灭菌和无菌空气的制备.pptx

工业生产上灭菌方法工业生产上灭菌方法有有加热灭菌、化学药剂灭菌、射加热灭菌、化学药剂灭菌、射线灭菌线灭菌等等。化学药剂灭菌、射线灭菌化学药剂灭菌、射线灭菌用于无菌间、培养室及车间用于无菌间、培养室及车间空气灭菌。空气灭菌。干热灭菌：干热灭菌：火焰灭菌、烘箱灭菌火焰灭菌、烘箱灭菌加热灭菌加热灭菌 湿热灭菌：湿热灭菌：巴氏灭菌、间歇灭菌、巴氏灭菌、间歇灭菌、高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌二、湿热灭菌原理二、湿热灭菌原理 致死温度：致死温度：指杀死微生物最低温度。指杀死微生物最低温度。灭菌和无菌空气的制备第1页致死时间：致死时间：在致死温度下杀死全部微生物在致死温度下杀死全部微生物所需要时间。所需要时间。1.1.微生物热阻微生物热阻 热阻：热阻：微生物对热抵抗力。微生物对热抵抗力。微生物对湿热相对抵抗力微生物对湿热相对抵抗力微生物名称微生物名称大肠杆菌大肠杆菌细菌芽孢细菌芽孢霉菌孢子霉菌孢子病毒病毒相对抵抗力相对抵抗力1 3 10621015灭菌和无菌空气的制备第2页2.2.微生物热死规律微生物热死规律对数残留定律对数残留定律 100100时不一样时间微生物存活数时不一样时间微生物存活数 时间时间（min）存活数存活数（个（个/mL)时间时间（min）存活数存活数（个（个/mL)06791191071.2107810651063106152025301106210521040灭菌和无菌空气的制备第3页菌死亡率（活菌降低率）菌死亡率（活菌降低率）:与任何时候残留活菌数与任何时候残留活菌数N 成正比。成正比。对数残留定律：对数残留定律：N残留活菌数（个）残留活菌数（个）t受热时间（受热时间（min)K反应速度常数（反应速度常数（min-1)11/2/20244发酵工艺原理灭菌和无菌空气的制备第4页 将上式积分得：将上式积分得：两边取对数：两边取对数：对数残留规律公式：对数残留规律公式：开始灭菌时原有活菌数（个）开始灭菌时原有活菌数（个）经过经过t 时间灭菌后残留菌数（个）时间灭菌后残留菌数（个）灭菌和无菌空气的制备第5页3.3.反应速度常数反应速度常数k k 在在相相同同温温度度下下，k k值值愈愈小小，则则此此微微生生物物愈愈耐耐热热。同同一一个个微微生生物物在在不不一一样样温温度度下下，k k值值也也不不相相同同，灭灭菌菌温温度度愈愈低低，k k值值愈愈小小，温温度度愈愈高高，k k值值愈愈大。大。121121一些细菌芽孢一些细菌芽孢k k 值值细菌芽孢名称细菌芽孢名称K 值值min-1枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌FS5230硬脂嗜热芽孢杆菌硬脂嗜热芽孢杆菌FS1518硬脂嗜热芽孢杆菌硬脂嗜热芽孢杆菌FS617产气梭状芽孢杆菌产气梭状芽孢杆菌PA36793.82.60.772.91.8灭菌和无菌空气的制备第6页4培养基灭菌温度选择培养基灭菌温度选择试验测试验测定：加热温度每升高定：加热温度每升高10 物质化学反应物质化学反应 1.52 芽孢热死反应芽孢热死反应 510 微生物营养细胞热死反应微生物营养细胞热死反应 35 灭菌和无菌空气的制备第7页结论：结论：温度升高，菌死亡速率大于培养基成份破坏温度升高，菌死亡速率大于培养基成份破坏 速率。速率。不一样温度灭菌时间及培养基破坏情况不一样温度灭菌时间及培养基破坏情况 在在实实际际生生产产中中为为了了既既到到达达灭灭菌菌目目标标又又很很好好地地保保留留营营养养成份，最好采取高温快速灭菌法。成份，最好采取高温快速灭菌法。温度温度（）灭菌时间灭菌时间（min)营养成份破坏（%）温度温度（）灭菌时间灭菌时间（min)营养成份破坏（%）1001101151204003015499.36750271301401500.50.080.01821灭菌和无菌空气的制备第8页三、影响培养基灭菌其它原因影响培养基灭菌其它原因1培养基成份培养基成份 2PH值值 pH值对灭菌时间影响值对灭菌时间影响温度温度（）孢子数孢子数（个（个/mL)灭菌时间（灭菌时间（min）pH6.1pH5.3pH5.0pH4.7pH4.5120115110100100001000010000100008257074072565720512351803133015031324150灭菌和无菌空气的制备第9页 3培养基中颗粒培养基中颗粒 4泡沫泡沫 四、工业灭菌方法四、工业灭菌方法 1连连续续灭灭菌菌（连连消消）(Continuous sterilization):是是采采取取专专一一灭灭菌菌设设备备-连连消消塔塔，在在高高温温下下对对液液体体培培养养基基进进行行短短时时间间加热灭菌。加热灭菌。优优点点：（1）培培养养基基受受热热时时间间短短（可可在在2030s到到达达预预定定灭灭菌菌温温度度），营营养养成成份份破破坏坏少少；（2）质质量量均均匀匀；（3）适适合合用用于于自自动控制。动控制。适适用用条条件件：大大规规模模生生产产，培培养养基基中中不不含含有有固固体体颗颗粒粒或或泡泡沫较少。沫较少。灭菌和无菌空气的制备第10页灭菌和无菌空气的制备第11页灭菌和无菌空气的制备第12页灭菌和无菌空气的制备第13页灭菌和无菌空气的制备第14页2.分批灭菌分批灭菌(实消实消):(Batch sterilization)指培养基在发酵罐中灭菌。指培养基在发酵罐中灭菌。优点：优点：无需专一灭菌设备，但易发生局部过热而无需专一灭菌设备，但易发生局部过热而破坏营养成份现象。破坏营养成份现象。适用条件：适用条件：当培养基中含有固体颗粒或培养基有当培养基中含有固体颗粒或培养基有较多泡沫时，以采取分批灭菌为好。对于容积较多泡沫时，以采取分批灭菌为好。对于容积小发酵罐，连续灭菌优点不显著，而采取分批小发酵罐，连续灭菌优点不显著，而采取分批灭菌比较方便。灭菌比较方便。灭菌和无菌空气的制备第15页