临床医学检验中级考试—免疫.doc

免疫

PEG
1. 可用来检测CIC，特点是简便，特异性差，易受温度影响，PEG最终浓度为3-4%（分子量越大，PEG浓度越小）；
2. 是最常用的细胞融合剂，分子量大约6000。
3. 可加速IC的形成；

补体：
1. 由肝脏或巨噬细胞产生。（抗原刺激机体不可产生！！）属于β球蛋白
2. 灭活：56℃ 30min。低温不能灭活。
3. 补体降低：
a) 消耗：SLE，冷球蛋白血症，自免性溶贫，类风关，移植排斥等；
b) 丢失：烧伤，失血，肾脏病变；
c) 合成不足：肝病，营养不良；
d) 细菌感染（G-尤甚），替代途径激活（凝聚的Ig、内毒素，菌体多糖、水解蛋白酶等可激活替代途径）；
4. 补体升高：感染恢复期，恶性肿瘤（C2/3/4）；心梗、病毒肝炎、糖尿病、正常妊娠则升高。
5. 补体活化：①经典：IC激活C1q，进一步激活C1r和C1s；激活顺序，142356789；经典途径激活可用C1q结合试验来检测；②MBL：MBL结合至细菌启动的途径，激活物是MBL或CRP，绕过C1途径；③旁路：C3开始。
6. CH50测定：检测的是经典途径的溶血总活性。
7. 单个补体测定：①免疫溶血法：非检测含量，而检测活性；②免疫化学法：单向免疫扩散，火箭免疫电泳，透射比浊法，散射比浊法；
8. 补体结合试验（cft）：不检测补体，而是利用补体检测抗原抗体。不溶血为阳性。所用补体多为豚鼠血清；
9. 溶血反应和补体结合试验所用溶血素多为兔抗羊RBC抗体；溶血试验用2个单位的溶血素；
10. C1抑制分子缺陷，导致遗传性血管神经性水肿；
11. C3a和C5a叫做过敏毒素，可作用于肥大细胞和嗜碱性粒细胞，引起过敏反应。
12. C3b与C3b受体结合后促使B细胞活化。

基因工程抗体的优点：
非异源性。
人鼠嵌合体指：Ig的人（C区）和鼠（V区）连接。

白介素
1． IL-1、6刺激肝脏细胞分泌急性时相反应蛋白；
2． IL-2：T细胞生长因子。活化T细胞产生，促进淋巴细胞增殖。可促B细胞分泌抗体；激活NK细胞；
3． IL-4：可促进免疫球蛋白的类型转换，促进IGE转换；
4． IL-5刺激EO增殖分化；
5． IL-6支持浆细胞增殖分化，以及B细胞杂交瘤细胞增殖；
6． IL-8对中性粒有趋化作用；
7． IL4/10是Th2细胞分泌的细胞因子，可负调节细胞免疫应答；IL-10抑制IL-2合成；

细胞因子
1. 多数细胞因子以单体形式存在，以非特异方式发挥作用，不受到MHC的限制。
2. TGF-α刺激靶细胞产生IL-1，IL6；激活NK细胞；
3. TGF-β可负调节免疫应答；
4. 干扰素可抑制TH0细胞向TH2细胞转换，激活NK细胞；

B细胞
1. B细胞：
① 不成熟B细胞仅表达SmIgM；
② 成熟B细胞表面表达SmIgM, SmIgD；CD21
③ B2是外周血中的主要B细胞。
2. 功能：B1主要和免疫调节、免疫病、B细胞源性肿瘤密切相关；B2是体液免疫的执行细胞。
3. B1：CD5/19/20/22
4. B2：CD23/12/20/22
5. CD21可与EB病毒结合；
6. B细胞到浆细胞发育发生障碍，可发生选择性免疫缺陷症；

T细胞
1. Th1细胞：分泌IL-2/IFN-γ/IFN-β；Th2细胞：分泌IL-4/5/6/10；
2. 全部T细胞都表达CD2；
3. 成熟T细胞表达CD3；
4. 部分T细胞表达CD4, CD8；
5. 与绵阳红细胞结合的是CD2；
6. 记忆性T细胞表面是CD45RO；
7. 部分NK细胞表达CD2；
8. CD28主要表达在T细胞

免疫球蛋白
1. IgA：
2. IgD：低；0.2%
3. IgE：最少。
4. IgG：Fc段可与SPA结合。
5. IgM：①可激活补体；②原发性巨球蛋白血症可增高；

冷球蛋白
4℃自发沉淀

免疫球蛋白测定
1. IgG/M/A：①单向环状免疫扩散法；②免疫比浊法；
2. IgD：

M蛋白
1. 良性单克隆丙球蛋白常见骨髓中M蛋白；轻链病尿中增高的主要为M蛋白；
2. 多发性骨髓M蛋白不具免疫活性；
3. 理化性质单一，多无免疫活性；
4. 血清蛋白区带电泳：经典分析方法。
5. 免疫球蛋白定量：粗筛
6. 免疫电泳：鉴定的方法。取代电泳和免疫扩散电泳的结合。
7. 免疫固定电泳：鉴定的常用方法。区带电泳和特异抗血清免疫沉淀反应相结合。

k-Ig和入-Ig定量测定
主要为单项免疫扩散法和免疫比浊法。

抗原抗体反应
1. 前带现象：抗体过剩；
2. 后带反应：抗原过剩；

抗原呈递细胞：
初次应答多为DC和单核巨噬，再次应答主要是B细胞。

中性粒细胞
1． 趋化能力下降（小室法，皮窗试验）：糖尿病
2． 吞噬能力下降：补体缺陷
3． 代谢能力下降：慢性肉芽肿
4． NBT（+）：细菌感染（NBT测试杀菌能力），正常为5-10%；
5． 中性粒发育不良可出现慢性肉芽肿

巨噬细胞
1. 巨噬细胞直接参加2,4型超敏反应，不直接参加1.3型超敏反应。
2. 具有ADCC效应。
3. 表面受体有清道夫受体，FcγR，TLR，补体受体。

1型超敏反应
1. 变应原：选择性激活CD4+Th2细胞、B淋巴细胞；
2. 效应抗体：IgE
3. 效应细胞：BASO, EO, 肥大细胞
4. 举例：过敏性休克，皮肤过敏，呼吸道过敏。
5. 特点：具有明显的特体差异。

2型超敏反应（细胞毒型）
1. 抗体：IgG, IgM。
2. 细胞：NK, 补体，巨噬细胞。
3. 举例：新生儿溶血

3型超敏反应（循环免疫复合型）
1. 抗体等：IgG, IgM，复合物，补体。
2. 细胞：中性粒细胞浸润
3. 举例：血清病、链球菌感染肾小球肾炎、SLE，类风关。

4型超敏反应
1. 反应物质：无补体、抗体
2. 细胞：巨噬细胞，淋巴细胞
3. 举例：接触性皮炎
4. 备注：关键作用的细胞还是T细胞，活化的CD4+Th1可招募单核巨噬细胞并活化，

脱敏治疗
诱导机体产生的封闭抗体是IgG

乙肝
1. HBV DNA感染第一个出现的为HBsAg；
2. HBV存在和复制活跃的直接指标为HBcAg；

SLE
IgG，IgA升高较多

类风关
IGM增高为主

标志性抗体
SLE：①抗Sm抗体：不与活动度相关；②抗dsDNA抗体：活跃期明显升高；

DiGeorge综合征：
先天性胸腺发育不良，胚胎胸腺移植治疗有效。

结核分枝杆菌：
抗PPD抗体+，结核菌活动的重要标志。

HLA抗原
1. HLA分子多态性主要体现在多肽结合区上，而非Ig样区；
2. 1类分布较广，有核细胞。淋巴、WBC表面最多。而RBC、神经细胞、滋养层细胞则不表达。
3. 2类分布较窄，主要在B细胞，单和巨噬细胞，DC及其他APC上。
4. 检测淋巴细胞HLA抗原：微量淋巴细胞毒试验。
5.

移植
1．
① 超急性排斥反应：数分钟，数小时，长至24-48小时发生；
② 急性排斥反应：数周——数月，免疫抑制剂治疗后可缓解;
③ 亚急性排斥反应：
④ 慢性排斥反应：数月——数年，免疫抑制剂治疗后常无效；
2． 同种异体移植：排斥反应最主要，受者T细胞，针对移植物抗原发生免疫应答。
3． 移植物抗宿主反应：常见于骨髓移植，骨髓中的免疫细胞攻击受体（严重免疫抑制状态）。
4． 受者对供体MHC识别，间接识别被激活的T细胞以CD4+为主。

原发性巨球蛋白血症
浆细胞恶性增殖，分泌IgM增多。

遗传性血管性水肿
补体系统缺陷病，缺乏C1/NH，导致炎症介质产生失控。

普通易变型免疫缺陷
B细胞功能缺陷病，信号转导异常。

慢性肉芽肿：
属于原发性吞噬细胞功能缺陷。中性粒细胞和单核细胞的调理、吞噬、杀伤能力受损。

ADA缺陷病
联合免疫缺陷病，ADA下降，多见于婴幼儿。

沉淀反应
1. 免疫浊度反应：要保持抗体过量，若抗原过量则不准确；
2. 单向扩散：单抗结果偏低，多抗偏高；
3. 双向扩散法：①可测定抗体效价；②抗体多，线靠近抗原孔；抗原多，线靠近抗体孔；

免疫电泳
1. 对流免疫电泳：双向免疫扩散+电泳；
2. 火箭免疫电泳：单向免疫扩散+电泳
3. 免疫电泳：定性试验：分析成分的种类和性质。
4. 免疫固定电泳：用于蛋白质的鉴定
5. 交叉免疫电泳：抗原蛋白质的定量

免疫散射比浊
颗粒直径如远小于入射波长，成为Rayleigh散射。

化学发光
1. （直接）吖啶酯类
2. （催化）碱性磷酸酶标记：底物为AMPPD。
3. （能量传递）参与氧化反应，非酶标记物，三联吡啶钌；
4. 辣根过氧化物酶标记：底物为鲁米诺。

放免与免放
1． 放免标记抗原，竞争性抑制，
2． 免放标记抗体，非竞争抑制，抗体过量。

时间分辨荧光免疫测定
1. 特异光信号是长寿命荧光；
2. 蛋白质、激素、药物、肿瘤标志物、病原体抗原抗体等；

间接免疫荧光
1. 公认最有效的检测疟疾抗体的方法；

荧光抗体染色法
1. 可检测病毒及其繁殖情况

荧光染色
1. 四乙基罗丹明：橘红色，吸收570
2. 四甲基乙硫氰酸罗丹明：橙红，吸收620nm；
3. 藻红蛋白：可与FITC共用488nm激发光；

免疫应答
初次应答的APC为DC和单核巨噬细胞，
再次应答的APC为B细胞