野生越南槐组织特异性内生真菌组及体外抗病原菌功能.pdf

.():/.:./.姚裕群 兰可 黄荣韶 等.野生越南槐组织特异性内生真菌组及体外抗病原菌功能.广西植物():.():.野生越南槐组织特异性内生真菌组及体外抗病原菌功能姚裕群 兰 可 黄荣韶 吴炫柯(.广西科技大学 医学部 广西 柳州 .柳州市农业气象试验站 广西 柳州 .广西中医药大学 南宁 )摘 要:有益微生物组能帮助宿主植物防御病害 越南槐的根、茎和种子在野外环境下健康发芽生长而栽培越南槐各组织极易感病 为了探明利用野生越南槐有益内生真菌组防治宿主病害的可能该文在分离健康野生越南槐根、茎和种子内生真菌的基础上并结合形态学和 序列特征鉴定内生真菌通过系统发育树、多样性指数和 多样性指数分别分析各内生真菌组的系统进化、多样性和相似性通过琼脂块法和平板对峙法测试内生真菌组的体外抗病原菌功能 结果表明:()从越南槐根、茎和种子内生真菌组分别分离鉴定 株 个分类单元、株 个分类单元、株 个分类单元()特有属多且所有种均为特有种显示根、茎和种子内生真菌组在属种进化上具有组织特异性()根茎/根种子/茎种子间极低的 多样性显示根、茎和种子各内生真菌组间的物种相似性极低()高的 多样性显示越南槐根、茎和种子均有丰富多样的内生真菌组()各内生真菌组三分之一以上的分类单元在体外均能拮抗供试病原菌根茎内生真菌组显示了强广谱的体外抗病原细/真菌功能种子内生真菌组显示了强广谱的体外抗病原真菌功能 该研究结果表明健康野生越南槐根、茎和种子内部均存在有益内生真菌组其具有生物多样性、组织特异性以及强广谱的体外抗病原菌功能在宿主各组织的抗病性方面可能发挥重要作用 这些结果将为进一步利用有益真菌组防治栽培越南槐各组织病害提供了材料和实验基础关键词:野生越南槐 有益内生真菌组 生物多样性 组织特异性 抗病功能中图分类号:文献标识码:文章编号:()(.)收稿日期:基金项目:国家自然科学基金()广西自然科学基金()年广西高校中青年教师科研基础能力提升项目()广西科技大学博士基金()第一作者:姚裕群()博士副研究员主要研究药用植物内生真菌宿主互作机制().通信作者:吴炫柯硕士高级工程师研究方向为应用气象().:.:().()()()()./.:越南槐()是广西著名道地药材山豆根的基源植物 山豆根药材清热解毒、消肿利咽常用于治疗湿热黄疸、心率失常、膀胱癌等症(国家药典委员会)含有生物碱、黄酮、皂苷等多种化学成分其中苦参碱和氧化苦参碱为其主要活性成分(.)具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗氧化、抑菌、保肝、调节免疫、降血压等药理学作用(彭成)随着健康大产业及乡村振兴的深入发展越南槐在广西百色、靖西、河池等地区推广种植 课题组在越南槐的野生驯化及其推广栽培中发现栽培越南槐容易感染各种病害其种子容易霉变影响发芽根茎时常腐烂发生炭疽溃疡引起条斑黑斑从而影响药材生长 而大量化学农药的使用容易导致药材农药、重金属等超标严重影响药材安全(.)因此发展绿色环保的越南槐病害防治策略对山豆根药材的可持续利用和发展极其重要 植物有先天的免疫系统以响应病原微生物的分子机制及效应物(.)植物有益微生物组通过与植物先天免疫系统的互作(.)使 植 物 系 统 获 得 相 关 抗 病 性(.)对植物的健康有重要的作用(.)番茄根系微生物组研究发现抗病与感病植株根系微生物组的结构、抗菌性功能有很大差异抗病植株根系微生物组作为有益微生物组转接到感病植株能激活感病株的抗病性(.)植物微生物组包括真菌组和细菌组根系微生物组主要来源于高度多样性的土壤生物受土壤类型、植物基因型、植物年龄等影响茎和种子微生物主要来源于气溶胶、昆虫及根系的迁移(.)在植物有益内生真菌组中各内生真菌通过与宿主进行复杂而精细的互作以激活植物先天免疫系统使宿主获得抗病性以拮抗病原和害虫的入侵甚至部分内生真菌自身就可以分泌毒性代谢物以拮抗病原菌的入侵(.)因此有益内生真菌组有利于宿主防御病害 野生越南槐生长于海拔 石灰岩山区的石头缝里周围植被类型多样局部小气候复杂多变在 期姚裕群等:野生越南槐组织特异性内生真菌组及体外抗病原菌功能这样的生境下野生越南槐依然能健康发芽生长并形成独特的药性此外项目组前期研究工作发现越南槐各组织内有内生真菌(姚裕群)因此我们推测独特复杂的野外生境容易使越南槐根、茎和种子形成独特而多样性的有益内生真菌组这些内生真菌组在拮抗病虫害方面可能发挥重要作用 本研究以相同生长年限不同时期采集的野生越南槐根、茎和种子为研究对象依托广西科技大学重点实验室、柳州市农业气象试验站采用组织块法分离内生真菌 结合形态和 序列测序比对鉴定真菌最大似然法构建内生真菌组系统发育树 软件计算内生真菌组的 多样性指数、多样性指数分别采用琼脂块法和平板对峙法体外测定内生真菌组各分类单元对病原细菌、真菌的拮抗活性 通过分析野生越南槐根、茎和种子内生真菌组的属种系统发育、多样性、多样性及体外抗病原菌功能拟探讨以下问题:()野生越南槐根、茎和种子各有益内生真菌组在属种系统发育上是否有差异()野生越南槐根、茎和种子各有益内生真菌组的多样性和相似性如何()野生越南槐根、茎和种子各有益内生真菌组体外是否具有抗病功能 本研究结果拟为探索利用野生越南槐各有益真菌组防治栽培越南槐各组织病害提供材料及实验基础材料与方法.材料.供 试 药 用 植 物 供 试 株 野 生 越 南 槐()年生株高约 根直径约 茎直径约.种子大小均匀饱满约(.根茎采集期分别为 年 月、月、月不同成熟度种子采集期分别为 年 月、月、月均采自靖西市诚良村山上(、)采集的越南槐根、茎和种子分别装袋、贴上标签并立即运往广西科技大学生物化学与分子生物学实验室并在 内处理样品.供试病原菌供试病原细菌为细菌性软腐病菌()、细菌性条斑病菌(.)、细菌性溃疡病菌(.)供试病原真菌为根腐病菌()、炭 疽 病 菌()、黑斑病菌()以上菌株均保藏在广西科技大学基础医学部.培养基、试剂与测序马铃薯葡萄糖()培养基、玉米培养基、培养基均购自广东环凯微生物科技有限公司所有培养基在 下湿热灭菌 备用次氯酸钠、甘油、酒精 均 购 自 成 都 金 山 化 学 试 剂 有 限 公 司购自天根生化科技有限公司引物/合成及 产物测序均由南京钟鼎生物技术有限公司完成.仪器与设备生物安全柜()、扩增仪()、凝 胶 成 像 系 统()、生化培养箱()、超低温冰箱()、离心机()、显微镜()、鼓风干燥箱()、全自动高压灭菌锅().方法.根、茎和种子内生真菌的分离纯化将越南槐的新鲜健康根段、茎段和种子用流水彻底冲洗表面晾干后移到超净工作台分别进行表面消毒即 酒精 无菌水漂洗 次次氯酸钠(根段/茎段 种子 )后无菌水漂洗 次无菌吸水纸吸干表面根段/茎段分别去除两端和表皮后切成 .大小的组织块种子分为种皮和胚均转接至/玉米粉培养基(含氯霉素和氨苄青霉素)并于 培养箱黑暗培养 待各组织边缘长出菌丝后及时挑取单一菌丝至 培养基上长出的菌落如果外部形态不一致继续挑取单一菌丝直至长出外部形态一致的菌落.根、茎和种子内生真菌的分类鉴定根据菌落的组织来源、培养时间及外部形态分别将根段、茎段和种子分离到的菌株划分为不同的形态型采用 分子标记鉴定每个形态型的代表菌株 采用通用引物对/从代表菌株基因组 扩增 序列并测序(.)分别 使 用 软 件 .和.分析测序序列登录 数据库比对下载最相似(尽量选择正式发表)序列使用.软件的邻接法()构建系统发育树经 次循环检验系统树的可靠性 在系统发育树中比对测序序列与参考序列之间的相似性依据真菌鉴定的常用相关阈值鉴广 西 植 物 卷定真菌(.)即相似性为未鉴定相似性为鉴定到属水平相似性为鉴定到种水平在属内比较中明显高于其他种时则被鉴定为同种.根、茎和种子各内生真菌组的系统进化基于真菌分类单元的 序列通过 .软件采用最大似然法()构建系统发育树来分析野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组的属种系统进化().根、茎和种子各内生真菌组的多样性和相似性 基于野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组的分类单元及其分离株系分别计算各真菌组的 多样性 指 数 香 农 维 纳 指 数()和辛普森多样性指数()及 多样性指数索伦森指数()和雅卡尔指数()通过 多样性指数来分析野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组的多样性通过 多样性指数来分析野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组间的物种相似性(.)使用生物统计软件.以及运用方差和多重比较以分析野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组的多样性差异.根、茎和种子各内生真菌组的体外抗病原菌功能 挑选内生真菌组各分类单元的代表菌株用于体外抗病原菌功能筛选 采用琼脂块法(姚裕群等)筛选供试内生真菌对病原细菌的拮抗活性即将新鲜病原细菌调成.麦氏浊度的菌悬液并将其在 内用无菌棉签均匀涂布于 培养基平板上将 直径的内生真菌菌块接入风干后的 培养基筛选平板每皿接 个菌块()培养 后观察并测量抑菌圈直径采用平板对峙法筛选(.)供试内生真菌对病原真菌的拮抗活性即将内生真菌和病原真菌均制成 直径菌块 块内生真菌接种于 培养基中央且周围等距接种 块病原真菌为处理以不接种内生真菌为对照 下培养待对照长至平板中央测量各病原菌块中心至平板中央之间病原菌的生长量并计算抑菌率抑菌率()对照生长量处理生长量对照生长量.统计分析基于野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组的分类单元及其分离株系计算相对频率()多样性指数(香农维纳指数和辛普森多样性指数)及 多样性指数(索伦森指数和雅卡尔指数)(.)使用生物统计软件 .以及运用方差和多重比较以分析野生与培越南槐内生真菌组多样性差异结果与分析.根、茎和种子内生真菌的分离和鉴定从野生越南槐根段共计 个组织块中分离获得 株内生真菌(图)从茎段 个组织块共分离获得 株内生真菌(图)从 粒种子共分离获得 株内生真菌(图)首先将分离自根、茎和种子的菌株分开然后将相同组织来源的菌株分别培养将相同培养时间内菌落孢子形态一致的菌株划分为同一形态型最后采用 序列分析鉴定每个形态型的代表菌株 结合形态学和 序列分析从根内生真菌组的 个形态型代表菌株中共鉴定 个分类单元从茎内生真菌组的 个形态型代表菌株中共鉴定 个分类单元从种子内生真菌组的 个形态型代表菌株中共鉴定 个分类单元且均来自于种皮 每个分类单元为一个特定的真菌物种依据真菌物种鉴定的常用相关阈值(见方法部分)根内生真菌组的 个分类单元(物种)中 个分类单元鉴定到属水平 个分类单元鉴定到种水平 个分类单元未鉴定茎内生真菌组的 个分类单元(物种)中 个分类单元鉴定到属水平 个分类单元鉴定到种水平 个分类单元未鉴定种子内生真菌组的 个分类单元(物种)中 个分类单元鉴定到属水平 个分类单元鉴定到种水平 个分类单元未鉴定 相关数据已上传 数据库登录号为、及.根、茎和种子各内生真菌组的系统进化基于野生越南槐根内生真菌组 个分类单元茎内生真菌组 个分类单元以及种子内生真菌组 个分类单元的 序列采用最大似然法分别构建了野生越南槐根、茎、种子内生真菌组的系统发育树(图 图 图)在根内生真菌组的已鉴定分类单元中 有 个属 个种其中有 个优势属镰刀菌属()为最优势属其次为茎点霉属()、青霉属()、期姚裕群等:野生越南槐组织特异性内生真菌组及体外抗病原菌功能图 野生越南槐根内生真菌组.在茎内生真菌组的已鉴定分类单元中有 个属 个种其中有 个优势属分别为节孢霉属()、青霉属、镰刀菌属、枝孢菌属()其中节孢霉属为最优势属在种子内生真菌组的已鉴定分类单元中有 个属 个种其中有 个优势属分别为炭疽菌属()、枝 孢 菌 属 和 假 尾 孢 菌 属()其中炭疽菌属为最优势属根、茎和种子 个内生真菌组共有属为 个即青霉属和枝孢菌属特有属分别为 个、个、个特有属分别约为共有属的 倍、倍、倍根、茎和种子 个内生真菌组间共有种为 个所有种均为特有种特有种分别为 个、个、个 研究结果表明在野生越南槐根、茎和种子内生真菌组中共有属少而特有属多且所有种均为特有种各组织内生真菌组在属种进化上具有组织特性.根、茎和种子各内生真菌组的多样性和相似性基于越南槐根、茎和种子各内生真菌组的分类单元(物种)、分离株系及其共有分类单元(物种)(图 图 图)计算 多样性指数(香农维纳指数和辛普森多样性指数)(表)及 多样性指数(索伦森指数和雅卡尔指数)(表)进一步比较野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组的 多样性指数及 多样性指数 越南槐根、茎和种子各内生真菌组的 多样性指数结果如表 所示比较其他药用植物组织内生真菌组(李玲玲)野生越南槐根、茎和广 西 植 物 卷图 野生越南槐茎内生真菌组.种子各内生真菌组的物种多样性指数均较大表明野生越南槐根、茎和种子内均有较丰富多样的内生真菌组而根茎内生真菌组的 多样性指数显著高于种子内生真菌组表明越南槐根茎内生真菌组的物种多样性显著高于种子内生真菌组越南槐根、茎和种子各内生真菌组间的 多样性指数如表 所示即索伦森指数和雅卡尔指数在.之间基于相似性系数原理当 多样性指数介于.时为极不相似.为中等不相似.为中等相似.为极为相似研究结果表明野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组间的物种相似性极低.根、茎和种子各内生真菌组的体外抗病原菌功能 种病原细菌(细菌性软腐病菌、细菌性条斑病菌、细菌性溃疡病菌)和 种病原真菌(根腐病菌、炭疽病菌、黑斑病菌)能广泛引起植物根、茎和种子的相应病害因此以这 种病原菌为靶标菌测试越南槐根、茎和种子各内生真菌组的体外抗病原菌功能以上述 种病原细菌为靶标菌对越南槐根、茎和种子各内生真菌组的分类单元(分别为 个、个、个)进行体外抗病原细菌活性测定由表 可知 在野生越南槐根内生真菌组中有 个分类单元()对靶标菌有不同程度的抑制作 期姚裕群等:野生越南槐组织特异性内生真菌组及体外抗病原菌功能图 野生越南槐种子内生真菌组.表 野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组的 多样性指数 多样性指数 根茎种子香农维纳指数.辛普森多样性指数 .注:多样性指数通过单因素方差的 分析结果由均值和标准差(个重复)表示不同字母表示.水平的显著性差异:.().用其中 个分类单元对细菌性软腐病菌有抑菌圈且抑菌圈直径均等于阳性对照 个分类单元对细菌性条斑病菌有抑菌圈且抑菌圈直径均大于或等于阳性对照 个分类单元对细菌性溃疡病菌有抑菌圈 个分类单元的抑菌圈直径等于阳性对照 个分类单元对 种靶标菌均有抑菌圈尤其是分类单元黑僵菌()对 种靶标菌的抑菌圈直径均等于阳性对照 在野生越南槐茎内生真菌组中 有 个分类单元()对靶表 野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组间的 多样性指数 多样性指数 根茎间茎种子间根种子间索伦森相似性指数.雅卡尔指数.注:多样性指数范围从(组间没有重叠)到(组间完全重叠):()().标菌 有 不 同 程 度 的 抑 制 作 用 其 中 分 类 单 元.对 种靶标菌的抑菌圈直径均大于或等于阳性对照在野生越南槐种子内生真菌组中没有发现抑制靶标病原细菌的分类单元以上述 种病原真菌为靶标菌对越南槐根、茎和种子各内生真菌组的分类单元(分别为 个、个、个)进行体外抗病原真菌活性测定由表 可知在野生越南槐根内生真菌组中有 个分类单元()对靶标菌均有不同程度的抑制作用 其中 个分类单元对根腐病菌的抑制率超过 个分类单元对炭疽病菌的抑制率超过广 西 植 物 卷表 野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组分类单元对病原细菌的抑菌圈 内生真菌组 真菌分类单元/阳性对照/抑菌圈直径 细菌性软腐病菌细菌性条斑病菌.细菌性溃疡病菌.阳性对照 硫酸链霉素 野生越南槐根 草茎点霉 .黑僵菌 野生越南槐茎 .注:符号标记不同范围的抑菌圈.:.个分类单元对黑斑病菌的抑制率超过茄镰孢菌()、可可球二孢菌()、.、.、草茎点霉(.)个分类单元对 种病原真菌的抑制率均超过 显示了强的拮抗活性在野生越南槐茎内生真菌组中有 个分类单元()对靶标菌均有不同程度的抑制作用其中 个分类单元对根腐病菌的抑制率超过 个分类单元对炭疽病菌的抑制率超过 个分类单元对黑斑病菌的抑制率超过分类单元尖孢镰刀菌()对 种病原真菌的抑制率均超过 显示了强的拮抗活性在野生越南槐种子内生真菌组中有 个分类单元()对靶标菌均有不同程度的抑制作用其中 个分类单元对根腐病菌的抑制率超过 个分类单元对炭疽病菌的抑制率超过 个分类单元对黑斑病菌的抑制率超过 分 类 单 元 海 水 仙 炭 疽 菌()对 种病原真菌的抑制率均超过显示了强的拮抗活性体外抗病原菌功能测定结果(表 表)显示野生越南槐根内生真菌组具有丰富的抗病原菌分类单元(个)体外对 种病原细/真菌均显示了强广谱的拮抗活性尤其是黑僵菌、茄镰孢菌、可可球 二 孢 菌、.、.、草茎点霉 个分类单元对 种以上病原细/真菌均具强广谱的拮抗活性野生越南槐茎内生真菌组也具有丰富的抗病原菌分类单元(个)体外对 种病原细/真菌也均显示了强广谱的拮抗活性尤其是 .、尖孢镰刀菌 个分类单元对 种以上病原细/真菌均具强广谱的拮抗活性野生越南槐种子内生真菌组同样具有丰富的抗病原菌分类单元(个)体外对靶标病原细菌没有拮抗活性但对 种病原真菌均显示了强广谱的拮抗活性尤其是分类单元海水仙炭疽菌对 种病原真菌均具强广谱的拮抗活性 研究结果表明野生越南槐根茎内生真菌组体外均能有效拮抗病原细/真菌具强广谱的体外抗病原细/真菌功能而野生越南槐种子内生真菌组体外均能有效拮抗病原真菌具强广谱的体外抗病原真菌功能讨论与结论植物的每个组织都定殖有不同而多样的内生真菌组内生真菌组与宿主植物协同进化、互惠共生()在内生真菌组与宿主植物的互作过程中基于“获得性免疫”理 期姚裕群等:野生越南槐组织特异性内生真菌组及体外抗病原菌功能表 野生越南槐根、茎和种子各内生真菌组分类单元对病原真菌的生长抑制 内生真菌组 真菌分类单元 病原真菌的生长抑制 根腐病菌 炭疽病菌 黑斑病菌 野生越南槐根 .茄镰孢菌.可可球二孢菌 .草茎点霉.野生越南槐茎 .尖孢镰刀菌 野生越南槐种子 .海水仙炭疽菌 .注:符号标记不同的生长抑制范围.:.论部分内生真菌能激活植物的天然免疫系统使宿主植物获得免疫活性以拮抗害虫和抗病微生物(.)基于“马赛效应”部分内生真菌通过内生真菌宿主/内生真菌内生真菌间的互作在宿主植物组织里合成多样性的化学成分以保护宿主()基于“平衡协作”学说部分内生真菌能帮助宿主直接拮抗病原菌(.李玲玲)已有研究结果表明内生真菌组在植物宿主的抗病中发挥着重要的作用 课题组在越南槐的栽培推广中发现栽培越南槐的根、茎和种子非常容易发病而野生越南槐各组织则极少发病且越南槐各组织内有内生真菌(姚裕群 .)基于内生真菌组及越南槐的前期研究工作推测生长于广西石灰岩山区独特生境的越南槐根、茎和种子内部可能存在独特的有益内生真菌组这些独特内生真菌组在野生药材抗病性方面可能发挥着重要的作用 宿主生长年限、生长季节、生长广 西 植 物 卷环境及组织类型也显著影响内生真菌组的系统进化、多样性及功能(.)为了避免生长年限和生长季节对内生真菌组的影响研究独特生境下越南槐根、茎和种子内生真菌组的系统发育、多样性及抗病潜力进而有效利用独特生境野生越南槐各组织有益内生真菌组防治其宿主栽培越南槐病害本研究分三个时期分别从相同生长年限/相同发育期的野生越南槐根茎/种子分离鉴定内生真菌分析各组织内生真菌组的系统发育、多样性、相似性和体外抗病原菌功能探明野生越南槐各组织内生真菌组作为有益微生物组防治栽培宿主病害的潜力多样性表明野生越南槐根、茎和种子内均存在分类单元较丰富多样的内生真菌组 根茎内生真菌组的 多样性显著高于种子可能由于根茎的生长时期远大于种子研究结果与前人研究基本一致(.李玲玲)基于“获得性免疫”理论越南槐根、茎和种子内生真菌组的分类单元越丰富越有助于激活宿主各组织的天然免疫系统使宿主各组织获得拮抗多种病原的免疫活性基于“马赛效应”分类单元多样的越南槐根、茎和种子内生真菌组通过多样的分类单元宿主/分类单元分类单元互作而有益于在宿主各组织内合成多样性的化学成分以保护宿主各组织免受多种病原侵害 因此基于“获得性免疫”理论和“马赛效应”丰富多样的野生越南槐根、茎和种子内生真菌组有益于帮助宿主各组织防御病害 聚类分析和低的 多样性进一步表明越南槐根、茎和种子内生真菌组在属种的发育上差异大表明越南槐各组织内存在不同的内生真菌组内生真菌组具有组织特异性组织特异性的内生真菌组在与特异组织的互作中可能帮助宿主组织拮抗特异的病原 内生真菌组的体外抗病功能分析发现在越南槐根、茎和种子的内生真菌组中均有三分之一以上的分类单元具有体外抗病原菌活性这些抗病原菌活性分类单元尤其是强广谱抗病原菌活性分类单元如根内生真菌组分类单元黑僵菌、茄镰孢菌、可可球二孢菌、.、.、草茎点霉茎内 生 真 菌 组 分 类 单 元.、尖孢镰刀菌种子内生真菌组分类单元海水仙炭疽菌可能直接参与拮抗宿主各组织病原菌的入侵 根、茎和种子 个内生真菌组共有青霉属、枝孢菌属这 个属共有属可能在帮助宿主越南槐根、茎和种子拮抗共同病害方面发挥作用 根茎/茎种子间均有共同的分类单元推测各组织内生真菌组间可能存在菌株交流番茄抗病植株根系微生物组中的优势属虽然在体外不能抑制病原菌但是接种番茄后能激活宿主的天然免疫系统而强烈抑制病原菌引起的番茄枯萎病(.)可见微生物组中的优势属在帮助宿主获得抗病活性方面发挥着重要作用 本研究中野生越南槐各组织的内生真菌组均存在特定的优势属如根内生真菌组中的 优 势 属 镰 刀 菌 属、茎 点 霉 属、青 霉 属、茎内生真菌组中的优势属节孢霉属、青霉属、镰刀菌属、枝孢菌属种子内生真菌组中的优势属炭疽菌属、枝孢菌属、假尾孢菌属特别是这些优势属的部分分类单元还具有病原菌拮抗活性这些优势属定殖根、茎和种子后可能激活其天然免疫系统使宿主组织能拮抗各病原菌引起的相关病害由此推测越南槐根、茎和种子内生真菌组内的这些优势属在保护宿主各组织拮抗病害方面可能发挥着重要作用 此外虽然野生越南槐种子内生真菌组检测不到病原细菌的体外拮抗活性但其优势属定殖种子后仍可能激活宿主使其获得拮抗病原细菌的免疫活性野生越南槐根、茎和种子内均有较丰富的内生真菌组这些内生真菌组具有生物多样性、组织特异性以及强广谱的体外抗病原菌功能作为有益微生物组在宿主各组织的抗病性方面可能发挥重要作用参考文献:.():.:.():./.:.期姚裕群等:野生越南槐组织特异性内生真菌组及体外抗病原菌功能 .:.国家药典委员会.中华人民共和国药典.北京:中国医药科技出版社:.:.:.():.():.():.():.谷筱玉 龙海荣 谢景千等.广西山豆根中 种重金属元素的微波消解 法测定.时珍国医国药():.:.():.:.():.():.():.李玲玲.药用植物青蒿不同种类的内生菌抑菌活性分析.广西植物():.():.:.():.:.彭成.中华道地药材.北京:中国中医药出版社:.:.:.姚裕群.越南槐内生真菌多样性、抑菌活性及其次生代谢产物研究.南宁:广西大学:.:.():.():.(责任编辑 周翠鸣)广 西 植 物 卷