紫苏梗和大皂角的质量标准.pdf

基金项目：国家自然科学基金（）通信作者：任燕，：紫苏梗和大皂角的质量标准陈旭范丽萍周新华董慧荣任燕滨州医学院药学院山东 烟台 【摘要】目的建立紫苏梗和大皂角两种中药材的质量标准。方法对 批不同产地紫苏梗和大皂角的药材性状和粉末显微特征进行观察，采用薄层色谱法进行定性鉴别。并分别对其水分、总灰分进行测定。对紫苏梗中的迷迭香酸含量进行 测定，对大皂角的酸不溶性灰分、浸出物进行测定。结果紫苏梗和大皂角的性状与药典描述一致，明确了其显微结构特征。薄层色谱鉴别中，供试品与对照品在相同位置显示出相同颜色斑点。紫苏梗的水分、总灰分分别 、，含量测定中迷迭香酸含量 ；大皂角的水分、总灰分、酸不溶性灰分分别 、，水冷浸、水热浸、醇冷浸以及醇热浸浸出物，均 。结论本研究制定了紫苏梗和大皂角的质量标准，为这两种药材的质量标准修订提供了参考。【关键词】紫苏梗；大皂角；质量标准；显微鉴别；薄层色谱；含量测定【中图分类号】【文献标志码】【文章编号】（）：，【】（），【】；紫苏梗（）为唇形科植物紫苏 （）的干燥茎，秋季果实成熟后采割，除去杂质，晒干，或趁鲜切片，晒干，呈类方形的厚片 。其具有理气宽中、止痛、安胎的功效，用于治疗胸膈痞闷、胃脘疼痛、嗳气呕吐、胎动不安 。紫苏入药始载于汉魏时期 名医别录，列为中品。“苏，味辛，温。主下气，除寒中，其子尤良”，其所载性味与今相符 。紫苏梗被单独使用，则载于宋代的 本草图经 中，曰：“苏，紫苏也。旧不著所出州土，今处处有之。叶下紫色而气甚香，夏滨州医学院学报 年 月第 卷第 期 ，采茎叶，秋采实。其茎并叶，通心经，益脾胃，煮饮尤胜，与橘皮相宜，气方中多用之”。紫苏茎即为紫苏梗 。版 中国药典 中收载了紫苏梗的质量规范，但未收载水分、总灰分。皂荚（）最早载于 神农本草经，曰：“皂荚味辛、咸，温。主风痹死肌，邪气，风头泪出，利九窍，杀精物。生川谷”。大皂角为皂荚的干燥成熟果实，秋季果实成熟变黑时采摘，晒干 。主产于山东、河南、山西等地 。大皂角具有祛痰开窍、散结消肿等功效 ，常用于咳嗽疾喘、病肿便毒、疮癣痢癞等症的治疗 ，具有较大的药用价值。年版 中国药典 一部只收录其来源、性状、粉末鉴别和薄层鉴别的方法，尚未收载水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物。本文通过对紫苏梗和大皂角的质量标准进行研究，将有助于丰富 中国药典 内容，可为紫苏梗和大皂角药材质量标准提供参考依据。材料与仪器 药品与试剂本实验共收集到主产地四川、山东、山西等地的紫苏梗饮片样品 批，共收集到主产地四川、山东、河南等地的大皂角样品 批，均购自河北济鑫堂药业有限公司。见表 。表 紫苏梗与大皂角产地与批次紫苏梗产地紫苏梗批次大皂角产地大皂角批次四川 成都 山东 枣庄 山西 贵州 江苏 菏泽 湖北 河南 广东 西安 广西 济南 浙江 陕西 河北 安徽 河南 江苏 迷迭香酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号为 ）。大皂角对照药材（中国食品药品检定研究院，批号为 ）。甲醇（天津市汇杭化工科技有限公司）、正己烷（天津市科密欧化学试剂有限公司）、乙酸乙酯（天津市富宇精细化工有限公司）、甲酸（国药集团化学试剂有限公司）、硅胶 薄层板（青岛谱科分离材料有限公司与青岛海洋化工有限公司）、水合氯醛（阿拉丁）、三氯甲烷，乙酸，丙酮（烟台三和化学试剂有限公司）、乙醇（天津市汇杭化工科技有限公司）。仪器三用紫外分析仪（温州铭仁仪器有限公司），超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司），电热鼓风干燥箱（上海力辰邦西仪器科技有限公司），显微镜（北京科至达信息技术有限公司），电子天平（北京丹佛仪器有限公司）。实验方法 性状鉴别参照 中国药典（年版）紫苏梗项和大皂角项的描述。显微鉴别将各批次紫苏梗或大皂角饮片粉碎过 目筛，用 水合氯醛透化稀甘油封片制为碎粉片。用显微成像系统拍摄。定性鉴别 紫苏梗 供试品溶液制备取本品粉末 ，加入甲醇 ，超声提取 ，过滤，滤液进行蒸干，残留的药渣加入甲醇 使其溶解，作为供试品溶液。对照品溶液的制备取迷迭香酸对照品，加甲醇制成每 含 的溶液，作为对照品溶液。薄层色谱方法考察参照薄层色谱法 中国药典（年版）四部通则 试验，对薄层色谱法各影响因素进行考察。硅胶板选取青岛海洋和青岛谱科预制薄层板进行考察。展开剂选择不同比例正己烷 乙酸乙酯 甲酸（）、（）、（）、（）进行考察。点样量选择 、和 进行考察。展开温度选择 、和常温进行考察。饱和状态选择展开前饱和 和展开前不饱和进行考察。大皂角 供试品溶液的制备取本品粉末 ，加入甲醇 ，超声处理 ，过滤，滤液蒸干，残渣加水 使其溶解，然后用乙酸乙酯振摇提取次，每次 ，合并，蒸干，然后加入 的甲醇将其溶解，作为供试品溶液。对照品溶液的制备将大皂角对照药材 ，用上述方法制成对照品溶液。薄层色谱方法考察参照薄层色谱法 药典 年版四部通则 试验，对薄层色谱法各影响因素进行考察。硅胶板选取青岛海洋和青岛谱科预制薄层板进行考察。展开剂选择不同比例三氯甲烷 甲醇 水 冰醋酸（）、（）、（）、（）进行考察。点样量选择 、和 进行考察。展开温度选择 、常温和 对进行考察。饱和状态选择展开前饱和 和展开前不饱和进行考察。水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物检查对滨州医学院学报 年 月第 卷第 期 ，批次紫苏梗与大皂角药材饮片按照 中国药典（年版）四部通则 第二法（烘干法）测定水分。按照通则 测定灰分、酸不溶性灰分。对 批次大皂角按照通则 进行浸出物测定。紫苏梗中迷迭香酸含量测定 参照高效液相色谱法通则 测定。色谱条件与系统适应性试验填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇 甲酸水（），流速 ，检测波长 ，柱温 。理论塔板数按照迷迭香酸色谱峰计算 。供试品溶液的制备根据“”制备供试品溶液。对照品溶液的制备根据“”制备对照品溶液。测定方法分别吸取 对照品溶液与供试品溶液，使用高效液相色谱仪进行测定。结果 紫苏梗 性状鉴别本品呈方柱形，四棱钝圆，长短不一，直径 。体轻，质硬，断面裂片状。切片厚 ，常呈斜长方形，木部黄白色，射线细密，呈放射状，髓部白色，疏松或脱落。气微香，味淡。见图 。图 紫苏梗饮片图 显微鉴别本品粉末灰白色。木纤维众多，多成束，常与木薄壁细胞、导管或木射线连接，甚细长，末端尖，纹络稀疏，有细点状的小孔。有单独或者成束状的纤维，分为两种。一种比较长，尾部比较尖，非木化，没有明显的孔沟，有的胞腔内有细小的草酸钙针晶。另一种为梭形，周边参差，具有比较密集的孔沟，胞腔小。导管主要是具缘纹孔或者螺纹导管。有散落的单个小腺毛，圆头，单细胞头，单细胞柄。见图 。薄层色谱定性鉴别 硅胶板考察结果青岛海洋薄层板较青岛谱科的斑点清晰，且 值适中。最终选用青岛海洋预制硅胶 薄层板。见图 。导管；木纤维；纤维；小腺毛。图 紫苏梗显微鉴别图 紫苏梗饮片；对 迷迭香酸对照品。图 紫苏梗硅胶板考察结果 展开剂考察结果紫苏梗各批次药材和对照品溶液在正己烷 乙酸乙酯 甲酸（）展开剂下分离的效果更好，斑点更清晰，且 值适中。最终选择正己烷 乙酸乙酯 甲酸（）作为展开剂。见图 。紫苏梗饮片；对 迷迭香酸对照品。图 紫苏梗展开剂考察结果滨州医学院学报 年 月第 卷第 期 ，点样量考察结果点样量在 、和 时斑点不够清晰，而 点样下斑点清晰，分离的效果更好。点样量最终确定为 。见图 。展开温度考察结果温度在 时斑点分离效果欠佳，而在 和常温时薄层板斑点清晰，分离效果较好。最终选择展开温度为常温。见图。饱和状态考察结果经展开前饱和后的斑点分离效果较好，未进行饱和的斑点存在分离效果欠佳和边缘效应现象。最终选择展开前饱和 。见图 。验证试验依据上述考察结果，本研究采用以下条件对各批次紫苏梗进行验证。薄层板采用青岛海洋预制硅胶 薄层板，展开剂为正己烷 乙酸乙酯 甲酸（）。在供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。见图。紫苏梗饮片；对 迷迭香酸对照品。图 紫苏梗点样量考察结果 紫苏梗饮片；对 迷迭香酸对照品。图 紫苏梗展开温度考察结果 紫苏梗饮片；对 迷迭香酸对照品。图 紫苏梗饱和状态考察结果 紫苏梗饮片；对 迷迭香酸对照品。图 紫苏梗薄层色谱法鉴别图谱滨州医学院学报 年 月第 卷第 期 ，水分、总灰分、酸不溶性灰分检查紫苏梗 批药材水分、总灰分、酸不溶性灰分的测定结果见表 。紫苏梗水分 、总灰分 、酸不溶性灰分 。表 紫苏梗水分、总灰分和酸不溶性灰分测定结果 批次水分总灰分酸不溶性灰分 含量测定 中国药典（年版）规定，紫苏梗含迷迭香酸 。见表 。表 紫苏梗中迷迭香酸的含量批次浓度（）百分含量（）大皂角 性状鉴别本品呈扁长的剑鞘状，有的略弯曲，长 ，宽 ，厚 。表面棕褐色或紫褐色，被灰色粉霜，擦去后有光泽，种子所在处隆起。基部渐窄而弯曲，有短果柄或果柄痕，两侧有明显的纵棱线。质硬，摇之有声，易折断，断面黄色，纤维性。种子多数，扁椭圆形，黄棕色至棕褐色，光滑。气特异，有刺激性，味辛辣。见图 。图 大皂角饮片图 显微鉴别本品粉末淡黄棕色。有很多直径在 的石细胞。形状不规则或者类似圆形。有的厚鼻孔纹细胞是长方形，偶尔能看见晶纤维。副卫细胞成环排列，有棕红色的外果皮细胞，表面看似多角形状。见图 。厚壁孔纹细胞；木栓细胞；石细胞 外果皮细胞；纤维。图 大皂角显微鉴别图 薄层色谱定性鉴别 硅胶板考察结果青岛谱科薄层板较青岛海洋的斑点清晰，且 值适中。最终选择青岛谱科预制硅胶 薄层板。见图 。大皂角饮片；对 大皂角对照药材。图 硅胶板考察结果 展开剂考察结果大皂角和对照品用三氯甲烷 甲醇 水 冰醋酸（）作为展开剂，分离的效果更加明显清楚，值适中。最终选择三氯甲烷 甲醇 水 冰醋酸（）为展开剂。见图 。大皂角饮片；对 大皂角对照药材。图 展开剂考察结果滨州医学院学报 年 月第 卷第 期 ，点样量考察结果点样量在 时斑点不够清晰，在 和 点样量下斑点清晰，但是 分离效果更好。最终点样量确定为 。见图 。展开温度的考察结果 和 下斑点分离效果欠佳，常温下薄层板斑点清晰，效果较好。最终选择展开温度为常温。见图 。饱和状态考察结果经展开前饱和后的薄层展开效果更好，未进行饱和后展开的斑点存在分离效果欠佳和边缘效应现象。最终确定条件为展开前饱和 。见图 。验证实验依据上述方法考察结果，本研究采用以下条件对各批次大皂角进行验证。薄层板采用青岛谱科预制硅胶 薄层板，展开剂为三氯甲烷 甲醇 水 冰醋酸（）的下层溶液，展开，晾干，喷 硫酸乙醇溶液，在 加热至斑点显色清晰。在供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。见图 。大皂角饮片；对 大皂角对照药材。图 点样量考察结果 大皂角饮片；对 大皂角对照药材。图 展开温度考察结果 大皂角饮片；对 大皂角对照药材。图 饱和状态考察结果滨州医学院学报 年 月第 卷第 期 ，大皂角饮片；对 大皂角对照药材。图 大皂角验证实验结果 水分、总灰分、酸不溶性灰分检查大皂角 批样品测定结果显示，大皂角的水分 ，总灰分 ，大皂角的酸不溶性灰分 。见表 。表 大皂角水分、总灰分和酸不溶性灰分测定结果 批次水分总灰分酸不溶性灰分 浸出物的测定大皂角 批样品测定结果显示，大皂角的水冷浸法、水热浸法、醇冷浸法（乙醇作溶剂）以及醇热浸法（乙醇作溶剂）均 。见表 。表 大皂角浸出物测定结果 批次水冷浸法水热浸法醇热浸法醇冷浸法 讨论本研究通过观察大皂角和紫苏梗饮片及粉末的显微特征，为两种药材的显微鉴别提供了参考。通过对薄层板厂家、点样量、展开剂比例、展开温度、饱和状态等薄层色谱条件进行考察，最终确定了大皂角和紫苏梗的薄层色谱鉴别方法。该方法色谱斑点清晰、专属性强、稳定性好、耐用性强。本研究通过对水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量的测定得出以下质量标准：大皂角水分 ，总灰分 ，酸不溶性灰分 ，浸出物限度为 ；紫苏梗水分 ，总灰分 ，酸不溶性灰分 。本研究通过对大皂角进行性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物测定，对紫苏梗进行性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、迷迭香酸含量测定，系统地考察了两种药材的各项质控指标，结合 中国药典 和各地两种药材的质量要求，制定了其质量标准，为这两种植物药的质量控制提供了参考依据。参考文献 国家药典委员会 中华人民共和国药典：一部 北京：中国医药科技出版社，王凤云，韩亮，石忠峰 紫苏梗的高效液相色谱指纹图谱研究 时珍国医国药，（）：吕选民，姬水英 柴草瓜果篇第三十八讲：苏梗 中国乡村药，（）：陶弘景集 名医别录 人民卫生出版社，苏颂 本草图经 安徽：安徽科学技术出版社，神农本草经 南宁：广西科学技术出版社，肖耀军 大皂角与猪牙皂不应混淆使用 首都医药，（）：国家中医药管理局编委会 中华本草 上海：上海科学技术出版社，：王唱唱，左蓓磊，周宁，等 大皂角酥炙工艺研究 中华中医药杂志，（）：（收稿日期：）（本文责编：于腊梅）滨州医学院学报 年 月第 卷第 期 ，