四川加工型辣椒种质资源遗传多样性分析_张艳.pdf

基金项目：本研究由四川省科技计划项目科研院所科技成果转化项目(2021JDZH0015)和四川省省级公益性科研单位基本科研业务费专项(21JDKY06;22JBKY03)共同资助引用格式：Zhang Y.,Sun T.,Liu Y.S.,Shang D.,Zhang J.,Luo D.G.,Yang M.J.,Chen X.X.,and Zhang J.R.,2023,Genetic diversityanalysis of processing-orientation type pepper(Capsicum annuum L.)germplasm in Sichuan Province,Fenzi Zhiwu Yuzhong(Mole-cularPlantBreeding),21(14):4702-4709.(张艳,孙婷,刘玉珊,尚迪,张军,罗大刚,杨马进,陈肖肖,张景荣,2023,四川加工型辣椒种质资源遗传多样性分析,分子植物育种,21(14):4702-4709.)研究报告Research Report四川加工型辣椒种质资源遗传多样性分析张艳1孙婷2刘玉珊1*尚迪2张军2罗大刚5杨马进3陈肖肖4张景荣1*1 四川省植物工程研究院生物技术研究所,成都,611730;2 四川省植物工程研究院蔬菜花卉研究所,成都,611730;3 四川省植物工程研究院药用植物研究所,成都,611730;4 四川省川椒种业科技有限责任公司,自贡,643200;5 四川省农业科学院作物研究所,粮油作物绿色种质创新与遗传改良四川省重点实验室,成都,610066*共同通信作者,;zjr_摘要为了评估四川加工型辣椒种质资源的遗传多样性和亲缘关系，本研究以 24 份辣椒种质资源为研究对象，采用 iPBS 分子标记技术分析其遗传多样性和亲缘关系。结果表明，10 条引物共扩增出 171 条谱带，多态性谱带 103 条，多态性比率为 59.39%。对 24 份辣椒种质资源的遗传多样性进行分析，其遗传相似系数(GS)在 0.7130.901；根据果型将供试样本分为牛角椒、线椒、羊角椒和小椒 4 个群体，其中羊角椒群体的遗传多样性最高，其观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Neis 基因指数(H)和 Shannons 信息指数(I)，分别为 1.473 7、1.340 9、0.189 2 和 0.275 2。牛角椒群体的遗传多样性最低，其 Na、Ne、H 和 I 分别为 1.263 2、1.167 9、0.098 7 和 0.147 0；按非加权组平均法(UPGMA)构建 24 份辣椒种质资源的 iPBS 标记聚类树状图，在遗传相似系数 0.82 处，可将 24 份材料分为 4 个组，与形态学的分类结果存在较大差异。综合分析结果表明，多数供试材料间的亲缘关系较近，而不同组材料间的亲缘关系相对较远，鉴于组间辣椒品种间的亲缘关系以及在产量、成熟期、品质等方面存在差异，故不同组间材料可进行杂交，以选育新品种。关键词加工型辣椒;iPBS 分子标记;遗传多样性;聚类分析Genetic Diversity Analysis of Processing-orientation Type Pepper(Capsicumannuum L.)Germplasm in Sichuan ProvinceZhangYan1SunTing2LiuYushan1*ShangDi2ZhangJun2LuoDagang5YangMajin3ChenXiaoxiao4ZhangJingrong1*1BiotechnologyResearchInstitute,SichuanAcademyofBotanicalEngineering,Chengdu,611730;2InstituteofVegetoblesand Flowers,Sichuan Acade-myofBotanical Engineering,Chengdu,611730;3 Institute ofMedicinal Plants,Sichuan AcademyofBotanical Engineering,Chengdu,611730;4 SichuanChuanjiao Seeds Industry Technology Co.,Ltd.,Zigong,643200;5 Environment-friendly Crop Germplasm Innovation and Genetic Improvement KeyLaboratoryofSichuanProvince,CropResearchInstitute,SichuanAcademyofAgriculturalSciences,Chengdu,610066*Co-corresponding authors,;zjr_DOI:10.13271/j.mpb.021.004702AbstractIn order to assess the genetic diversity and genetic relationship of the collected processing-orientationtype pepper germplasm resources,iPBS molecular markers were used to analyze the genetic characterization of 24pepper germplasm in Sichuan Province.The results showed that 171 bands were amplified by 10 iPBS primers,ofwhich 103 bands(59.39%)were polymorphic.The genetic similarity coefficient among 24 pepper germplasm ran-ged from 0.713 to 0.901 by NTSYS-pc2.10e software.The tested samples can be morphologically categorized分子植物育种，2023 年，第 21 卷，第 14 期，第 4702-4709页Molecular Plant Breeding,2023,Vol.21,No.14,4702-4709based on pepper type as cattle horn-,linear-,caprinehorn-fruited,and small sized population.The caprine horn-fruited population exhibited the highest genetic diversity,the observed number of alleles(Na),effective number ofalleles(Ne),Neis gene diversity(H),and Shannons information index(I)were 1.473 7,1.340 9,0.189 2,and0.275 2,respectively.The lowest genetic diversity was observed within the cattle horn-fruited population(withNa=1.263 2,Ne=1.167 9,H=0.098 7,I=0.147 0).Clustering analysis through the unweighted pair-group mean av-erage(UPGMA)method showed that 24 pepper cultivars were divided into 4 groups with a similarity coefficient of0.82,which was not consistent with the morphological classification.The comprehensive analysis results show thatthe genetic relationship of most the tested pepper materials was relatively close,while the genetic relationship be-tween groups were relatively distant from each other.Given the genetic relationship between each group and thedifferences in fruit yield,ripening stage and quality,the materials from different groups can be crossed to breednew varieties.KeywordsProcessing-orientation type pepper(Capsicum annuum L.);iPBS molecular marker;Genetic diver-sity;Clustering analysis丰富的种质资源是作物育种和种质创新的物质基础，对种质资源进行鉴定评价不仅可以挖掘和筛选出优异种质资源，而且还有助于作物高质量生产和育种。遗传多样性一般是指种内不同群体间或同一群体内的不同个体遗传变异的总和(樊龙江等,2004)，是生物进化的基础。遗传多样性可以揭示物种或种群的遗传背景、育种潜力以及利用价值，对种质资源的收集、保存、评价和发掘利用具有十分重要的意义(姬广海等,2003;孙蕾倩等,2022)。辣椒(Capsicum annuum L.)属茄科辣椒属，为一年生或多年生草本植物(Wahyuni et al.,2013)。辣椒作为蔬菜因营养成分丰富深受人们喜爱，作为调味品在全世界风靡，是全球消费量最大的辛辣调味品(邹学校等,2022)。辣椒是中国栽培面积第二大的蔬菜，明确其种质资源的遗传多样性和种质间的亲缘关系，可减少育种目标的盲目性，有利于提高辣椒的育种效率(李艳等,2018)。因此，开展辣椒种质遗传多样性和亲缘关系的研究，对辣椒种质收集、挖掘与育种实践均具有重要的理论和实践意义。遗传多样性的检测方法有形态学、细胞学以及DNA 水平的分子标记等方法(邱芳等,1998)。目前，国内外学者对辣椒种质资源遗传多样性的研究多采用形态学和以 SSR、ISSR 为主的传统的分子标记技术。裴红霞等(2022)采用形态学与质量形状相结合的方法分析了 220 份辣椒种质，发现聚类结果与引种来源关系不大。张强强等(2020)对 57 份辣椒的表型性状和 SSR 分子标记进行聚类分析，结果表明 2 种聚类结果间不能完全对应。Brilhante 等(2021)对来自巴西不同地区的 69 份辣椒种质进行表型和 ISSR 分析，为巴西辣椒资源的挖掘、利用和保护提供了重要依据。iPBS(Inter-primer binding site)标记技术，是一种基于 LTR 类反转录转座子多态性扩增的新型分子标记(Kalendar et al.,2010)，具有操作简单、检测成本低、引物多态性高等特点，已应用于黄秋葵(Yldz etal.,2015;张景荣等,2021)、菜豆(Haliloglu et al.,2022)、茄子(Shimira et al.,2021)等物种的遗传多样性分析，被证明是一种评估植物的多样性、研究系统发育和进化行之有效的新型标记系统(Kalendar et al.,2011;孙蕾倩等,2022)。迄今为止，鲜见辣椒种质资源多样性的 iPBS 分析的相关报道。本研究以 24 份加工型辣椒种质资源为研究对象，采用 iPBS 分子标记技术分析其遗传多样性和亲缘关系，以期为辣椒杂交育种中亲本选配提供参考。1结果与分析1.1 PCR扩增与引物筛选从 83 条 iPBS 引物中筛选出 10 条多态性较高、条带丰富清晰的引物对 24 份辣椒种质资源进行PCR 扩增，共获得 171 条谱带，平均每条引物扩增出17.1 条，多态性谱带 103 条，多态性比率为 59.39%。其中，引物 2271 的多态性比率最高，为 80.77%；引物2074 的多态性比率最低，为 38.89%。引物 2271 对 24份辣椒种质扩增的琼脂糖凝胶电泳图谱结果显示，PCR 扩增条带大多在 2503 000 bp(图 1)。1.2辣椒种质资源的遗传多样性分析为了分析加工型辣椒群体的遗传多样性，将24 个辣椒品种按椒型分为牛角椒、线椒、羊角椒和小椒 4 个群体，利用 PopGene32 软件分析其遗传多样性。结果显示(表 1)，4 个群体的观测等位基因四川加工型辣椒种质资源遗传多样性分析Genetic DiversityAnalysisofProcessing-orientation Type Pepper(Capsicum annuum L.)Germplasm in Sichuan Province4703分子植物育种Molecular Plant Breeding表 1 4 个类群辣椒种质资源的遗传多样性Table 1 Genetic diversity of four taxa pepper germplasm椒型Fruit shapes牛角椒Cattle horn-fruited线椒Linear-fruited羊角椒Caprine horn-fruited小椒Small sized平均值Mean value标准差Standard deviation品种数量Number of varieties368724Na1.263 21.368 41.473 71.397 71.602 30.490 9Ne1.167 91.272 21.340 91.266 91.353 40.373 6H0.098 70.149 50.189 20.149 70.207 00.199 9I0.147 00.216 80.275 20.219 90.310 20.284 9注:Na:观测等位基因数;Ne:有效等位基因数;H:Neis 基因多样性;I:Shannon 信息指数Note:Na:Observed number of alleles;Ne:Effective number of alleles;H:Neis gene diversity;I:Shannons information index图 1 引物 2 271 对 24 个辣椒品种 DNA 的扩增注:M:DL5000 DNA Marker;124:辣椒材料编号(表 3)Figure 1 Amplification of 24 pepper cultivars obtained with pri-mer 2271Note:M:DL5000 DNA Marker;124:Pepper material number(Table 3)数(Na)平均值为 1.602 3，有效等位基因数(Ne)平均值为 1.353 4；Neis 基因指数(H)平均值为 0.207 0，Shannons 信息指数(I)平均值为 0.310 2。在 4 种椒型的观测等位基因数(Na)中，牛角椒的 Na 最低，为1.263 2；羊角椒的 Na 最高，为 1.473 7；有效等位基因数(Ne)中，牛角椒的 Ne 最低，为 1.167 9；羊角椒的Ne 最高，为 1.340 9。Neis 基因指数(H)中，牛角椒的H 最低，为 0.098 7；羊角椒的 H 最高，为 0.189 2；Sh-annons 信息指数(I)中，牛角椒的 I 最低，为 0.147 0；羊角椒的 I 最高，为 0.275 2。4 个群体中，以羊角椒群体的遗传多样性程度最高，而牛角椒群体的遗传多样性最低。1.3辣椒种质资源间的遗传相似性分析运用 NTSYSpc-2.1e 软件计算出 24 份辣椒种质材料间的遗传相似系数(genetic similarity coefficient,GS)(表 2)。结果显示，24 份辣椒种质资源的遗传相似系数(GS)在 0.7130.901，阈值差为 0.188，表明 24份辣椒种质间的遗传相似性较高，亲缘关系较近。其中，3 号材料 顺尖 97 和 24 号材料 尖椒 4 号 的遗传相似系数最小，为 0.713，说明它们之间的亲缘关系较远。9 号材料 川椒 152 和 14 号材料 朝地椒 1 号的遗传相似性最大，GS 为 0.901，表明这 2 个材料间的亲缘关系最近。1.4辣椒种质资源的聚类分析采用 UPGMA 聚类法构建 24 份辣椒种质资源的 iPBS 标记聚类树状图(图 2)。在遗传相似系数0.82 处，可将 24 份辣椒种质材料分为 4 个组(,和)。组包含大果 B 特早、丰优 B 特早、川椒红艳、新尖椒 1 号、干辣 3 号、顺尖 97这 6 份材料，约占辣椒材料总量的 25%，其中，干辣3 号 为该组内唯一的线椒。组也包含 6 份材料，为川椒红心、川椒 153、川椒珠子椒、川椒152、朝地椒 1 号、深红帅，除来自海南的 深红帅 为羊角椒外，其余 5 份材料均为小椒，其中，川椒红心、川椒 153、川椒珠子椒 和 川椒 152 为四川省川椒种业科技有限责任公司所选育。组包含 川椒 221、顺尖 66、川椒长线、金条 1 号、4704四川加工型辣椒种质资源遗传多样性分析Genetic DiversityAnalysisofProcessing-orientation Type Pepper(Capsicum annuum L.)Germplasm in Sichuan Province201.0000.8130.8070.8130.795211.0000.8540.8830.854221.0000.8420.789231.0000.842241.000表 2 24 份辣椒种质资源遗传相似系数矩阵Table 2 Genetics similarity coefficient of 24 pepper germplasm resources编号No.12345678910111213141516171819202122232411.0000.8420.8540.8130.8890.8770.8950.8130.7840.7890.7540.7780.8010.7780.7720.7890.8010.7370.7490.7600.8190.8250.8300.75421.0000.8480.8540.8710.8600.8770.8300.7890.8540.7950.8190.8540.8300.8010.8070.8420.8130.8010.7890.8250.8300.8600.80731.0000.8070.8600.8710.8540.7840.7660.7720.7490.7600.7840.7720.7660.7840.7720.7780.7310.7190.7890.8190.8480.71341.0000.8190.8190.8600.8710.8770.7660.8830.7780.8360.8600.7950.7660.7890.7600.7840.8190.8070.8600.8300.76651.0000.8950.8890.8190.8010.7600.7600.7840.7950.7950.7780.7840.8070.7660.7660.8010.8250.8540.8360.79561.0000.8890.8300.8360.8070.7950.7840.8070.7950.7890.8070.8070.8130.7780.7660.8360.8540.8600.77271.0000.8130.8070.7890.8010.8010.8360.8010.8070.7890.8010.7950.7600.7950.8300.8480.8300.77881.0000.8890.8130.8480.8360.8480.8600.8190.8010.8130.7600.7840.8300.8300.8360.8540.80191.0000.7600.8890.8070.8070.9010.8360.7950.8190.8010.8250.7890.8010.8420.8250.784101.0000.7780.8710.8480.7780.7950.8010.8010.8070.8070.7370.8190.7780.8650.813111.0000.7890.8010.8360.7950.7890.8250.7950.8190.7840.8070.8480.7720.766121.0000.8710.8130.8070.8250.8480.8070.8420.7840.8190.7890.8300.836131.0000.8130.8070.8480.8480.8190.8300.8420.8540.8250.8770.825141.0000.8300.8130.8480.7950.8070.8190.8070.8250.8420.801151.0000.8540.8190.8130.8250.7190.8250.7720.8010.807161.0000.8600.8650.8770.7370.8420.8010.8300.813171.0000.8540.8890.7840.8650.8250.8300.825181.0000.8480.7430.8480.8070.8360.795191.0000.7660.8360.7950.8130.807注:124:辣椒材料编号(表 3)Note:124:Pepper material number(Table 3)4705分子植物育种Molecular Plant Breeding川椒 18 号、川椒 19 号、皱牛角 1 号、新尖椒3 号、线龙 71、川椒红 120、新尖椒 4 号，共11 份材料约占供试材料总量的 45.83%。组仅有 1份材料，为来自四川自贡的 川椒 112，说明 川椒112 与其它供试材料间的亲缘关系较远。2讨论iPBS 作为一种新型反转录转座子分子标记技术，具有操作简单、重现性高、多态性丰富等特点，且不需要预先对 LTR 序列进行克隆、测序和引物开发。本研究利用筛选出的 10 条 iPBS 引物对 24 份辣椒种质资源进行遗传多样性分析，共获得 171 条谱带，其中，多态性谱带 103 条，其多态性比率为 59.39%，低于徐小万等(2019)所报道的 77.99%、李雪峤等(2018)的 95.71%。对加工型辣椒不同椒型群体的遗传多样性分析，发现在牛角椒、线椒、羊角椒和小椒 4 种类群中，羊角椒的观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Neis 基因指数(H)和 Shannons 信息指数(I)最高，分别为 1.473 7、1.340 9、0.189 2 和 0.275 2。虽然与其它3 种椒型比较，羊角椒种质间存在较为丰富的遗传多样性，但整体差异性不大。本研究选用在四川主栽的24 个加工型辣椒品种，其遗传相似系数(GS)介于0.7130.901，表明供试辣椒种质在 DNA 水平的遗传图 2 24 份辣椒种质的聚类分析注:124:辣椒材料编号(表 3)Figure 2 Cluster analysis of 24 pepper germplasmsNote:124:Pepper material number(Table 3)多样性不够丰富，其遗传基础较狭窄，反映出四川丰富的辣椒资源还未被充分挖掘利用。赫卫等(2019)利用 SRAP 标记对来自全国各地的 43 个常见辣椒品种进行遗传关系分析，发现这些辣椒品种间遗传多样性较少，遗传基础较窄。这与本研究的结果相似，揭示了国内辣椒品种种质资源相对丰富，但存在其遗传背景相对狭窄的问题(张宝玺等,2010)。在基于 iPBS 标记数据所构建的聚类图中，在遗传相似系数 0.82 处，可将 24 份辣椒种质材料分为 4个组(,和)，与形态学方法分组存在较大差异，其中、组均存在不同地域、不同果型和成熟期的辣椒品种聚在同一组的现象，说明这些品种的选育公司(单位)间所用的育种材料存在交叉。傅鸿妃等(2018)利用表型性状和 SSR 分子标记分析了52 份辣椒种质进行遗传多样性，结果表明 2 种聚类结果吻合度不高。推测造成上述这些差异的主要原因为：其一，形态学属表型性状是由基因控制和环境影响共同作用的结果，生物体某些表型性状的变异并非由基因的差异所致，而是受环境饰变的影响(石胜友等,2011)；其二，iPBS 标记所揭示的基因组DNA 片断差异不一定在形态上全都表现出来(李锡香等,2004)。本实验聚类图组只包含 川椒 112 1个品种，说明 川椒 112 与其他供试品种间的亲缘关系较远，今后在辣椒杂种优势育种工作中，可选其作为亲本。四川是中国辣椒的主产地之一，也是其消费大省，但目前对四川加工型辣椒遗传多样性研究尚属空白。本研究利用 iPBS 分析四川主栽加工型辣椒品种的遗传多样性和亲缘关系，其供试材料仅来自四川和海南两省，存在材料来源狭窄的局限性。将来辣椒育种工作中，应扩大辣椒种质资源的来源，以打破遗传基础狭窄的困局。本研究中，多数供试材料间的亲缘关系较近，鉴于各个组间的亲缘关系相对较远，加之不同组间的辣椒品种在产量、成熟期、品质等方面存在差异，基因型的差异相对较大，故不同组间的品种可选作亲本进行杂交，从而育成新品种。3材料与方法3.1试验材料本试验选用的 24 份辣椒材料均于四川省植物工程研究院成都市试验基地(30.818N,103.834E)育苗和定植(表 3)。取苗龄约为 6 周的幼苗嫩叶，用液氮速冻后转存于-80 超低温冰箱待用。4706表 3 24 份供试辣椒材料Table 3 24 test samples of pepper materials序号No.123456789101112序号No.131415161718192021222324材料名称Materials name大果 B 特早DaguoB Tezao干辣 3 号Ganla No.3顺尖 97Shunjian97川椒红心Chuanjiaohongxin川椒红艳Chuanjiaohongyan新尖椒 1 号Xinjianjiao No.1丰优 B 特早Fengyou B Tezao川椒珠子椒Chuanjiaozhuzijiao川椒 152Chuanjiao152川椒 19 号Chuanjiao No.19川椒 153Chuanjiao153皱牛角 1 号Zhouniujiao No.1种质来源Germplasmsource四川自贡Zigong,Sichuan川植研院SABE海南三亚Sanya,Hainan川椒种业SCSI川椒种业SCSI四川自贡Zigong,Sichuan海南三亚Sanya,Hainan川椒种业SCSI川椒种业SCSI川椒种业SCSI川椒种业SCSI海南Hainan椒型Pepper type牛角椒Cattle horn-fruited线椒Linear-fruited羊角椒Caprinehorn-fruited小椒Small sized羊角椒Caprinehorn-fruited羊角椒Caprinehorn-fruited牛角椒Cattle horn-fruited小椒Small sized小椒Small sized线椒Linear-fruited小椒Small sized牛角椒Cattle horn-fruited材料名称Materials name新尖椒 3 号Xinjianjiao No.3朝地椒 1 号Chaodijiao No.1川椒 221Chuanjiao221顺尖 66Shunjian66川椒长线Chuanjiaochangxian川椒 18 号Chuanjiao No.18金条 1 号Jintiao No.1川椒 112Chuanjiao112线龙 71Xianlong71深红帅Shenhongshuai川椒红 120Chuanjiaohong120新尖椒 4 号Xinjianjiao No.4种质来源Germplasmsource海南Hainan四川Sichuan四川Sichuan海南三亚Sanya,Hainan川椒种业SCSI川椒种业SCSI四川自贡Zigong,Sichuan四川自贡Zigong,Sichuan海南Hainan海南Hainan川椒种业SCSI海南三亚Sanya,Hainan椒型Pepper type羊角椒Caprinehorn-fruited小椒Small sized小椒Small sized羊角椒Caprinehorn-fruited线椒Linear-fruited线椒Linear-fruited羊角椒Caprine horn-fruited小椒Small sized线椒Linear-fruited羊角椒Caprine horn-fruited线椒Linear-fruited羊角椒Caprine horn-fruited注:川植研院:四川省植物工程研究院;川椒种业:四川省川椒种业科技有限责任公司Note:SABE:Sichuan Academy of Botanical Engineering;SCSI:Sichuan Chuanjiao Seeds Industry Technology Co.Ltd.3.2基因组DNA的提取及检测采用天根 DNA 提取试剂盒提取辣椒基因组DNA，用 0.8%琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 的质量。3.3 iPBS-PCR扩增与检测本实验从 Kalendar 等(2010)公布的 83 条引物中筛选出 10 条多态性高、条带清晰、重复性好的引物(表 4)，委托擎科生物合成。PCR 反应扩增体系参考张景荣等(2021)。3.4数据统计参考 Yldz等(2015)、张景荣等(2021)的方法对各引物 PCR 扩增的电泳条带进行统计。用 NTSY-Spc-2.1e 软件计算辣椒材料间的遗传相似系数，并构建出辣椒种质的亲缘关系树状图。利用 Pop-Gene32 软件分析辣椒种质的遗传多样性指数。作者贡献张艳、孙婷和刘玉珊是本研究实验的执行人；张艳、罗大刚和张景荣完成数据分析；张艳和刘玉珊完成论文初稿的写作；孙婷、张军、尚迪、罗大刚、陈肖肖和杨马进参与部分试验；刘玉珊参与实验设计，试验结果分析；张景荣指导实验设计、数据分析、论文写作与修改。全体作者都阅读并同意最终的文本。致谢本研究由四川省科技计划项目科研院所科技成果转化项目(2021JDZH0015)和四川省省级公益性科研单位基本科研业务费专项(21JDKY06;22JBK-四川加工型辣椒种质资源遗传多样性分析Genetic DiversityAnalysisofProcessing-orientation Type Pepper(Capsicum annuum L.)Germplasm in Sichuan Province4707分子植物育种Molecular Plant Breeding表 4 10 个 iPBS 引物的 PCR 扩增Table 4 PCR amplification of 10 iPBS primers引物Primer2074208120952390227122722225223022382239合计Total平均值Mean value引物序列(5-3)Primer sequence(5-3)GCTCTGATACCAGCAACGGCGCCAGCTCGGATACCAGCAACAACCCCAGGCTCGGATGCCAGGCTCAGATGCCAAGCATAGCTTTGATACCATCTAGGCGTCTGATACCAACCTAGCTCATGATGCCAACCTAGGCTCGGATGCCAAt()51525457615455545758T18.0020.009.0027.0026.009.0014.0013.0019.0016.00171.0017.10P7.0011.005.0013.0021.004.0010.008.0012.0012.00103.0010.30PPL(%)38.8955.0055.5648.1580.7744.4471.4361.5463.1675.0059.39注:At:退火温度;T:扩增条带总数;P:多态性条带数;PPL:多态性位点百分率Note:At:Annealing temperature;T:Total number of amplified bands;P:Number of polymorphic bands;PPL:Percentage of polymor-phic lociY03)共同资助。参考文献Brilhante B.D.G.,De Oliveira Santos T.,Santos P.H.A.D.,Kam-phorst S.H.,Neto J.D.S.,Rangel L.H.,Valadares F.V.,DeAlmeida R.N.,Rodrigues R.,Jnior A.C.S.,and Moulin M.M.,2021,Phenotypic and molecular characterization ofBrazilian Capsicum germplasm,Agronomy,11(5):854.Fan L.J.,Pang H.Q.,Wu 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