结核性脑膜炎临床和实验室诊断现状与新进展.pdf

7 0 6 生堡擅经型苤圭!生!旦箜堑鲞笙!塑鱼!也盟!竺!：Q!：!：堑：型!：!结核性脑膜炎临床和实验室诊断现状与新进展王婷冯国栋赵雁林赵钢由于耐药结核菌株的出现、H I V 的流行、免疫抑制剂的广泛应用等综合因素，使全球结核病每年新增约9 0 0 万例。1J，每年有1 7 0 万例结核病患者死亡。2。中国有超过4 5 0万例结核病患者，位居世界第二口J。截至2 0 1 1 年，耐多药结核病已有3 1 万例，全世界约有2 0 0 万人潜伏感染并可能复发HJ。结核病的诊断也由鉴别是否为结核分枝杆菌(m y c o b a c t e r i u mt u b e r c u l o s i s，M t b)的问题上升到了鉴别是否为耐药M t b 或潜伏M t b 感染的问题。结核性脑膜炎(t u b e r c u l o u sm e n i n g i t i s，T B M)是由M t b 感染引起的非化脓细菌性脑膜炎5J，在肺外结核中诊断难度、病死率、致残率均最高。6 1；儿童T B M 占同年龄段结核病患者的2 0 一4 5，而成年T B M 只占到2 9 5 9 L 6 j。由于T B M 患者早期临床表现、脑脊液变化、影像学均不典型，临床上可收集用于检测的脑脊液量有限，再加上M t b 为胞内寄生菌，使得很多用于诊断T B M 的方法敏感度低，特异度不高，易误诊、漏诊，目前尚未有一种方法可完全解决T B M 诊断的问题7 j。我们就这些方法在临床和实验室诊断T B M 过程中的应用现状与新进展进行综述。一、临床诊断1 临床诊断现状：据2 0 0 9 年国际T B M 临床诊断标准，当患者出现头痛、易激惹、呕吐、发热、颈项强直、癫痫、局部神经损害表现、意识改变、昏睡等1 项或多项脑膜炎症状时，即应进行临床结核性脑膜炎评分(c a s ed e f i n i t i o n)。8o。该评分系统的优点是可对临床非确诊T B M 患者进行定量评估，从而便于观察诊断效率、治疗效果和预后判读，但缺乏特异性，只能作为参考诊断。需要注意的是，近年由于抗生素和激素的滥用，使一些T B M 患者未得到正规抗结核治疗，病情就有所缓解一o。部分T B M 患者脑脊液内检测到耐多药M t b，经经典抗结核治疗疗效不佳，使“治疗反应性”无法真实地反映患者的状态一o。2 常规脑脊液检查：虽然T B M 患者脑脊液常规与生化改变约有1 3 不典型，不能作为确诊标准，但仍有重要价D 0 1：1 0 3 7 6 0 c m a J i s s n 1 0 0 6-7 8 7 6 2 0 1 3 1 0 0 1 4基金项目：国家科技重大专项基金资助项目(2 0 0 8 Z X l 0 0 0 3)作者单位：7 1 0 0 3 2 西安，第四军医大学西京医院神经内科(王婷、冯国栋、赵钢)；中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心(赵雁林)通信作者：赵钢，E m a i l：z h a o g a n g f m m u e d u c n综述值1。多数T B M 患者腰椎穿刺脑脊液压力增高，达2 0 0 4 0 0m mH，0(1 8 3 6k P a，1m mH，O=0 0 0 9 8k P a)；脑脊液外观多为无色透明，混浊或出现薄膜已不常见；细胞数多在(5 0 5 0 0)1 0“L，也有报道细胞数正常(1 0 0 0 1 0“L)的患者脑脊液中可检测到抗酸杆菌。1。早期脑脊液主要表现为中性粒细胞明显增高，恢复期主要以淋巴细胞为主。蛋白含量多在1 3g L，6 0 以上患者葡萄糖低于正常。3 影像学检查：T B M 影像学无特征性，可为脑积水、脑梗死、脑膜增厚以及脑结核瘤等多种形式，可累及脑膜表面、脑脊液间隙、血管和神经结构。早期头部C T 可显示其病变部位和范围，主要病变为渗出性，可见软脑膜强化。后期可有阻塞性脑积水征象。头颅M R I 较C T 更为敏感，尤其是当病变仅累及脑干或者脑膜的时候。当常规头颅M R I 检查未见明显异常时，仍应选择更为特殊的磁共振序列进行检查，如M R A、弥散加权成像、对比增强T 加权成像、矢状位T：加权成像、冠状液体反转衰减恢复序列成像等。此外，T B M 患者合并颅外结核的比例高达3 0 一6 0，对疑似T B M 患者应常规行胸部平片或c T 筛查。“。二、病原学直接检查T B M 的确诊依赖于对M t b 的病原学检查，根据检测M t b本身还是其组成成分可以分为直接病原学检查和间接病原学检查。据最新国际T B M 诊断标准。8J，脑脊液中镜检到抗酸杆菌、分离培养到M t b 或P C R 法检测到M t b 均可作为临床确诊T B M 的依据。但由于T B M 患者脑脊液M t b 载量较低，敏感度明显低于颅外结核尤其是肺结核，探索提高病原学诊断效率在T B M 诊断中最有意义。1 抗酸杆菌涂片、染色、镜检：涂片抗酸染色是诊断M t b的主要方法，除了直接涂片法，还可用离心浓缩法和漂浮集菌涂片法。”。抗酸染色中传统萋尼染色法(Z i e h l N e e l s e ns t a i n)应用最普遍，但因患者脑脊液中M t b 浓度低，通常认为只有脑脊液M t b 数量超过1 0 0 0 1 0。L 时才能检测到，敏感度低，各实验室报告从0 8 7 不等。2 1。反复腰椎穿刺脑脊液检查、增加脑脊液量(1 0 2 0m 1)、延长离心时间(3 0m i n)及增加镜检时间虽可提高敏感度，但对实验室要求高，无法普及；而改良抗酸染色法针对M t b 为胞内寄生菌，通过脑脊液玻片离心法保留细胞的完整性并在萋尼染色同时使用去垢剂T r i t o n 提高细胞膜通透性，从而显著提高脑脊液细胞内、外M t b 的检出率，敏感度更高，尤其可检测到脑脊液细万方数据主堡益经型盘查!Q!至!旦箜堑鲞箜!塑鱼!i!盟!翌!：Q!竺!：!：堑：盟!：!Q胞内部的M t b，对判断患者的疾病严重程度、预后更有帮助“。该法仅需0 5m l 脑脊液，操作简便可行，更适合普通临床实验室开展。但抗酸染色时，对形态多变、细胞壁部分或完全缺失的L 型M t b 无法着色，不能区分M t b 和非M t b，仍是影响T B M 确诊的原因之一。近年使用发光二极管荧光显微镜(L E D F M)观察金胺“O”一罗丹明染色阳性的抗酸杆菌可快速诊断T B M，该显微镜视野较普通显微镜大2 4 倍，不需油镜观察，可显著提高检查涂片的时间，敏感度更高，W H O 建议可用其取代传统萋尼染色显微镜。1“，是抗酸杆菌镜检研究的发展方向。1。但因其费用昂贵，目前只在发达国家普遍使用。2 M t b 培养：此法是结核病诊断的“金标准”，可在鉴别M t b 和非M t b、M t b 分型、药敏试验、药物研究等方面发挥作用。目前临床常用的T B M 脑脊液的培养方法有：(1)罗氏培养法(L o w n s t e i n J e n s o n 培养法)：临床应用最普遍。一直是T B M 诊断的“金标准”，敏感度约2 0，但需时4 8 周，给临床及时诊断带来不便。”J。(2)M G I T(m y c o b a c t e r i ag r o w t hi n d i c a t o rt u b e)液体9 6 0 培养法：是近年研制的专门用于结核快速培养的方法，主要是通过连续检测接种标本培养基所显示的荧光强度变化来判断是否有分枝杆菌生长。诊断T B M 的敏感度约5 0，且M t b 平均检出时问明显缩短，平均为1 4 4d，最快1 0d 1 8 。操作简单、灵敏，全封闭非侵袭性检测系统防止交叉污染，是目前临床结核培养的主要发展方向。三、病原学问接检查通过检测M t b 特异核酸片段或抗原成分来诊断结核病相较直接病原学检查，虽未直接观察到M t b 的存在，但可间接推测，有助于结核病诊断和对M t b 分型，可发展为全自动化检测手段，检查快速、高效，成为目前诊断T B M 领域发展最快的方向。1 核酸检测：聚合酶链反应(P C R)在T B M 诊断中多用于实验研究，非临床诊断2。最新制定的T B M 临床诊断标准将商业化的P C R 检测试剂盒作为T B M 诊断的“金标准”L 8 j，使该方法成为T B M 诊断研究发展最快的领域。但因其成本高、敏感度较低，尚未成为T B M 的常规检查。(1)经典P C R 检测：P C R 可选择性扩增脑脊液中M t b 的D N A 片段，目前最常用的靶基因有I S 6 1 1 0 保守片段、M P B 6 4 抗原、相对分子质量6 50 0 0 蛋白等。此外，巢式(n e s t e d)、多重(m u l t i p l e x)以及实时定量(q u a n t i t a t i v er e a l t i m e)P C R 拉”2o 等方法也可诊断T B M。所需脑脊液量少，敏感度达4 8 1 0 0，特异度达8 4 9 8 四J。由于各实验室P C R 所用的靶基因、引物、反应条件、报道的P C R 敏感度和特异度差别较大，因此难以对T B M 的诊断效率进行整体评估。(2)G e n e X p e r t：该法通过对M t b 特有的序列r p o b 基因和利福平耐药相关8 1b p 的核心区域进行检查，采用独特的定量P C R反应设计和全自动样品处理纯化核酸，定量检测降低系统误差，敏感度可达9 2，特异度可达9 9 6，使结果更准确，方法更简便，操作更安全”o。可用于脑脊液、胸腔积液、腹水、7 0 7 脓、粪便标本中M t b 的检测，标本使用量小，2h 可检测8 个样本。2，但对T B M 诊断的敏感度尚有待检查，在欧美国家已普遍受到认可。4 1。(3)环介导等温扩增法：是对靶基因的6 个特异部位设定4 种引物，利用一种链置换D N A 聚合酶在恒温条件下催化新链合成，使靶基因高效扩增，应用专门的浊度仪进行实时定量检测，可准确检测到临床样本中的M t b。操作简便，需时短，耗材少，易于在基层实验室开展。有文献报道可用于诊断T B M，敏感度达8 8 2 3，特异度达8 0，优于巢式P C R 检测，但因敏感度高，极易污染，会产生假阳性2。(4)线性探针技术：运用多重P C R 扩增和反向杂交技术，通过检测利福平和异烟肼耐药相关基因r p o B、k a t G、i n h A 的突变，敏感度为9 4 3，特异度为9 6 0，有助于早期耐药结核病的诊断，操作简便易开展哺o，但操作复杂，费用昂贵，不易普及，尚未见文献报道用于T B M 的诊断。(5)基因芯片技术：是将多种探针固定在玻璃等基片上，与待测样本的D N A 或R N A 进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度而进行大规模遗传差异分析。可同时用于结核菌种鉴定和M t b 耐药基因，诊断快速，为临床诊断治疗提供重要依据。一般标本中细菌数超过每毫升1 00 0 0 个才能呈现杂交阳性反应。2，敏感度低，但特异度高。将特异度高的D N A 探针与敏感度高的P C R 技术结合已成为结核病研究和临床应用的一种良好途径-z“。2 抗原检测：(1)脑脊液结核抗原：截至目前，人们所使用过的结核抗原有2 0 余种，由于不同种类的结核抗原纯度和活性差异很大，因此检测效果差距甚大。2。1 9 8 3 年S a d a等首先报道了以E L I S A 双夹心法检测T B M 患者脑脊液中卡介苗抗原，敏感度为8 1 3，特异度为9 5 O。但由于B C G抗原和其他细菌有交叉反应，假阳性率较高。目前，最常监测的结核抗原包括结核菌素纯蛋白衍生物、阿拉伯甘露聚糖(L A M)、早期分泌性抗原靶6(E S A T 一6)、蛋白抗原b(相对分子质量3 80 0 0)、分泌蛋白M P T 6 4、M t b 8 4、M t b 8、M t b l 6 3、A 6 0 抗原、A 9 8 5 复合体、培养滤液蛋白1 0(C F P 1 0)等，对这些抗原成分的检测方法包括凝集试验、酶联免疫吸附试验、免疫斑点法和免疫金标技术。其中对L A M 的检测已经进入临床诊断，有特异的L A M I g G 试剂盒，称作结明试验，操作简便，2 0m i n 可出结果0 1 3 。M t b 特异抗原成分，不仅可用来诊断T B M，还可区分潜伏感染、现症感染、感染M t b 的毒力。对多种特异性靶抗原进行优化组合，分析不同感染状态的抗原表达谱，从而提高对现症感染诊断的特异度HJ。(2)胞内结核抗原：M t b 是胞内寄生菌。因此使用免疫细胞化学法检测脑脊液细胞内的结核特异性抗原与脑脊液循环结核抗原检测相比，诊断T B M 的敏感度可高达7 2 5 一1 0 0 0，特异度达9 0 7 L 2 9J。目前研究较多的有E S A T-6 和C F P 一1 0，使胞内结核抗原检查不仅可作为诊断T B M 的方法，还可用来研究T B M 的机制和评估患者的预后。(3)二维胶内差异凝胶电泳：此法已广泛用于各种神经系统疾病，可鉴别出T B M 脑脊液中表达的特异性蛋白，M t b 蛋白花生四烯酸-5 一脂氧合酶(a r a c h i d o n a t e5-l i p o x y g e n a s e，A L O X 一5)、胶质纤维万方数据7 0 8 空堡益经型苤圭!生!旦箜堑鲞笙!Q 翅垦生!堕型翌!：Q!竺!Q!：!：堑：堕!：!Q酸性蛋白、抗凝血酶可特异性升高，载脂蛋白E 以及A I、甲状腺素运载蛋白可特异性降低，其中A L O X 5 可作为诊断T B M 的标志性蛋白，如与质谱分析联合使用可提高检出率。四、免疫学检测1 脑脊液结核抗体：近年来发现结核菌重组蛋白、L A M、脂多糖等成分的较为优化的抗I g G 抗体的血清水平与病变程度呈正相关，因此检测血清中I g G 抗体的水平对于活动性疾病的诊断有重要意义。但一次检测不能区分急性结核感染和既往结核感染，如果患者免疫力低下或长期使用免疫抑制剂可出现假阴性。2 结核菌素试验：结核菌素皮肤试验是临床用于结核病初筛的主要方法之一，有较高的检出率。1 9 3 2 年人们在旧结核菌素基础上发现了结核菌素纯蛋白衍生物，但敏感度及特异度还是不高“。目前有研究使用M t b 的特异抗原E S A T-6 作为皮肤试验试剂，可显著提高特异度，但由于结核菌素试验和患者的免疫状态密切相连，敏感度有待观察。3 酶联免疫斑点技术：是以M t b 早期分泌E S A T-6 和C F P 一1 0 作为特异性抗原，通过探测结核患者的特异性T 细胞来诊断结核病3。操作简便，耗时少，对肺结核诊断敏感度较高。但由于存在血脑屏障以及广泛的结核潜伏感染等因素，该法尚不能成为T B M 诊断的有效手段3“。只有儿童(小于1 0 岁)酶联免疫斑点阳性时才予以考虑。8o，对结核病和结核潜伏感染者的早期诊断有重要价值。目前有研究通过分离脑脊液T 淋巴细胞进行酶联免疫斑点反应，可增加诊断敏感度，但由于操作复杂、价格昂贵，尚不能临床推广。五、展望随着近年来M t b 相关研究的深入，尽管病原学、分子生物学及免疫学等方法诊断结核病1 3 益成熟，很多诊断方法已普遍用于颅外结核，但对T B M 缺乏特异性。对现有方法进行优化，并探索其在T B M 中适合的检测条件有助于早期发现并诊断T B M，使患者获得更好的治疗旧“。此外，世界各国还需加强交流合作，共同探讨研究T B M 的快速诊断问题，以便新技术的普及推广，进一步提高T B M 的诊断水平。参考文献T h a i s sW M T h a i s sC C r 1 1 l a i s sC A R e c e n td e v e l o p m e n t si nt h ee p i d e m i o l o g ya n dm a n a g e m e n to ft u b e r c u l o s i s n e ws o l u t i o n st oo l dp r o b l e m s 7 I n f e c tD r u gR e s i s t 2 0 1 2 5：1 8 W H Og l o b a lt u b e r c u l o s i sc o n t r o lr e p o r t2 0 1 0 S u m m a r y C e n tE u rJP u b l i cH e a l t h 2 0 1 0，1 8：2 3 7 L a w nS D Z u m l aA I T u b e r c u l o s i s L a n c e t，2 0 l l，3 7 8：5 7-7 2 Z u m l aA，R a v i g l i o n eM，H a f n e rR，e ta 1 T u b e r c u l o s i s NE n g lJM e d 2 0 1 3，3 6 8：7 4 5-7 5 5 L i a oP W，C h i a n gT R，L e eM C，e ta 1 T u b e r c u l o s i sw i t hm e n i n g i t i s，m y e l o r a d i c u l i t i s，a r a c h n o i d i t i sa n dh y d r o c e p h a l u s：ac a s er e p o r t A c t aN e u r o lT a i w a n 2 0 1 0 1 9：1 8 9 1 9 3 P e h l i v a n o g l uF，Y a s a rK K，S e n g o zG T u b e r c u l o u sm e n i n g i t i si na d u l t s：ar e v i e wo f1 6 0c a s e s S c i e n t i f i c W o r l d J o u m a l，2 0 1 2，2 0 1 2：1 6 9 0 2 8 G o n z f l e z D u a r t eA，P o n c ed eL e 6 nA，O s o r n i oJ S I m p o r t a n c eo fd i f k r e n t i a t i n gM y c o b a t e r i u mb o r i si nt u b e r c u l o u sm e n i n g i t i s 8 9 N e u r o l I n t，2 0 1 1，3：e 9 M a r a i sS r 1 1 I l w a i t e sG S c h o e m a nJ F e ta 1 T u b e r c u l o u sm e n i n g i t i s：au n i f o r mc a s ed e f i n i t i o nf o ru s ei nc l i n i c a lr e s e a r c h L a n c e tI n f e e tD i s，2 0 1 0，1 0：8 0 3 8 1 2 B r a n c u s iF F a r r a rJ H e e m s k e r kD T u b e r c u l o u sm e n i n g i t i si na d u l t s：ar e v i e wo fad e c a d eo fd e v e l o p m e n t sf o c u s i n go np r o g n o s t i cf a c t o r sf o ro u t c o m e F u t u r eM i e r o b i o l，2 0 1 2，7：11 0 1 1 1 1 6 1 0 P a s c oP M，D i a g n o s t i cf e a t u r e so ft u b e r c u l o u sm e n i n g i t i s：ac r o s s s e c t i o n a ls t u d y B M CR e sN o t e s 2 0 1 2 5：4 9 11 A l f a y a t e-M i g u f l e zS，M a r t i n e z L a g e-A z o f l nL，M a r i n V i r e sL，e ta 1 N o r m a lv e n t r i c u l a r C S Fm a yc o m f o u n dt h ed i a g n o s i so ft u b e r c u l o u sm e n i n g i t i sh y d r o c e p h a l u s N e u r o e i r u g i a(A s t u r)，2 0 1 1，2 2：1 5 7-1 6 1 12 G a l i m iR E x t r a p u l m o n a r yt u b e r c u l o s i s：t u b e r c u l o u sm e n i n g i t i sn e wd e v e l o p m e n t s E u rR e vM e dP h a r m a c o lS c i，2 0 11，1 5：3 6 5-3 8 6 1 3 张贺秋，赵雁林现代结核病诊断技术北京：人民卫生出版社，2 0 1 3：4 7 1 0 3 1 4 C h e nP，S h iM，F e n gG D，e ta 1 Ah i g h l ye f f i c i e n tZ i e h l N e e l s e ns t a i n：i d e n t i f y i n gd en o v oi n t r a c e l l u l a rM y c o b a c t e r i u mt u b e r c u l o s i sa n di m p r o v i n gd e t e c t i o no fe x t r a c e l l u l a rM t u b e r c u l o s i si nc e r e b r o s p i n a lf l u i d JC l i nM i c r o b i o|，2 0 1 2 5 0：1 1 6 6 1 1 7 0 15 W a l l i sR S，P a lM，M e n z i e sD，e ta 1 B i o m a r k e r sa n dd i a g n o s t i c sf o rt u b e r c u l o s i s：p r o g r e s s，n e e d s，a n dt r a n s l a t i o ni n t op r a c t i c e L a n c e t，2 0 1 0，3 7 5：1 9 2 0-1 9 3 7 1 6 H o o j aS，P a lN，M a l b o t r aB，e ta 1 C o m p a r i s o no fZ i e h lN e e l s e nA u r a m i n eOs t a i n i n gm e t h o d so nd i r e c ta n dc o n c e n t r a t e ds m e a r si nc l i n i c a ls p e c i m e n s I n d i a nJT u b e r c，2 0 11，5 8：7 2 7 6 17 K a s h y a pR S，R a m t e k eS S，M o r e yS H，e ta 1 D i a g n o s t i cv a l u eo fe a r l ys e c r e t e da n t i g e n i ct a r g e t-6f o rt h ed i a g n o s i so ft u b e r c u l o u sm e n i n g i t i sp a t i e n t s I n f e c t i o n，2 0 0 9，3 7：5 0 8-5 1 3 1 8 K o hW J，K oY，K i mC K，e ta 1 R a p i dd i a g n o s i so ft u b e r c u l o s i sa n dm u l t i d r u gr e s i s t a n c eu s i n gaM G I T9 6 0s y s t e m A n nL a bM e d，2 0 1 2，3 2：2 6 4 2 6 9 19 N a g d e vK J，K a s h y a pR S，D e s h p a n d eP S，e ta 1 C o m p a r a t i v ee v a l u a t i o no faP C Ra s s a yw i t ha ni n-h o u s eE L I S Am e t h o df o rd i a g n o s i so fT u b e r c u l o u sm e n i n g i t i s M e dS c iM o n i t，2 0 1 0，1 6：C R 2 8 9 _ 2 9 5 2 0 N a g d e vK J，K a s h y a pR S，P a r i d aM M，e ta 1 L o o p m e d i a t e di s o t h e r m a la m p l i f i c a t i o nf o rr a p i da n dr e l i a b l ed i a g n o s i so ft u b e r c u l o u sm e n i n g i t i s JC l i nM i c r o b i o l，2 0 11 4 9：18 6 1 18 6 5 2 1 H a l d a rS，S h a r m aN，G n p t aV K，e ta 1 E f f i c i e n td i a g n o s i so ft u b e r c u l o u sm e n i n g i t i sb yd e t e c t i o no fM y c o b a c t e r i u mt u b e r c u l o s i sD N Ai ne e r e b r o s p i n a lf l u i df i l t r a t e su s i n gP C R JM e dM i c r o b i 0 1 2 0 0 9，5 8(P t5)：6 1 6-6 2 4 2 2 K u s u mS，A m a nS，P a l l a bR，e ta 1 M u l t i p l e xP C Rf o rr a p i dd i a g n o s i so f t u b e r c u l o u sm e n i n g i t i s JN e u r o l，2 0 1 1，2 5 8：1 7 8 1 1 7 8 7 2 3 V a d w a iV，B o e h m eC，N a b e t aP，e ta 1 X p e r tM T B R I F：an e wp i l l a ri nd i a g n o s i so fe x t r a p u l m o n a r yt u b e r c u l o s i s 7 JC l i nM i c r o b i o l，2 0 11 4 9：2 5 4 0 2 5 4 5 2 4 A l v a r e z U r i aG，A z c o n aJ M，M i d d eM，e ta 1 R a p i dd i a g n o s i so fp u l m o n a r ya n de x t r a p u l m o n a r yt u b e r c u l o s i si nH I V i n f e c t e dp a t i e n t s C o m p a r i s o no fL E Df l u o r e s c e n tm i c r o s c o p ya n dt h eG e n e X p c r tM T B R I Fa s s a yi nad i s t r i c th o s p i t a li nI n d i a T u b e r cR e sT r e a t，2 0 1 2(2 0 1 2)：9 3 2 8 6 2 2 5 C r u d uV，S t r a t a nE，R o m a n e e n e oE，e ta 1 F i r s te v a l u a t i o no fa ni m p r o v e da s s a yf o rm o l e c u l a rg e n e t i cd e t e c t i o no ft u b e r c u l o s i sa sw e l la sr i f a m p i na n di s o n i a z i dr e s i s t a n c e s JC l i nM i c r o b i o l，2 0 1 2，5 0：1 2 6 4 1 2 6 9 2 6 S t r o u pS，T o n g j a iS，S w a iN，e ta 1 D u a lp r o b eD N Ac a p t u r ef o rs e n s i t i v er e a l t i m eP C Rd e t e c t i o no fC r y p t o s p o r i d i u ma n dG i a r d i a M o lC e l lP r o b e s，2 0 1 2，2 6：1 0 4 1 0 6 2 7 S h iX C，L i uX Q，X i eX L，e ta 1 G e n ec h i pa r r a yf o r_ 二_心口H陋口万方数据主垡弛经整苤查!生!旦箜堑鲞箜!塑垡!i!堕!丛：Q!尘竺!：尘：堑：塑!：!Qd i f f e r e n t i a t i o no fm y c o b a c t e r i a ls p e c i e sa n dd e t e c t i o no fd r u gr e s i s t a n c e C h i nM e dJ，2 0 1 2，1 2 5：3 2 9 2-3 2 9 7 2 8 张舒林，王洪海结核分枝杆菌特异性抗原检测的研究现状及展望中国热带医学，2 0 0 8，8：2 9 9 3 0 1 2 9 S h a oY，X i aP，Z h uT，e ta 1 S e n s i t i v i t ya n ds p e c i f i c i t yo fi m m u n o c y t o c h e m i c a ls t a i n i n go fm y c o b a c t e r i a lA n t i g e n si nt h ec y t o p l a s mo fc e r e b r o s p i n a lf l u i dm a c r o p h a g e sf o rd i a g n o s i n gt u b e r c u l o u sm e n i n g i t i s JC l i nM i c r o b i o l，2 0 11，4 9：3 3 8 8-3 3 9 1 3 0 张昆南，许自强，王朝东，等脑脊液中检测结核分枝杆菌特异性抗原对结核性脑膜炎的诊断意义中华神经科杂志，2 0 1l，4 4：8 6-8 9 31 K a t a r i aJ，R u k m a n g a d a c h a rL A，H a r i p r a s a dG，e ta 1 T w od i m e n s i o n a ld i f f e r e n c eg e le l e c t r o p h o r e s i sa n a l y s i so fc e r e b r o s p i n a lf l u i di nt u b e r c u l o u sm e n i n g i t i sp a t i e n t s JP r o t e o m i c s 2 0 11，7 4：2 1 9 4-2 2 0 3 3 2 S a g n e l l iE，S t a r n i n iG，S a g n e l l iC，e ta 1 B l o o db o r nv i r a l7 0 9 i n f e c t i o n s s e x u a l l yt r a n s m i t t e dd i s e a s e sa n dl a t e n tt u b e r c u l o s i si ni t a l i a np r i s o n s：ap r e l i m i n a r yr e p o r to fal a r g em u h i c e n t e rs t u d y E u r R e vM e dP h a r m a c o lS c i，2 0 1 2，1 6：2 1 4 2-2 1 4 6 3 3 P a t e lV B，S i n g hR，C o n n o l l yC，e ta 1 C e r e b r o s p i n a lT c e l lr e s p o n s e sa i di nt h ed i a g n o s i so ft u b e r c u l o u sm e n i n g i t i si nah u m a ni m m u n o d e f i c i e n c yv i r u s a n dt u b e r c u l o s i s e n d e m i cp o p u l a t i o n A mJR e s p i rC r i tC a r eM e d，2 0 1 0，1 8 2：5 6 9 5 7 7 3 4 F a nL，C h e nZ，H a oX H，e ta 1 I n t e r f e r o n g a m m ar e l e a s ea s s a y sf o rt h ed i a g n o s i so fe x t r a p u l m o n a r yt u b e r c u l o s i s：as y s t e m a t i cr e v i e wa n dm e t a a n a l y s i s F E M SI m m u n o lM e dM i c r o b i o l，2 0 1 2，6 5：4 5 6-4 6 6 3 5 赵钢脑脊液细胞学的应用现状与未来发展中华神经科杂志，2 0 1 1，4 4：7 3-7 6(收稿日期：2 0 1 3 1 3-0 4)(本文编辑：郑晴)脑海绵状血管畸形发病机制及治疗的研究进展乔珊韩涛位坤坤刘学伍脑海绵状血管畸形(c e r e b r a lc a v e m o u sm a l f o r m a t i o n s，C C M s)是发生于中枢神经系统的血管缺陷，家族性患者常为多发性病变，而散发病例多为单发病变。根据磁共振成像，C C M s