超声引导下甲状腺FNAB联合BRAF V600E基因检测对甲状腺微小结节的诊断价值.pdf

超声引导下甲状腺F N A B联合B R A F V 6 0 0 E基因检测对甲状腺微小结节的诊断价值朱莉莎1,2,杜朝阳1,2,黎 兵1,2,喻昆霖2,3(1.宜春市人民医院 功能科;2.宜春学院附属医院;3.宜春市人民医院 普外科,江西 宜春 3 3 6 0 0 0)摘 要:目的:探讨超声引导下甲状腺细针穿刺活检(F N A B)联合丝/苏氨酸特异性激酶基因突变基因V 6 0 0 E(B R A F V 6 0 0 E)检测对甲状腺微小结节的诊断价值。方法:选取2 0 2 0年1 0月 2 0 2 1年1 0月于我院进行甲状腺切除术患者6 7例,术前均接受甲状腺F N A B及B R A F V 6 0 0 E基因检测,并与术后病理结果进行比对分析。结果:与术前单一进行F N A B相比,术前F N A B联合B R A F V 6 0 0 E基因检测的术后病理符合率(9 4.0 3%),特异度(9 7.1 4%),敏感度(9 0.6 3%)均高于单一F N A B检查,差异有统计学意义(P0.0 5)。结论:超声引导下甲状腺F N A B联合B R A F V 6 0 0 E检测可提高甲状腺微小结节术前检出率,对患者治疗及疾病诊断具有较高的参考价值。关键词:甲状腺微小结节;超声引导;细针穿刺活检;丝/苏氨酸特异性激酶基因突变基因V 6 0 0 E;病理诊断中图分类号:R 4 4 5.1 文献标识码:A 文章编号:1 6 7 1 3 8 0 X(2 0 2 3)0 6 0 0 7 6 0 4T h e D i a g n o s t i c V a l u e o f U l t r a s o u n d g u i d e d F N A B E x a m i n a t i o n C o m b i n e d w i t h B R A F V 6 0 0 E G e n e T e s t i n T h y r o i d M i c r o n o d u l e sZ HU L i s h a1,2,D U Z h a o y a n g1,2,L I B i n g1,2,Y U K u n l i n2,3(1.D e p a r t m e n t o f F u n c t i o n,Y i c h u n P e o p l es H o s p i t a l;2.T h e A f f i l i a t e d H o s p i t a l o f Y i c h u n U n i v e r s i t y;3.D e p a r t m e n t o f G e n e r a l S u r g e r y,Y i c h u n P e o p l es H o s p i t a l,Y i c h u n 3 3 6 0 0 0,C h i n a)A b s t r a c t:O b j e c t i v e:T o i n v e s t i g a t e t h e d i a g n o s t i c v a l u e o f u l t r a s o u n d g u i d e d t h y r o i d f i n e n e e d l e a s p i r a t i o n b i o p s y(F N A B)c o m b i n e d w i t h t h e d e t e c t i o n o f s i l k/t h r e o n i n e s p e c i f i c k i n a s e m u t a t i o n V 6 0 0 E(B R A F V 6 0 0 E)i n t h e d i a g-n o s i s o f t h y r o i d m i c r o n o d u l e s.M e t h o d s:6 7 p a t i e n t s w h o u n d e r w e n t t h y r o i d e c t o m y i n o u r h o s p i t a l f r o m O c t o b e r 2 0 2 0 t o O c t o b e r 2 0 2 1 w e r e s e l e c t e d,a n d a l l o f t h e m r e c e i v e d t h y r o i d F N A B a n d B R A F V 6 0 0 E g e n e d e t e c t i o n b e f o r e s u r-g e r y,a n d c o m p a r e d w i t h t h e p o s t o p e r a t i v e p a t h o l o g i c a l r e s u l t s.R e s u l t s:C o m p a r e d w i t h p r e o p e r a t i v e F N A B a l o n e,p r e o p e r a t i v e F N A B c o m b i n e d w i t h B R A F V 6 0 0 E g e n e d e t e c t i o n h a d h i g h e r p o s t o p e r a t i v e p a t h o l o g i c a l c o i n c i d e n c e r a t e(9 4.0 3%),s p e c i f i c i t y(9 7.1 4%)a n d s e n s i t i v i t y(9 0.6 3%)t h a n s i n g l e F N A B d e t e c t i o n,w i t h s t a t i s t i c a l s i g n i f i-c a n c e(P 1 0 mm者;合并桥本甲状腺炎者;存在F N A B禁忌症者。1.2 超声引导下F N A B检测应用M i n d r a yM 9型(中国,迈 瑞公司)及A l o k e F 7 5型(日本,日立公司)超声诊断仪,阵线探头调至7 1 2 MH z对甲状腺进行探查,留存直径、形态、回声性质、血流及钙化状况,拟定穿刺部位等数据,以穿刺点为中心,使用碘伏进行消毒,消毒后2%利多卡因局部皮下浸润麻醉,以5 m L注射器+7号针头组合,每枚结节穿刺2针,将细针穿刺入甲状腺结节中,重复1 0次左右抽取动作,消除负压后退针,酒精棉球按住针孔,观察1 5 m i n防止血肿,并向患者交代注意事项。抽取的样本采用传统涂片法做细胞病理学分类诊断,涂片2 3张,涂片后的穿刺针内残留组织用2 m L细胞保存液反复抽吸冲洗,洗脱液一部分用于液基细胞学涂片,另一部分用于B R A F V 6 0 0 E基因检测。91 01.3 B R A F V 6 0 0 E基因检测从细针取出患者甲状腺结节样本,置于样本管中,提取D N A,应用7 9 0 0型R e a l t i m e P C R仪(美国A B公司)对人类B R A F V 6 0 0 E基因进行检测,B R A F V 6 0 0 E基因试剂盒购自艾德生物公司,货号为A 2 0 0 5 2 2。P C R扩增后得到突变信号或内控信号的C t值。C t值=突变检测C t值-质控检测C t值。有明显扩增曲线产生,并且C t值2 8则定义为未突变型(野生型),反之则定义为突变型。1.4 细胞学诊断标准参照甲状腺病理学B e t h e s d a报告系统,共分6类:无法判断;良性病变;非典型/滤泡性病变;滤泡性或可疑滤泡性肿瘤;可疑恶性肿瘤;恶性肿瘤。1 11 2标本由两名经验丰富的细胞病理医师阅片,当结果不一致时,由高年资细胞病理医师重复阅片直至意见统一。1.5 统计学处理选择S P S S 2 5.0统计学软件,计量数据均经由正态分布检验,以(xs)记录,行独立样本t检验;计数数据以例(百分比)n(%)记录,行2检验,检验水准=0.0 5。2 结果2.1 术后病理结果在6 7例甲状腺微小结节患者中,良性结节3 5例,甲状腺微小癌3 2例。2.2 术 前F N A B检 查 与 术 前F N A B联 合B R A F V 6 0 0 E基因检测的效果评价患者术前F N A B检查,诊断良性结节3 9例、甲状腺微小癌2 8例,漏诊2例,误诊6例,诊断敏感度8 1.2 5%(2 6/3 2),特异度9 4.2 9%(3 3/3 5),病理符合率为8 8.0 6%(5 9/6 7),阳性预测值为9 2.8 6%(2 6/2 8),阴性预测值为8 4.6 2%(3 3/3 9),K a p p a值为0.7 5 8 4;术前F N A B联合B R A F V 6 0 0 E基因检测,诊断良性结节3 7例、甲状腺微小癌3 0例,漏诊1例,误诊3例,诊断敏感度9 0.6 3%(2 9/3 2),特异度9 7.1 4%(3 4/3 5),病理符合率为9 4.0 3%(6 3/6 7),阳性 预测值为9 6.6 7%(2 9/3 0),阴 性 预 测 值 为9 1.8 9%(3 4/3 7),K a p p a值为0.8 7 9 5,与病理诊断具有较高的一致性(K a p p a值 0.7 5),表格如下。表1 术前F N A B及联合B R A F V 6 0 0 E基因检测的诊断结果分析检检测测方方法法甲甲状状腺腺微微小小结结节节术术后后病病理理甲甲状状腺腺微微小小癌癌(nn=33 22)良良性性结结节节(nn=33 55)合合计计术前F N A B甲状腺微小癌2 622 8良性结节63 33 9术前F N A B联合B R A FV 6 0 0 E基因检测 甲状腺微小癌2 913 0良性结节33 43 777第6期 朱莉莎,杜朝阳,黎 兵,等:超声引导下甲状腺F N A B联合B R A F V 6 0 0 E基因检测对甲状腺微小结节的诊断价值 第4 5卷表2 术前F N A B及联合B R A F V 6 0 0 E基因检测的诊断效果分析诊诊断断效效果果术术前前FF NN AA BB术术前前FF NN AA BB联联合合BB RR AA FF VV 66 00 00 EE基基因因检检测测敏感度%8 1.2 59 0.6 3特异度%9 4.2 99 7.1 4阳性预测值%9 2.8 69 6.6 7阴性预测值%8 4.6 29 1.8 9病理符合率%8 8.0 69 4.0 3K a p p a值0.7 5 8 40.8 7 9 53 讨论甲状腺癌大多预后良好,被誉为“懒癌”,但并不是所有的甲状腺癌患者均有较长的无病生存期,部分患者仍存在较大复发可能,需进行早期治疗。1 3临床治疗中往往因甲状腺微小结节体积小,难以定性,采取定期复查策略,但这为部分预后不良类型甲状腺癌患者埋下隐患。1 4超声定位甲状腺F N A B检查在临床应用已有多年,但穿刺后样品原本的组织量少,组织形态被破坏,进行染色时易细胞重叠,加之良、恶性结节在细胞形态上的重叠,如部分甲状腺良性结节也可出现甲状腺乳头状癌的核特征,易导致穿刺结果假阴性、假阳性发生率较高,使医生对微小结节性质进行误判。1 5因此,术前明确甲状腺微小结节性质,明确进一步治疗方案,具有重大临床意义。B R A F基因突变目前已被证实是甲状腺乳头状癌的重要发病机制之一,早于2 0 0 4年国外学者发现其可激活MA P K信号通路,并保持激活持续性,导致甲状 腺 细 胞 异 常 增 殖,最 终 发 生 癌 变。1 6B R A F V 6 0 0 E检测用于甲状腺恶性肿瘤术前诊断已有一段时间,虽然近年来检验技术不断进步,已可对B R A F V 6 0 0 E突变型基因进行定量分析,但仍不能达到理想的诊断效能。1 7目前证实,多种检测方法联合应用,可提高甲状腺癌的诊断效能。5,1 8本研究在超声引导下,采用F N A B检查联合B R A F V 6 0 0基因检测,对6 7例甲状腺微小结节进行诊断分析,并与术后病理结果比较。本研究结果表明,术前F N A B检查联合B R A F V 6 0 0 E基因检测与术后病理符合率为9 4.0 3%,特异度9 7.1 4%,敏感度9 0.6 3%,均高于单一F N A B检查,差异有统计学意义(P0.0 5)。说明两种方法联合检测可提高甲状腺微小结节术前诊断的针对性,提升了临床参考价值。此外,本研究发现,联合检测后对甲状腺微小结节的灵敏度虽有较大提升,但并无统计学差异,这与国内诸多学者1 92 0报告结果不同,分析原因认为,一方面可能由于本研究例数较少,进行统计分析时无法凸显统计意义,另一方面可能由于检测方法略有不同,故呈现争议结果。本研究由于收集病例时间较短的关系,存在例数偏少,未对多发结节进行结果分析等缺点,以上不足将在进一步研究中加以完善。综上所述,超声引导下甲状腺F N A B检查联合B R A F V 6 0 0 E检测可提高甲状腺微小结节术前检出率,对患者治疗及疾病诊断具有较高的参考价值。参考文献:1C e o l i n L,D u v a l MA D S,B e n i n i A F,e t a l.M e d u l l a r y t h y r o i d c a r c i n o m a b e y o n d s u r g e r y:a d v a n c e s,c h a l l e n g e s,a n d p e r s p e c-t i v e sJ.E n d o c r R e l a t C a n c e r,2 0 1 9,2 6(9):4 9 9 5 1 8.2中国抗癌协会甲状腺癌专业委员会.甲状腺微小乳头状癌诊断与治疗中国专家共识(2 0 1 6)J.中国肿瘤临床,2 0 1 6,4 3(1 2):4 0 5 4 1 1.3张宗敏.甲状腺微小癌是否需要手术J.癌变畸变突变,2 0 2 1,3 3(5):3 2 5 3 2 6.4莫聪慧,卢秀波.甲状腺髓样癌1 3 7例临床预后相关因素及无复发生存分析J.中国实用外科杂志,2 0 2 1,4 1(1 1):1 2 9 3 1 2 9 6.5邱爽,王庆文,张倩,等.U S F N A B、血清T S H、T T F 1诊断甲状腺微小癌价值及与病理因素关系J.影响科学与光化学,2 0 2 1,3 9(9):7 2 7 7 3 1.6HA D D A D R I,N A s R c,B I s c HO F F L,e t a 1.N c c N g u i d el i n e s i n s i g h t s:T h y r o i d c a r c i n o m a,v e r s i o n 2.2 0 1 8J.J N a t l C o m p r C a n c N e t w,2 0 1 8,1 6(1 2):1 4 2 9 1 4 4 0.7章健全,詹维伟,徐辉雄,等.超声引导下甲状腺结节细针穿刺细胞学检查实践指南(2 0 1 9版)J.中华超声影像学杂志,2 0 2 0,2 9(5):3 6 9 3 8 3.8Y o o n J i n C h a,J u Y e o n P y o,S o o n W o n H o n g,e t a l.T h y r o i d F i n e N e e d l e A s p i r a t i o n C y t o l o g y P r a c t i c e i n K o r e aJ.J o u r-n a l o f P a t h o l o g y a n d T r a n s l a t i o n a l M e d i c i n e,2 0 1 7,5 1(6):5 2 1 5 2 7.9刘宏,赵亮.超声引导下细针穿刺细胞学检查联合B R A F V 6 0 0 E基因检测对甲状腺癌的诊断价值J.医学影像学杂志,2 0 2 0,3 0(1 2):2 1 9 3 2 1 9 7.1 0 信芳杰,林东亮,赵诚,等.液基细胞学技术在甲状腺结节细针穿刺病理诊断中的应用J.临床与实验病理学杂志,2 0 1 7,3 3(1):1 0 7 1 0 9.1 1 温泉,钱林学.超声引导下细针穿刺细胞学检查联合B R A F V 6 0 0 E基因突变检测对T I R A D S 4类甲状腺结节的诊断价值J.中国医学装备,2 0 2 1,1 8(8):1 0 0 1 0 4.1 2 周一帆,王建华,徐书杭.甲状腺细胞病理学B e t h e s d a报告系统的更新及研究进展J.国际内分泌代谢杂志,2 0 2 0,4 0(3):1 7 5 1 7 8.1 3 吕民,李苓.甲状腺癌患者生存质量调查及影响因素J.中国卫生工程学,2 0 2 1,2 0(4):6 1 1 6 1 2.(下转第1 1 9页)87第6期 宜春学院学报 第4 5卷足,并研究其性质,因此需要先从集合理论开始学习。学生明白了本课程的主要目的的同时,还应当善于把勒贝格积分理解处理成黎曼积分的一种并列或者顺应。同时,把微积分的发展历史串联起来理解黎曼积分和勒贝格积分的地位,以及它们之间的并列和顺应关系,并将该部分知识归类存放在自己完善的知识处理系统的恰当位置上,以便处理问题的时候可以及时调用。同化和顺应的学习方法可以帮助学生们形成良好的数学认知结构,它们不仅是对立统一的,而且是相辅相成的,它们互相补充,同时存在于同一个学习过程。否则难以使学生形成良好的数学认知结构,难以培养出具有较高数学素养的学生。参考文献:1(瑞士)皮亚杰.认识发生论M.北京:商务印书馆出版,1 9 9 0.2郝俊彦.数学认知结构与数学学习成绩相关性的研究D.南京:南京师范大学,2 0 0 4.3奥苏伯尔.教育心理学 认知观点M.佘南星,宋钧,译.北京:人民教育出版社,1 9 9 4.4布鲁纳.布鲁纳教育论著选M.邵瑞珍,译.北京:人民教育出版社,1 9 8 9:4 2 5 7.5张颖,吴建华.对数学认知结构的再认识J.聊城大学学报(自然科学版),2 0 0 4,1 7(4):4 5.6曹才翰,蔡金法.数学教育学概论M.南京:江苏教育出版社,1 9 8 9:5 2 5 3.7陆珺,喻平.对我国数学认知结构研究的反思J.数学教育学报,2 0 1 0,(2):1 9 2 2.8涂荣豹.数学教学认识论M.南京:南京师范大学出版社,2 0 0 3:1 7 2 1 7 5.9刘斌.从构建学生数学认知结构看高中数学教材的编写J.课程教材教法,1 9 9 8,(5):2 6 2 9.1 0 龙毅.试论数学认知结构J.吉首大学学报(自然科学版),1 9 9 6,1 7(1):2 8 3 1.1 1Y a n g Z.Z.,Z h u M.,Q u Z.H.,e t a l.R e s e a r c h o n O r g a n i z a-t i o n o f M a t h e m a t i c s K n o w l e d g e i n G o o d M a t h e m a t i c a l C o g n i-t i v e S t r u c t u r eJ.E u r a s i a J o u r n a l o f M a t h e m a t i c s,S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y E d u c a t i o n,2 0 1 7,1 4(1):2 9 1 3 0 2.1 2 冯丹丹.基于学生良好数学认知结构生成的教学研究D.上海:上海师范大学,2 0 1 7.1 3 郭学锋.如何指导学生构建认知结构J.教育,2 0 1 6,(3):3 1.1 4 王文静,韩龙淑,付建红.P C K在优化学生数学认知结构中的应用J.太原师范学院学报(自然科学版),2 0 1 7,1 6(4):6 9 7 2.1 5 唐秋萍.浅谈教学中如何帮助学生构建良好的数学认知结构J.中学数学研究(华南师范大学版),2 0 1 8,(1 0):1 92 0+2 2.1 6 谢丽敏.从建构角度探讨学生良好数学认知结构的形成J.教育导刊,2 0 0 5,(6):6 3 6 4.1 7 何小亚.构建良好的数学认知结构的教学策略J.数学教育学报,2 0 0 2,1 1(1):2 4 2 7.1 8 严正香,黄德成.如何建构学生良好的数学认知结构J.沈阳农业大学学报(社会科学版),2 0 0 5,7(2):1 9 0 1 9 1.1 9 米萌,侯万胜.认知结构对数学结题的影响J.延安职业技术学院学报,2 0 1 1,2 5(1):6 8 6 9.2 0 韩冰,王光明.认知结构在解题过程中的作用与思考J.中学数学杂志,2 0 0 5,(6):5 7.2 1 周丽鑫.学生数学认知结构的发展J.小品文选刊:下,2 0 1 7,(1 0):1 2 1.2 2 王利平.初中数学教学加强学生数学认知结构教学探讨J.才智,2 0 1 6,(1 5):9 7.2 3 孙景丽.构建认知结构教好高中数学J.中学课程辅导(教学研究),2 0 1 6,1 0(2 5):2 3.2 4 李世忠.高考复习中优化学生数学认知结构的基本策略J.新课程研究(上旬刊),2 0 1 7,(1 1):2 0 2 2.2 5 程其襄.张奠宙.胡善文.等.实变函数与泛函分析基础M.北京:高等教育出版社,2 0 1 9.(上接第7 8页)1 4 曾杰,杨秋怡,张志鹏,等.基于公共数据库的甲状腺癌预后风险基因筛选J.中国普通外科杂志,2 0 2 1,3 0(1 1):1 3 3 4 1 3 4 2.1 5B o n g i o v a n n i M,S p i t a l e A,F a q u i n W C,e t a l.T h e b e t h e s d a s y s t e m f o r r e p o r t i n g t h y r o i d c y t o p a t h o l o g y:a m e t a a n a l y s i sJ.A c t a C y t o l,2 0 1 2,5 6(4):3 3 3 3 3 9.1 6F r a t t i n i M,F e r r a r i o C,B r e s s a n P,e t a l.A l t e r n a t i v e m u t a t i o n s o f B R A F,R E T a n d N T R K 1 a r e a s s o c i a t e d w i t h s i m i l a r b u t d i s t i n c t g e n e e x p r e s s i o n p a t t e r n s i n p a p i l l a r y t h y r o i d c a n c e rJ.O n c o g e n e,2 0 0 4,2 3(4 4):7 4 3 6 7 4 4 0.1 7 赵正平,曹晓龙,李明宏.弹性超声联合B R A F v 6 0 0 e基因检测对甲状腺恶性肿瘤术前诊断价值分析J.药物生物技术,2 0 1 8,2 5(5):4 1 3 4 1 6.1 8 李若暄,慈霞,王菲,等.超声引导下F N A C联合B R A F V 6 0 0 E基因突变检测诊断甲状腺乳头状癌及评估病情的研究进展J.临床超声医学杂志,2 0 1 9,2 1(5):3 6 6 3 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