阿尔茨海默病患者血液中外泌体miR-223及NLRP3表达水平及临床意义.pdf

精准医学杂志2 0 2 3年1 0月第3 8卷第5期 JP r e c i sM e d,O c t o b e r2 0 2 3,V o l.3 8,N o.5d o i:1 0.1 3 3 6 2/j.j p m e d.2 0 2 3 0 5 0 2 0 文章编号:2 0 9 6-5 2 9 X(2 0 2 3)0 5-0 4 6 0-0 5 收稿日期2 0 2 3-0 8-2 3;修订日期2 0 2 3-0 9-1 5 基金项目2 0 1 9年河南省医学科技攻关计划联合共建项目(L HG J 2 0 1 9 1 4 8 9)通讯作者师俊亮,E m a i l:mm c 7 8 8 71 6 3.c o m阿尔茨海默病患者血液中外泌体m i R-2 2 3及N L R P 3表达水平及临床意义师俊亮1 郝豫萍2 夏源2 戴恩云2(河南省职工医院,河南 郑州 4 5 0 0 0 3 1 老年医学科;2 神经内科)摘要 目的 探讨血清中外泌体m i R-2 2 3及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(N L R P 3)表达水平与阿尔茨海默病(A l z h e i m e rsd i s e a s e,A D)发生及进展的关系。方法 选取2 0 1 8年3月2 0 1 9年1 2月于我院老年医学科就诊的老年A D患者6 5例作为研究组,分为轻度认知功能障碍(MC I)亚组(4 1例)和痴呆(D A T)亚组(2 4例);另外纳入同时期神经功能正常的老年人6 0例作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应和酶联免疫吸附测定法检测受检者血清中外泌体m i R-2 2 3及N L R P 3表达水平。采用P e a r s o n及S p e a r m a n检验分析受检者血清中外泌体m i R-2 2 3及N L R P 3与简易精神状态检查量表(MM S E)评分的关系。绘制受试者工作特征(R O C)曲线,计算血清中外泌体m i R-2 2 3及N L R P 3用于A D患者MC I诊断或者D A T鉴别诊断的曲线下面积(AU C)。结果 与对照组相比较,研究组受试者血清中外泌体m i R-2 2 3的表达水平显著降低,N L R P 3表达水平显著升高(t=6.6 2 3,Z=-9.4 5 1,P0.0 5);与MC I亚组相比,D A T亚组受试者血清中外泌体m i R-2 2 3表达水平显著降低,N L-R P 3表达水平显著升高(t=3.1 9 0,Z=-5.2 8 8,P0.0 5)。研究组受试者血清中外泌体m i R-2 2 3表达水平与N L-R P 3表达水平呈负相关(r=-0.8 5 9,P0.0 0 1),与MM S E评分呈正相关(r=0.7 9 0,P0.0 0 1),研究组受试者血清中N L R P 3表达水平与MM S E评分则呈负相关(r=-0.7 7 6,P0.0 0 1)。血清中外泌体m i R-2 2 3联合N L R P 3诊断A D患者MC I的AU C为0.9 1(9 5%C I=0.8 60.9 7),灵敏度为8 9.0%,特异度为7 6.5%;其鉴别诊断D A T的AU C为0.8 1(9 5%C I=0.7 50.8 8),灵敏度为7 0.0%,特异度为8 5.0%。结论 m i R-2 2 3/N L R P 3信号通路可能参与A D的发生和发展,血清中外泌体m i R-2 2 3和N L R P 3的检测对A D患者MC I和D A T的诊断或鉴别诊断具有一定价值,值得进一步深入研究。关键词 阿尔茨海默病;认知功能障碍;微R NA s;N L R家族,热蛋白结构域包含蛋白3;外泌体;曲线下面积;诊断;老年人 中图分类号 R 7 4 9.1 6 文献标志码 AE X P R E S S I O NO FB L O O DE X O S OMA Lm i R-2 2 3A N DN U C L E O T I D E-B I N D I N GO L I G OME R I Z A T I O ND OMA I N-L I K ER E C E P T O RP R O T E I N3I NP A T I E N T SW I T HA L Z H E I ME RSD I S E A S EA N DT H E I RC L I N I C A LS I G N I F I C A N C E SH IJ u n l i a n g,HA OY u-p i n g,X I AY u a n,D A IE n y u n(D e p a r t m e n to fG e r i a t r i c s,H e n a nW o r k e r sH o s p i t a l,Z h e n g z h o u4 5 0 0 0 3,C h i n a)A B S T R A C T O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t et h ee x p r e s s i o nl e v e l so fs e r u me x o s o m a lm i R-2 2 3a n dn u c l e o t i d e-b i n d i n go l i g o m e-r i z a t i o nd o m a i n-l i k e r e c e p t o rp r o t e i n3(N L R P 3)i np a t i e n t sw i t hA l z h e i m e rsd i s e a s e(A D)a n d t h e i r a s s o c i a t i o nw i t h t h ed e v e l o p-m e n ta n dp r o g r e s s i o no fA D.M e t h o d s At o t a l o f 6 5e l d e r l yp a t i e n t sw i t hA Dw h o a t t e n d e dD e p a r t m e n t o fG e r i a t r i c s i no u r h o s-p i t a l f r o m M a r c h2 0 1 8 t oD e c e m b e r 2 0 1 9w e r e e n r o l l e da s s t u d yg r o u pa n dw e r ed i v i d e d i n t om i l dc o g n i t i v e i m p a i r m e n t(MC I)s u b-g r o u pw i t h4 1p a t i e n t sa n dd e m e n t i ao fA l z h e i m e r t y p e(D A T)s u b g r o u pw i t h2 4p a t i e n t s,a n d6 0e l d e r l y i n d i v i d u a l sw i t hn o r m a ln e u r o l o g i c a l f u n c t i o nw e r ee n r o l l e da sc o n t r o l g r o u p.Q u a n t i t a t i v er e a l-t i m eP C Ra n dE L I S Aw e r eu s e dt om e a s u r et h ee x p r e s s i o nl e v e l so f s e r u me x o s o m a lm i R-2 2 3a n dN L R P 3.T h eP e a r s o na n dS p e a r m a n t e s t sw e r eu s e d t oa n a l y z e t h e c o r r e l a t i o no f s e r u me x o-s o m a lm i R-2 2 3a n dN L R P 3w i t h M i n i-M e n t a lS t a t eE x a m i n a t i o n(MM S E)s c o r e.T h er e c e i v e ro p e r a t i n gc h a r a c t e r i s t i c(R O C)c u r v ew a sp l o t t e dt oc a l c u l a t e t h ea r e au n d e r t h eR O Cc u r v e(AU C)o fs e r u me x o s o m a lm i R-2 2 3a n dN L R P 3i nt h ed i a g n o s i so fMC I i nA Dp a t i e n t so r t h ed i f f e r e n t i a l d i a g n o s i so fD AT.R e s u l t s C o m p a r e dw i t ht h ec o n t r o l g r o u p,t h e s t u d yg r o u ph a das i g-n i f i c a n t l y l o w e re x p r e s s i o n l e v e l o f s e r u me x o s o m a lm i R-2 2 3a n das i g n i f i c a n t l yh i g h e re x p r e s s i o n l e v e l o fN L R P 3(t=6.6 2 3,Z=-9.4 5 1,P0.0 5),a n dc o m p a r e dw i t ht h eMC I s u b g r o u p,t h eD A Ts u b g r o u ph a das i g n i f i c a n t l y l o w e r e x p r e s s i o n l e v e l o f s e r u me x o s o m a lm i R-2 2 3a n da s i g n i f i c a n t l yh i g h e r e x p r e s s i o n l e v e l o fN L R P 3(t=3.1 9 0,Z=-5.2 8 8,P0.0 5).I n t h e s t u d yg r o u p,t h ee x p r e s s i o n l e v e l o f s e r u me x o s o m a lm i R-2 2 3w a sn e g a t i v e l yc o r r e l a t e dw i t ht h a t o fN L R P 3(r=-0.8 5 9,P0.0 0 1)a n dw a sp o s i-t i v e l yc o r r e l a t e dw i t hMM S Es c o r e(r=0.7 9 0,P0.0 0 1),w h i l et h ee x p r e s s i o nl e v e lo fs e r u m N L R P 3w a sn e g a t i v e l yc o r r e l a t e dw i t hMM S Es c o r e(r=-0.7 7 6,P0.0 5),两组受试者具有可比性。研究组受试者的MM S E评分和日常生活能力量表(A D L)评分显著低于对照组(t=1 3.9 8 11 8.3 7 1,P0.0 0 1)。见表1。表1 两组受试者一般资料比较组别对照组(n=6 0)A D组(n=6 5)t/2值P值年龄(岁,xs)7 1.7 28.1 47 3.5 87.8 5 1.3 0 0 0.1 9 6男性 例(/%)3 8(6 3.3 3)4 5(6 9.2 3)0.4 8 6 0.4 8 6BM I(k g/m2,xs)2 3.6 73.1 22 4.1 94.2 5 0.7 7 4 0.4 4 0MM S E评分(分,xs)2 9.0 00.6 41 8.9 83.9 71 8.3 7 10.0 0 1A D L评分(分,xs)1 9.3 84.5 53 6.5 88.4 71 3.9 8 10.0 0 1合并症 高血压 例(/%)2 6(4 3.3 3)3 2(4 9.2 3)0.4 3 6 0.5 0 9 糖尿病 例(/%)1 9(3 1.6 7)2 8(4 3.0 8)1.7 3 1 0.1 8 8 高脂血症 例(/%)2 8(4 6.6 7)3 9(6 0.0 0)2.2 3 0 0.1 3 5 冠心病 例(/%)1 3(2 1.6 7)1 5(2 3.0 8)0.0 3 6 0.8 5 0受教育程度 文盲或小学 例(/%)2 1(3 5.0 0)3 2(4 9.2 3)初中及以上 例(/%)3 9(6 5.0 0)3 3(5 0.7 7)2.5 8 7 0.1 0 81.2 研究方法1.2.1 样本采集 每位受试者禁食1 2h后采集外周静脉血,室温下30 0 0r/m i n离心1 0m i n,后4下1 20 0 0r/m i n离心5m i n。将采集的血清样本保存在-8 0冰箱备用。1.2.2 血清中外泌体提取及鉴定 取出冻存备用样本,于(2 53)室温下放置2 0m i n复溶,使用外泌体分离试剂盒(美国I n v i t r o g e n公司)按照说明书步骤分离血清中外泌体。用HT 7 7 0 0透射电子显微镜(日本日立公司)观察外泌体形态及颗粒大小,用纳米粒径追踪技术分析粒径分布。采用蛋白质印迹法测定外泌体特征蛋白热休克蛋白7 0(H s p 7 0)、溶酶体相关膜蛋白-3(C D 6 3)以及内质网特征蛋白C a l n e x i n的表达水平。1.2.3 血清中外泌体m i R-2 2 3表达水平测定 利用m i R NA分离试剂盒提取上述外泌体中总R NA,选取m i c r o R NAF i r s t S t r a n dc D NA合成试剂盒(大164精准医学杂志2 0 2 3年1 0月第3 8卷第5期 JP r e c i sM e d,O c t o b e r2 0 2 3,V o l.3 8,N o.5连宝生生物公司)在2 0L反应体系中进行逆转录反应,获得c D NA。以c D NA为模板,U 6mR NA为内源对照,采用M i c r o R NA sQ u a n t i z a t i o nP C RK i t(上海S a n g o n公司)和L i g h t C y c l e r4 8 0实时P C R系统(德国R o c h ea p p l i e ds c i e n c e公司)进行实时荧光定量聚合酶链式反应。反应进行条件为:9 5 1 0m i n,1个循环;9 5 1 5s,5 9.5 3 0s,3 6个循环。m i R-2 2 3正向引物为5 -C C A C G C T C C G T G T-AT T T GA C-3,反向引物为5 -C C G C A C T T G G G G-T AT T T GA C-3,使用公式2-C T计算m i R-2 2 3相对表达量,进行3次独立重复试验,结果选取3次试验的平均值。1.2.4 血清中N L R P 3表达水平测定 取出冻存备用样本,于(2 53)室温下放置2 0m i n复溶,利用酶联免疫吸附测定试剂盒(加拿大M y B i o S o u r c e公司),按照试剂盒说明检测血清中N L R P 3水平。1.3 统计方法利用S P S S1 7.0和G r a p h p a dp r i s m6.0软件进行数据分析。计量资料采用xs或M(P2 5,P7 5)表示,组间相关指标的比较采用t检验或非参数检验;分类变量以例(率)表示,组间比较采用卡方检验;相关分析采用P e a r s o n检验或S p e a r m a n检验。绘制受试者工作特征(R O C)曲线,计算曲线下面积(AU C)、诊断灵敏度和特异度。以P0.0 5为差异有统计学意义。2 结 果2.1 血清中外泌体提取及鉴定结果透射电子显微镜观察显示,分离出形状、大小不一的囊泡,具有典型的胞外体形态和双层膜结构(图1 A);粒径平均分布范围为5 0.0 02 0 0.0 0n m,平均粒径为(1 5 8.5 21 8.7 1)n m,稀释后调整粒子浓度为2.8 61 09个/L(图1 B)。蛋白质印迹结果显示,内质网特征蛋白C a l n e x i n蛋白表达阴性,而外泌体特征蛋白H s p 7 0以及溶酶体相关膜蛋白C D 6 3则呈特异性高表达(图1 C)。A:透射电镜观察外泌体形态,B:纳米粒径追踪分析颗粒粒径分布,C:蛋白质印迹法检测C a l n e x i n、C D 6 3和H s p 7 0蛋白表达图1 血清中外泌体特征分析结果2.2 两组受试者血清中外泌体m i R-2 2 3及N L R P 3表达水平比较研究组和对照组受试者血清中外泌体m i R-2 2 3表达水平分别为0.6 70.3 4、1.0 00.1 9,N L R P 3水平分别为1 2.3 1(7.8 2,1 9.4 4)、4.4 5(2.4 5,9.5 8),两组间上述两指标比较差异具有显著意义(t=6.6 2 3,Z=-9.4 5 1,P0.0 5)。在研究组中,D AT亚组和MC I亚组受试者血清中外泌体m i R-2 2 3表达水平分别为0.5 20.2 6、0.7 60.3 1,N L R P 3水平分别为2 0.7 8(1 4.4 5,2 8.5 2)、8.8 7(6.1 1,1 2.6 3),两亚组当中上述两指标相比较差异具有显著意义(t=3.1 9 0,Z=-5.2 8 8,P0.0 5)。2.3 研究组受试者血清中外泌体m i R-2 2 3、N L R P 3表达水平及MM S E评分间的相关性P e a r s o n及S p e a r m a n检验示,研究组受试者血清中外泌体m i R-2 2 3与N L R P 3表达水平呈负相关(r=-0.8 5 9,P0.0 0 1),与MM S E评分呈正相关(r=0.7 9 0,P0.0 0 1);血清中N L R P 3表达水平与MM S E评分呈负相关(r=-0.7 7 6,P0.0 0 1)。2.4 血清中外泌体m i R-2 2 3、N L R P 3的测定对A D患者MC I的诊断价值将对照组受试者作为对照,绘制R O C曲线。血清中外泌体m i R-2 2 3以及N L R P 3诊断A D患者MC I的AU C分别为0.8 5(9 5%C I=0.7 60.9 1)和0.8 4(9 5%C I=0.7 50.8 9),最佳截断值为0.7 4和8.1 5。该最佳截断值下,血清中外泌体m i R-2 2 3和N L R P 3诊断A D患者MC I的灵敏度分别为8 9.4%和8 1.7%,特异度分别为7 6.1%以及7 0.9%。另外,血清中外泌体m i R-2 2 3联合N L R P 3诊断A D患者MC I的AU C为0.9 1(9 5%C I=0.8 60.9 7),灵敏度和特异度分别为8 9.0%和7 6.5%。见图2。2.5 血清中外泌体m i R-2 2 3、N L R P 3水平测定对264精准医学杂志2 0 2 3年1 0月第3 8卷第5期 JP r e c i sM e d,O c t o b e r2 0 2 3,V o l.3 8,N o.5D AT的鉴别诊断价值将MC I亚组受试者作为对照,绘制R O C曲线。血清中外泌体m i R-2 2 3和N L R P 3鉴别诊断D AT的AU C分别为0.7 0(9 5%C I=5 0.6 40.7 8)和0.7 9(9 5%C I=0.7 10.8 5),最佳截断值分别为0.6 1和1 5.4 2。该最佳截断值下,血清中外泌体m i R-2 2 3和N L R P 3鉴别诊断D AT的灵敏度分别为8 5.0%和7 2.8%,特异度分别为7 6.1%和5 7.5%。血清中外泌体m i R-2 2 3联合N L R P 3鉴别诊断D AT的AU C为0.8 1(9 5%C I=0.7 50.8 8),灵敏度和特异度分别为7 0.0%和8 5.0%。见图3。图2 血清中外泌体m i R-2 2 3、N L R P 3诊断A D源性MC I的R O C曲线图3 血清中外泌体m i R-2 2 3、N L R P 3鉴别诊断D A T的R O C曲线3 讨 论A D属于一种不可逆转的认知功能进行性障碍综合征,受人口老龄化影响,近年来我国A D发病率明显上升6。大量研究表明,异常m i R NA s在多种人类疾病的发生发展中起着重要作用。本研究结果显示,与对照组相比较,研究组受试者的血清中外泌体m i R-2 2 3表达水平普遍降低,同时伴有血清中N L R P 3水平升高;且与MC I亚组相比,D AT亚组受试者也存在上述变化。上述结果说明m i R-2 2 3/N L R P 3信号通路可能参与了A D的发生以及进展过程。m i R NA s是神经系统当中大量存在的一种非编码小分子R NA,是神经元细胞的重要功能调节因子7-8。众多研究在A D大脑组织和脑脊液中观察到了异常m i R NA s表达,这表明不同m i R NA s参与调节神经退行性变相关基因表达,可能是A D的发病机制之一9。m i R NA s不仅调节细胞内生物学过程,也存在于外周血外泌体中,在内分泌模式下调节其他细胞中的靶mR NA1 0。例如WE I等1 1研究证实间充质干细胞衍生的外泌体m i R-2 2 3通过磷酸酶张力蛋白同源物-磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路保护神经元免于凋亡,并为A D治疗提供了一种潜在的靶点。在本研究中,研究组受试者血清中外泌体中m i R-2 2 3表达水平较对照组下调,且D AT亚组受试者血清中外泌体m i R-2 2 3表达水平低于MC I亚组,这可能是因为m i R-2 2 3下调可能会干扰与神经元细胞周期相关的信号通路,从而导致与A D进展相关的神经元凋亡。另外,本研究的R O C曲线提示血清中外泌体m i R-2 2 3用于A D患者MC I的早期诊断以及D AT的鉴别诊断,其灵敏度和特异度均较高。这些结果均证实了血清中外泌体m i R-2 2 3作为A D诊断生物标志物的有效性。此外,血清样本相较于脑脊液样本较为简单易得,随着二代基因测序技术的发展,血清m i R NA s检测也愈发方便准确。神经退行性疾病与遗传易感性、蛋白质结构异常、线粒体功能障碍以及氧化应激失衡等密切相关,-淀粉样蛋白(A)沉积并激活小胶质细胞驱动脑神经炎症是A D主要的病理基础1 2。本研究结果显示,研究组血清中N L R P 3表达水平普遍升高,且D AT亚组血清中N L R P 3水平高于MC I亚组,这说明N L R P 3是参与A D发生和进展的重要分子,对A D的识别和治疗具有一定指导意义。神经炎症是A D进行性神经病变的重要基础,脑组织中N L R P 3在认知功能障碍早期即被激活,现有研究成果推测N L R P 3炎症小体可能在A D的发生发展中起作用,这可能与其在小胶质细胞中被A激活会引发神经炎症有关1 3-1 5。A聚集蛋白的积累以及小胶质细胞和星形胶质细胞的激活是A D的典型病理特征,后者可促进炎症分子的释放,上述过程都会损害神经元的结构和功能,导致偶发性记忆缺陷和认知功能障碍1 6。N L R P 3炎症小体被认为是A D关键及364精准医学杂志2 0 2 3年1 0月第3 8卷第5期 JP r e c i sM e d,O c t o b e r2 0 2 3,V o l.3 8,N o.5常见的先天免疫应答物,N L R P 3炎症小体的激活是在小胶质细胞吞噬原纤维A后开始的,该过程导致溶酶体损伤,组织蛋白酶B释放、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白水解酶1激活和一氧化氮的释放,进而促进A D病理的发展1 7。HE N E KA等1 8发现,小胶质细胞中N L R P 3炎症小体被A激活是白细胞介素-1成熟及随后炎性事件的基础,并且推测抑制N L R P 3炎症小体有望成为A D治疗的新型手段之一。既往研究表明,N L R P 3为m i R-2 2 3的重要靶点,但m i R-2 2 3并不会立即触发负反馈机制,而是通过调节炎症因子,到达启动机体炎症反应所需的“炎症水平”,从而导致N L R P 3炎症小体的激活1 9。本研究中,研究组受试者的血清中外泌体m i R-2 2 3与N L R P 3表达水平呈负相关,这也进一步提示了m i R-2 2 3/N L R P 3信号通路在A D中的作用机制。此外,R O C曲线评估外泌体m i R-2 3 3联合N L R P 3诊断A D源性MC I的AU C为0.9 1,灵敏度及特异度分别为8 9.0%和7 6.5%,二者联合鉴别诊断A D患者D AT的AU C为0.8 1,灵敏度以及特异度分别为7 0.0%和8 5.0%,上述结果均表明m i R-2 3 3联合N L R P 3对A D具有良好的诊断效能,且对评估该病进展具有一定意义。综上所述,m i R-2 2 3/N L R P 3信号通路可能参与A D的发生和发展,检测血清中外泌体m i R-2 2 3和N L R P 3表达水平对于A D患者的早期MC I以及D AT进展具有一定的判断价值,值得进一步深入研究。同时本文仍存在一定的局限性,如m i R-2 2 3与N L R P 3之间的靶向调控关系,以及两者在A D发生发展中的作用机制,仍需要在细胞实验、动物实验乃至大样本临床研究中进一步验证。伦理批准和知情同意:本研究涉及的所有试验均已通过河南省职工医院伦理委员会的审核批准(文件号L 2 0 1 9 0 1 5)。所有试验过程均遵照 涉及人的生命科学和医学研究伦理审查办法 的条例进行。受试对象或其亲属已经签署知情同意书。作者声明:师俊亮、郝豫萍参与了研究设计;夏源、师俊亮、戴恩云参与了论文的写作和修改。所有作者均阅读并同意发表该论文,且均声明不存在利益冲突。参考文献1 汪惠琳,徐清清,郑国庆.精神疾病治疗进展(四):阿尔茨海默病J.医药导报,2 0 1 7,3 6(1 0):1 1 4 8-1 1 5 2.2J A C KCRJ r,B E NN E T TDA,B L E NNOW K,e ta l.N I A-AA r e s e a r c hf r a m e w o r k:T o w a r dab i o l o g i c a ld e f i n i t i o no fA l z h e i m e rsd i s e a s eJ.A l z h e i m e r sD e m e n t,2 0 1 8,1 4(4):5 3 5-5 6 2.3 彭阳,史伟峰.N L R s信号转导通路在真菌感染中的作用机制J.临床检验杂志,2 0 1 7,3 5(7):5 2 8-5 3 0.4 李洋,费洪新,张晓杰.芪苓益脑汤对阿尔茨海默病小鼠炎症小体NO D样 受 体 蛋 白3表 达 的 影 响 J.中 国 医 药 导 报,2 0 1 9,1 6(3 2):1 4-1 7,2 6,1 8 1.5GA L V I NJE,S A D OWS KYCH,N I N C D S-A D R D A.P r a c t i-c a l g u i d e l i n e s f o r t h e r e c o g n i t i o na n dd i a g n o s i so f d e m e n t i aJ.JAmB o a r dF a m M e d,2 0 1 2,2 5(3):3 6 7-3 8 2.6 朱琼,陈星星.阿尔茨海默病的流行病学调查及国内康复治疗现状分析J.中华物理医学与康复杂志,2 0 1 7,3 9(1 1):8 6 6-8 6 9.7KO R I T Z I N S KYE H,S T R E E TJ M,S T A R R A,e ta l.Q u a n t i f i c a t i o no f e x o s o m e sJ.JC e l lP h y s i o l,2 0 1 7,2 3 2(7):1 5 8 7-1 5 9 0.8C HAN G WS,WAN GY H,Z HU XT,e ta l.G e n o m e-w i d ep r o f i l i n go fm i R NAa n dmR NAe x p r e s s i o ni nA l z h e i m e rsd i-s e a s eJ.M e dS c iM o n i t,2 0 1 7,2 3:2 7 2 1-2 7 3 1.9S WA R B R I C KS,WR A G G N,GHO S H S,e ta l.S y s t e m a t i cr e v i e wo fm i R NAa sb i o m a r k e r si nA l z h e i m e rsd i s e a s eJ.M o lN e u r o b i o l,2 0 1 9,5 6(9):6 1 5 6-6 1 6 7.1 0张萍,杨波,蔡小玲,等.外泌体微小R NA研究进展及诊断价值J.检验医学,2 0 1 9,3 4(1 2):1 1 3 9-1 1 4 4.1 1WE IH,XU Y,C HE N Q,e ta l.M e s e n c h y m a l s t e mc e l l-d e-r i v e de x o s o m a lm i R-2 2 3r e g u l a t e sn e u r o n a lc e l la p o p t o s i sJ.C e l lD e a t hD i s,2 0 2 0,1 1(4):2 9 0-3 0 0.1 2T I WA R IS,A T L UR IV,KAU S H I K A,e ta l.A l z h e i m e rsd i s e a s e:P a t h o g e n e s i s,d i a g n o s t i c s,a n dt h e r a p e u t i c 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7.1 7F R I K E RLL,S C HE I B L I C H H,HO C HHE I S E RIV,e ta l.-Am y l o i dc l u s t e r i n ga r o u n dA S Cf i b r i l sb o o s t s i t st o x i c i t yi nm i c r o g l i aJ.C e l lR e p,2 0 2 0,3 0(1 1):3 7 4 3-3 7 5 4.1 8HE N E KA MT,KUMME RMP,S TUT ZA,e t a l.N L R P 3 i sa c t i v a t e d i nA l z h e i m e rsd i s e a s ea n dc o n t r i b u t e st op a t h o l o g yi nA P P/P S 1m i c eJ.N a t u r e,2 0 1 3,4 9 3(7 4 3 4):6 7 4-6 7 8.1 9L A-R O S AF,MAN C U S OR,AGO S T I N I S,e t a l.P h a r m a c o-l o g i c a l a n de p i g e n e t i c r e g u l a t o r s o fN L R P 3 i n f l a mm a s o m e a c t i-v a t i o n i nA l z h e i m e rsd i s e a s eJ.P h a r m a c e u t i c a l s(B a s e l),2 0 2 1,1 4(1 1):1 1 8 7-1 1 9 7.(本文编辑 范睿心 厉建强)464