VEGF⁃C、Ki⁃67及PTEN在皮肤恶性黑色素瘤患者中的表达及临床意义.pdf

分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.7论著基金项目：安徽省自然科学基金资助项目（1808185MH1035）作者单位：宣城市中心医院病理科，安徽，宣城 242000通信作者：李杨，Email：VEGFC、Ki67及PTEN在皮肤恶性黑色素瘤患者中的表达及临床意义李杨李启松丁聪玲王庆摘要 目的分析血管内皮细胞生长因子 C（VEGFC）、细胞增殖指数 Ki67 及张力蛋白同源物（PTEN）在皮肤恶性黑色素瘤患者中的表达及临床意义。方法收集 2017 年 3 月至 2020 年 3 月宣城市中心医院收治的 59 例皮肤恶性黑色素瘤患者作为研究组，另选同时期 61 例色素痣患者作为对照组。分析两组 VEGFC、Ki67 及 PTEN 的表达水平，分析 VEGFC、Ki67 及 PTEN 与皮肤恶性黑色素瘤病理特征及预后的关系。结果研究组 VEGFC、Ki67 阳性表达率均高于对照组，PTEN 阳性表达率低于对照组，差异有统计学意义（P0.05）；临床分期期、有淋巴结转移者 VEGFC、Ki67 阳性率明显高于临床分期期、无淋巴结转移者，差异具有统计学意义（P0.05）。临床分期期、无淋巴结转移者 PTEN 阳性率明显高于临床分期期、有淋巴结转移者，差异具有统计学意义（P0.05）。术后对患者进行 1 年随访，死亡者 12 例（20.34%）。多元 Logistic 回归分析结果显示，临床分期期、有淋巴结转移、VEGFC 及 Ki67 阳性表达、PTEN 阴性表达是影响皮肤恶性黑色素瘤患者预后死亡的独立危险因素（P0.05）。结论在皮肤恶性黑色素瘤中 VEGFC、Ki67 阳性表达率高、PTEN 阴性表达率高，推测VEGFC、Ki67 及 PTEN 表达与皮肤恶性黑色素瘤疾病有着密切联系，三指标可作为评估皮肤恶性黑色素瘤病情进展及预后的有效检测指标。关键词 Ki67；皮肤恶性黑色素瘤；VEGFC；PTENExpression and clinical significance of VEGF C，Ki 67 and PTEN in patients withcutaneous malignant melanomaLI Yang，LI Qisong，DING Congling，WANG Qing（Department of Pathology，Xuancheng Central Hospital，Xuancheng，Anhui，China，242000）ABSTRACTObjectiveTo analyze the expression and clinical significance of vascular endothelialgrowth factor C（VEGFC），cell proliferation index Ki67 and tensin homolog（PTEN）in patients with skinmalignant melanoma.Methods59 patients with skin malignant melanoma admitted to Xuancheng CentralHospital from March 2017 to March 2020 were collected as the study group，and 61 patients with pigmentednevus in the same period were selected as the control group.The expression of VEGFC，Ki67 and PTEN levelsbetween the two groups was analyzed，and the relationship between VEGFC，Ki67 and PTEN and thepathological features and prognosis of cutaneous malignant melanoma was analyzed.ResultsThe positive expression rates of VEGFC and Ki67 in the research group were higher than those in the control group，and thepositive expression rate of PTEN was lower than that in the control group，the difference was statistically significant（P0.05）.The positive rates of VEGFC and Ki67 in patients with clinical stage and lymphnode metastasis were significantly higher and the difference was statistically significant（P0.05）.The positiverate of PTEN in patients with clinical stage and no lymph node metastasis was significantly higher，thedifference was statistically significant（P0.05）.The patients were followed up for 1 year after the operation，1252分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.7and 12 cases（20.34%）died.The results of multivariate logistic regression analysis showed that clinical stage，lymph node metastasis，positive expression of VEGFC and Ki67，and negative expression of PTENwere independent risk factors affecting the prognosis and death of patients with cutaneous malignant melanoma（P0.05）。见表 1。本研究经院医学伦理委员会批准通过。1.2方法所有标本组织于手术切除后 30 min 内使用10%甲醛固定，组织切片后脱蜡、水化。采用 SP免疫组化染色检测 VEGFC、Ki67 及 PTEN 水平，鼠抗人VEGFC、鼠抗人Ki67、PTEN单克隆抗体均采购自美国 Epitomics 公司。每批切片染色均用已知的 VEGFC、Ki67及 PTEN 阳性组织切片当阳性对照，以磷酸盐缓冲液代替一抗作阴性对照。根据阳性细胞百分比及染色情况判定 VEGFC、Ki67 及PTEN表达7：0分、1分、2分及3分对应的阳性细胞比分别是 0、50%。染色情况判定：0分、1分、2分及3分对应的颜色分别是无色、淡黄色、棕黄色及棕褐色。总积分：上述2项评分的乘积。阴性为3分及以下，阳性为4分及以上。1.3统计学方法采用 SPSS 22.0 软件进行统计分析，计量资料以（xs）行 t 检验；计数资料采用 n（%）行c2检验；独立危险因素采用多元 Logistic 回归分析，以 P0.05 表示差异有统计学意义。2结果2.1两组 VEGFC、Ki67 及 PTEN 表达情况比较研究组 VEGFC、Ki67 阳性表达率均高于对照组，PTEN 阳性表达率低于对照组，差异有统计学意义（P0.05）。见表 2、图 1。组别研究组对照组c2/t 值P 值n5961男/女36/2334/270.3440.558平均年龄（岁）54.385.2952.358.231.6010.112平均体重指数（kg/m2）20.533.1421.384.271.2390.218表 1两组基本资料比较（xs）Table 1Comparison of basic information between the twogroups（xs）1253分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.7组别研究组对照组c2值P 值n5961VEGFC阳性32（54.24）7（11.48）24.9990.001阴性27（45.76）54（88.52）Ki67阳性39（66.10）4（6.56）46.2470.001阴性20（33.90）57（93.44）PTEN阳性24（40.68）56（91.80）35.2773 cm有无头、颈躯干四肢n24353623283146133722321017VEGFC 阳性（n=32）11（45.83）21（60.00）17（47.22）15（65.22）10（35.71）22（70.96）27（58.70）5（38.46）24（64.86）8（36.36）15（46.88）6（60.00）11（64.71）c2值1.1511.8317.3671.6724.5151.583P 值0.2830.1760.0070.1960.0340.453Ki67 阳性（n=39）16（79.17）23（65.71）24（66.67）15（65.22）13（46.43）26（83.97）32（69.57）7（53.85）32（86.49）7（31.82）19（59.38）6（60.00）14（82.35）c2值0.0060.0139.2051.11818.4022.816P 值0.9390.9090.0020.2900.0010.245PTEN 阳性（n=24）9（37.20）15（42.86）14（38.89）10（43.48）16（57.14）8（25.81）18（39.13）6（46.15）11（29.73）13（59.09）13（40.63）3（30.00）8（47.06）c2值0.1690.1235.9870.2074.9290.759P 值0.6810.7260.0140.6490.0260.684表 3不同临床病理特征患者间 VEGFC、Ki67 及 PTEN 表达情况n（%）Table 3Comparing the expression of VEGFC，Ki67 and PTEN among patients with different clinical and pathologicalcharacteristicsn（%）A AB BC CD DE EF F注：A.Ki67 阳性表达，B.Ki67 阴性表达；C.PTEN 阳性表达，D.PTEN 阴性表达；E.EGFC 阳性表达，F.EGFC 阴性表达。图 1Ki67、PTEN 及 VEGFC 的表达图示（免疫组化染色法，400400）Figure 1Expression diagram of Ki67，PTEN and VEGFC（Immunohistochemical staining method，400400）2.2不同临床病理特征患者间 VEGFC、Ki67 及PTEN 表达情况比较临床分期期、有淋巴结转移者 VEGFC、Ki67 阳性率明显高于临床分期期、无淋巴结转移者，差异有统计学意义（P0.05）。临床分期期、无淋巴结转移者 PTEN 阳性率明显高于临床分期期、有淋巴结转移者，差异有统计学意义（P0.05）。见表 3。2.3皮肤恶性黑色素瘤患者预后死亡危险因素分析术后 1 年死亡死亡率为 20.34%（12/59）。经Logistic 回归分析得，临床分期期、有淋巴结转移、VEGFC 及 Ki67 阳性表达、PTEN 阴性表达是影响皮肤恶性黑色素瘤患者预后死亡的独立危险因素（P50 岁）性别：男（参照组：女）临床分期：期（参照组：期）肿瘤直径：3 cm（参照组：3 cm）淋巴结转移：有（参照组：无）肿瘤部位：头、颈（参照组：躯干/四肢）VEGFC：阳性（参照组：阴性）Ki67：阳性（参照组：阴性）PTEN：阴性（参照组：阳性）单因素分析OR 值1.9122.0561.9232.3002.6621.5622.6252.3072.45595%CI0.6690.5470.7755.4581.5112.4480.6508.1431.1336.2560.7343.3221.1196.1571.0075.2861.0630.668P 值0.3890.6970.0010.5630.0020.8730.0010.0010.001多因素分析OR 值2.1442.4062.1492.3582.10995%CI1.2993.5421.0675.4271.3613.3931.1334.9091.3593.271P 值0.0010.0010.0010.0010.001表 4皮肤恶性黑色素瘤患者预后死亡危险因素分析Table 4Analysis of independent risk factors affecting the prognosis and death of patients with skin malignant melanoma了重要作用1011。本组研究结果发现，皮肤恶性黑色素瘤患者 VEGFC 阳性表达率显著高于对照组，且VEGFC阳性表达率与皮肤恶性黑色素瘤的淋巴结转移及临床分期有关，与Kallarakkal 等12的研究结果 相 符。进 一 步 多 元 Logistic 回归分析发现，VEGFC阳性表达是影响皮肤恶性黑色素瘤患者死亡的危险因素，故笔者认为可将 VEGFC 作为皮肤恶性黑色素瘤患者预后评估的可靠指标之一。Ki67 在细胞不同分裂阶段表达均有差异，故有学者13认为可将其作为检测肿瘤细胞增殖活性的有效指标。本研究结果显示，皮肤恶性黑色素瘤中Ki67阳性表达率显著高于对照组，Ki67阳性表达和皮肤恶性黑色素瘤患者的临床分期、淋巴结转移等关系紧密，且多因素Logistic回归分析显示，Ki67表达阳性是影响皮肤恶性黑色素瘤患者预后生存的独立危险因素。提示在术后进行 Ki67检测可对皮肤恶性黑色素瘤患者治疗效果进行有效评估。PTEN 是近年来发现的一个具有磷酸酶活性的抑癌基因，其具有负性调控 PI3K/AKT 通路、抑制丝裂原活化的蛋白激酶通路的作用。有学者研究证实，PTEN 基因缺失与乳腺癌、卵巢癌、胃癌及口腔鳞状细胞癌等恶性肿瘤的发病有着密切联系，因此认为 PTEN 基因与恶性肿瘤发生、发展密切相关14。本研究中，PTEN 在皮肤恶性黑色素瘤组织中呈阴性表达，且临床分期越低及无淋巴结转移者 PTEN 阳性表达率越高，考虑原因可能与PTEN 基因启动子甲基化有关。多元 Logistic 回归分析发现，PTEN 阴性的皮肤恶性黑色素瘤患者死亡风险为阳性患者的 2.109 倍，表明 PTEN 与皮肤恶性黑色素瘤的发生、发展及预后有关。综上所述，在皮肤恶性黑色素瘤中 VEGFC、Ki67 阳性表达率高、PTEN 阴性表达率高，推测VEGFC、Ki67 及 PTEN 表达与皮肤恶性黑色素瘤疾病有着密切联系，三指标可作为评估皮肤恶性黑色素瘤病情进展及预后的有效检测指标。参考文献1Wu J，Song Y.Expression and clinical significance of serumMMP7 and PTEN levels in patients with acute myeloid leukemia J.Oncol Lett，2018，15（3）：34473452.2胡露，郑德义，李伟人.皮肤恶性黑色素瘤的外科治疗进展 J.医学综述，2022，28（9）：16951700.3Duan YT，LI RH，Hematology DO，et al.Expression andclinical significance of PTEN，miR195 and BCL2 in patients with acute myeloid leukemia J.Hainan Medical 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Venereol，2017，31（9）：14681474.（下转第 1260 页）1255分子诊断与治疗杂志2023年7月第15卷第7期J Mol Diagn Ther,July 2023,Vol.15No.7益菌数量过低，肠杆菌、肠球菌等致病菌数量过高。经治疗后研究组乳酸杆菌、双歧杆菌高于对照组，肠杆菌低于对照组，这可能与以下两方面原因有关，一方面是布拉氏酵母菌可抑制免疫活性细胞释放炎性细胞因子，增强肠道黏膜免疫功能，减轻肠道应激反应，另一方面是可在肠道内与致病菌竞争营养素，抑制致病菌生成繁殖，纠正肠道菌群紊乱，改善肠道内环境。ET、D乳酸、DAO 是当前最能体现肠黏膜屏障功能指标。王欣等15发现 D乳酸在 UC 患者血清中呈高表达。陈桂梅16指出，UC 患者血清D乳酸、DAO 水平过高，经微生态制剂（双歧杆菌三联活菌）治疗后降低。本研究发现研究组血清D乳酸、DAO、ET 水平明显低于对照组，这可能与布拉氏酵母菌对肠黏膜屏障的修复保护作用有关。综上可知，布拉氏酵母菌联合柳氮磺吡啶栓治疗 UC 疗效确切，有助于控制临床症状，降低Baron 内镜评分，调节肠道菌群，恢复肠黏膜屏障功能，且安全性较高。参考文献1Keshteli AH，Madsen KL，Dieleman LA，et al.Diet in thepathogenesis and management of ulcerative colitis；a reviewof randomized controlled dietary interventionsJ.Nutrients，2019，11（7）：1498.2杨斐，郑晓娟，刘近春，等.溃疡性结肠炎肠道菌群失调的治疗进展 J.胃肠病学，2018，23（1）：5658.3吕歆.固本益肠片联合柳氮磺胺吡啶治疗轻中度溃疡性结肠炎的疗效观察 J.现代药物与临床，2018，33（3）：560563.4向黎莉.布拉氏酵母菌散联合柳氮磺吡啶治疗溃疡性结肠炎的临床研究 J.现代药物与临床，2018，33（9）：23602364.5葛均波，徐永健.内科学 M.8 版.北京：人民卫生出版社，2013：385390.6潘庆华，魏文斌.愈疡汤保留灌肠对直肠型溃疡性结肠炎临床疗效及对血清炎性因子的影响 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