯 A c o u s t ic a l ly a c t iv e l i况 o s o 树e s 预o 情d 情 u ge n c a 况 s u l a t io na n du l t 情 a s o u n d 2t 情 i g g e 情 e d情 e le a s e 固 纯 BiochimBio physActa教 空 似 似 东 教 适 申 申 显 活 适 之 空)单 适 坏 东-适 东 适 纯 适 适 亲A N O 冻 R OI A 教 WO N 个 T R A K 异 动P 教 亲A N O 冻 R OI 固教 et a l.按 h a 情 a c 2te 情 i z a t io no 预 v e s ic l e s 况 情 e 况 a 情 e dwit hv a 情 io u sn o n 2io n i cs u 情 预 a c t a n t s树ix e d wi thc h o l e s t e 情 o l 固 纯 Colloid Surface B教 空 似 似 坏 教 坏 似 活 适 之 空)单适 空 头-适 坏 8 纯 适 空 封 H A N 个差 亲 教 P A R DA 携 教 D E个 A 教 et a l.D e t e 情树in i t io no 预 l i况 o s o 树 2a l e n c a 况 s u la t io ne 预 i c ie n c yu s i n g况 情 o t o nN 亲Rs 况 e c t 情 o s c o 况 y 固 纯Chem Phys lipids 教 空 似 似 东 教 适 空 7 活 适)单 适 适 坏-适 空 似 纯随醇单 琥志之接第包期单 空 似 似 7-似 显-适 似)适 显 空)按 h in e s e 固 o u 情 n a l o 预 N e wD情u g s 空 似 似 8 教 V o 纯l 适 7 No纯 空+国醇花琥志空 似 似 8 接第适 7 卷第空 期