农业微生物学实验专家讲座.pptx

农业微生物学试验农业微生物学试验微生物教研室秋季学期植物生产类各专业农业微生物学实验专家讲座第1页试验内容试验内容n试验一试验一 细菌革兰氏染色法细菌革兰氏染色法n试验二试验二 培养基制备及灭菌培养基制备及灭菌n试验三试验三 稀释平板分离计数法稀释平板分离计数法n试验试验四四 微生物菌落特征微生物菌落特征观察观察及描述及描述农业微生物学实验专家讲座第2页试验汇报书写和试验要求试验汇报书写和试验要求1 1 一个试验技术内容写一份汇报。一个试验技术内容写一份汇报。2 2 试验内容包含试验目标、原理、操作步骤及试验试验内容包含试验目标、原理、操作步骤及试验结果，强调是不能将书本上搬到试验汇报中，必结果，强调是不能将书本上搬到试验汇报中，必须是你真实完成步骤及对应每步结果反应在你汇须是你真实完成步骤及对应每步结果反应在你汇报中。报中。3 3 要求绘图时必须用铅笔描绘，用一个圆表示从显要求绘图时必须用铅笔描绘，用一个圆表示从显微镜看到视野，标明菌名、放大倍数等。微镜看到视野，标明菌名、放大倍数等。大肠杆菌大肠杆菌 101004 试验结束后要求每位同学将自己使用过仪器和玻璃器皿清扫试验结束后要求每位同学将自己使用过仪器和玻璃器皿清扫洁净，并放回原处，保持试验室整齐，每次试验全班留一组同洁净，并放回原处，保持试验室整齐，每次试验全班留一组同学清扫试验室卫生。学清扫试验室卫生。农业微生物学实验专家讲座第3页农业微生物学试验农业微生物学试验试验一试验一 细菌革兰氏染色法细菌革兰氏染色法农业微生物学实验专家讲座第4页n1本试验目标和要求本试验目标和要求n了解革兰氏染色原理，学习并掌握革了解革兰氏染色原理，学习并掌握革兰氏染色方法兰氏染色方法。农业微生物学实验专家讲座第5页n2试验内容和原理试验内容和原理n革兰氏染色法（革兰氏染色法（Gram stain）不但能观察到细菌形态而且）不但能观察到细菌形态而且还可将全部细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色称为革还可将全部细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色称为革兰氏阳性细菌，用兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）表示；染色反应呈红色（复染颜色）称为革兰氏阴性细菌，用称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。细菌对于革兰氏染色不表示。细菌对于革兰氏染色不一样反应，是因为它们细胞壁成份和结构不一样而造成。一样反应，是因为它们细胞壁成份和结构不一样而造成。革兰氏阳性细菌细胞壁主要是由肽聚糖形成网状结构组成革兰氏阳性细菌细胞壁主要是由肽聚糖形成网状结构组成，在染色过程中，当用乙醇处理时，因为脱水而引发网状，在染色过程中，当用乙醇处理时，因为脱水而引发网状结构中孔径变小，通透性降低，使结晶紫结构中孔径变小，通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，所以，展现蓝紫色；革兰氏阴性留在细胞内而不易脱色，所以，展现蓝紫色；革兰氏阴性细菌细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙细菌细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁通透性增加，使结晶紫醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）颜色，所以展现红色。（番红）颜色，所以展现红色。农业微生物学实验专家讲座第6页n3需用仪器和试剂等需用仪器和试剂等n大肠杆菌，枯草芽孢杆菌；革兰氏染大肠杆菌，枯草芽孢杆菌；革兰氏染色液，载玻片，接种环、显微镜等。色液，载玻片，接种环、显微镜等。农业微生物学实验专家讲座第7页n4试验步骤试验步骤n样品涂片样品涂片干燥干燥固定固定草酸铵结晶紫草酸铵结晶紫初染约初染约1min水洗水洗碘液媒染约碘液媒染约1min水洗水洗95酒精脱色酒精脱色2030s马上水马上水洗洗番红液复染番红液复染12min水洗水洗干燥干燥镜检镜检农业微生物学实验专家讲座第8页2024/11/9 周六9农业微生物学实验专家讲座第9页2024/11/9 周六10农业微生物学实验专家讲座第10页n5试验汇报要求试验汇报要求n在你所作革兰氏染色制片中，大肠杆菌和枯草在你所作革兰氏染色制片中，大肠杆菌和枯草芽孢杆菌各染成什么颜色？它们是革兰氏阴性芽孢杆菌各染成什么颜色？它们是革兰氏阴性菌还是革兰氏阳性菌？菌还是革兰氏阳性菌？绘图。绘图。农业微生物学实验专家讲座第11页