胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液形态学检查.pdf

胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液形态学检查胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液形态学检查周道银周道银第二军医大学长海医院实验诊断科第二军医大学长海医院实验诊断科体液细胞形态学检查体液细胞形态学检查?是指除血液以外的各种体液，如是指除血液以外的各种体液，如胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液等，在完成一般性检验的基础上，将沉渣制成涂片，经瑞吉染色后，在显微镜下进行细胞形态学观察，作出检验诊断（报告细胞分类、肿瘤细胞、狼疮细胞、噬菌细胞、真菌、寄生虫和结晶等）。该检查是集基础理论、实验方法、涂片染色、实践经验于一体的综合技术；可称为体液常规细胞形态学检查。其目的是提高检验质量，提升常规检验应用价值。等，在完成一般性检验的基础上，将沉渣制成涂片，经瑞吉染色后，在显微镜下进行细胞形态学观察，作出检验诊断（报告细胞分类、肿瘤细胞、狼疮细胞、噬菌细胞、真菌、寄生虫和结晶等）。该检查是集基础理论、实验方法、涂片染色、实践经验于一体的综合技术；可称为体液常规细胞形态学检查。其目的是提高检验质量，提升常规检验应用价值。形 态 学 核 心 价 值形 态 学 核 心 价 值?形态学检验是检验学科最基本的技能，形态学检验是检验学科最基本的技能，是临床实验室诊断最简便、最特异和最经济实用的常规检验方法是临床实验室诊断最简便、最特异和最经济实用的常规检验方法(李艳、丛玉隆.加强形态学临床检验专家座谈会纪要，中华检验医学杂志2005，28(2),147)?形态学检验是某些疾病诊断的形态学检验是某些疾病诊断的“金指标金指标”，是判断疾病疗效和预后的重要依据。是判断疾病疗效和预后的重要依据。（丛玉隆、秦小玲.既要发展现代技术 也要继承经典方法,中华检验医学杂志2005,28(2),129）?形态学检验是常规检验的重要内容，形态学检验是常规检验的重要内容，但由于自动化仪器的应用，检验人员，尤其是青年技术人员的形态学技能越渐弱化，现在特别需要加强形态学人才培养，使这一对某些疾病具有重要诊断价值的经典技术传承光大。但由于自动化仪器的应用，检验人员，尤其是青年技术人员的形态学技能越渐弱化，现在特别需要加强形态学人才培养，使这一对某些疾病具有重要诊断价值的经典技术传承光大。体液形态学检查的法规依据体液形态学检查的法规依据医学实验室质量和能力专用要求医学实验室质量和能力专用要求（GB/T 22576-2008/ISO15189:2007）（GB/T 22576-2008/ISO15189:2007）医疗机构临床实验室管理办法医疗机构临床实验室管理办法(卫生部卫医发200673号)(卫生部卫医发200673号)医疗机构临床检验项目目录医疗机构临床检验项目目录（卫生部卫医发2007180号）（卫生部卫医发2007180号）胸腹水常规检查胸腹水常规检查包括外观、比重、粘蛋白定性、细胞计数、细胞分类包括外观、比重、粘蛋白定性、细胞计数、细胞分类 胸腹水细胞学检查胸腹水细胞学检查包括浓缩查肿瘤细胞包括浓缩查肿瘤细胞 各种穿刺液及分泌物细胞学检查各种穿刺液及分泌物细胞学检查 包括嗜酸、肥大细胞、肿瘤细胞等包括嗜酸、肥大细胞、肿瘤细胞等全国临床检验操作规程全国临床检验操作规程（卫生部 第三版 P315-317）（卫生部 第三版 P315-317）胸腹水常规检查及分类:胸腹水常规检查及分类:穿刺液应在抽出后立即离心，用沉淀物涂片3-5张，穿刺液应在抽出后立即离心，用沉淀物涂片3-5张，以瑞氏或瑞氏-吉姆萨复合染色法进行分类以瑞氏或瑞氏-吉姆萨复合染色法进行分类，同时用多张涂片，同时用多张涂片寻找肿瘤细胞寻找肿瘤细胞也甚有效。也甚有效。体液检验能否筛查肿瘤细胞体液检验能否筛查肿瘤细胞全国临床检验操作规程第全国临床检验操作规程第3版版：P313 脑脊液染色分类P313 脑脊液染色分类:进行瑞氏染色后油镜分类，如见有不能分类的细胞，应请示上级主管，并另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤细胞等。P316 浆膜腔积液检查P316 浆膜腔积液检查：穿刺液用沉淀物涂片35张，以瑞氏或瑞氏-吉姆萨复合染色法进行分类，同时用多张涂片寻找肿瘤细胞也甚有效。P324-329 阴道脱落细胞检查P324-329 阴道脱落细胞检查：细胞学诊断报告方式有巴氏五级分类。P330 胃液显微镜检查P330 胃液显微镜检查：包括红细胞、白细胞、上皮细胞、癌细胞。P331 痰液显微镜检查P331 痰液显微镜检查：包括红细胞、白细胞、上皮细胞、真菌孢子、心力衰竭细胞、癌细胞等。P304 粪便显微镜检查P304 粪便显微镜检查：包括白细胞、红细胞、巨噬细胞、肠粘膜上皮细胞、肿瘤细胞等。P277 肺泡灌洗液检查：P277 肺泡灌洗液检查：可发现呼吸道原发性或继发性恶性肿瘤，包括周围性肺癌，弥漫性肺恶性肿瘤（如支气管肺泡癌）、小细胞肺癌等。临床检验基础第3版ISO 15189：ISO 15189：5.5.1优先使用在公认/权威教科书，经同行评议的书刊或杂志，或国际、国家或区域的指南中发表的程序。体液形态学检验内容体液形态学检验内容?细胞形态学细胞形态学细胞计数细胞计数细胞形态细胞形态?病原体形态学病原体形态学真菌、细菌、寄生虫等真菌、细菌、寄生虫等?其他形态如结晶、狼疮细胞等其他形态如结晶、狼疮细胞等浆膜腔积液形态学检查浆膜腔积液形态学检查?正常情况下，人体的胸腔、腹腔和心包腔、关节腔统称为浆膜腔。浆膜腔内仅含有少量的液体起润滑作用。一般采集不到。在病理情况下，浆膜腔内有大量液体潴留而正常情况下，人体的胸腔、腹腔和心包腔、关节腔统称为浆膜腔。浆膜腔内仅含有少量的液体起润滑作用。一般采集不到。在病理情况下，浆膜腔内有大量液体潴留而形成浆膜腔积液。形成浆膜腔积液。可采集积液进行各种检验，以可采集积液进行各种检验，以鉴别积液性质鉴别积液性质和和查找病因。查找病因。具有具有鉴别诊断、参考诊断、确定诊断鉴别诊断、参考诊断、确定诊断的作用。的作用。?积液穿刺分为治疗性穿刺和诊断性穿刺积液穿刺分为治疗性穿刺和诊断性穿刺浆膜腔积液常规形态学检查内容浆膜腔积液常规形态学检查内容1.颜色、透明度、蛋白定性、细胞总数计数、有核细胞计数、细胞分类。1.颜色、透明度、蛋白定性、细胞总数计数、有核细胞计数、细胞分类。2.形态学检查借助显微镜完成：2.形态学检查借助显微镜完成：细胞总数计数、有核细胞计数细胞总数计数、有核细胞计数细胞分类、形态学观察细胞分类、形态学观察引起胸水的常见原发疾病引起胸水的常见原发疾病?良性疾病：76%良性疾病：76%-各类炎症37%-各类炎症37%-结核9%-结核9%-心源性30%-心源性30%?恶性肿瘤：24%恶性肿瘤：24%引起腹水的常见原发疾病引起腹水的常见原发疾病?良性疾病：83%良性疾病：83%-肝硬化75%-肝硬化75%(自发性细菌性腹膜炎20%)(自发性细菌性腹膜炎20%)-心衰3%-心衰3%-结核、胰腺炎、肾病等5%-结核、胰腺炎、肾病等5%?恶性肿瘤：17%恶性肿瘤：17%-伴有腹膜癌14%-伴有腹膜癌14%-不伴有腹膜癌3%-不伴有腹膜癌3%引起心包积液的常见原发疾病引起心包积液的常见原发疾病?良性疾病：77%良性疾病：77%-病毒感染14%-病毒感染14%-尿毒症、肾功不全12%-尿毒症、肾功不全12%-风湿免疫性疾病12%-风湿免疫性疾病12%-放疗后炎症14%-放疗后炎症14%-结核3%-结核3%-支原体4%-支原体4%-细菌2%-细菌2%-自发性及其它原因12%-自发性及其它原因12%?恶性肿瘤：23%恶性肿瘤：23%?26%的病例，26%的病例，诊断只依据于诊断只依据于心包积液这一项检查,其中3/4为恶性。心包积液这一项检查,其中3/4为恶性。1.用于不同病因引起的漏出液与渗出液的鉴别。1.用于不同病因引起的漏出液与渗出液的鉴别。如肝硬化、心衰等引起的如肝硬化、心衰等引起的漏出液漏出液；结核、细菌、真菌感染、创伤和肿瘤等引起的；结核、细菌、真菌感染、创伤和肿瘤等引起的渗出液渗出液。2.用于病原生物体的初步判定。2.用于病原生物体的初步判定。如细菌、真菌、寄生虫、结晶等。如细菌、真菌、寄生虫、结晶等。3.用于恶性积液的诊断。3.用于恶性积液的诊断。恶性积液约占所有积液的恶性积液约占所有积液的20-3020-30。对于积液原因待查病人，检出恶性细胞的信息报告，临床医生通常于第一时间优于其它检查获得结果回报。对于积液原因待查病人，检出恶性细胞的信息报告，临床医生通常于第一时间优于其它检查获得结果回报。浆膜腔积液检查的意义浆膜腔积液检查的意义浆膜腔积液检查的意义浆膜腔积液检查的意义4.用于良性疾病的诊断。用于良性疾病的诊断。如在积液中找到狼疮细胞、卡氏肺孢子虫、噬细菌细胞、噬真菌细胞、郎格汉斯细胞、嗜酸性粒细胞增多、中性粒细胞增多、胆红素结晶、胆固醇结晶等，为临床查明积液原因提供了重要诊断依据。如在积液中找到狼疮细胞、卡氏肺孢子虫、噬细菌细胞、噬真菌细胞、郎格汉斯细胞、嗜酸性粒细胞增多、中性粒细胞增多、胆红素结晶、胆固醇结晶等，为临床查明积液原因提供了重要诊断依据。5.用于肿瘤术后的疗效和癌性积液腔内化疗的疗效评估。用于肿瘤术后的疗效和癌性积液腔内化疗的疗效评估。如在肿瘤术后病人的浆膜腔积液中找到肿瘤细胞，证明肿瘤已发生转移；如在腔内化疗的积液中未找到肿瘤细胞，证明治疗有效。如在肿瘤术后病人的浆膜腔积液中找到肿瘤细胞，证明肿瘤已发生转移；如在腔内化疗的积液中未找到肿瘤细胞，证明治疗有效。浆膜腔积液标本采集浆膜腔积液标本采集浆膜腔积液标本由穿刺术采集浆膜腔积液标本由穿刺术采集第一管细菌学检查，必须留于无菌试管第一管细菌学检查，必须留于无菌试管第二管化学及免疫学检查（宜用肝素抗凝）第二管化学及免疫学检查（宜用肝素抗凝）第三管常规检查（宜用EDTA-Na第三管常规检查（宜用EDTA-Na2 2抗凝）抗凝）第四管不加任何抗凝剂，以观察有无凝集现象。第四管不加任何抗凝剂，以观察有无凝集现象。标本收集后必须立即送检，以防细胞变性、出现凝块或细胞破坏溶解。标本收集后必须立即送检，以防细胞变性、出现凝块或细胞破坏溶解。推片法制作涂片推片法制作涂片?其方法是将离心后标本弃上清液,留约0.1ml沉渣，取沉渣10其方法是将离心后标本弃上清液,留约0.1ml沉渣，取沉渣10l,置于清洁玻片的右侧端,用一推玻片压在沉渣上,形成2530度角,迅速向另一侧推进,制成涂片。l,置于清洁玻片的右侧端,用一推玻片压在沉渣上,形成2530度角,迅速向另一侧推进,制成涂片。?每份标本推6张涂片：2张有尾薄片、2张有尾厚片、2张无尾厚片。每份标本推6张涂片：2张有尾薄片、2张有尾厚片、2张无尾厚片。备用涂片开展其他染色,如抗酸、化学和免疫化学染色等备用涂片开展其他染色,如抗酸、化学和免疫化学染色等有尾薄片x有尾薄片x2有尾厚片x有尾厚片x2无尾厚片x2无尾厚片x2涂片染色采用瑞吉染色方法涂片染色采用瑞吉染色方法?瑞吉染色使细胞形态染色鲜艳、结构清晰,便于良恶性细胞的辨认和鉴定。瑞吉染色使细胞形态染色鲜艳、结构清晰,便于良恶性细胞的辨认和鉴定。涂片观察涂片观察?每例标本至少观察2份涂片每例标本至少观察2份涂片?先用低倍镜扫描全片,寻找可疑细胞先用低倍镜扫描全片,寻找可疑细胞?再用油浸镜鉴定细胞性质再用油浸镜鉴定细胞性质有核细胞分类有核细胞分类低倍镜扫描2份涂片后，选择细胞分布均匀处，计数100-200个有核细胞,按各占百分比报告。如中性粒细胞60%,淋巴细胞25%,巨噬细胞10%,嗜酸性粒细胞5%。同时报告其它异常形态，如狼疮细胞、恶性细胞等。低倍镜扫描2份涂片后，选择细胞分布均匀处，计数100-200个有核细胞,按各占百分比报告。如中性粒细胞60%,淋巴细胞25%,巨噬细胞10%,嗜酸性粒细胞5%。同时报告其它异常形态，如狼疮细胞、恶性细胞等。报告多核、单核细胞的直接分类法不符合卫生部操作规程要求。报告多核、单核细胞的直接分类法不符合卫生部操作规程要求。肿瘤细胞检查采用分级描述形式报告肿瘤细胞检查采用分级描述形式报告?分级报告：未查见恶性细胞分级报告：未查见恶性细胞查见核异质细胞查见核异质细胞查见可疑恶性细胞查见可疑恶性细胞查见恶性细胞查见恶性细胞?查见恶性细胞若能明确类型则报告其类型,如查见腺癌细胞、鳞癌细胞、淋巴瘤细胞、白血病细胞等。若恶性细胞数量多时,按占有核细胞分类的百分比报告，如恶性细胞20。查见恶性细胞若能明确类型则报告其类型,如查见腺癌细胞、鳞癌细胞、淋巴瘤细胞、白血病细胞等。若恶性细胞数量多时,按占有核细胞分类的百分比报告，如恶性细胞20。浆膜腔积液细胞成份浆膜腔积液细胞成份细胞成份细胞成份：上皮源肿瘤细胞：如癌细胞上皮源肿瘤细胞：如癌细胞上皮源非肿瘤细胞：如间皮细胞上皮源非肿瘤细胞：如间皮细胞造血淋巴组织肿瘤细胞：如淋巴瘤细胞、白血病细胞造血淋巴组织肿瘤细胞：如淋巴瘤细胞、白血病细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞：如中性、淋巴、巨噬细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞：如中性、淋巴、巨噬细胞其它：如细菌、真菌、寄生虫、结晶其它：如细菌、真菌、寄生虫、结晶上皮源肿瘤细胞胸水癌细胞上皮源肿瘤细胞胸水癌细胞胸水涂片间皮细胞(瑞吉染色1000)胸水涂片间皮细胞(瑞吉染色1000)上皮源非肿瘤细胞胸水间皮细胞上皮源非肿瘤细胞胸水间皮细胞上皮源非肿瘤细胞胸水间皮、巨噬细胞、淋巴细胞上皮源非肿瘤细胞胸水间皮、巨噬细胞、淋巴细胞造血淋巴组织肿瘤细胞 心包积液淋巴瘤细胞造血淋巴组织肿瘤细胞 心包积液淋巴瘤细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞胸水 巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞胸水 巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞 腹水 嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞 腹水 嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、巨噬细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞腹水巨噬细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞腹水巨噬细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞腹水 巨噬细胞腹水 巨噬细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞腹水噬菌细胞造血淋巴组织非肿瘤细胞腹水噬菌细胞腹水胆红素结晶、细菌、真菌腹水胆红素结晶、细菌、真菌恶性肿瘤细胞的典型形态恶性肿瘤细胞的典型形态三大三大胞体大胞体大胞核大胞核大核仁大核仁大三千三千形态形态千姿百态千姿百态胞质胞质千变万化千变万化胞核胞核千奇百怪千奇百怪典型恶性肿瘤细胞病例典型恶性肿瘤细胞病例占所有查见恶性细胞病例的80%以上占所有查见恶性细胞病例的80%以上胞体、胞质、胞核胞体、胞质、胞核的形态特征，简要概括为的形态特征，简要概括为“三大三千三大三千”胸水癌细胞胸水癌细胞胸水 癌细胞胸水 癌细胞胸水癌细胞胸水癌细胞胸水癌细胞胸水癌细胞胸水癌细胞胸水癌细胞胸水癌细胞胸水癌细胞腹水癌细胞腹水癌细胞心包积液癌细胞心包积液癌细胞积液涂片癌细胞瑞吉染色积液涂片癌细胞瑞吉染色恶性细胞通常大于30m。正常间皮细胞1530m同一份涂片也可见恶性细胞形态大小不一恶性细胞通常大于30m。正常间皮细胞1530m同一份涂片也可见恶性细胞形态大小不一胸水涂片癌细胞瑞吉染色胸水涂片癌细胞瑞吉染色恶性细胞形态大恶性细胞形态大核质比例失常核质比例失常恶性细胞（1）核大质少2:1；（2）核小质多1:4以上。正常间皮细胞核：质1:2恶性细胞（1）核大质少2:1；（2）核小质多1:4以上。正常间皮细胞核：质1:2。浆膜腔积液涂片癌细胞瑞吉染色浆膜腔积液涂片癌细胞瑞吉染色核畸形及大小不一核畸形及大小不一可见圆、椭圆、肾形、分叶、多形性核等可见圆、椭圆、肾形、分叶、多形性核等积液涂片癌细胞瑞吉染色积液涂片癌细胞瑞吉染色多核多核恶性细胞可见双核、三核、甚至45个核以上恶性细胞可见双核、三核、甚至45个核以上积液涂片双核及多核癌细胞瑞吉染色积液涂片双核及多核癌细胞瑞吉染色核仁大而多核仁大而多恶性细胞核仁3.0恶性细胞核仁3.0m，有的可达57m，有的可达57m以上。常可见多个核仁。间皮细胞、活化的淋巴、巨噬细胞可见核仁，但直径2.5 m以上。常可见多个核仁。间皮细胞、活化的淋巴、巨噬细胞可见核仁，但直径2.5 m。m。浆膜腔积液涂片癌细胞瑞吉染色浆膜腔积液涂片癌细胞瑞吉染色核仁大而多核仁大而多浆膜腔积液涂片癌细胞瑞吉染色浆膜腔积液涂片癌细胞瑞吉染色核染质增多分布不均核染质增多分布不均胞核染色质粗糙甚至结块，分布疏密不均。胞核染色质粗糙甚至结块，分布疏密不均。浆膜腔积液涂片癌细胞瑞吉染色浆膜腔积液涂片癌细胞瑞吉染色浆膜腔积液涂片癌细胞及分裂象瑞吉染色浆膜腔积液涂片癌细胞及分裂象瑞吉染色病理性核分裂：不规则分裂、环状分裂病理性核分裂：不规则分裂、环状分裂浆膜腔积液涂片癌细胞分裂象瑞吉染色浆膜腔积液涂片癌细胞分裂象瑞吉染色病理性核分裂：直接分裂、不规则分裂病理性核分裂：直接分裂、不规则分裂病理性核分裂：多极不规则分裂、裸核病理性核分裂：多极不规则分裂、裸核多极分裂及裸核多极分裂及裸核胞质多少不定胞质多少不定分化越低胞质越少，但有的腺癌细胞胞质很多，大于核数倍。分化越低胞质越少，但有的腺癌细胞胞质很多，大于核数倍。浆膜腔积液涂片 低分化癌细胞 瑞吉染色浆膜腔积液涂片 低分化癌细胞 瑞吉染色浆膜腔积液涂片 腺癌细胞 瑞吉染色浆膜腔积液涂片 腺癌细胞 瑞吉染色浆膜腔积液涂片印戒癌细胞浆膜腔积液涂片印戒癌细胞浆膜腔积液涂片癌细胞浆膜腔积液涂片癌细胞胞质染色差异性大胞质染色差异性大有的恶性细胞胞质嗜碱性强有的恶性细胞胞质嗜碱性强深蓝，有的嗜酸性强深蓝，有的嗜酸性强灰红色。即使同一个癌细胞，胞质部分区域着色深，部分区域着色淡，有的出现囊性空泡。灰红色。即使同一个癌细胞，胞质部分区域着色深，部分区域着色淡，有的出现囊性空泡。癌细胞可见胞质融合现象癌细胞可见胞质融合现象浆膜腔积液涂片封入癌细胞浆膜腔积液涂片封入癌细胞腹水 癌细胞 腺腔样排列腹水 癌细胞 腺腔样排列癌细胞可见腺腔样排列癌细胞可见腺腔样排列恶性肿瘤细胞的不典型形态恶性肿瘤细胞的不典型形态不典型形态不典型形态是指浆膜腔积液中的是指浆膜腔积液中的低分化、未分化的各类型小恶性肿瘤细胞低分化、未分化的各类型小恶性肿瘤细胞，与组织学的低分化、未分化不是同一概念与组织学的低分化、未分化不是同一概念。恶性细胞特点恶性细胞特点：体积小，约10-30m左右；形态核形多样；核质比增高；核染色质粗密不均，或细致均匀，易见核仁体积小，约10-30m左右；形态核形多样；核质比增高；核染色质粗密不均，或细致均匀，易见核仁。细胞分布细胞分布可单个散在，也可与巨噬细胞、间皮细胞混合成簇可单个散在，也可与巨噬细胞、间皮细胞混合成簇。排列排列可呈疏松成群、聚集成团，腺腔样、桑椹样、链状、脊椎骨样排列。可呈疏松成群、聚集成团，腺腔样、桑椹样、链状、脊椎骨样排列。此类细胞与间皮细胞、巨噬细胞大小相似，容易误认、较难以区别此类细胞与间皮细胞、巨噬细胞大小相似，容易误认、较难以区别。此是形态学技术难点，应高度重视。此是形态学技术难点，应高度重视。不典型恶性肿瘤细胞病例约不典型恶性肿瘤细胞病例约占所有查见恶性细胞病例的10%-15%占所有查见恶性细胞病例的10%-15%。胸水1癌细胞 2巨噬细胞胸水1癌细胞 2巨噬细胞121121腹水癌细胞 巨噬细胞 嗜酸性粒细胞腹水癌细胞 巨噬细胞 嗜酸性粒细胞心包积液癌细胞 疏松成群排列心包积液癌细胞 疏松成群排列胸水 癌细胞 疏松成群排列胸水 癌细胞 疏松成群排列胸水 癌细胞 疏松成群胸水 癌细胞 疏松成群胸水 癌细胞 脊椎骨样排列胸水 癌细胞 脊椎骨样排列积液淋巴瘤细胞形态特点积液淋巴瘤细胞形态特点 积液涂片淋巴瘤细胞形态积液涂片淋巴瘤细胞形态空泡形态空泡形态大细胞形态大细胞形态小细胞形态小细胞形态不规则形态不规则形态 淋巴瘤细胞积液涂片背景特征淋巴瘤细胞积液涂片背景特征易见破碎细胞，易见核碎裂细胞，易见瘤细胞分裂象。易见破碎细胞，易见核碎裂细胞，易见瘤细胞分裂象。胸水淋巴瘤细胞胸水淋巴瘤细胞空泡形态空泡形态体积约体积约10-3010-30m m可见瘤细胞分裂象可见瘤细胞分裂象腹水 淋巴瘤细胞腹水 淋巴瘤细胞空泡形态空泡形态易见破碎及凋亡细胞易见破碎及凋亡细胞胸水淋巴瘤细胞胸水淋巴瘤细胞大细胞形态大细胞形态及分裂象 体积及分裂象 体积大于15大于15m m腹水淋巴瘤细胞腹水淋巴瘤细胞大细胞形态大细胞形态，体积，体积大于15大于15m m，易见核仁，易见核仁心包液淋巴瘤细胞心包液淋巴瘤细胞小细胞形态小细胞形态，体积约，体积约6-15 6-15 m m心包液淋巴瘤细胞心包液淋巴瘤细胞小细胞形态小细胞形态，体积约，体积约6-15 6-15 m m心包积液淋巴瘤细胞心包积液淋巴瘤细胞不规则形态不规则形态，细胞核，细胞核呈三叶或花瓣状呈三叶或花瓣状胸水淋巴瘤细胞胸水淋巴瘤细胞不规则形态不规则形态，细胞核，细胞核呈凹陷、菱形等不规则形态呈凹陷、菱形等不规则形态M5 胸水涂片 原幼单、幼红M5 胸水M5 胸水涂片 原幼单、幼红M5 胸水 POX染色阳性POX染色阳性胸水检出白血病细胞胸水检出白血病细胞患者诊断患者诊断M5后后22个月发生胸水，个月发生胸水，胸水涂片原单幼单胸水涂片原单幼单35%，血片原单幼单，血片原单幼单44%，骨髓涂片原单幼单，骨髓涂片原单幼单47.5%。临床诊断为急单复发。临床诊断为急单复发。胸水骨髓瘤细胞胸水骨髓瘤细胞胸水检出骨髓瘤细胞胸水检出骨髓瘤细胞患者确诊MM五年后发生胸水，胸水涂片骨髓瘤细胞70%。胸水巨核细胞(胸水巨核细胞(CML)胸水 癌细胞(肺癌)胸水 癌细胞(肺癌)慢粒胸水检出巨核细胞慢粒胸水检出巨核细胞患者诊断慢粒后14个月发生胸水，胸水查见白血病细胞和患者诊断慢粒后14个月发生胸水，胸水查见白血病细胞和巨核细胞（全片108个巨核细胞（全片108个），临床诊断为慢粒加速期。注意巨核细胞与肿瘤细胞的区别。），临床诊断为慢粒加速期。注意巨核细胞与肿瘤细胞的区别。巨核细胞与恶性肿瘤细胞鉴别巨核细胞与恶性肿瘤细胞鉴别巨核细胞恶性肿瘤细胞巨核细胞恶性肿瘤细胞积液积液：血性积液血性与非血性积液体积体积：3060 m 以上体积30-60 m或更大胞核胞核：不规则，核染色质粗糙结块胞核圆、类圆或不规则，核色质较粗糙，分布不均匀核仁核仁：无核仁常可见大而清晰核仁胞质胞质：胞质浅蓝至蓝色，分布细小浅蓝至深蓝，灰蓝至灰红色，的紫红色颗粒，偶可见产板胞质无紫红色颗粒，常见囊巨核细胞性空泡积液常规细胞形态学的诊断性能积液常规细胞形态学的诊断性能总结12000例患者（14708份标本）浆膜腔积液资料，积液常规细胞形态学检验方法对总结12000例患者（14708份标本）浆膜腔积液资料，积液常规细胞形态学检验方法对恶性积液恶性积液的诊断性能：的诊断性能：诊断灵敏度78.00%，诊断灵敏度78.00%，诊断特异性98.88%，诊断特异性98.88%，阳性预期值97.18%，阳性预期值97.18%，阴性预期值90.08%，阴性预期值90.08%，总有效率91.97%。总有效率91.97%。积液涂片非恶性细胞及其它形态检出积液涂片非恶性细胞及其它形态检出?浆膜腔积液涂片中可见中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸细胞、狼疮细胞、朗格汉斯细胞、包含体细胞、巨核细胞、噬菌细胞、细菌、真菌、寄生虫（卡氏肺孢子虫）、结晶等。浆膜腔积液涂片中可见中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸细胞、狼疮细胞、朗格汉斯细胞、包含体细胞、巨核细胞、噬菌细胞、细菌、真菌、寄生虫（卡氏肺孢子虫）、结晶等。?为渗出液与漏出液的鉴别诊断提供了重要参考指标；为某些细菌、真菌、寄生虫感染诊断提供了重要的检验诊断依据。为渗出液与漏出液的鉴别诊断提供了重要参考指标；为某些细菌、真菌、寄生虫感染诊断提供了重要的检验诊断依据。积液涂片中性粒细胞增多积液涂片中性粒细胞增多积液涂片淋巴细胞增多积液涂片淋巴细胞增多中性粒细胞增高多见于细菌感染性积液淋巴细胞增高见于慢性感染、结核、肿瘤等中性粒细胞增高多见于细菌感染性积液淋巴细胞增高见于慢性感染、结核、肿瘤等积液涂片 中性粒细胞包裹杆菌 瑞吉染色积液涂片 中性粒细胞包裹杆菌 瑞吉染色分叶核细胞包裹杆菌现象见于细菌或结核菌感染进一步作抗酸染色和革兰染色及培养鉴定分叶核细胞包裹杆菌现象见于细菌或结核菌感染进一步作抗酸染色和革兰染色及培养鉴定积液涂片抗酸染色抗酸杆菌积液涂片抗酸染色抗酸杆菌积液涂片细菌及噬菌细胞瑞吉染色积液涂片细菌及噬菌细胞瑞吉染色分叶核细胞噬菌现象见于化脓性炎症积液分叶核细胞噬菌现象见于化脓性炎症积液分叶核细胞噬菌现象见于化脓性炎症积液分叶核细胞噬菌现象见于化脓性炎症积液?积液涂片 细菌及噬菌细胞 瑞吉染色积液涂片 革兰阴性杆菌 革兰染色积液涂片 细菌及噬菌细胞 瑞吉染色积液涂片 革兰阴性杆菌 革兰染色积液涂片噬真菌细胞瑞吉染色积液涂片噬真菌细胞瑞吉染色噬真菌细胞见于真菌感染性积液噬真菌细胞见于真菌感染性积液积液涂片真菌PAS染色积液涂片真菌PAS染色积液涂片寄生虫感染嗜酸性粒细胞增多积液涂片寄生虫感染嗜酸性粒细胞增多瑞吉染色瑞吉染色嗜酸性粒细胞增多性积液嗜酸性粒细胞增多性积液见于寄生虫感染、气胸、肿瘤、结核、反复穿刺等见于寄生虫感染、气胸、肿瘤、结核、反复穿刺等积液涂片肿瘤嗜酸粒细胞增多瑞吉染色积液涂片肿瘤嗜酸粒细胞增多瑞吉染色积液涂片 朗格汉斯细胞瑞吉染色积液涂片 朗格汉斯细胞瑞吉染色积液涂片 抗酸杆菌 抗酸染色积液涂片 抗酸杆菌 抗酸染色结核性积液可见朗格汉斯细胞结核性积液可见朗格汉斯细胞积液涂片狼疮细胞瑞吉染色积液涂片狼疮细胞瑞吉染色狼疮细胞见于SLE等自身免疫性疾病狼疮细胞见于SLE等自身免疫性疾病积液涂片卡氏肺孢子虫瑞吉染色积液涂片卡氏肺孢子虫瑞吉染色免疫功能低下病人免疫功能低下病人,如艾滋病、肿瘤晚期、肝硬化等可并发寄生虫感染积液如艾滋病、肿瘤晚期、肝硬化等可并发寄生虫感染积液积液涂片胆固醇结晶积液涂片胆固醇结晶结核、肿瘤性积液可见胆固醇结晶结核、肿瘤性积液可见胆固醇结晶积液涂片巨核细胞（CML)瑞吉染色积液涂片巨核细胞（CML)瑞吉染色巨核细胞见于慢粒、外伤所致血性胸腔积液巨核细胞见于慢粒、外伤所致血性胸腔积液姓名：陈某性别：男年龄：72岁住院号：530545姓名：陈某性别：男年龄：72岁住院号：530545科别：胸外床号：37床临床诊断：胸主动脉瘤送检者：王海科别：胸外床号：37床临床诊断：胸主动脉瘤送检者：王海标本：胸腔积液收到日期：2009.11.9 检验编号：20091303标本：胸腔积液收到日期：2009.11.9 检验编号：20091303胸腔积液常规细胞形态学检验：胸腔积液常规细胞形态学检验：颜色：血性透明度：浑浊蛋白定性：阳性（+）颜色：血性透明度：浑浊蛋白定性：阳性（+）细胞总数：1000010细胞总数：10000106 6/L 有核细胞数：110010/L 有核细胞数：1100106 6/L/L细胞分类：中性粒细胞:10%淋巴细胞:82%巨噬细胞:8%细胞分类：中性粒细胞:10%淋巴细胞:82%巨噬细胞:8%查见恶性细胞；该类细胞体积1730m，形态呈圆、类圆或不规则形。胞浆呈灰蓝至蓝色，可见胞浆突起和空泡。胞核1525m，形态圆、椭圆或不规则形，核染色质粗糙，疏松或结块，分布不均；核仁清晰14个不等。根据该类细胞形态特征提示淋巴瘤。查见恶性细胞；该类细胞体积1730m，形态呈圆、类圆或不规则形。胞浆呈灰蓝至蓝色，可见胞浆突起和空泡。胞核1525m，形态圆、椭圆或不规则形，核染色质粗糙，疏松或结块，分布不均；核仁清晰14个不等。根据该类细胞形态特征提示淋巴瘤。瑞吉染色1000 瑞吉染色1000瑞吉染色1000 瑞吉染色1000报 告 者：某某报告日期：报 告 者：某某报告日期：上海长海医院体液常规细胞形态学检查上海长海医院体液常规细胞形态学检查关节腔积液形态学检查关节腔积液形态学检查*Synovial fluid 3.0ml*Synovial fluid 3.0ml关节液收集应采用消毒注射器，正常时关节液量甚少，病理时可多达310ml。标本应采用EDTA盐或枸橼酸钠抗凝。第一管做理学和微生物学检查;第二管做化学检查核细胞学检查；第三关不加抗凝剂用于积液的凝固性观察。标本收集后立即送检。一、标本收集二、形态学检查1.有核细胞计数正常关节液3ml红细胞50%通常见于风湿、类风关、痛风等炎症性关节炎；以中性粒细胞75%为诊断界值，对炎症性关节炎诊断灵敏度为75%，特异性为92%；90%见于化脓性关节炎；30%通常见于非感染性疾病（如创伤性关节炎、退变性关节炎、绒毛结节滑膜炎、肿瘤等）。二、形态学检查淋巴细胞增高：主要见于类风关早期、慢性感染、胶原疾病等。单核巨噬细胞增高：主要见于病毒性关节炎或血清病、SLE等。嗜酸性粒细胞增高：主要见于寄生虫感染、风湿及风湿热、关节造影术后等。二、形态学检查4.结晶：见于各种痛风。常见的结晶有尿酸盐、焦磷酸钙、磷灰石、草酸钙结晶等。5.细胞学检查 涂片瑞吉染色后，除细胞分类外，可查找肿瘤细胞，及其他特殊细胞，如狼疮细胞、赖特细胞(Reiter cell)、RA细胞。二、形态学检查关节液 中性粒细胞增高，见于炎症性关节腔积液，如化脓性关节炎、类风关，痛风等关节液 中性粒细胞增高、吞噬细胞关节液 巨噬细胞、吞噬细胞关节液查见赖特细胞（Reiter cell）关节液查见赖特细胞（Reiter cell）Reiter cell为单核巨噬细胞吞噬脱颗粒死亡的中性粒细胞。Reiter cell为单核巨噬细胞吞噬脱颗粒死亡的中性粒细胞。赖特细胞见于Reiter综合症、痛风、幼年类风关等?病例：病例：患者女双膝关节疼痛5年，伴活动受限一月余，“以双膝骨关节炎伴感染”入院。关节腔积液常规：黄色浑浊蛋白+，凝固，涂片分类：N87%L10%M3%，两次关节腔积液涂片均患者女双膝关节疼痛5年，伴活动受限一月余，“以双膝骨关节炎伴感染”入院。关节腔积液常规：黄色浑浊蛋白+，凝固，涂片分类：N87%L10%M3%，两次关节腔积液涂片均查见狼疮细胞。查见狼疮细胞。血和关节腔积液免疫学检查：抗核抗体：阳性；RF：阳性；抗环瓜氨酸肽抗体：阳性，最后诊断：类风湿性关节炎合并感染。血和关节腔积液免疫学检查：抗核抗体：阳性；RF：阳性；抗环瓜氨酸肽抗体：阳性，最后诊断：类风湿性关节炎合并感染。?讨论：讨论：患者以双膝骨关节炎入院，在穿刺液中检出LEC后，及时进行了自身抗体及免疫特种蛋白方面的检查，确诊为类风湿性关节炎合并感染患者以双膝骨关节炎入院，在穿刺液中检出LEC后，及时进行了自身抗体及免疫特种蛋白方面的检查，确诊为类风湿性关节炎合并感染关节液查见狼疮细胞关节液查见狼疮细胞关节液狼疮细胞，见于类风关、SLE等自身免疫性疾病关节液狼疮细胞，见于类风关、SLE等自身免疫性疾病关节液狼疮细胞，见于类风关、SLE等自身免疫性疾病关节液狼疮细胞，见于类风关、SLE等自身免疫性疾病关节液狼疮细胞，见于类风关、SLE等自身免疫性疾病关节液狼疮细胞，见于类风关、SLE等自身免疫性疾病关节液关节液 尿酸结晶尿酸结晶 形态呈双折射的针状或杆状无色结晶，长度约为形态呈双折射的针状或杆状无色结晶，长度约为520微米，常见于痛风微米，常见于痛风关节液关节液 Corticosteroid 结晶见于激素封闭治疗脑脊液形态学检查脑脊液形态学检查脑脊液来源去路脑脊液来源去路?存在于脑室及蛛网膜下腔的无色透明液体。循环于脑和脊髓表面。存在于脑室及蛛网膜下腔的无色透明液体。循环于脑和脊髓表面。?正常脑脊液容量：成人120-180 ml；新生儿10-60 ml。正常脑脊液容量：成人120-180 ml；新生儿10-60 ml。?70%由脑室脉络丛主动分泌和超滤作用产生，其余由脑室的室管膜和蛛网膜下腔产生。通过蛛网膜绒毛吸收返回静脉。70%由脑室脉络丛主动分泌和超滤作用产生，其余由脑室的室管膜和蛛网膜下腔产生。通过蛛网膜绒毛吸收返回静脉。主要功能主要功能?保护脑组织保护脑组织?调节颅内压调节颅内压?营养代谢营养代谢?酸碱平衡酸碱平衡?参与神经内分泌调节参与神经内分泌调节病理情况下,量和成份发生改变。病理情况下,量和成份发生改变。标本采集与处理标本采集与处理采集 第一管：细菌培养采集 第一管：细菌培养第二管：化学检查第二管：化学检查第三管：免疫学检查第三管：免疫学检查第四管：理学和显微镜检查第四管：理学和显微镜检查处理 及时送检，及时检验。防止细胞破坏，糖份处理 及时送检，及时检验。防止细胞破坏，糖份分解。避免凝固。必要时加入EDTA盐抗凝。分解。避免凝固。必要时加入EDTA盐抗凝。检查内容检查内容?理学检查理学检查?显微镜检查显微镜检查?化学检查化学检查?免疫学检查免疫学检查?病原学检查病原学检查理学+化学+显微镜常规检查理学+化学+显微镜常规检查脑脊液常规检查脑脊液常规检查?颜色、透明度、蛋白定性、细胞总数计数、有核细胞计数、有核细胞分类。颜色、透明度、蛋白定性、细胞总数计数、有核细胞计数、有核细胞分类。?形态学检查是显微镜检查的重要内容：形态学检查是显微镜检查的重要内容：细胞总数计数细胞总数计数有核细胞计数有核细胞计数有核细胞分类：直接分类法有核细胞分类：直接分类法染色分类法染色分类法直接分类：多个核细胞、单个核细胞直接分类：多个核细胞、单个核细胞染色分类：瑞吉染色染色分类：瑞吉染色淋巴系细胞-小淋巴细胞、转化型淋巴细胞、淋巴系细胞-小淋巴细胞、转化型淋巴细胞、NK细胞、浆细胞。NK细胞、浆细胞。单核-吞噬细胞-单核细胞、激活型单核细胞、单核-吞噬细胞-单核细胞、激活型单核细胞、吞噬细胞。吞噬细胞。多形核白细胞-中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱多形核白细胞-中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞。性粒细胞。肿瘤细胞-实体瘤细胞、白血病细胞。肿瘤细胞-实体瘤细胞、白血病细胞。其他-真菌、细菌、寄生虫、结晶等。其他-真菌、细菌、寄生虫、结晶等。临床意义临床意义感染性疾病感染性疾病化脓性脑膜炎化脓性脑膜炎结核性脑膜炎结核性脑膜炎病毒性脑炎病毒性脑炎隐球菌脑膜炎隐球菌脑膜炎寄生虫病寄生虫病CSF涂片中性粒细胞增高瑞吉染色CSF涂片中性粒细胞增高瑞吉染色化脓性脑膜炎：中性粒细胞增高化脓性脑膜炎：中性粒细胞增高CSF涂片 中性粒细胞增高 瑞吉染色CSF涂片 中性粒细胞增高 瑞吉染色结核性脑膜炎：初期中性粒细胞增高随后淋巴细胞为主结核性脑膜炎：初期中性粒细胞增高随后淋巴细胞为主CSF涂片 淋巴细胞增高瑞吉染色CSF涂片 淋巴细胞增高瑞吉染色CSF涂片转化型淋巴细胞增高瑞吉染色CSF涂片转化型淋巴细胞增高瑞吉染色病毒性脑炎：淋巴细胞为主病毒性脑炎：淋巴细胞为主CSF涂片隐球菌墨汁染色CSF涂片隐球菌墨汁染色隐球菌脑膜炎：墨汁染色阳性，可见隐球菌隐球菌脑膜炎：墨汁染色阳性，可见隐球菌CSF涂片隐球菌直接涂片CSF涂片隐球菌直接涂片隐球菌脑膜炎：湿片直接镜检可见真菌瑞吉染色隐球菌呈紫红色，边缘放射状，荚膜不易着色隐球菌脑膜炎：湿片直接镜检可见真菌瑞吉染色隐球菌呈紫红色，边缘放射状，荚膜不易着色CSF涂片隐球菌瑞吉染色CSF涂片隐球菌瑞吉染色CSF涂片嗜酸性粒细胞增高瑞吉染色CSF涂片嗜酸性粒细胞增高瑞吉染色寄生虫感染：嗜酸性粒细胞增高寄生虫感染：嗜酸性粒细胞增高蛛网膜下腔出血蛛网膜下腔出血脑脊液呈血性，大量红细胞，中性粒细胞增高，可见吞噬细胞。陈旧性出血可见棘形红细胞。脑脊液呈血性，大量红细胞，中性粒细胞增高，可见吞噬细胞。陈旧性出血可见棘形红细胞。CSF涂片巨噬细胞中性粒细胞瑞吉染色CSF涂片巨噬细胞中性粒细胞瑞吉染色肿瘤查见肿瘤细胞具有诊断价值肿瘤查见肿瘤细胞具有诊断价值实体瘤细胞和白血病细胞实体瘤细胞和白血病细胞阳性率为 15%-40%阳性率为 15%-40%转移性肿瘤高于原发性肿瘤转移性肿瘤高于原发性肿瘤CSF涂片癌细胞瑞吉染色CSF涂片癌细胞瑞吉染色CSF涂片癌细胞瑞吉染色CSF涂片癌细胞瑞吉染色CSF涂片 癌细胞瑞吉染色CSF涂片 癌细胞瑞吉染色CSF涂片 淋巴瘤细胞瑞吉染色CSF涂片 淋巴瘤细胞瑞吉染色CSF涂片 淋巴细胞白血病瑞吉染色CSF涂片 淋巴细胞白血病瑞吉染色姓名：吴某性别：女年龄：65岁住