DB50_T 142-2023马铃薯脱毒种薯繁育技术规程.pdf

ICS 65.020.20CCS B 23DB50重庆市地方标准DB 50/T 1422023代替 DB50/T 142-2003马铃薯脱毒种薯繁育技术规程2023-03-20 发布2023-06-20 实施重庆市市场监督管理局发 布DB50/T 1422023I前言本文件按照 GB/T 1.12020标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件代替 DB50/T 1422003。与 DB50/T 1422003 相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：a)修改了规范性引用文件；b)重新定义了部分术语和定义；c)增加了脱毒试管苗生产条件条款，对脱毒试管苗、原原种、原种、生产用种的生产、水肥和病虫害管理等过程中的部分内容进行细化完善，使之更具操作性；d)对各等级种薯生产的必备项作出了明确要求。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由重庆市农业农村委员会提出、归口并组织实施。本文件起草单位：重庆市农业技术推广总站。本文件主要起草人员：欧建龙、黄振霖、赵雨佳、何佳洋、李义江、李明聪、梁峰铭、刘芳、胡斯刚、佘兴蓉、王开周、胡黎华。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：2003 年 9 月 18 日首次发布为 DB50/T 142-2003；本次为第一次修订。DB50/T 14220231马铃薯脱毒种薯繁育技术规程1范围本文件规定了病毒脱除、原原种生产、原种繁育、生产种繁殖等操作规程。本文件适用于马铃薯脱毒试管苗、原原种、原种、生产用种的繁育和生产。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 18133 马铃薯种薯GB/T 29375 马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程GB/T 29376 马铃薯脱毒原原种繁育技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1脱毒试管苗in-virto virus free plantlet经检测确认不带马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯S病毒(Potato virus S,PVS)、马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)、马铃薯M病毒（Potato virus M,PVM）、马铃薯A病毒（Potato virus A,PVA）和马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber disease,PSTVd)的再生试管苗。3.2原原种pre-elite用脱毒试管苗在温室和防虫网室等隔离条件下生产出的符合质量标准的种薯。3.3原种elite用原原种作种薯，在隔离蚜虫和病害的良好条件下生产出的符合质量标准的种薯。3.4生产用种certified seed potato用原种作种薯，在隔离蚜虫和病害的良好条件下生产出的符合质量标准的种薯。4病毒脱除4.1生产条件4.1.1车间条件DB50/T 14220232生产车间应遵循方便消毒、减少污染的原则，并满足以下条件：a）周围环境无污染源，与大田生产隔离；b）具有相互隔离的更衣室、清洗室、配药室、灭菌室、接种室、培养室等；c）组培室应具有充足的自然光或人工光源；d）生产环境清洁、干燥。4.1.2消毒处理消毒处理操作应符合 GB/T 29375 的要求。a）接种室、组培室每周定期消毒一次，按照每立方米空间用量，将 40%的甲醛溶液 10 mL 迅速倒入 5 g 高锰酸钾容器内进行熏蒸，密闭 1 d 后，进行通风；b）接种前，超净工作台用紫外灯灭菌 20 min，超净工作台台面及内壁用 75%酒精擦拭消毒；c）操作所用镊子、解剖刀等工具接触植物材料前应灼烧或高温消毒，冷却后使用；d）操作人员需穿消毒工作服，用肥皂洗净双手，带工作手套，操作过程中，手和工作台面要经常用 75%酒精消毒；培养室发现污染及时清除。4.2脱毒试管苗的培育4.2.1材料选择应选用田间具备品种典型性状的健康植株的顶芽或腋芽，作茎尖脱毒材料。4.2.2培养基制备茎尖分化培养基：MS+GA30.2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+白糖 3%+琼脂 0.6%；扩繁培养基：MS+白糖 3%+琼脂 0.6%。4.2.3培养基灭菌在 0.11 Mpa/cm2压力下灭菌 15 min20 min，冷却备用。4.2.4茎尖剥离接种将选用的材料放入纱布袋，用自来水冲洗 1h 后，在无菌条件下用 75%酒精中浸 30 s，再用 0.1%的升汞溶液消毒 3 min6 min。取出材料后，用无菌水冲洗 3 次5 次，用灭菌滤纸吸干材料表面水分。在体视解剖镜下用手术刀剥去幼叶，切取带 l 个2 个叶原基(0.1 mm0.4 mm 大小)的生长点，迅速接入装有茎尖分化培养基的培养瓶中，每瓶接种 1 个茎尖。做好标注。4.2.5脱毒试管苗扩繁对生长到具有 7 片8 片叶、经检测不带病毒和类病毒的试管苗进行切段扩繁，每个切段至少带1 个叶片。将剪下的切段扦插到扩繁培养基，每瓶放 20 个切段。培养条件为温度 20 25，光照时数 l2 h/d 左右，光照强度 2000 1x 3000 1x。切段长成具有 7 片8 片叶后，再次切段繁殖。4.2.6培养条件温度 20 25，光照时数 l2 h/d，光照强度 2000 1x3000 1x。4.3病毒检测DB50/T 14220233用酶联免疫吸附测定（ELISA）法进行病毒检测，无病毒的材料送国家法定检验部门复检合格后扩繁。4.4 品种真实性观察取出一部分脱毒试管苗移栽到温（网）室内，结出的小薯种植到田间观察是否发生变异，应符合原品种的典型性状。5原原种生产5.1生产条件应符合 GB/T 29376 要求。5.2脱毒试管苗扦插5.2.1基质宜采用蛭石等作为基质，用 50%多菌灵可湿性粉剂 800 倍液喷洒消毒。5.2.2炼苗将长到 7 片8 片叶，苗龄 20 d 以上的试管苗炼苗 3 d5 d。5.2.3扦插将炼苗后的脱毒试管苗用镊子轻轻取出，用剪刀切除根部，自来水冲洗干净附着的琼脂，用 NAA溶液 50 ppm 浸泡 5min 后扦插。5.3管理5.3.1水分管理扦插后在 5 d10 d 内应保持相对湿度 90%以上，适当遮阴。在结薯前应适当控水，在结薯期保证充足的水分，在成熟期减少供水。5.3.2肥料管理试管苗生根成活到收获前 7 d10 d，喷 0.2%0.3%磷酸二氢钾溶液 3 次5 次。5.3.3病虫害防治生产过程中全程进行病虫草害防治。重点防治晚疫病，根据晚疫病预警系统信息，先采用保护剂喷雾，后采用治疗剂喷雾。保护剂选用 75%代森锰锌水分散粒剂，治疗剂选用 72%霜脲锰锌可湿性粉剂、687.5 SC/L 氟菌霜霉威、50%氟啶胺等药剂。生产全程应防治 4 次6 次，每次间隔 7 d10d，不同治疗剂交替使用，均匀喷雾。5.4收获收获前 1 周应停止营养液和水分的供应，收获时避免损伤和品种混杂。5.5分级DB50/T 14220234摊晾 5 d7 d 后，严格剔除破损、畸形等非正常薯，按种薯个体重量大小依次分为 10 g 以上、5g10 g、3 g5 g、1 g3 g 四个等级。5.6贮藏按收获期、等级分品种分装，并做好标签。在 15 20 的温度下预贮藏 5 d7 d，然后 3 5、相对湿度 80%90%的条件下贮藏。5.7质量检测参照 GB 18133 要求对贮藏的原原种质量进行检测。5.8包装出库采用清洁透气且具有良好保护的编织袋、网袋或纸箱包装，并贴好标签。6原种繁育6.1繁育地条件选择海拔 1200 m 以上，自然隔离和通风条件好，周围 60 m 无十字花科、茄科植物种植，三年内未种植茄科作物，土层深厚、结构疏松的沙壤土、交通方便。6.2播种6.2.1播前处理选用通过休眠的原原种做种薯，剔除病薯、烂薯和缺陷薯，播前 20 d25 d 催芽，芽长 0.5 cm1 cm 可播种。6.2.2实时播种10 cm 以内土层温度稳定达到 8 以上播种。6.2.3施肥重施底肥，每 666.7 施农家肥 1000 kg 1500 kg，宜用总养分40%高钾复合肥（N:P2O5:K2O=5:2:7）30 kg40 kg 作底肥；苗高 3 cm5 cm 时，每 666.7 以清粪水 500 kg 加尿素 5 kg8 kg 进行追肥；现蕾期每隔 7 d10 d 用 0.3%0.5%磷酸二氢钾进行根外追肥 1 次2次。6.3 田间管理苗期中耕除草并培土，使垄高达到 20 cm25 cm。苗期施尿素 10 kg/667 作为齐苗肥；薯块膨大期追施 0.3 0.5 磷酸二氢钾作为促薯肥。在现蕾期、花期进行除杂，及时拔除病株，杂株及地下块茎。6.4病虫害防治虫害主要防治蚜虫，出苗后 10 d 左右，每 7 d10 d 喷施低毒高效杀虫剂一次，连续 3 次4 次。马铃薯晚疫病防治根据晚疫病预警系统信息，先采用保护剂喷雾，后采用治疗剂喷雾。保护剂选用 75%DB50/T 14220235代森锰锌水分散粒剂，治疗剂选用 72%霜脲锰锌可湿性粉剂、687.5 SC/L 霜霉威氟吡菌胺、50%氟啶胺等药剂。生产全程应防治 4 次6 次，每次间隔 7 d10 d，不同治疗剂交替使用，均匀喷雾。6.5收获在田间植株下部 2/3 叶片变黄时收获，收获前 7 d10 d 机械或人工杀秧。宜晴天收获，收获后摊晾，去除泥土，清除杂物。6.6分级、包装种薯的重量大小进行分级，分 30 g50 g、50 g100 g、100 g 以上三个级别用网袋包装。6.7贮藏种薯宜在 15 20 的温度下预贮藏 5 d7 d，然后在 35、相对湿度 80%90%的条件下贮藏。7生产用种薯繁殖7.1繁殖地条件按本文件 6.1 执行。7.2播种7.2.1种薯选用打破休眠的原种做种薯。播前 20 d25 d 催芽，小于 50 g 的整薯播种，大于 50 g 的切块播种，每个切块 30 g 左右且带 2 个以上芽眼，切刀须用 5%次氯酸钠或 75%酒精消毒。7.2.2播种时期10 cm 以内土层温度稳定达到 8 以上播种。7.2.3播种密度符合本文件 6.2.3 要求。7.2.4施肥符合本文件 6.2.3 要求。7.2.5田间管理符合本文件 6.3 要求。7.2.6病虫害防治符合本文件 6.4 要求。7.2.7收获符合本文件 6.5 要求。7.2.8分级包装DB50/T 14220236符合本文件 6.6 要求。7.2.9贮藏符合本文件 6.7 要求。7.3质量检测符合本文件 5.7 要求。