临床医学检验中级考试—免疫.doc

免疫PEG1. 可用来检测CIC，特点是简便，特异性差，易受温度影响，PEG最终浓度为3-4%（分子量越大，PEG浓度越小）；2. 是最常用的细胞融合剂，分子量大约6000。3. 可加速IC的形成；补体：1. 由肝脏或巨噬细胞产生。（抗原刺激机体不可产生！）属于球蛋白2. 灭活：56 30min。低温不能灭活。3. 补体降低：a) 消耗：SLE，冷球蛋白血症，自免性溶贫，类风关，移植排斥等；b) 丢失：烧伤，失血，肾脏病变；c) 合成不足：肝病，营养不良；d) 细菌感染（G-尤甚），替代途径激活（凝聚的Ig、内毒素，菌体多糖、水解蛋白酶等可激活替代途径）；4. 补体升高：感染恢复期，恶性肿瘤（C2/3/4）；心梗、病毒肝炎、糖尿病、正常妊娠则升高。5. 补体活化：经典：IC激活C1q，进一步激活C1r和C1s；激活顺序，142356789；经典途径激活可用C1q结合试验来检测；MBL：MBL结合至细菌启动的途径，激活物是MBL或CRP，绕过C1途径；旁路：C3开始。6. CH50测定：检测的是经典途径的溶血总活性。7. 单个补体测定：免疫溶血法：非检测含量，而检测活性；免疫化学法：单向免疫扩散，火箭免疫电泳，透射比浊法，散射比浊法；8. 补体结合试验（cft）：不检测补体，而是利用补体检测抗原抗体。不溶血为阳性。所用补体多为豚鼠血清；9. 溶血反应和补体结合试验所用溶血素多为兔抗羊RBC抗体；溶血试验用2个单位的溶血素；10. C1抑制分子缺陷，导致遗传性血管神经性水肿；11. C3a和C5a叫做过敏毒素，可作用于肥大细胞和嗜碱性粒细胞，引起过敏反应。12. C3b与C3b受体结合后促使B细胞活化。基因工程抗体的优点：非异源性。人鼠嵌合体指：Ig的人（C区）和鼠（V区）连接。白介素1 IL-1、6刺激肝脏细胞分泌急性时相反应蛋白；2 IL-2：T细胞生长因子。活化T细胞产生，促进淋巴细胞增殖。可促B细胞分泌抗体；激活NK细胞；3 IL-4：可促进免疫球蛋白的类型转换，促进IGE转换；4 IL-5刺激EO增殖分化；5 IL-6支持浆细胞增殖分化，以及B细胞杂交瘤细胞增殖；6 IL-8对中性粒有趋化作用；7 IL4/10是Th2细胞分泌的细胞因子，可负调节细胞免疫应答；IL-10抑制IL-2合成；细胞因子1. 多数细胞因子以单体形式存在，以非特异方式发挥作用，不受到MHC的限制。2. TGF-刺激靶细胞产生IL-1，IL6；激活NK细胞；3. TGF-可负调节免疫应答；4. 干扰素可抑制TH0细胞向TH2细胞转换，激活NK细胞；B细胞1. B细胞： 不成熟B细胞仅表达SmIgM； 成熟B细胞表面表达SmIgM, SmIgD；CD21 B2是外周血中的主要B细胞。2. 功能：B1主要和免疫调节、免疫病、B细胞源性肿瘤密切相关；B2是体液免疫的执行细胞。3. B1：CD5/19/20/224. B2：CD23/12/20/225. CD21可与EB病毒结合；6. B细胞到浆细胞发育发生障碍，可发生选择性免疫缺陷症；T细胞1. Th1细胞：分泌IL-2/IFN-/IFN-；Th2细胞：分泌IL-4/5/6/10；2. 全部T细胞都表达CD2；3. 成熟T细胞表达CD3；4. 部分T细胞表达CD4, CD8；5. 与绵阳红细胞结合的是CD2；6. 记忆性T细胞表面是CD45RO；7. 部分NK细胞表达CD2；8. CD28主要表达在T细胞免疫球蛋白1. IgA：2. IgD：低；0.2%3. IgE：最少。4. IgG：Fc段可与SPA结合。5. IgM：可激活补体；原发性巨球蛋白血症可增高；冷球蛋白4自发沉淀免疫球蛋白测定1. IgG/M/A：单向环状免疫扩散法；免疫比浊法；2. IgD：M蛋白1. 良性单克隆丙球蛋白常见骨髓中M蛋白；轻链病尿中增高的主要为M蛋白；2. 多发性骨髓M蛋白不具免疫活性；3. 理化性质单一，多无免疫活性；4. 血清蛋白区带电泳：经典分析方法。5. 免疫球蛋白定量：粗筛6. 免疫电泳：鉴定的方法。取代电泳和免疫扩散电泳的结合。7. 免疫固定电泳：鉴定的常用方法。区带电泳和特异抗血清免疫沉淀反应相结合。k-Ig和入-Ig定量测定 主要为单项免疫扩散法和免疫比浊法。抗原抗体反应1. 前带现象：抗体过剩；2. 后带反应：抗原过剩；抗原呈递细胞：初次应答多为DC和单核巨噬，再次应答主要是B细胞。中性粒细胞1 趋化能力下降（小室法，皮窗试验）：糖尿病2 吞噬能力下降：补体缺陷3 代谢能力下降：慢性肉芽肿4 NBT（+）：细菌感染（NBT测试杀菌能力），正常为5-10%；5 中性粒发育不良可出现慢性肉芽肿巨噬细胞1. 巨噬细胞直接参加2,4型超敏反应，不直接参加1.3型超敏反应。2. 具有ADCC效应。3. 表面受体有清道夫受体，FcR，TLR，补体受体。1型超敏反应1. 变应原：选择性激活CD4+Th2细胞、B淋巴细胞；2. 效应抗体：IgE3. 效应细胞：BASO, EO, 肥大细胞4. 举例：过敏性休克，皮肤过敏，呼吸道过敏。5. 特点：具有明显的特体差异。2型超敏反应（细胞毒型）1. 抗体：IgG, IgM。2. 细胞：NK, 补体，巨噬细胞。3. 举例：新生儿溶血3型超敏反应（循环免疫复合型）1. 抗体等：IgG, IgM，复合物，补体。2. 细胞：中性粒细胞浸润3. 举例：血清病、链球菌感染肾小球肾炎、SLE，类风关。4型超敏反应1. 反应物质：无补体、抗体2. 细胞：巨噬细胞，淋巴细胞3. 举例：接触性皮炎4. 备注：关键作用的细胞还是T细胞，活化的CD4+Th1可招募单核巨噬细胞并活化，脱敏治疗诱导机体产生的封闭抗体是IgG乙肝1. HBV DNA感染第一个出现的为HBsAg；2. HBV存在和复制活跃的直接指标为HBcAg；SLEIgG，IgA升高较多类风关IGM增高为主标志性抗体SLE：抗Sm抗体：不与活动度相关；抗dsDNA抗体：活跃期明显升高；DiGeorge综合征：先天性胸腺发育不良，胚胎胸腺移植治疗有效。结核分枝杆菌：抗PPD抗体+，结核菌活动的重要标志。HLA抗原1. HLA分子多态性主要体现在多肽结合区上，而非Ig样区；2. 1类分布较广，有核细胞。淋巴、WBC表面最多。而RBC、神经细胞、滋养层细胞则不表达。3. 2类分布较窄，主要在B细胞，单和巨噬细胞，DC及其他APC上。4. 检测淋巴细胞HLA抗原：微量淋巴细胞毒试验。5.移植1 超急性排斥反应：数分钟，数小时，长至24-48小时发生； 急性排斥反应：数周数月，免疫抑制剂治疗后可缓解; 亚急性排斥反应： 慢性排斥反应：数月数年，免疫抑制剂治疗后常无效；2 同种异体移植：排斥反应最主要，受者T细胞，针对移植物抗原发生免疫应答。3 移植物抗宿主反应：常见于骨髓移植，骨髓中的免疫细胞攻击受体（严重免疫抑制状态）。4 受者对供体MHC识别，间接识别被激活的T细胞以CD4+为主。原发性巨球蛋白血症浆细胞恶性增殖，分泌IgM增多。遗传性血管性水肿补体系统缺陷病，缺乏C1/NH，导致炎症介质产生失控。普通易变型免疫缺陷B细胞功能缺陷病，信号转导异常。慢性肉芽肿：属于原发性吞噬细胞功能缺陷。中性粒细胞和单核细胞的调理、吞噬、杀伤能力受损。ADA缺陷病联合免疫缺陷病，ADA下降，多见于婴幼儿。沉淀反应1. 免疫浊度反应：要保持抗体过量，若抗原过量则不准确；2. 单向扩散：单抗结果偏低，多抗偏高；3. 双向扩散法：可测定抗体效价；抗体多，线靠近抗原孔；抗原多，线靠近抗体孔；免疫电泳1. 对流免疫电泳：双向免疫扩散+电泳；2. 火箭免疫电泳：单向免疫扩散+电泳3. 免疫电泳：定性试验：分析成分的种类和性质。4. 免疫固定电泳：用于蛋白质的鉴定5. 交叉免疫电泳：抗原蛋白质的定量免疫散射比浊颗粒直径如远小于入射波长，成为Rayleigh散射。化学发光1. （直接）吖啶酯类2. （催化）碱性磷酸酶标记：底物为AMPPD。3. （能量传递）参与氧化反应，非酶标记物，三联吡啶钌；4. 辣根过氧化物酶标记：底物为鲁米诺。放免与免放1 放免标记抗原，竞争性抑制，2 免放标记抗体，非竞争抑制，抗体过量。时间分辨荧光免疫测定1. 特异光信号是长寿命荧光；2. 蛋白质、激素、药物、肿瘤标志物、病原体抗原抗体等；间接免疫荧光1. 公认最有效的检测疟疾抗体的方法；荧光抗体染色法1. 可检测病毒及其繁殖情况荧光染色1. 四乙基罗丹明：橘红色，吸收5702. 四甲基乙硫氰酸罗丹明：橙红，吸收620nm；3. 藻红蛋白：可与FITC共用488nm激发光；免疫应答初次应答的APC为DC和单核巨噬细胞，再次应答的APC为B细胞