血清CD4+_CD8+、P...性肺炎严重程度的相关性研究_崔晶娴.pdf

转化医学杂志 2022年12月 第11卷 第6期Translational Medicine Journal,Vo1.11 NO.6,Dec 2022血清CD4+/CD8+、PCT及KL-6水平与局部晚期NSCLC放疗后放射性肺炎严重程度的相关性研究崔晶娴，董业峰，陈烨，黄霞，刘颖，葛仁美 摘要 目的 研究血清分化决定族抗原4+/分化决定族抗原8+（CD4+/CD8+）、降钙素原（PCT）及涎液化糖链抗原（KL-6）水平与局部晚期非小细胞肺癌（NSCLC）放疗后重症放射性肺炎相关性。方法选取2019年5月至2021年3月海安市人民医院收治的103例局部晚期NSCLC患者，根据放疗后放射性肺炎评估结果分组：未发生放射性肺炎作为对照组，共54例；发生放射性肺炎且分级在12级作为轻症组，共31例；分级3级患者作为重症组，共18例。分别于放疗前后检测3组血清CD4+/CD8+、PCT及KL-6水平，采用Logistic回归模型分析重症放射性肺炎影响因素。结果单因素分析发现，三组放疗前 KPS 评分、FEV1/FVC、照射剂量60Gy 比例、放疗后 CD4+/CD8+、放疗后PCT、放疗后KL-6比较，差异具有统计学意义（P0.05）。其中重症组放疗前KPS评分、FEV1/FVC、照射剂量60Gy比例及放疗后CD4+/CD8+低于对照组与轻症组，且轻症组放疗前KPS评分、FEV1/FVC、照射剂量60Gy比例及放疗后CD4+/CD8+低于对照组。而重症组放疗后PCT、放疗后KL-6高于对照组与轻症组，且轻症组放疗后PCT，放疗后KL-6高于对照组（P0.05）。Logistic回归分析显示，放疗后血清CD4+/CD8+下降、PCT、KL-6水平升高、照射剂量60Gy为重症放射性肺炎的独立危险因素（P0.05）。结论放疗结束后局部晚期NSCLC患者血清CD4+/CD8+下降，PCT、KL-6水平上升，照射剂量60Gy对预测重症放射性肺炎发生具有重要价值。关键词 非小细胞肺癌；放射性肺炎；CD4+/CD8+；降钙素原；涎液化糖链抗原 中图分类号 R734.2 文献标志码 A 文章编号 2095-3097（2022）06-0384-04doi:10.3969/j.issn.2095-3097.2022.06.013Study on the association between the levels of Serum CD4+/CD8+,PCT,KL-6 and severity of Radiation Pneumonitis after Radiotherapy for Locally Advanced NSCLCCUI Jingxian,DONG Yefeng,CHEN Ye，HUANG Xia,LIU Ying,GE Renmei(Department of laboratory,Haian peoples Hospital,Jiangsu Province,Haian Jiangsu 226600,China)Abstract ObjectiveTo investigate the relationship between serum levels of cluster of Differentiation 4+/cluster of Differentiation 8+(CD4+/CD8+),procalcitonin(PCT),salivary glycochain antigen(KL-6),and severe radiationpneumonia after radiotherapy for locally advanced non-small cell lung cancer(NSCLC).MethodsA total of 103 patients with locally advanced NSCLC admitted to the Peoples Hospital of Haian City from May 2019 to March 2021were selected and divided into 3 groups according to the evaluation results of radiation pneumonia after radiotherapy.Patients without radiation pneumonia were classified as congrol group with 54 cases in it.There 31 patients with grade 12of radiation pneumonia were classified as mild disease group and 18 patients with grade 3 or higher of radiation pneumonia were classified as critical group.Serum CD4+/CD8+,PCT,and KL-6 levels of the 3 groups were detected before andafter radiotherapy.The influencing factors of severe radiation pneumonia were analyzed by Logistic regression model.Results Univariate analysis showed that KPS score before radiotherapy,FEV1/FVC,proportion of irradiation dose60Gy,CD4+/CD8+after radiotherapy,PCT after radiotherapy,and KL-6 after radiotherapy were significantly differentamong the three groups(P0.05).KPS score before radiotherapy,FEV1/FVC,proportion of radiation dose60Gy,andCD4+/CD8+after radiotherapy in severe group were lower than those in the control group and mild group.KPS scorebefore radiotherapy,FEV1/FVC,proportion of radiation dose60Gy,and CD4+/CD8+after radiotherapy in the mildgroup were lower than those in the control group.The PCT and KL-6 after radiotherapy in the severe group were higherthan those in the control group and mild group.And the PCT and KL-6 after radiotherapy in the mild group were higherthan those in the control group(P0.05).Logistic analysis showed that after radiotherapy,decrease of serum CD4+/CD8+,increase of serum PCT and KL-6,and radiation dose above 60Gy were independent risk factors for severe radiation pneumonia(P0.05).Conclusion After radiotherapy of patients with locally advanced NSCLC,decrease of serumCD4+/CD8+,increase of serum PCT and KL-6 and the radiation dose above 60Gy could be used to predict the occur基金项目 南通市卫计委青年医学人才科研基金（WKZD2018025）作者单位 226600 江苏 海安，海安市人民医院检验科（崔晶娴，董业峰，陈烨，黄霞，刘颖，葛仁美）通讯作者 葛仁美，E-mail： 384转化医学杂志 2022年12月 第11卷 第6期Translational Medicine Journal,Vo1.11 NO.6,Dec 2022rence of severe radiation pneumonia.Key words Non-small cell lung cancer;Radiation pneumonitis;CD4+/CD8+;Procalcitonin;Krebs von denLungen-6肺癌为我国发病率较高的恶性肿瘤，每年新增病例超过 70 万1。非小细胞肺癌（non-small celllung cancer，NSCLC）为肺癌发病的主要类型，多数患者确诊时已处于局部晚期，错失手术最佳治疗时机，放射治疗为局部晚期NSCLC主要治疗方式2。放射性肺炎为放疗严重并发症，重症放射性肺炎会导致患者发生不可逆性肺功能变化，临床尚无有效防治方法3。早期识别重症放射性肺炎并对其进行干预，对有效改善患者治疗结局具有重要价值。T淋巴细胞为构成免疫系统重要组成，参与炎症反应与细胞免疫过程；降钙素原（Procalcitonin，PCT）是与机体感染密切相关的炎性标志物；涎液化糖链抗原（Krebs Von den Lungen-6，KL-6）对肺泡上皮与肺间质损伤程度具有较高的敏感性，为诊断间质性肺炎特异性标志物。有研究指出，放射性肺炎患者放疗后分化决定族抗原4+（Cluster of Differentiation 4+，CD4+）/分化决定族抗原8+（Cluster of Differentiation 8+，CD8+）降低，PCT与KL-6水平升高4-5，但与重症放射性肺炎发病关系尚不明确。本研究通过比较不同程度放射性肺炎患者放疗前后的血清CD4+/CD8+、PCT、KL-6水平，分析其含量对局部晚期NSCLC患者放疗后重症放射性肺炎的价值。1资料与方法1.1一般资料选取2019年5月-2021年3月海安市人民医院收治的 103 例局部晚期 NSCLC 患者。纳入标准：符合 非小细胞肺癌术后辅助治疗中国胸外科专家共识(2018版)标准6，且经病理检查判断为局部晚期；接受放疗治疗；患者知情同意且随访时间超过半年。排除标准：血液系统疾病患者；IV期广泛转移患者；胸部放疗史患者；急慢性轧染疾病及骨髓抑制患者；精神疾病患者；预生存期不足3个月患者。患者病理资料显示：腺癌61例，鳞癌36例，其他类型6例；接受同步放疗14例，序贯放疗89例；照射剂量60Gy 40例，60Gy 63例。根据放疗后放射性肺炎评估结果分组：未发生放射性肺炎作为对照组，共54例；发生放射性肺炎且分级在12级作为轻症组，共31例；分级3级患者作为重症组，共18例。本研究经我院伦理委员会批准，全部患者均知情同意。1.2 方法 血清检测方法：于患者放疗前后分别抽取其静脉血离心处理，取血清冷冻保存；采用流式细胞仪检测CD4+、CD8+含量并计算CD4+/CD8+比值，全自动电化学发光分析仪（罗氏，型号e602）电化学夹心发光法检测PCT水平，全自动免疫分析仪测定KL-6水平；操作均严格参照说明书。放疗前后对患者进行卡氏行为状态（Karnofsky，KPS）检查；采用肺功能仪（Sensormedi cs 公司，型号2200）检测第一秒用力呼气容积（Forced expiratory volume in one second，FEV1）、用 力 肺 活 量（Forced vital capacity，FVC），并计算FEV1/FVC比值。1.3 放射性肺炎判断标准7参考美国肿瘤放疗与欧洲治疗研究协作组诊断分级，将放射性肺炎分为05级：放疗后症状体征无变化为0级；患者表现为轻度干咳、劳累时有呼吸困难为1级；持续咳嗽需要麻醉止咳药治疗或稍作活动即出现呼吸困难，休息时无症状为2级；重度咳嗽，使用麻醉止咳药无效果或休息时也表现呼吸困难，或影像学检查证实放射性肺炎，或需要间断吸氧或类固醇治疗为 3级；患者表现严重呼吸功能不全或需持续吸氧、辅助通气等治疗为4级；严重威胁生命为5级。1.4 统计学处理 采用SPSS 20.0软件分析数据，计量资料以均数标准差（xs）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析，组间两两比较使用SNK-q检验；计数资料用n(%)表示，2检验；采用Logistic回归模型进行多因素分析，P0.05有统计学意义。2结果2.1 三组患者一般资料比较 三组患者的性别、年龄等一般资料对比，差异无统计学意义（P0.05）。见表1。2.2 影响重症放射性肺炎的单因素分析 三组放疗前KPS评分、FEV1/FVC、照射剂量60Gy比例、放疗后CD4+/CD8+、放疗后PCT、放疗后KL-6比较，差异具有统计学意义（P0.05）；其中重症组放疗前KPS评分、FEV1/FVC、照射剂量60Gy比例及放疗后CD4+/CD8+低于对照组与轻症组；且轻症组放疗前KPS评分、FEV1/FVC、照射剂量60Gy比例及放疗后CD4+/CD8+低于对照组；而重症组放疗后PCT、因素性别平均年龄（岁）吸烟史病理类型诱导化疗方式男女有无腺癌鳞癌其他同步序贯对照组（n=54）312351.948.36272732184747轻症组（n=31）171451.7610.29141719111427重症组（n=18）11752.849.8310810713152/F0.1840.0900.5030.7800.176P0.9120.9190.7780.9410.916表1 三组患者一般资料比较 385转化医学杂志 2022年12月 第11卷 第6期Translational Medicine Journal,Vo1.11 NO.6,Dec 2022放疗后KL-6高于对照组与轻症组，且轻症组放疗后PCT，放疗后KL-6高于对照组（P0.05）。单因素分析提示，放疗后血清CD4+/CD8+、PCT、KL-6水平、放疗前KPS评分、FEV1/FVC、照射剂量连续变量为重症放射性肺炎的可疑危险因素。见表2。2.3重症放射性肺炎的多因素分析将重症放射性肺炎作为自变量，放疗后血清CD4+/CD8+、PCT、KL-6水平、放疗前KPS评分、FEV1/FVC、照射剂量连续变量根据其中位数值转变为二分类变量，经Logistic 分析显示，放疗后血清 CD4+/CD8+下降、PCT、KL-6水平升高、照射剂量60Gy为重症放射性肺炎的独立危险因素（P0.05）。见表3。因素性别年龄（岁）吸烟史病理类型诱导化疗方式放疗前KPS（分）放疗后KPS（分）放疗前FEV1/FVC放疗后FEV1/FVC照射剂量放疗前CD4+/CD8+放疗后CD4+/CD8+放疗前PCT（g/L）放疗后PCT（g/L）放疗前KL-6（U/ml）放疗后KL-6（U/ml）男女有无腺癌鳞癌其他同步序贯60Gy60Gy对照组（n=54）312351.948.3627273218474782.5913.2965.547.2883.1513.2964.3510.2524301.230.481.190.260.790.150.810.13204.1368.94205.1663.17轻症组（n=31）171451.7610.2914171911142781.4610.75*66.118.0281.4112.78*65.289.8114*171.090.420.780.17*0.840.232.240.38*209.0671.10305.0355.06*重症组（n=18）11752.849.83108107131571.3614.35*#65.317.2572.349.47*#64.7010.072*#161.020.510.620.16*#0.880.273.620.51*#217.1375.46456.07202.85*#2/F0.1840.0900.5030.7800.1765.4000.6245.0600.5717.0621.74060.7701.560611.780.23046.680P0.9120.9190.7780.9410.9160.0060.7120.0080.6330.0290.1820.0010.2140.0010.7920.001表2 重症放射性肺炎单因素分析因素放疗后CD4+/CD8+放疗后PCT放疗后KL-6放疗前KPS放疗前FEV1/FVC照射剂量60Gy0.8330.9230.7720.2640.2181.212OR值2.3012.5182.1651.3021.2443.35995%CI1.1214.4601.3715.0281.3844.2911.0372.7961.1152.8381.4469.996Wald值5.5967.76012.7871.0880.8396.035P值0.0180.0050.0010.3010.3660.014表3重症放射性肺炎的多因素分析3讨论局部晚期 NSCLC发病率目前呈上升趋势，放疗为其常见治疗手段。随着放疗发展而广泛应用于临床，目前放疗为恶性肿瘤有效治疗方式，其中放射性肺炎为放疗期间较为严重并发症，多发生于放疗后6个月内，其中放疗后23个月为发病高峰期，加重病情而降低治疗效果8-9。放射性肺炎与放射线损伤密切相关，1级患者无需处理，2级症状相对较轻，较小影响NSCLC治疗效果；3级及以上的患者可对肺功能造成无法逆转的损伤，延误治疗且影响患者预后10。故放疗期间早期发现重症放射性肺炎并及时采取干预手段能有效预防疾病发生并改善患者治疗结局。放射性肺炎发病机制较为复杂，且目前临床尚未明确其机制，患者自身病情、放射物理与生物学因素等为该病发生影响因素。生物学因素与放射线肺炎间的发病关系得到证实，是放射线作用于肺组织引发细胞因子分泌与基因表达等而激活机体炎症反应、免疫应答等改变放射线肺炎有关的病理。临床较多文献指出，胸部放疗期间会大量生成促炎细胞与促纤维化因子，且持续 386转化医学杂志 2022年12月 第11卷 第6期Translational Medicine Journal,Vo1.11 NO.6,Dec 2022生成该类因子对肺脏组织有急性或迟发性损伤11。T淋巴细胞参与免疫反应，正常状态下，CD4+、CD8+含量处于正常范围。CD4+可发挥抗感染免疫功效，CD8+参与细胞毒反应，T淋巴细胞指标含量随免疫功能变化，检测其指标含量能有效反映患者预后状况12。CD4+/CD8+可很好反映宿主细胞调节平衡，比值上升能辅助诱导T细胞增加，抑制细胞毒性T细胞减少，提高机体对突变细胞识别与消灭力，减缓癌细胞恶化。比值下降说明免疫能力下降，机体发生恶性肿瘤可引起CD4+、CD8+T细胞紊乱。PCT为降钙素的前肽，是由116个氨基酸残基组成的糖蛋白，在外界环境中的稳定性较好，不易降解；当机体未发生炎症感染情况，血清PCT水平较低，当发生炎症感染，PCT水平显著上升，并于感染1周时间内达到峰值13。研究指出，PCT为感染特异性指标，机体感染后肝脏巨噬细胞、肺肠淋巴与内分泌细胞可分泌PCT而升高其水平。自身免疫炎症或发生病毒感染时，机体PCT水平并未升高，故PCT被认定为具有一定价值的炎症标志物，与感染程度、预后有关。KL-6为高分子量糖蛋白，在多种上皮细胞表面表达，尤其是再生II型肺泡上皮细胞表面14。血清KL-6被证实为诊断间质性肺病的敏感标记物，该蛋白是一种肺成纤维细胞潜在物质，可促进增殖、抗凋亡，其作用与成纤维细胞、血小板源性生长因子类似15。KL-6对成纤维细胞产生胶原蛋白I和III、诱导其分化为肌成纤维细胞有促进作用，进而转变为上皮间质，诱导产生细胞外基质成分；且KL-6能抑制成纤维细胞表达，使细胞外基质过度重塑沉积而出现肺纤维化。本研究显示，放疗后重症组血清CD4+/CD8+低于对照组与轻症组，PCT、KL-6水平高于对照组与轻症组，说明重症放射性肺炎患者体内免疫功能下降，炎症加重。近年来国内外多项关于放射线肺炎因素的研究显示，KSP评分、治疗方式、放射剂量等与重症放射性肺炎密切相关16，放射剂量与放疗前肺功能变化也与放射线肺炎有关。本研究中，重症组患者放疗前KPS评分、FEV1/FVC低于对照组和轻症组，照射剂量更高，与姚元虎17等人研究结果一致。基于单因素结果进一步行 Logistic 分析，放疗后血清CD4+/CD8+下降、PCT、KL-6水平升高及照射剂量60Gy为影响重症放射性肺炎的独立危险因素，说明血清血清CD4+/CD8+下降，PCT、KL-6水平升高，照射剂量60Gy患者发生重症放射性肺炎的几率越高。对于照射剂量60Gy的局部晚期NSCLC患者需警惕发生重症放射性肺炎，经检测放疗前后血清CD4+/CD8+、PCT、KL-6水平对预测重症放射性肺炎有重要临床价值18。综上所述，放疗结束后局部晚期 NSCLC患者血清CD4+/CD8+下降，PCT、KL-6水平上升，照射剂量60Gy极易发生重症放射性肺炎，对预测重症放射性肺炎发生具有重要价值。【参考文献】1 Luo WX,Yang L,Li W M.Immunotherapy-related toxicity inlung cancer:clinical characteristics and managing strategyJ.Chin Med J,2021，134（7）：780-782.2Kota V,Best J,Jegannathen A,et al.Sequential chemo radiation(SCRT)in locally advanced NSCLC:a review of outcomesin a single institution practiceJ.Lung Cancer,2021，156：555-5563周子洋,宋晓,吴爱鲁,等.局部晚期非小细胞肺癌放疗后重症放射性肺炎相关因素分析J.广东医学,2017,38(11):1703-1706+1710.4王纯,卢宏达.新辅助化疗对局部晚期非小细胞肺癌肿瘤标记物和淋巴细胞亚群的影响J.重庆医学,2014,43(1):61-63+66.5陈曲,王嵬.血清转化生长因子-水平对局部晚期非小细胞肺癌放疗后重症放射性肺炎的预测价值J.中国肿瘤临床与康复,2020,27(10):1228-1231.6岳东升，张华天.非小细胞肺癌术后辅助治疗中国胸外科专家共识(2018版)J.中国肺癌杂志,2018,21(10):731-737.7刘锐锋,魏世鸿,罗宏涛,等.不同分级放射性肺炎的临床特征及其影响因素J.山东医药,2017,57(33):78-81.8Lampridis S.Differences in Staging and 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