猪粪、鸡粪经黑水虻转化后碳、氮及微生物变化_马叶.pdf

农业环境科学学报Journal of AgroEnvironment Science2023，42（6）:1388-13962023年6月马叶，吴楠，王小波，等.猪粪、鸡粪经黑水虻转化后碳、氮及微生物变化J.农业环境科学学报,2023,42（6）：1388-1396.MA Y,WU N,WANG X B,et al.Changes in carbon，nitrogen，and microorganisms in pig manure and chicken manure after conversion by black soldier flylarvaeJ.Journal of Agro-Environment Science,2023,42（6）：1388-1396.猪粪、鸡粪经黑水虻转化后碳、氮及微生物变化马叶1，2，吴楠1，王小波1，2，梁嘉琪1，徐晓燕1，2*（1.天津农学院农学与资源环境学院，天津 300384；2.天津农垦渤海农业集团有限公司，天津 301800）Changes in carbon，nitrogen，and microorganisms in pig manure and chicken manure after conversion byblack soldier fly larvaeMA Ye1,2,WU Nan1,WANG Xiaobo1,2,LIANG Jiaqi1,XU Xiaoyan1,2*（1.College of Agronomy and Resource and Environment,Tianjin Agricultural University,Tianjin 300384,China;2.Tianjin Nongken BohaiAgricultural Group Co.Ltd,Tianjin 301800,China）Abstract：To explore the changes in carbon,nitrogen,and microbial community structure in livestock and poultry manure before and afterblack soldier fly larvae（BSFL）transformation,7-day-old BSFL were used to transform pig manure and chicken manure.The relatedindices of carbon and nitrogen and Illumina high-throughput sequencing data were determined before and after transformation.Resultsshowed that the conversion rates of pig manure and chicken manure by the BSFL were 8.36%and 10.42%,respectively.Organic carbonand the carbon-nitrogen ratio（C/N）increased by 5.86%and 47.64%,respectively,after the conversion of pig manure,whereas organiccarbon and C/N decreased by 11.67%and 4.68%,after the conversion of chicken manure.Dissolved organic carbon,total nitrogen,nitrate收稿日期：2022-12-16录用日期：2023-03-06作者简介：马叶（1998），女，江西宜春人，硕士研究生，从事农业废弃物资源化研究。E-mail：*通信作者：徐晓燕E-mail：基金项目：国家重点研发计划项目（2018YFD0500205）；天津市科技计划项目（22ZYCGSN00690）Project supported：The National Key Research and Development Project of China（2018YFD0500205）；Tianjin Science and Technology Planning Projectof China（22ZYCGSN00690）摘要：为研究畜禽粪便经黑水虻转化前后碳、氮和微生物群落结构的变化，利用7日龄黑水虻幼虫转化猪粪和鸡粪，进行转化前后碳、氮相关指标测定和Illumina高通量测序。结果表明：黑水虻对猪粪和鸡粪的转化率分别为8.36%和10.42%，猪粪转化后有机碳和C/N分别升高了5.86%和47.64%，鸡粪转化后有机碳和C/N分别下降了11.67%和4.68%，两者的溶解性有机碳、全氮、硝态氮和铵态氮含量显著降低。黑水虻转化后，猪粪和鸡粪中分别有18.93%和10.49%的碳及31.42%和32.58%的氮被幼虫吸收利用，74.83%和57.43%的碳及43.71%和60.25%的氮保留在虫粪中。相比转化前的畜禽粪便，虫粪的微生物群落结构发生了显著变化，细菌丰富度和多样性均明显增加，其中厚壁菌门、变形菌门和放线菌门是猪粪、鸡粪和两组虫粪的优势菌门。黑水虻转化后，粪便中的细菌群落结构向着降解蛋白质和脂肪方向演变，鸡粪源虫粪中分解纤维素的菌群丰度高于新鲜鸡粪，且主要来自于厚壁菌门，猪粪源虫粪中分解纤维素的厚壁菌门丰度下降，但放线菌门中木质素降解菌丰度上升。PICRUSt功能预测分析显示两组虫粪中ABC转运蛋白、氨基酸生物合成和碳代谢功能基因丰度最高，且鸡粪源虫粪中的代谢基因丰度要高于猪粪源虫粪。研究表明，黑水虻幼虫对鸡粪的转化效率高于猪粪，转化后猪粪、鸡粪中碳、氮大部分转入虫粪，部分转入虫体，部分损失，其中鸡粪中的碳损失高于猪粪，而猪粪氮损失高于鸡粪。猪粪转化后有机碳和C/N提高，鸡粪转化后有机碳和C/N降低，而两者的溶解性有机碳、全氮、硝态氮和铵态氮含量都降低。黑水虻转化显著改变了猪粪和鸡粪的微生物群落结构，增加了有机物降解菌的丰度，增强了粪便中微生物的碳、氮代谢。关键词：黑水虻；猪粪；鸡粪；细菌群落；碳氮代谢中图分类号：X713文献标志码：A文章编号：1672-2043（2023）06-1388-09doi:10.11654/jaes.2022-1277马叶，等：猪粪、鸡粪经黑水虻转化后碳、氮及微生物变化2023年6月随着我国集约化养殖业的发展，随之产生了大量的养殖废弃物1，据统计我国每年产生约38 亿t畜禽粪污，但其综合利用率不足60%2。未经处理的畜禽粪便不仅含有对人体和环境有害的重金属、抗生素和病原菌等物质，还会排放大量恶臭气体，严重威胁周围的空气、土壤和水体安全3-4。因此畜禽粪便的高效资源化利用对我国畜禽养殖业的可持续发展具有重要意义。黑水虻是一种腐生性昆虫，具有繁殖速度快、转化效率高、抗逆性强、食性广等特点，可取食畜禽粪便、餐厨垃圾等有机废弃物5-6，并将其转化为虫体和虫粪。黑水虻虫体含有蛋白质、脂肪和多种微量元素，是一种良好的动物蛋白饲料7，虫粪施用后能提高土壤养分含量，促进作物生长8。此外黑水虻转化后还能降低畜禽粪便中重金属活性、潜在病原菌丰度和抗生素数量，并有效减少粪便臭味9-10。因此利用黑水虻转化畜禽粪便具有较高的经济和环境价值。微生物在黑水虻转化有机废弃物中起着至关重要的作用，研究表明黑水虻肠道中的多功能核心菌群有助于其对废弃物的消化吸收11。Ao等12利用黑水虻转化猪粪和鸡粪，在水虻肠道中发现的Rhizobiales、Bacteroidales等菌群，可能与氮的固定、循环等相关，而Providencia则可能与蛋白质、脂类的分解代谢紧密相关。Wu等10在转化猪粪的水虻肠道中发现一些核心 菌 群，如 Dysgonomonas、Enterococcus、Morganella等，在有机物降解和肠道健康维护等方面起着重要作用。此外，肠道和基质菌群之间的相互作用也使得黑水虻肠道微生物群落结构向着更利于基质降解的新生态位演化13。碳、氮是畜禽粪便中重要的营养元素，也是黑水虻生长代谢所必需的物质。前人的研究已经证实相较于传统堆肥，黑水虻在实现碳、氮回收利用，减少温室气体排放方面具有较大的潜力14-15，但对于黑水虻转化畜禽粪便后碳氮及微生物群落变化还鲜有报道。因此，本文研究了黑水虻转化猪粪和鸡粪前后碳、氮变化规律、菌群结构及相关代谢功能基因变化特征，以期为畜禽粪便的黑水虻高效转化提供科学依据。1材料与方法1.1 试验材料本试验使用的黑水虻来自天津农学院有机废弃物资源化研究中心；猪粪取自天津市静海区某生猪养殖场，鸡粪取自天津市宝坻区某蛋鸡养殖场。清粪工艺均为干清粪，试验前将猪粪和鸡粪用小塑料袋分装并放入-20 冰箱冷冻，使用前解冻并将猪粪和鸡粪的含水率调至70%。nitrogen,and ammonium nitrogen contents were significantly reduced in both types of manure.After transformation,18.93%and 10.49%ofcarbon and 31.42%and 32.58%of nitrogen in pig manure and chicken manure,respectively,were absorbed and utilized by the BSFL,while 74.83%and 57.43%of carbon and 43.71%and 60.25%of nitrogen were retained in the BSFL frass.Compared with fresh pig andchicken manure,the microbial community structure of the BSFL frass was changed substantially,with a significant increase in bacterialrichness and diversity.Firmicutes,Proteobacteria,and Actinobacteria were the dominant phyla in the pig manure,chicken manure,and theBSFL frass.After BSFL transformation,the bacterial community structure in the frass evolved to favor those that were better at protein andfat degradation.The abundance of cellulose-degrading bacteria in the BSFL frass sourced from transformed chicken manure was higherthan that in fresh chicken manure,predominantly comprising Firmicutes.The abundance of cellulose-decomposing bacteria belonging toFirmicutes in the BSFL frass sourced from pig manure decreased,whereas the abundance of lignin-degrading bacteria belonging toActinobacteria increased.PICRUSt prediction analysis showed that the abundance of functional genes for ABC transport,amino acidbiosynthesis,and carbon metabolism was highest in the two groups of the BSFL frass,and the abundance of metabolic genes in frass fromchicken manure was higher than that from pig manure.These results suggested that the transformation efficiency of chicken manure by theBSFL was higher than that of pig manure.After transformation,most of the carbon and nitrogen in the pig manure and chicken manure weretransferred to the BSFL frass,some transferred to insect bodies,and some was lost.Carbon loss was greater in chicken manure than in pigmanure,whereas nitrogen loss was greater in pig manure than in chicken manure.Organic carbon and C/N ratios increased after thetransformation of pig manure,whereas they decreased after the transformation of chicken manure.Dissolved organic carbon,total nitrogen,nitrate nitrogen,and ammonium nitrogen content decreased in both types of manure.BSFL transformation significantly changed themicrobial community structures of pig and chicken manures,increased the abundance of organic-degrading bacteria,and enhanced thecarbon and nitrogen metabolism of microorganisms in the manure.Keywords：black soldier fly;pig manure;chicken manure;bacterial community;carbon and nitrogen metabolism1389农业环境科学学报第42卷第6期1.2 试验设计本试验共设计黑水虻转化猪粪（PBV）和黑水虻转化鸡粪（CBV）两个处理组，以转化前的猪粪（PM）和鸡粪（CM）作为对照。分别将800 g猪粪和800 g鸡粪平铺在塑料盒（长宽高：70 cm45 cm15 cm）中，再分别接种200 g黑水虻，每组3个重复，每日喂食一次（第2 天：1.2 kg；第3天：1.6 kg；第4天：2.0 kg；第5天：3.0 kg；第 6天：3.6 kg；第 7天：3.6 kg；第 8天：2.0kg），喂养8 d后，停止喂食，放置24 h，待虫体肠道内的粪便完全排出体外后再分离虫体和虫粪。分别采集黑水虻转化前的猪粪、鸡粪样品和转化后的虫粪样品。一部分鲜样放入-80 冰箱保存，用作细菌群落检测，一部分鲜样自然风干，虫体微波烘干，用作理化性质测定。1.3 理化指标测定虫体和虫粪的全氮、虫体粗蛋白采用凯氏定氮法测定16；有机质采用重铬酸钾容量法测定，总有机碳含量根据公式TOC=有机质/1.724计算，根据TOC/TN计算C/N17；用1 molL-1KCl提取，采用连续流动分析仪测定NO-3-N和NH+4-N含量18；样品与去离子水按照1 10混匀，提取可溶性有机质（DOM）19，之后采用重铬酸钾氧化-比色法测定提取液中可溶性有机质含量，按照可溶性有机质/1.724 计算溶解性有机碳含量20；粪便转化率=增加的虫体干质量/转化的粪便干质量100%，粪便减量率=（粪便干质量-虫粪干质量）/粪便干质量100%21。1.4 DNA的提取和16S rRNA基因测序分析虫粪的 DNA 提取和测序：将样品 CM、CBV、PM和PBV送至北京百迈克云科技有限公司。采用基因组DNA提取试剂盒（天根）完成总核酸的提取，再使用酶标仪对提取的核酸进行浓度检测，合格后对其进行扩增，扩增后的PCR产物使用1.8%的琼脂糖凝胶电泳检测完整性。对质检合格的样本构建目标区域PCR 体 系 并 进 行 纯 化，再 采 用 引 物 338F（5-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3）和 引 物 806R（5-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3）对细菌 16S rRNA基因的 V3和 V4区进行 PCR 扩增，PCR 产物用 1.8%的琼脂糖凝胶电泳检测后再进行混样，将混好的样品进行切胶前纯化，之后用Monarch DNA胶回收试剂盒回收PCR产物并建立文库，文库通过Qsep-400方法进行质检，质检合格后使用Illumina novaseq6000进行上机测序。1.5 数据分析统计分析采用 SPSS 20.0。在分析之前，使用单样本Kolmogorov-Smirnov检验检查数据的正态分布，并使用Levene检验检查方差的同质性。单因素方差分析（ANOVA）和t检验用于确定样本之间的差异，显著性水平为 P0.05。使用 Usearch 软件对序列在97.0%的相似度水平下进行聚类、获得 OTU。利用QIIME2软件对样品 多样性和 多样性进行分析，再使用Origin 2019绘制箱型图，根据bray curtis算法计算样品间的距离从而绘制PCoA图，使用PICRUSt2软件进行菌群代谢功能的分析与预测，使用IMG微生物基因组数据进行功能信息的输出进而推测样本中的功能基因组成，从而分析不同样本或组分之间在功能上的差异。2结果与分析2.1 黑水虻转化处理猪粪和鸡粪的生产性能由表1可知，黑水虻转化猪粪和鸡粪后分别产生了421.18 g和522.13 g干虫，猪粪和鸡粪的转化率分别为8.36%和10.42%，减量率分别为29.31%和34.98%，虫体粗蛋白含量分别为42.73%和47.10%，上述结果表明黑水虻对鸡粪的转化效率高于猪粪。2.2 猪粪和鸡粪转化前后碳氮变化猪粪和鸡粪经黑水虻转化后的理化性质变化如表2所示。与新鲜猪粪（PM）相比，黑水虻转化后虫粪中溶解性有机碳、全氮、硝态氮和铵态氮含量均显著下降，其降幅分别为 17.75%、28.22%、86.73%和93.94%，而总有机碳含量和C/N较PM均显著增加，增处理TreatmentPBVCBV虫体干质量Dry weight of insect body/g421.189.90b522.135.38a粪便转化率Conversion rate of manure/%8.360.22b10.420.12a粪便减量率Reduction rate of manure/%29.310.73b34.980.52a虫体粗蛋白Crude protein of insect body/%42.730.08b47.100.44a注：同列不同小写字母之间表示差异性显著（P0.05）。下同。Notes：Different lowercase letters in a column indicate significant differences among treatments at PCMPBVPM，梭菌目细菌平均相对丰度之和表现为PMPBVCBVCM。此外，猪粪和鸡粪转化后，PBV 和CBV中丹毒丝菌属（Erysipelothrix，丹毒丝菌纲）的平均相对丰度分别上升了6.63倍和13.47倍，志贺菌属（Escherichia-Shigella）的平均相对丰度分别下降了91.67%和 97.87%。慢生根瘤菌属（Bradyrhizobium）是CM和CBV的优势菌属，但黑水虻转化鸡粪后CBV中慢生根瘤菌属丰度从3.22%下降到了2.71%，而PM和PBV中几乎没有检测到慢生根瘤菌属。2.6 微生物代谢功能预测通过KEGG代谢途径的组成及差异分析，可以观测到不同样本之间微生物群落的功能基因在代谢途径上的差异和变化。与碳氮代谢相关的前20种功能基因（KEGG三级代谢）丰度信息如图4所示，黑水虻转化猪粪和鸡粪后，PBV和CBV中各种代谢基因的平均丰度均明显高于PM和CM，且CBV的平均基因丰度要高于PBV，可见黑水虻转化增强了猪粪和鸡粪的碳氮代谢，且鸡粪转化组的碳氮代谢比猪粪转化组更为强烈。20种功能基因中平均基因丰度最高的前三位分别是ABC转运蛋白、氨基酸的生物合成和碳代谢，其中ABC转运蛋白的平均基因丰度最高。3讨论黑水虻转化鸡粪后虫体产量、虫体粗蛋白含量、粪便转化率和减量率均高于猪粪转化，这与刘涛22的研究结果类似。庞万程23发现使用玉米芯将猪粪C/N调至25时黑水虻产量最高，本试验中鸡粪和猪粪的C/N分别为20.02和13.78，鸡粪的C/N更接近于最优物料组成，这可能是黑水虻对鸡粪的转化率和减量率更高的原因。黑水虻转化鸡粪后虫体粗蛋白含量显图2 黑水虻转化猪粪和鸡粪前后和多样性变化Figure 2 Changes of alpha-diversity and beta-diversity in chicken manure and pig manure before andafter treatment with black soldier fly（a）Chao1指数Chao1 richness处理Treatment（b）Shannon指数Shannon index处理Treatment（c）Veen图Venn diagram（d）PCoA Principal coordinates analysisPC2-33.35%R2=0.987P=0.001-0.4PC1-48.78%0.40.20-0.2-0.4-0.200.20.41392马叶，等：猪粪、鸡粪经黑水虻转化后碳、氮及微生物变化2023年6月著高于猪粪转化，由此推测使用黑水虻转化鸡粪所获得的经济效益高于猪粪转化。碳、氮是黑水虻生长和发育过程中必需的营养元素，黑水虻可以将猪粪和鸡粪中的碳、氮一部分转化为生物质体，一部分转入虫粪中，而转化后虫粪中的溶解性有机碳、全氮、硝态氮和铵态氮含量均显著低于猪粪和鸡粪，这与Pang等15的研究结果类似。溶解性有机碳是基质中最容易利用的碳源15，两组虫粪中的溶解性有机碳含量显著低于猪粪和鸡粪，这可能是由于黑水虻吸收利用了粪便中的碳所致24。此外，黑水虻肠道中含有能够合成氨基酸的细菌类群，高水平的氨基酸代谢有利于黑水虻体内的蛋白质迅速积累12，从而使得铵态氮和硝态氮可能在这一过程中被大量消耗。黑水虻转化猪粪后，虫粪中有机碳含量升高，而转化鸡粪后，虫粪中有机碳含量降低，这可能是因为猪粪和鸡粪的特性不同。黑水虻转化猪粪和鸡粪后，显著改变了其微生物群落结构，提高了虫粪的细菌多样性和丰富度，这可能是由于黑水虻肠道中的微生物进入虫粪中所致。厚壁菌门、变形菌门和放线菌门是猪粪、鸡粪和两组虫粪的优势菌门，这与前人的研究结果类似19，25。随着黑水虻的转化，CBV中厚壁菌门丰度明显高于CM，图3 黑水虻转化猪粪和鸡粪前后的门（a）和属（b）水平的细菌群落相对丰度Figure 3 Relative abundance of bacteria community at the phylum level（a）and genus level（b）in chicken manureand pig manure before and after treatment with black soldier fly（b）Sample（a）Sample020406080Relative abundance/%CBV1CBV2CBV3CM1CM2CM3PBV1PBV2PBV3PM1PM2PM3100OthersNitrospiraeEpsilonbacteraeotaVerrucomicrobiaCyanobacteriaFusobacteriaAcidobacteriaBacteroidetesActinobacteriaProteobacteriaFirmicutes1393农业环境科学学报第42卷第6期而猪粪转化过程则与之相反，且对属水平分析发现，厚壁菌门中基因丰度较高的属分别属于芽孢杆菌纲、丹毒丝菌纲和梭菌纲。有研究表明芽孢杆菌纲中的某些细菌具有分泌蛋白酶，降解蛋白质的能力17，26，丹毒丝菌纲细菌具有分解脂肪的能力27，两组虫粪中的芽孢杆菌纲和丹毒丝菌纲丰度要明显高于猪粪和鸡粪，这表明黑水虻转化过程中可以通过增加蛋白质降解菌和脂肪降解菌的丰度加速猪粪和鸡粪的降解。据报道梭菌目具有分解纤维素、半纤维素和产酸的能力28，棒状杆菌科细菌可以降解木质素、单宁和激素等有机物29，本研究中黑水虻转化后明显提高了CBV的梭菌目丰度，但降低了PBV的梭菌目丰度，提高了两组虫粪的棒状杆菌科丰度，这表明黑水虻能够通过调节不同基质中的细菌群落结构来增加降解纤维素和木质素的细菌丰度，从而达到快速降解猪粪和鸡粪的目的。此外，CBV中的慢生根瘤菌属是一种能与大豆共生固氮的细菌30，PBV中的棒状杆菌属能促进亚硝酸盐的产生31，它们在 CBV 和 PBV 中的分布可能使得黑水虻在转化猪粪过程中比在转化鸡粪过程中损失更多的氮。志贺菌属（Escherichia-Shigella）可能会引发腹泻、溃疡性结肠炎等多种肠道疾病，是一种典型的肠道致病菌32。本研究结果表明黑水虻转化猪粪和鸡粪后该菌丰度下降了90%以上，这表明黑水虻对粪便中的潜在病原菌具有一定的削减作用。其他研究也证实黑水虻转化能降低粪便中的病原菌，如 Awasthi等33研究发现黑水虻幼虫能显著降低鸡粪、猪粪和牛粪中的病原菌丰度，Elhag等34报道称黑水虻能通过调节肠道相关微生物和抗菌肽的表达等多种机制抑制猪粪中潜在的人畜共患病原体。黑水虻转化鸡粪和猪粪后，虫粪中 ABC 转运蛋白的基因丰度最高，研究表明ABC转运蛋白具有促进糖类和氨基酸等物质运输的作用35，其在 PBV 和CBV中大幅增加表明黑水虻加快了猪粪和鸡粪转化体系中微生物的物质代谢。CBV中氨基酸合成基因丰度和碳代谢基因丰度均显著高于 PBV，这也进一步证明了为什么黑水虻转化鸡粪过程中的氮损失要明显低于猪粪转化，而黑水虻转化猪粪过程中则保留了更多的碳。黑水虻转化猪粪和鸡粪过程中分别损失了 6.24%和 32.08%的碳及 24.87%和 7.17%的氮，袁京等36研究指出，传统堆肥过程可能会造成48.7%的碳和27.7%的氮损失，这一数据明显要高于黑水虻转化过程中的碳氮损失，这说明相较于传统堆肥，黑水虻转化对减少猪粪和鸡粪的碳、氮损失具有更大的潜力。黑水虻转化处理猪粪和鸡粪后增加了粪便中有机物降解菌丰度，加快了碳、氮代谢，实现了粪便中碳、氮物质的高效利用，但关于畜禽粪便转化过程中011062106310641065106图4 与碳氮代谢相关的KEGG三级代谢图（前20种）Figure 4 Level 3 KEGG metabolism diagram of variation in bacterial function profile related to carbon and nitrogen metabolism（Top20）1394马叶，等：猪粪、鸡粪经黑水虻转化后碳、氮及微生物变化2023年6月碳、氮损失的调控还需进一步的研究，以减少其碳、氮损失，提高转化效率。4结论（1）黑水虻可生物转化畜禽粪便，提高其资源化利用率。黑水虻对鸡粪的转化率高于猪粪，猪粪转化后有机碳含量和C/N提高，鸡粪转化后有机碳含量和C/N降低，而两者的溶解性有机碳、全氮、硝态氮和铵态氮含量都降低。猪粪、鸡粪经黑水虻转化后碳、氮大部分转入虫粪，鸡粪中的碳损失高于猪粪，而猪粪氮损失高于鸡粪。（2）黑水虻转化猪粪和鸡粪后显著改变了其微生物群落结构，提高了细菌群落丰富度和多样性，增加了虫粪中蛋白质和脂肪降解菌丰度，增强了粪便中微生物的碳、氮代谢，其中ABC转运蛋白、氨基酸的生物合成和碳代谢基因在虫粪中更加丰富，且鸡粪源虫粪的碳氮代谢基因丰度要高于猪粪源虫粪。参考文献：1 韩冬梅,汪刚,魏珣.养殖业环境问题研究热点及趋势探析：基于Cite Space 知识图谱分析J.中国农业资源与区划,2022,43（9）：60-70.HAN D M,WANG G,WEI X.Research hotspots and trendsof breeding industry environmental problems-based on the Cite Spaceknowledge map analysisJ.Chinese Journal of Agricultural Resourcesand Regional Planning,2022,43（9）：60-70.2 王小波,蔡瑞婕,耿维娜,等.黑水虻生物转化猪粪过程中重金属的迁移变化J.农业工程学报,2020,36（20）：263-268.WANG X B,CAI R J,GENG W N,et al.Migration and changes of heavy metals during biotransformation of pig manure by black soldier flyJ.Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering,2020,36（20）：263-268.3 焦敏娜,任秀娜,何熠锋,等.畜禽粪污清洁堆肥：机遇与挑战J.农业环境科学学报,2021,40（11）：2361-2371.JIAO M N,REN X N,HE Y F,et al.Opportunities and challenges in a livestock manurecleaner composting processJ.Journal of Agro-Environment Science,2021,40（11）：2361-2371.4 陆丽珠,邓盾,马平,等.黑水虻堆肥促畜禽粪便分解的研究进展J.广东农业科学,2020,47（8）：110-117.LU L Z,DENG D,MAP,et al.Research progress in composting with black soldier fly to promote the decomposition of livestock and poultry manureJ.GuangdongAgricultural Sciences,2020,47（8）：110-117.5 张金金,王占彬.黑水虻在畜禽养殖中的应用与研究进展J.家畜生态学报,2021,42（4）：84-90.ZHANG J J,WANG Z B.Application and research progress of Hermetia illucens in livestock and poultrybreedingJ.Journal of Domestic Animal Ecology,2021,42（4）：84-90.6 GOLD M,TOMBERLIN J K,DIENER S,et al.Decomposition of biowaste macronutrients,microbes,and chemicals in black soldier fly larval treatment：a reviewJ.Waste Management,2018,82：302-318.7 王斌,邹仕庚,彭运智,等.黑水虻在畜禽饲料中的应用研究进展J.中国畜牧杂志,2021,57（6）：8-15.WANG B,ZOU S G,PENGY Z,et al.Research progress on application of black soldier fly（Hermetia illucens）in animal feedJ.Chinese Journal of Animal Science,2021,57（6）：8-15.8 吴翔,胡从勇,蔡瑞婕,等.虫粪有机肥对番茄生长及品质的影响J.北方园艺,2019,426（3）：60-64.WU X,HU C Y,CAI R J,et al.Influence of frass organic manure on tomato growth and qualityJ.Northern Horticulture,2019,426（3）：60-64.9 LUO X,YANG Q,LIN Y,et al.Black soldier fly larvae effectively degrade lincomycin from pharmaceutical industry wastesJ.Journal Environmental Management,2022,307：114539.10 WU N,WANG X B,YAN Z C,et al.Transformation of pig manure bypassage through the gut of black soldier fly larvae（Hermetia illucens）：metal speciation,potential pathogens and metal-related functionalprofilingJ.Ecotoxicology Environmental Safety,2021,211：111925.11 KLAMMSTEINER T,WALTER A,BOGATAJ T,et al.The core gutmicrobiome of black soldier fly（Hermetia illucens）larvae raised onlow-bioburden dietsJ.Frontier in Microbiology,2020,11：993.12 AO Y,YANG C,WANG S,et al.Characteristics and nutrient functionof intestinal bacterial communities in black soldier fly（Hermetia illucens L.）larvae in livestock manure conversionJ.Microbial Biotechnology,2021,14（3）：886-896.13 JIANG C L,JIN W Z,TAO X H,et al.Black soldier fly larvae（Hermetia illucens）strengthen the metabolic function of food waste biodegradation by gut microbiomeJ.Microbial Biotechnology,2019,12（3）：528-543.14 PARODI A,GERRITS W,VAN L J,et al.Black soldier fly reared onpig manure：bioconversion effici