饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态和抗氧化功能的影响.pdf

动物营养学报，（）：饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态和抗氧化功能的影响徐朝阳 童庆芳 赵玉妍 朱晓倩 孙岚源 朱靓芸 郭双双 吴 涛（武汉轻工大学，农副产品蛋白质饲料资源教育部工程研究中心，动物营养与饲料科学湖北省重点实验室，武汉；武汉市江夏区动物疫病预防控制中心，武汉）摘 要：本试验旨在研究饲粮中添加不同剂量的屎肠球菌对肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态和抗氧化功能的影响。试验选用 只 日龄健康罗斯 肉鸡，随机分为 个组，每组 个重复，每个重复 只鸡（公母各占）。对照组饲喂基础饲粮，低剂量屎肠球菌组和高剂量屎肠球菌组分别在基础饲粮中添加 和 屎肠球菌菌粉（活菌数为 ）。试验期 。结果表明：）与对照组相比，饲粮中添加不同剂量的屎肠球菌对肉鸡各阶段生长性能均无显著影响（）。）与对照组相比，高剂量屎肠球菌组肉鸡血清总蛋白含量显著提高（），血清磷含量有提高的趋势（）；低剂量屎肠球菌组肉鸡血清钙含量显著降低（）。）与对照组相比，低剂量屎肠球菌组和高剂量屎肠球菌组肉鸡十二指肠和空肠绒毛高度与隐窝深度比值显著提高（），十二指肠隐窝深度显著降低（）。）与对照组相比，低剂量屎肠球菌组和高剂量屎肠球菌组肉鸡血清和十二指肠过氧化氢含量显著降低（），空肠过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著提高（），回肠丙二醛含量显著降低（）；低剂量屎肠球菌组肉鸡血清过氧化氢酶活性显著提高（）。综上所述，饲粮中添加屎肠球菌可以改善肉鸡肠道形态，提高抗氧化能力，且以添加 为宜。关键词：肉鸡；屎肠球菌；生长性能；肠道形态；抗氧化功能中图分类号：文献标识码：文章编号：（）收稿日期：基金项目：湖北省自然科学基金一般面上项目（）作者简介：徐朝阳（），男，河南周口人，硕士研究生，研究方向为饲料生物工程。：通信作者：郭双双，副教授，硕士生导师，：；吴 涛，教授，硕士生导师，：抗生素的应用使畜牧业规模化生产成为可能，但其所引发的药物残留和耐药性问题严重威胁人类健康。益生菌可维持肠道菌群平衡，并具有安全、绿色和无残留等优点，可作为抗生素替代品应用于畜牧业生产之中。屎肠球菌属于厚壁菌门肠球菌属，菌落呈圆形或椭圆形，为革兰氏阳性菌，属兼性厌氧菌，生长迅速，是动物体内正常菌群的重要组成部分。屎肠球菌具有耐高温、耐胃酸和耐胆碱的特性，其可黏附于肠道表面形成保护屏障，其合成的乳酸以及分泌的细菌素能够有效抑制或杀灭胃肠道中的病原菌，在畜牧业生产中有着广泛的应用前景。安文艺等研究表明，在饲粮中添加屎肠球菌可促进肉鸡生长，缓解脂多糖刺激导致的肉仔鸡生长性能下降，改善肠道微生物群组成。等研究发现，在肉鸡饲粮中添加屎肠球菌可以改善肉鸡腿肌品质，增加腿肌中肌苷酸（）含量，提高肌肉抗氧化能力。等研究发现，饲粮中添加屎肠球菌可以改善肉鸡肠道形态，降低肉鸡料重比。等研 究 表 明，在 饲 粮 中 添 加 期徐朝阳等：饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态和抗氧化功能的影响 的屎肠球菌可提高爱拔益加（）肉仔鸡的生长性能。因此，本试验拟通过研究屎肠球菌对肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态和抗氧化功能的影响，旨在探讨屎肠球菌在肉鸡生产中的实际应用效果，为其在肉鸡生产中的应用提供科学依据。材料与方法 试验材料 试验所用屎肠球菌 菌种由本实验室分离保藏，菌粉制备由湖北浩华生物技术有限公司完成，菌粉中活菌数为 。试验动物和试验设计 试验选用 只 日龄健康罗斯 肉鸡，随机分为 个组，每组 个重复，每个重复 只鸡（公母各占）。对照组饲喂基础饲粮，低剂量屎肠球菌组和高剂量屎肠球菌组分别在基础饲粮中添加 和 屎肠球菌菌粉。试验期。基础饲粮 试验用基础饲粮为玉米豆粕型，其组成及营养水平见表。表 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）（）项目 含量 原料 玉米 豆粕 大豆油 磷酸氢钙 石粉 食盐 蛋氨酸 氯化胆碱 （）矿物质预混料 ）维生素预混料 ）合计 营养水平 ）代谢能 （）粗蛋白质 钙 有效磷 赖氨酸 续表 项目 含量 苏氨酸 蛋氨酸半胱氨酸 ）矿物质预混料每千克饲粮提供 ：，。）维 生 素 预 混 料 为 每 千 克 饲 粮 提 供 ：，生物素 ，叶酸 ，泛酸 ，烟酸 。）营养水平为计算值。饲养管理 肉鸡饲养采用网上平养，试验前将鸡舍、鸡笼、料盘、水槽和喂料器消毒处理。养殖过程中，肉鸡自由采食和饮水，采用 连续光照。试验第 周鸡舍温度控制在 ，以后每周降低，直到温度降至 左右，并维持至试验结束；鸡舍相对湿度为。样品采集 于 日龄早上，从每个重复随机选取公鸡和母鸡各 只，翅下静脉采血，在 、下离心 ，分离血清，于 冷冻保存。将肉鸡颈动脉放血致死后屠宰取样，剖取十二指肠、空肠和回肠肠段中部（长约 ）置于预冷的 多聚甲醛中固定，送往武汉博士德生物工程有限公司制作肠道组织切片并进行苏木精伊红（）染色；另取十二指肠、空肠、回肠中间部分（长约），剖开肠段后用预冷的无 酶水冲洗肠道内容物，刮取肠黏膜，于 保存，用于肠道抗氧化指标测定。检测指标及方法 生长性能 试验期间，统计每个重复的采食量、死淘鸡数和死淘鸡重。分别于第 日龄和第 日龄晚上断料 ，并于第、和 日龄以重复为单位对肉鸡进行称重。记录 日龄、日龄和 日龄的平均日增重（）和平均日采食量（），并计算料重比（）。血清生化指标采用日立 自动生化分析仪（日动 物 营 养 学 报 卷本）测定血清总蛋白（）、白蛋白（）、高密度脂蛋 白（）、低 密 度 脂 蛋 白（）、尿 酸（）、直接胆红素（）、总胆红素（）、总胆固醇（）、葡萄糖（）、甘油三酯（）、磷（）和钙（）含量以及谷氨酰转肽酶（）和碱性磷酸酶（）活性；血清谷草转氨酶（）和谷丙转氨酶（）活性测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所，测定方法参照文献。肠道形态 将肠段从 的多聚甲醛溶液中取出，包埋于石蜡中，制作 染色切片。使用 型光学显微镜（装有计算机辅助形态测定系统）观察各肠道组织切片，记录其绒毛高度（，）、隐窝深度（，）以及绒毛面积（，），并计算绒毛高度与隐窝深度的比值（），取 根完整肠绒毛数据的平均值作为此切片的最终测量值。其中，绒毛高度指绒毛顶端到肠腺开口的垂直距离，隐窝深度值隐窝开口处到隐窝底部的垂直距离，绒毛面积为用面积测量工具测定完整绒毛的面积。血清和肠道抗氧化指标 用生理盐水制备 的肠道组织匀浆。在、下离心处理 ，取上清液测定抗氧化指标。血清和肠道过氧化氢酶（）、谷胱甘肽过氧化物酶（）、总超氧化物歧化酶（）活性以及总抗氧化能力（）和过氧化氢（）、丙二醛（）含量均采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定。数据统计分析 试验数据采用 软件进行单因素方差分析，并用 氏法多重比较进行组间分析。以 为统计学差异显著，以 为差异有显著的趋势。试验结果用“平均值标准差”来表示。结 果 饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡生长性能的影响 由表 可知，与对照组相比，饲粮中添加不同剂量的屎肠球菌对肉鸡 日龄、日龄和 日龄 个阶段的、和 均没有显著影响（）。与对照组相比，低剂量屎肠球菌组 日龄肉鸡 有提高的趋势（），日龄肉鸡 有降低的趋势（）。表 饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡生长性能的影响 项目对照组 低剂量屎肠球菌组 高剂量屎肠球菌组 值 日龄体重 日龄体重 日龄体重 日龄 平均日采食量 （）平均日增重 （）料重比 日龄 平均日采食量 （）平均日增重 （）料重比 日龄 平均日采食量 （）平均日增重 （）料重比 同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著（），不同小写字母表示差异显著（）。下表同。，（），（）期徐朝阳等：饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态和抗氧化功能的影响 饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡血清生化指标的影响 由表 可知，与对照组相比，高剂量屎肠球菌组肉鸡血清 含量显著提高（），肉鸡血清 含量有提高的趋势（）；低剂量屎肠球菌组肉鸡血清 含量显著降低（）；饲粮中添加不同剂量的屎肠球菌对肉鸡血清其他生化指标均无显著影响（）。表 饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡血清生化指标的影响 项目对照组 低剂量屎肠球菌组 高剂量屎肠球菌组 值总蛋白 （）白蛋白 （）葡萄糖 （）高密度脂蛋白 （）低密度脂蛋白 （）尿酸 （）谷氨酰转肽酶 （）总胆红素 （）直接胆红素 （）谷草转氨酶 （）谷丙转氨酶 （）碱性磷酸酶 （）总胆固醇 （）甘油三酯 （）磷 （）钙 （）饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡肠道形态的影响 由表 可知，与对照组相比，低剂量屎肠球菌组和高剂量屎肠球菌组肉鸡十二指肠 显著提高（），十二指肠 显著降低（），空肠 显著提高（），空肠 有提高的趋势（）。表 饲粮中屎肠球菌对肉鸡肠道形态的影响 项目对照组 低剂量屎肠球菌组 高剂量屎肠球菌组 值十二指肠 绒毛高度 隐窝深度 绒毛高度 隐窝深度 绒毛面积 空肠 绒毛高度 隐窝深度 绒毛高度 隐窝深度 绒毛面积 动 物 营 养 学 报 卷续表 项目对照组 低剂量屎肠球菌组 高剂量屎肠球菌组 值回肠 绒毛高度 隐窝深度 绒毛高度 隐窝深度 绒毛面积 饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡血清和肠道抗氧化指标的影响 由表 可知，与对照组相比，低剂量屎肠球菌组和高剂量屎肠球菌组肉鸡血清和十二指肠 含量显著降低（），空肠 和 活性显著提高（），回肠含量显著降低（）。与对照组相比，低剂量屎肠球菌组肉鸡血清 活性显著提高（），十二指肠活性显著降低（）。与对照组相比，高剂量屎肠球菌组肉鸡血清 活性显著降低（）。表 饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡血清和肠道抗氧化指标的影响 项目对照组 低剂量屎肠球菌组 高剂量屎肠球菌组 值血清 谷胱甘肽过氧化物酶 （）过氧化氢酶 （）总超氧化物歧化酶 （）丙二醛 （）过氧化氢 （）总抗氧化能力 （）十二指肠 谷胱甘肽过氧化物酶（）过氧化氢酶 （）总超氧化物歧化酶 （）丙二醛 （）过氧化氢 （）总抗氧化能力 （）空肠 谷胱甘肽过氧化物酶（）过氧化氢酶 （）总超氧化物歧化酶 （）丙二醛 （）过氧化氢 （）总抗氧化能力 （）期徐朝阳等：饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态和抗氧化功能的影响续表 项目对照组 低剂量屎肠球菌组 高剂量屎肠球菌组 值回肠 谷胱甘肽过氧化物酶（）过氧化氢酶 （）总超氧化物歧化酶 （）丙二醛 （）过氧化氢 （）总抗氧化能力 （）讨 论 饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡生长性能的影响 本试验结果表明，饲粮中添加不同剂量的屎肠球菌对肉鸡各阶段的生长性能均没有显著影响。彭众等在为期 的试验中，在 个试验阶段，饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡的、和 均无显著影响；张立恒等研究结果显示，在 日龄，饲粮中添加 个不同剂量的屎肠球菌对肉仔鸡采食和生长均没有显著影响，本试验结果与上述研究结果基本一致。但黄丽卿等研究发现，连续 对肉鸡饲喂含量为 的屎肠球菌能显著提高肉鸡的生长性能；等报道，饲粮中添加屎肠球菌可以调节肉兔血清生化指标，改善免疫力，有提高饲料转化率和生长性能的趋势。以上结果与本试验结果不同，可能是由于屎肠球菌菌种以及添加剂量不同。饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡血清生化指标的影响 血清 含量是体现肝脏功能及生理健康的重要指标，能有效反映家禽体内蛋白质代谢状况。血清 含量提高，表明体内蛋白质代谢旺盛，有利于提高饲料转化率，促进动物生长。彭众等试验结果显示，饲粮中添加屎肠球菌使肉鸡血清 含量有所提高。在本试验中，与对照组相比，高剂量屎肠球菌组肉鸡血清 含量显著提高，这与上述研究结果基本一致，说明在饲粮中添加屎肠球菌可以提高机体蛋白质代谢。和 含量占机体总灰分含量的 以上，与畜禽骨骼健康密切相关。在本试验中，随着屎肠球菌添加剂量的增加，肉鸡血清 含量不断增加，这说明屎肠球菌在一定程度上可以促进家禽骨的 代谢；不过，与对照组相比，低剂量屎肠球菌组肉鸡血清 含量显著降低，这与既往的研究所得结果有所不同，其具体机理有待进一步研究。饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡肠道形态的影响 小肠 和 反映了肠道的功能状态和健康状况，增高使肠道与营养物质的接触面积增大、吸收效率提高；降低时则表明上皮细胞成熟周期短，消化能力增强；越大，说明肠道的有效吸收面积越大，吸收营养物质的能力越强。李凯年和 等发现，在基础饲粮中添加屎肠球菌可以显著降低肉鸡空肠，显著提高肉鸡空肠。等报道，饲粮中添加活菌数为 的屎肠球菌 对大肠杆菌 攻毒肉鸡的空肠形态有益，空肠 显著提高，显著降低。在本试验中，饲粮中添加屎肠球菌能显著提高肉鸡十二指肠和空肠，显著降低十二指肠，有提高空肠 的趋势，这与上述研究结果相似。在本试验中，饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡回肠的肠道形态无显著影响，这与张伟等报道的饲粮中添加由丁酸梭菌和屎肠球菌组成的复合微生态制剂能够显著提高蛋鸡回肠 的结果不同。这可能是由于单一的屎肠球菌与复合微生态制剂对肠道的作用机制和效果不同，但总得来说，无论是单一的屎肠球菌还是包含屎肠球菌的复合微生态制剂都能改善家禽的肠道形态，对家禽营养物质的消化吸收起到积极作用。饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡抗氧化功能的影响 过量自由基可干扰细胞 及蛋白质合成动 物 营 养 学 报 卷进而破坏细胞结构。和 是清除机体内自由基的抗氧化酶，能够维持体内自由基含量的动态平衡。是脂质发生过氧化反应的终产物，且具有细胞毒性，它的产生能加剧细胞膜 的 损 伤。动 物 体 内、活 性 和 含量是衡量机体抗氧化能力的重要指标。毛俊舟等研究发现，饲粮中添加屎肠球菌可以降低肉鸡血清 含量，显著提高肉鸡血清 活性。等研究发现，饲粮中添加屎肠球菌显著降低肉鸡血清 和多种过氧化物含量。等研究表明，在雄性肉鸡饮水中添加屎肠球菌 可提高肉鸡抗氧化能力。本试验结果表明，与对照组相比，饲粮中添加低剂量和高剂量屎肠球菌可以显著降低肉鸡血清和十二指肠含量，显著提高空肠 和 活性，并显著降低回肠 含量，与上述研究结果基本一致。这说明在饲粮中添加屎肠球菌可以促进机体抗氧化物酶活性，提高机体清除自由基的能力，维持氧化还原系统稳态，从而促进动物健康生长。结 论 综上所述，饲粮中添加不同剂量的屎肠球菌对 日龄肉鸡的生长性能无显著影响，但可促进肉鸡蛋白质代谢，改善肠道形态，并提高抗氧化能力。在本试验条件下，综合生长性能、血清生化指标、肠道形态和抗氧化指标的试验结果，建议肉鸡饲粮中添加 屎肠球菌较为适宜。参考文献：赵静，张红凤我国家禽养殖现状与发展趋势研究现代畜牧科技，（）：，（）：（），（）：傅予彤，房勇，曲绍军，等复合益生菌制剂对肉仔鸡生长性能、肠道屏障功能及肠道菌群的影响饲料工业，（）：，（）：（），（）：，（）：，（）：，（）：，（）：安文艺，雷佳琦，董元洋，等壳寡糖与屎肠球菌对肉仔鸡生长性能、免疫功能及肠道短链脂肪酸含量的影响中国畜牧杂志，（）：，（）：（），（）：，（）：期徐朝阳等：饲粮中添加屎肠球菌对肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态和抗氧化功能的影响 ，（）：张丽娟，马志鹏，张敏，等葛根素和复合植物精油对肉鸡生长性能、血清生化指标和肠道形态的影响饲料工业，（）：，（）：（）刘阳，张钊，郭双双，等葛根提取物对产气荚膜梭菌感染肉鸡生长性能和肠道屏障功能的影响中国畜牧杂志，（）：，（）：（）彭众，董丽，王淑楠，等日粮中添加屎肠球菌对 肉鸡生产性能、免疫器官指数和血液脂质代谢相关指标的影响中国畜牧兽医，（）：，（）：（）张立恒，史洪涛，乔宏兴，等日粮添加屎肠球菌对肉仔鸡生长性能、抗氧化及免疫能力的影响饲料研究，（）：，（）：（）黄丽卿，罗丽萍，张亚茹，等屎肠球菌 对鼠伤寒沙门菌感染肉鸡生产性能、肠道微生物菌群和血液抗氧化功能的影响中国兽医杂志，（）：，（）：，（），（），（）：，（）：陈盼，徐婷婷，何彦锋，等钙磷代谢对动物骨骼健康影响的研究进展 畜牧与饲料科学，（）：，（）：（），（）：李凯年益生素屎肠球菌可以促进家禽健康中国动物保健，（）：，（）：（），（）：，（）：张伟，左方瑞，邱权，等复合微生态制剂对蛋鸡产蛋性能、蛋品质、血清生化指标和肠道形态的影响饲料研究，（）：，（）：（），动 物 营 养 学 报 卷 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