DB3415_T 54-2023金寨灵芝菌种生产技术规程.pdf

ICS 65.020.20 CCS B 30 3415 六安市地方标准 DB 3415/T 542023 金寨灵芝菌种生产技术规程 2023-11-07 发布 2023-11-07 实施 六安市市场监督管理局 发 布 DB 3415/T 542023 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件中的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由金寨县中药(西山药库)产业发展中心提出。本文件由六安市农业农村局归口。本文件起草单位：金寨县中药(西山药库)产业发展中心、金寨灵芝产业协会、六安市食品药品检验中心。本文件主要起草人：余春富、黄守文、宋承林、周其书、胡炅、李洁、江庆武、李文海、杜继甫、宋宇、苏振泉、曹雪明、赵伟、王艳、彭亚旭、殷兴国、王景义、孙贺春、周礼玲、张新芹、王雷。DB 3415/T 542023 1 金寨灵芝菌种生产技术规程 1 范围 本文件规定了金寨灵芝菌种制备术语和定义、基本要求、生产技术、标签、标志、包装、运输、贮存和生产档案等技术要求。本文件适用于金寨灵芝菌种的生产。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 12728 食用菌术语 GB 50073 洁净厂房设计规范 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1742 食用菌菌种通用技术要求 3 术语和定义 GB/T 12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1 金寨灵芝 Jinzhai ganoderma 以金寨县内野生赤灵芝作为原种，经过人工多年连续选育的菌株，金寨县内生产的灵芝。半圆形或肾形，少数近圆形，直径5 cm25 cm,厚0.5 cm3.0 cm。4 基本要求 工作人员卫生要求 4.1 应保持个人卫生，进生产车间前须洗手、消毒，应穿戴经消毒处理的工作服、口罩、鞋、帽等。场所要求 4.2 应符合NY/T 528的环境卫生要求。生产车间要求 4.3 厂房设置和布局应符合NY/T 528的要求，车间设计应符合GB 50073的要求。设施设备 4.4 4.4.1 基本设备 DB 3415/T 542023 2 应具有磅秤、天平、高压灭菌锅或常压灭菌锅、净化工作台或接种箱、调温设备、除湿设备、培养架、恒温箱或培养室、冰箱或冷库、显微镜等及常规用具。高压灭菌锅应使用经有资质部门生产与检验的安全合格产品。4.4.2 基本设施 配料、分装、灭菌、冷却、接种、培养等各环节的设施应配套。冷却室、接种室、培养室和贮存室都要有满足其功能的基本配套设施。5 生产技术 工艺流程图 5.1 菌种生产工艺流程见图1。图1 菌种生产流程图 母种制作 5.2 5.2.1 配方 5.2.1.1 PDA 培养基 马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂20 g、水1000 ml。5.2.1.2 加富马铃薯葡萄糖琼脂培养基 马铃薯200 g，葡萄糖20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，20 mg维生素B1，琼脂20 g，蛋白胨10 g。5.2.2 母种检查 应按NY/T 528的要求执行。母种接种后第3天、第7天和菌丝体长满培养基后分别逐个进行检验，挑出未活、污染和生长不良的不合格培养物，拿到准备室及时进行淘汰处理。母种感官要求应符合表1规定。表1 金寨灵芝母种感官要求 项目 要求 容器（玻璃试管）完整、无损 棉塞或硅胶塞 干燥、洁净、松紧适度，能满足透气和滤菌要求 培养基灌装量 试管总容量的1/3以内 DB 3415/T 542023 3 表1 金寨灵芝母种感官要求（续）项目 要求 培养基斜面长度 距顶端棉塞40 mm50 mm 接种量（接种块大小）(35)mm(35)mm 菌种外观 菌丝体特征 白夹浅黄色、菌丝粗壮、菌苔较厚实、部分有白色结晶物 菌丝生长量 菌丝占斜面2/3以上 菌丝体表面 均匀、平整、无角变、无拮抗现象 菌落边缘 整齐 菌丝分泌物 无 杂菌菌落 无 菌丝自溶 无 脱壁 无 原基 无 斜面背面外观 培养基不干缩、颜色均匀 气味 有灵芝菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味 原种、栽培种培养基制作 5.3 5.3.1 原种培养基配制 小麦或玉米粒90%、杂木屑7%、麸皮3%，含水量50%左右。5.3.2 栽培种培养基配制 杂木屑78%，米糠或麸皮20%，蔗糖1%，石膏粉1%，含水量60-65%左右。5.3.3 其它操作方法 按NY/T 528执行。5.3.4 原种、栽培种检查 接种后每3至5天检查一次，发现污染及时清除，当菌丝封住料面并向下深入1 cm2 cm时，可适当延长检查时间。感官要求应符合表2和表3规定。表2 金寨灵芝原种感官要求 项目 要求 容器（培养瓶）完整、无损 棉塞或无棉塑料盖 干燥、洁净、松紧适度，能满足透气和滤菌要求 培养基上表面距瓶口的距离 50 mm 5 mm 菌种外观 菌丝体特征 密集、尖端整齐、束状菌丝明显 菌丝生长量 长满容器 表面菌丝体 褐色、生长均匀、无角变，无高温圈 培养基及菌丝体 白色、紧贴瓶壁、无干缩 表面分泌物 无 杂菌菌落 无 DB 3415/T 542023 4 表2 金寨灵芝原种感官要求（续）项目 要求 菌种外观 拮抗现象 无 脱壁 无 子实体原基 无 气味 有灵芝菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味 表3 金寨灵芝栽培种感官要求 项目 要求 容器（培养袋或培养瓶）完整、无损 棉塞或无棉塑料盖 干燥、洁净、松紧适度，能满足透气和滤菌要求 培养基上表面距瓶口的距离 50 mm 5 mm 菌种外观 菌丝体特征 密集、尖端整齐、束状菌丝明显 菌丝生长量 长满容器 不同部位菌丝体 生长均匀、无角变、无高温圈 培养基及菌丝体 紧贴瓶（袋）壁、无干缩 表面分泌物 无或有少量深黄色水珠 杂菌菌落 无 拮抗现象 无 脱壁 无明显脱壁 子实体原基 无或少量有 气味 有灵芝菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味 6 标签、标志、包装、运输、贮存 按照NY/T 1742执行。7 生产档案 母种、原种和栽培种生产中的每个环节由操作技术人员现场详细记录，记录内容按资料性附录A执行，签字后归档保存。DB 3415/T 542023 5 A A 附录A （资料性）菌种生产记录表 菌种生产记录样表见表A.1。表A.1 菌种生产记录表 菌种名称 批号 备注 培养基配制 配方：配置过程：配置人：复核人：日期：日期：装袋/瓶 数量 水分 pH 操作人：复核人：日期：日期：灭菌 温度 时间 操作人：复核人：日期：日期：接种 菌种批号 菌种用量 接种人：复核人：日期：日期：产量