糖皮质激素诱导小梁网组织失能的研究进展.pdf

医学分子生物学杂志,2024,21(2):176-181 J Med Mol Biol,2024,21(2):176-181DOI:10.3870/j.issn.1672-8009.2024.02.014资助项目:国家自然科学基金(No.U1904166)通讯作者:李海军(电话:[phone],E-mail:lihaijun )This work was supported by a grant from the National Natural ScienceFoundation of China(No.U1904166)Corresponding author:LI Haijun(Tel:[phone],E-mail:)糖皮质激素诱导小梁网组织失能的研究进展任静,段世超,崔慧玲,王迪,赵茹梦,李海军河南省人民医院,河南省立眼科医院,郑州大学人民医院,河南大学人民医院 郑州市,450003【摘要】糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)作用于小梁网组织,诱导发生组织形态学的改变与功能失衡。研究证实糖皮质激素性青光眼与原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)具有相似的小梁网形态与功能变化,然而 POAG 的发病机制仍不清楚。阐明 GCs 如何诱导小梁网形态学的改变,如何影响房水流出阻力,有利于探索 POAG 的发病机制。文章主要就 GCs 对小梁网的影响作一综述。【关键词】糖皮质激素;小梁网;激素性高眼压;青光眼;【中图分类号】R775.2Research Progress on Glucocorticoids Induced Dysfunction of Trabec-ular MeshworkREN Jing,DUAN Shichao,CUI Huiling,WANG Di,ZHAO Rumeng,LI HaijunHenan Provincial People s Hospital,Henan Eye Hospital,Zhengzhou University People s Hospital,Henan University People s Hospital,Zhengzhou,450003,China【Abstract】Glucocorticoids(GCs)could induce the morphological changes and dysfunction oftrabecular meshwork tissues.The changes in the trabecular meshwork tissues of the glucocorticoids(GCs)induced glaucoma is similar with those of the primary open angle glaucoma(POAG).However,the pathogenesis of POAG is still unclear,elucidating how GCs induce morphologicalchanges of trabecular meshwork and the increase of aqueous humor outflow resistance is beneficialfor exploring the pathogenesis of POAG.The effects of GCs on trabecular meshwork are summarizedin this review.【Key words】glucocorticoids;trabecular meshwork;glucocorticoid induced ocular hyperten-sion;glaucoma 青光眼是全球范围内首位不可逆的致盲性眼病。自 20 世纪 50 年代,糖皮质激素(glucocorti-coids,GCs)在全球范围内被广泛应用于全身各系统相关疾病的抗炎和免疫抑制治疗。长期的 GCs治疗会继发激素性高眼压,甚至激素性青光眼而致盲。然而,并非所有长期接受 GCs 的个体都会发生高眼压,其取决于人群对 GCs 的易感性及 GCs的效力、给药方式、作用时间、药代动力学1。据报道非青光眼患者中只有 40%的人对糖皮质激素较敏感,而青光眼患者对糖皮质激素的高反应率达到了 90%2。至今,激素性高眼压或青光眼的发病机制,涉及的分子病理生理学尚未完全明确,其与原发性开角型青光眼(primary open angle glau-coma,POAG)均表现为房角开放和房水流出阻力的增加,它们可能具有共同的发病机制,因此,对激素性高眼压或青光眼房水流出途径改变机制的探索也有助于进一步了解 POAG。近几十年,关于GCs 引起的房水引流途径的研究取得了很大进展,从最开始对其形态学改变的观察,到细胞生物学和分子生物学层面的研究,再到最近应用新技术手段对其生物力学特性的探索,这些研究均为流出阻力增加的原因提供了重要线索。1 糖皮质激素对小梁网的影响人眼房水的主要引流途径是小梁网途径,包括小梁网(葡萄膜和角巩膜小梁网),邻管区组织(juxtacanaliculartissue,JCT),Schlemm s管(Schlemms canal,SC),集液管,房水静脉。葡萄膜和角巩膜小梁网为结构较规则的结缔组织薄片或束,而 JCT 为 2 5 层排列不规则的疏松结缔组织。JCT/SC 区富含细胞外基质(extracellular ma-trix,ECM),JCT 中纤维状 ECM 的增加、小梁网中肌动蛋白细胞骨架的重塑、小梁网细胞吞噬功能的下降,均与 GCs 诱导房水流出阻力增加相关。1.1 糖皮质激素对小梁网形态的影响人们普遍认为小梁网的形态学改变是小梁网流出阻力增加和高眼压的原因。形态学的变化包括:小梁网的增粗,小梁网细胞数量的减少,小梁网间隙的减少,JCT 区小梁网细胞呈现出类似于“肌成纤维细胞”的活化外观,SC 内壁内皮下方细纤维状物质的沉积,外部小梁网中出现以“指纹”状形式沉积的基底膜样物质3。Li 等4用电镜观察到地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的小鼠眼睛中,“开放”的小梁网间空间数量减少,无定形ECM 的积累增加,且与对照组 SC 下方不连续基底膜相比,DEX 组更连续。Zhu 等5用电镜观察到醋酸地塞米松治疗组小梁网间隙不明显,胞浆内线粒体异常肿胀,弹力纤维增多且排列紊乱,弹力纤维外鞘增厚致密。Zeng 等6报道了醋酸地塞米松诱导的小鼠小梁网束增粗,小梁网间隙减少且被纤维状和无定形颗粒状物质充填,并在 JCT 区观察到类弹性纤维的积累。Ren 等7用电镜发现 DEX 干预后小鼠小梁网邻管区厚度减少,基底膜样物质沉积增加,表现为指纹状、短的卷曲细丝状,及短的卷曲细丝与胶原纤维混合的致密物质。这些均导致了小梁网的有效滤过面积减少,眼压升高。1.2 糖皮质激素对小梁网细胞骨架的影响GCs 诱导后,小梁网细胞大小增加,增殖和迁移受到抑制,吞噬能力降低,在培养的小梁网细胞中可观察到围绕核周的、圆顶状的结构再到肌动蛋白的“缠结”形成的广泛交叉的交联型肌动蛋白网 络(cross-linkedactinnetworks,CLANs),CLANs 的形成可能是小梁网细胞功能发生失衡的直接或间接原因。为了更好地了解 CLANs 在 GCs诱导小梁网组织失能中的作用,Fujimoto 等8利用活细胞成像技术观察了 DEX 作用猪眼小梁网细胞后 CLANs 的变化,发现 28%的细胞在 DEX 处理后出现 CLANs,当 DEX 撤除后,CLANs 会消失。早在 20 世纪 90 年代就有研究证实 GCs 介导的CLANs 的形成具有剂量依赖性和时间依赖性,并且当停止 GCs 的诱导时,这些 CLANs 的形成是可逆转的9,这与临床上当停止 GCs 的使用时,激素性高眼压患者的眼压会回归正常的现象相一致。DEX 同时诱导了 CLANs 的形成和眼压升高,那么CLANs 是如何导致眼压的升高?研究表明 CLANs通过增加了房水流出途径的硬度增加了房水流出阻力,Peng 等10用活细胞成像技术检测,DEX 诱导后,原代人小梁网细胞形成更多的 CLANs,原子力显微镜检测 CLANs 的弹性模量增加,使细胞变的更硬。细胞骨架蛋白在细胞质和细胞核区域之间穿梭,其又是如何影响基因表达和细胞功能的呢?为了更好的了解蛋白的功能,Bachman 等11用蛋白质组学分析来表征 DEX 处理的人小梁网细胞的核蛋白,发现肌动蛋白结合染色质调节剂(actinbinding chromatin regulator,BRG1)的缺失会减弱DEX 诱导的小梁网细胞中 CLANs 蛋白和细胞黏附蛋白水平,这些变化与肌动蛋白调控的 BRG1 染色质的重塑,核 MICAL2 和磷脂酰肌醇蛋白聚糖-4 调节的 Wnt 信号通路上游血清反应因子/心肌蛋白控制的转录活性有关。1.3 糖皮质激素对小梁网细胞外基质的影响众所周知,小梁网 ECM 的稳态对于维持房水流出至关重要,与角巩膜小梁网中更规则的结构相比,JCT 中的小梁网细胞包埋在无定形和多孔的ECM 中,排列成不规则的网络。大部分抵抗房水流出的阻力被认为来自小梁网深部 JCT 区的 ECM,及 Schlemm 管的内壁基底膜12。ECM 蛋白贯穿整个小梁网组织,包括纤连蛋白、胶原蛋白、蛋白聚糖、糖胺聚糖、细胞基质蛋白、弹性纤维成分等,这些 ECM 蛋白在不同细胞层中的含量不同。据报道,眼压下降的大部分(6 9 mmHg,即 799.93 1199.90 Pa)发生在 JCT 的 ECM 区,小部分(0.5 2.0 mmHg,即 66.66 266.64 Pa)由 SC 细胞控制13。在离体灌注培养的眼睛中发现 DEX 处理2 3周后人小梁网中 3G-葡萄糖胺掺入率在未消化的糖胺聚糖残留物中平均增加了 92%,DEX 诱导了糖胺聚糖的积聚14。Patel 等2在醋酸地塞米松诱导的小鼠青光眼模型中发现,免疫荧光显示高眼压小鼠眼小梁网中维连接蛋白(fibronectin,FN)、型胶原(collagen,Col1)和-平滑肌肌动蛋白(-smooth muscle actin,-SMA)的表达均较对照组明显增强。Yemanyi 等15报道了 DEX 影响了人小梁网细胞和细胞外基质中整合素/整合素黏附体、小窝蛋白、细胞骨架相关蛋白的表达,诱导了ECM 的纤维化表型。Haribalaganesh 等16首次在尸体的眼中发现:在 100 nmol/L DEX 处理的尸体的眼中,糖皮质激素反应者占 37.5%;在 500 nmol/L DEX 处理的尸体的眼中,糖皮质激素反应者占20%;在激素敏感性的高眼压尸体的眼中,免疫771医学分子生物学杂志,2024,21(2):176-181 J Med Mol Biol,2024,21(2):176-181染色观察到小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白(myocilin,MYOC)和 FN 较对照组 显 著 表 达。Watanabe 等17在 DEX 处理的 3D 培养的人小梁网细胞中检测到 FN 和金属蛋白酶抑制剂 4(tissueinhibitor of metalloproteinase 4,TIMP4)显著上调。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的蛋白水解活性在小梁网的 ECM 重塑中起着关键作用,MMPs 是一种调节细胞外基质蛋白水解的酶家族,青光眼小梁网 ECM 的稳态失衡与 MMPs 的分泌减少相关。Mohd Nasir 等18报道了 DEX 减少了人小梁网细胞 MMP2 和 MMP9 的分泌,其与核转录因 子 B(NF-B)磷 酸 化 和 腺 苷 a1 受 体(A1AR)表达的降低有关。1.4 糖皮质激素对小梁网细胞和细胞外基质的生物力学影响 目前人们对房水流出途径的生物物理特性了解甚少,据报道,青光眼患者小梁网的硬度增加,与房水流出阻力密切相关,且外部小梁网较内部小梁网要硬19。近年来,随着检测技术的发展,对小梁网生物力学的研究越来越多,了解小梁网生物力学的改变能帮助我们进一步了解这种僵硬度的改变情况。那么糖皮质激素是否是通过诱导 ECM 僵硬和/或细胞变得僵硬来诱导高眼压或青光眼的发生呢?Krishna 等14用原子力显微镜对人小梁网细胞和小梁网组织的力学进行了检测,发现 DEX 处理后人小梁网细胞的弹性模量及硬度显著增加,ECM变硬。在兔眼中,检测到 DEX 干预眼小梁网弹性模量明显升高,小梁网组织变僵硬,但干预眼的眼压并无统计学意义的升高,表明糖皮质激素干预后,无论眼压变化如何,小梁网的机械性能都会发生改变,小梁网的功能和结构出现问题在眼压升高之前。除了原子力显微镜,Wang 等20通过数值建模和光学相干断层扫描成像间接评估了人小梁网组织的硬度,对人眼进行灌注,通过示踪剂识别高和低流量区域,通过直接操纵 Schlemm s 管的管腔压力获得光谱域光学相干断层扫描图像,人小梁网的硬度通过逆有限元建模方法获得,经逆有限元建模估算的正常人小梁网的弹性模量较青光眼低,结果与原子力显微镜测量的人小梁网硬度一致。2 糖皮质激素诱导小梁网组织失能的机制GCs 诱导青光眼的确切机制尚不清楚,但越来越多的证据表明,其可能通过小梁网细胞中的各种信号级联发挥作用。2.1 糖皮质激素受体学说小梁网细胞具有吞噬功能,可吞噬自体血、虹膜的光凝碎屑、色素、红细胞、乳胶球等,其通过清除房水中的碎屑来维持房水流出通道的通畅。GCs 抑制了小梁网细胞的吞噬功能,诱导了小梁网ECM 的沉积21。GCs 效应是通过与糖皮质激素受体亚型 (glucocorticoid receptor,GR)结合激活配体对小梁网细胞起作用,有趣的是,糖皮质激素受体 (glucocorticoid receptor,GR)对 GR有明显的抑制作用。小梁网中 GR 的过表达可能会减少 DEX 引起的高眼压,并可能会减少 GCs 介导的小梁网生化和形态的变化。为了验证这些假设,Patel 等22分别从体外及体内进行了探索,在体外,DEX 诱导了小鼠小梁网细胞中 FN 的高表达,而经腺病毒载体 Ad5.hGR 转导后 FN 表达降低。在体内,向小鼠玻璃体腔注射了腺病毒载体Ad5.hGR,抑制了醋酸地塞米松诱导的小鼠高眼压,并维持了房水流出系数 C 在正常水平。生化方面检测到 Ad5.hGR 减少了小梁网组织中 FN、Col1、MYOC 的表达。已报道 GCs 的不良效应主要由糖皮质激素受体的反式激活介导,而抗炎活性由反式抑制引起。目前尚不清楚哪种糖皮质激素受体机制在调节激素性高眼压。为了进一步了解调控激素性高眼压发展的病理生理的机制,Patel 等23在生化层面检测了 GRdim 转基因小鼠(GR 反式激活受损的小鼠)和 C57BL/6 小鼠的小梁网细胞中 FN和 MYOC 的表达,蛋白质印迹实验显示前者 FN 和MYOC 的表达明显降低,免疫荧光检测结果与之对应。在细胞骨架层面检测到 DEX 诱导的小鼠小梁网细胞中 CLANs 的形成需要糖皮质激素受体的反式激活。此外,醋酸地塞米松诱导后,GR 反式激活受损的小鼠在任何时间点眼压都未升高并维持在基线水平,且房水流出系数与眼压变化相一致。糖皮质激素受体反式激活在 GCs 介导的小梁网的生化改变及高眼压中发挥了重要作用,为激素性高眼压或青光眼的治疗提供了一种新的有效治疗方法。2.2 TGF-信号通路TGF-信号通路在糖皮质激素诱导的小梁网组织功能障碍中扮演了重要角色,其诱导了小梁网ECM 的纤维化24。Kasetti 等25报道了 TGF2-Smad 信号通路介导了 ECM 的积累和内质网应激,在 GCs 诱导的高眼压中起核心作用。Razali 等26报道了反式白藜芦醇通过抑制 TGF2 信号通路增加 ECM 降解达到降眼压目的。Montecchi-Palmer等27证实 TGF2 可通过 Smad 和非 Smad 依赖性途871任静,等.糖皮质激素诱导小梁网组织失能的研究进展径诱导人小梁网细胞中 CLANs 的形成,与眼压升高密切相关。尽管 TGF2 是青光眼发病机制中的重要因子,但其在小梁网中被如何调控鲜有报道,Filla 等28报 道 DEX 激 活 小 梁 网 细 胞 中 CaN/NFATc1 通路,调节 TGF2 mRNA 的表达,且依赖于细胞周期。2.3 Wnt 信号通路Sugali 等29报道在青光眼患者的房水和小梁网中发现了典型的 Wnt 信号抑制剂 Dickkopf 相关蛋白 1(Dickkopf-related protein,DKK1)水平的升高,Dkk1 增强了 GR 信号通路,而下调 Dkk1 或激活 Wnt 信号可抑制 GR 信号通路,同样,GR 信号的激活会抑制 Wnt 信号。相反,下调-catenin 来抑制 Wnt 信号通路,可增加 DEX 诱导的 ECM 蛋白的上调。GR 和 Wnt 信号在小梁网中相互抑制,激活 Wnt 信号可抑制糖皮质激素的不良影响。Harib-alaganesh 等30首次报道用转录组测序技术在 GC-应答和 GC-非应答的人小梁网细胞中研究了参与不同糖皮质激素反应性的基因和信号通路,得出结论Wnt 信号、药物代谢细胞色素 P450、细胞黏附分子通路、TGF-信号和 MAPK 信号与 GC 反应性相关,Wnt 和 MAPK 信号通路是治疗 GCs 诱发青光眼的潜在靶点。Zhang 等31为了进一步阐明 Wnt信号通路在青光眼表型中的作用,在 DEX 处理的人原代小梁网细胞中,检测了 Wnt 信号通路正反馈因子 AXIN2,负反馈因子 sFRP1 和 MYOC 的mRNA 及蛋白表达水平,其观察到 MYOC 的表达首先达到峰值,其次是 Wnt 信号活性标志物 AX-IN2,最后是 Wnt 信号抑制剂 sFRP1,由此得出结论 DEX 诱导了 MYOC 表达的升高,可能激活了Wnt 信号通路,由于 Wnt 信号异常,激活了抑制异常 Wnt 信号的负反馈机制,出现了 sFRP1 显著上调。因此,小梁网细胞对糖皮质激素反应的动态学变化需要进一步的探索。2.4 细胞衰老与自噬相关信号通路以往的研究主要集中在细胞外基质的稳态失衡在小梁网功能障碍中的作用上,但小梁网细胞的细胞效应是否参与了糖皮质激素性青光眼的发病机制尚不清楚,Wan 等32通过微阵列筛选出小鼠糖皮质激素性青光眼小梁网组织中表达差异最大的长链非编码 RNA(lncRNA)ANRIL 表达降低,而其靶基因 p15 显著上调,且细胞衰老在通路分析中的富集得分最高。基于这些线索,其推测小梁网细胞中的 ANRIL/p15 信号可能通过调节细胞衰老来促进糖皮质激素性青光眼的发生。研究结果表明,AN-RIL 减少和 p15 表达增加是糖皮质激素性青光眼小梁网细胞衰老的原因,细胞衰老的诱导与小梁网功能障碍相关。靶向 ANRIL/p15 信号的分子治疗对类固醇治疗具有保护作用。我们课题组前期研究显示 DEX 通过 TGF/Smad3-NOX4 信号轴增加活性氧水平,诱导了小梁网细胞衰老,并首次验证了其与青光眼相关33,提示细胞衰老通路在 GCs 引起的小梁网组织失能中的可能作用。自噬与众多眼病的发生和发展有着密切联系,其可能是导致小梁网细胞功能异常的重要因素之一。Sbardella 等34报道在 DEX 暴露后,人小梁网细胞泛素蛋白酶体系统(UPS)的 Ulk-1 复合物中两种成分 Ulk-1 和 Atg101 的周转增强,显著抑制了自噬体生物发生途径,导致了严重的自噬失调。Ulk-1 复合物是自噬小体生物发生的主要调控因子,Ulk-1 激酶和 Atg101 的生物利用度被 DEX 逐步下调,在 DEX 干预 6 d 后达到峰值。Ulk-1 和 Atg101的丢失归因于被蛋白酶体更快地清除所致。2.5 与细胞器的功能障碍和细胞代谢变化相关的机制内质网的功能障碍会导致慢性内质网应激。Zode 等35报道了 DEX 引起的眼压升高与内质网应激有关,当终止 DEX 干预,内质网应激的标志物CHOP 和眼压均降低。线粒体损伤已在青光眼小梁网细胞中被发现,DEX 处理后 MYOC 显著升高,其定位于线粒体,可能具有促凋亡作用,包括降低膜电位,然而青光眼小梁网细胞的代谢活性尚待定量评估。Graybeal 等36用 DEX 处理原代人小梁网细胞以建立青光眼的体外模型,使用细胞能量代谢分析仪,测量耗氧率和细胞外酸化率评估细胞能量代谢,得出结论 DEX 不会显著或持续影响细胞基础呼吸,但会增加最大呼吸,备用呼吸能力,来自于氧化磷酸化的 ATP 产生和 ATP 连动呼吸及非线粒体呼吸。其发现,DEX 处理后的小梁网细胞可定量地改变代谢谱,逆转或预防这些代谢变化可能是未来研究的一个途径。2.6 影响小梁网细胞基本生命活动的其他分子机制GCs 诱导的肌动蛋白细胞骨架动力学、小梁网细胞的收缩特性和细胞黏附作用的改变共同影响了房水流出阻力,但介导这些细胞特征变化的分子机制尚不清楚。Maddala 等37研究发现磷脂酰肌醇蛋白聚糖-4(GPC4)依赖的 Wnt/PCP 信号通路是DEX 诱导人小梁网细胞中肌动蛋白细胞骨架重建和细胞黏附的关键上游调控因子之一。Tan 等38用公共基因表达综合数据库鉴定了 250 个差异表达基因,发现 NEDD9 在基因表达谱中表达上调,进971医学分子生物学杂志,2024,21(2):176-181 J Med Mol Biol,2024,21(2):176-181一步研究发现 NEDD9 介导的 FAK/Src 信号通路,在 DEX 治疗后促进了人小梁网细胞的粘附。Yes相关蛋白(YAP)与含 PDZ 结合基序的转录共激活因子(TAZ)是 Hippo 通路的下游介质,YAP/TAZ 激活后,从细胞质转移到细胞核并与 TEAD 转录因子相互作用,调控细胞基因表达、增殖和命运,YAP/TAZ 过度活跃与青光眼小梁网细胞功能障碍相关。Yoo 等39发现辛伐他汀通过抑制 YAP/TAZ 活性来减轻糖皮质激素诱导的人小梁网细胞功能障碍。既往的研究通过微阵列分析了人小梁网细胞中DEX 处理后差异基因表达的整体变化,但是鲜有报道 DEX 处理后小梁网细胞基因表达的时间变化。Kathirvel 等40在 2022 年首次报道利用转录组测序技术探索了原代人小梁网细胞在 DEX 较短(16 h)或较长(7 d)时间暴露后全基因组表达的时间依赖性变化。较短的暴露时间可能揭示基因表达的急性和起始改变,其是导致小梁网细胞中持续高眼压表型的原因。较长的暴露时间来研究慢性改变的基因,以进一步确定导致高眼压和青光眼的小梁网细胞的分子变化,并确定新的治疗靶点。经测序发现16 h 和 7 d 处理组分别有 199 个基因(上调 118,下调 81)及 525 个基因(上调 119,下调 406)。7d 的暴露显示了除 Wnt 信号通路异常下调外,Rap1信号通路也异常上调。Rap1 调节多种细胞功能,包括局灶性黏附、细胞连接形成和细胞极性。然而,Rap1 信号通路在青光眼中的作用尚未得到很好的研究,以及这些通路与 GR 信号通路的交叉均需要进一步研究。3 小结糖皮质激素诱导的高眼压或青光眼近年来越来越引起临床重视,糖皮质激素拥有强大的抗炎特性,但部分人群在用药过程中会诱发高眼压的发生,且开角型青光眼患者对糖皮质激素极其易感,对糖皮质激素诱导的小梁网变化的研究具有重要的理论价值和临床意义。本文主要综述了糖皮质激素对小梁网形态学、细胞骨架、细胞外基质和小梁网生物物理特性的影响及其相关细胞及分子机制等方面的研究进展,希望通过加深对糖皮质激素诱导的小梁网的各种病理变化的及相关机制的了解,进一步加深我们对青光眼这种致盲性眼病的认识,为寻求疾病的干预机制做铺垫。未来,通过建立合适的糖皮质激素诱导的高眼压或青光眼动物模型,探索青光眼发生和发展过程中的分子机制,可进一步提高我们对青光眼的理解。在此基础上,在分子水平上对病理变化涉及的主要机制进行靶向干预,也将为青光眼的治疗提供新的治疗策略。参考文献1RYBKIN I,GEROMETTA R,FRIDMAN G,et al.Modelsystems for the study of steroid-induced IOP elevationJ.Exp Eye Res,2017,158:51-58.2 PATEL G C,PHAN T N,MADDINENI P,et al.Dexam-ethasone-induced ocular hypertension in mice:Effects ofmyocilin and route of administrationJ.Am J Pathol,2017,187:713-723.3 FINI M E,SCHWARTZ S G,GAO X,et al.Steroid-in-duced ocular hypertension/glaucoma:Focus on pharma-cogenomics and implications for precision medicineJ.Prog Retin Eye Res,2017,56:58-83.4 LI G,LEE C,AGRAHARI V,et al.In vivo measurementof trabecular meshwork stiffness in a corticosteroid-in-duced ocular hypertensive mouse modelJ.Proc NatlAcad Sci USA,2019,116:1714-1722.5 ZHU X,WU S,ZENG W,et al.Protective effects of rapa-mycin on trabecular meshwork cells in glucocorticoid-in-duced glaucoma mice J.Front Pharmacol,2020,11:1006.6 ZENG W,WANG W,WU S,et al.Mitochondria and auto-phagy dysfunction in glucocorticoid-induced ocular hyper-tension/glaucoma mice modelJ.Curr Eye Res,2019,45(2):190-198.7 REN R,HUMPHREY A A,SWAIN D L,et al.Relation-ships between intraocular pressure,effective filtration are-a,and morphological changes in the trabecular meshworkof steroid-induced ocular hypertensive mouse eyesJ.IntJ Mol Sci,2022,23(2):854.8 FUJIMOTO T,INOUE T,INOUE-MOCHITA M,et al.Live cell imaging of actin dynamics in dexamethasone-treated porcine trabecular meshwork cellsJ.Exp EyeRes,2016,145:393-400.9 CLARK A F,WILSON K,MCCARTNEY M D,et al.Glu-cocorticoid-induced formation of cross-linked actin net-works in cultured human trabecular meshwork cellsJ.Invest Ophthalmol Vis Sci,1994,35(1):281-294.10 PENG M,RAYANA N P,DAI J,et al.Cross-linked actinnetworks(CLANs)affect stiffness and/or actin dynamicsin transgenic transformed and primary human trabecularmeshwork cellsJ.Exp Eye Res,2022,220:109097.11 BACHMAN W,MADDALA R,CHAKRABORTY A,et al.Glucocorticoids preferentially influence expression of nu-cleoskeletal actin network and cell adhesive proteins inhuman trabecular meshwork cellsJ.Front Cell Dev Bi-ol,2022,10:886754.12 CASSIDY P S,KELLY R A,REINA-TORRES E,et al.siRNA targeting Schlemm s canal endothelial tight junc-tions enhances outflow facility and reduces IOP in a ster-oid-induced OHT rodent modelJ.Mol Ther MethodsClin Dev,2021,20:86-94.13 OVERBY D R,STAMER W D,JOHNSON M.The chan-ging paradigm of outflow resistance generation:Towardssynergistic models of the JCT and inner wall endotheliumJ.Exp Eye Res,2009,88(4):656-670.14 RAGHUNATHAN V K,MORGAN J T,PARK S A,et al.081任静,等.糖皮质激素诱导小梁网组织失能的研究进展Dexamethasone stiffens trabecular meshwork,trabecularmeshwork cells,and matrixJ.Invest Ophthalmol VisSci,2015,56(8):4447-4459.15 YEMANYI F,BAIDOURI H,BURNS A R,et al.Dexam-ethasone and glucocorticoid-induced matrix temporallymodulate key integrins,caveolins,contractility,and stiff-ness in human trabecular meshwork cellsJ.Invest Oph-thalmol Vis Sci,2020,61(13):16.16 HARIBALAGANESH R,GOWRI PRIYA C,SHARMILAR,et al.Assessment of differential intraocular pressure re-sponse to dexamethasone treatment in perfusion culturedIndian cadaveric eyesJ.Sci Rep,2021,11(1):605.17 WATANABE M,IDA Y,OHGURO H,et al.Establish-ment of appropriate glaucoma models using dexametha-sone or TGF2 treated three-dimension(3D)cultured hu-man trabecular meshwork(HTM)cells J.Sci Rep,2021,11(1):19369.18 MOHD NASIR N A,AGARWAL R,KRASILNIKOVA A,et al.Effect of dexamethasone on the expression ofMMPs,adenosine A1 receptors and NFKB by human tra-becular meshwork cellsJ.J Basic Clin Physiol Pharma-col,2020,31(6):10.19 WANG K,LI G,READ A T,et al.The relationship be-tween outflow resistance and trabecular meshwork stiff-ness in miceJ.Sci Rep,2018,8(1):5848.20 WANG K,JOHNSTONE M A,XIN C,et al.Estimatinghuman trabecular meshwork stiffness by numerical model-ing and advanced OCT imagingJ.Invest OphthalmolVis Sci,2017,58(11):4809-4817.21 FARALLI J A,DESIKAN H,PEOTTER J,et al.Genomic/proteomic analyses of dexamethasone-treated human tra-becular meshwork cells reveal a role for GULP1 and ABRin phagocytosisJ.Mol Vis,2019,25:237-254.22 PATEL G C,LIU Y,MILLAR J C,et al.Glucocorticoidreceptor GRbeta regulates glucocorticoid-induced ocularhypertension in miceJ.Sci Rep,2018,8(1):862.23 PATEL G C,MILLAR J C,CLARK A F.Glucocorticoidreceptor transactivation is required for glucocorticoid-in-duced ocular hypertension and glaucomaJ.Invest Oph-thalmol Vis Sci,2019,60(6):1967-1978.24 CHEN H Y,CHOU H C,HO Y J,et al.Characterizationof TGF-beta by induced oxidative stress in human trabec-ular meshwork cellsJ.Antioxidants(Basel),2021,10(1):107.25 KASETTI R B,MADDINENI P,PATEL P D,et al.Trans-forming growth factor beta2(TGFbeta2)signaling plays akey role in glucocorticoid-induced ocular hypertensionJ.J Biol Chem,2018,293(25):9854-9868.26 RAZALI N,AGARWAL R,AGARWAL P,et al.IOP low-ering effect of topical trans-resveratrol involves adenosinereceptors and TGF-beta2 signaling pathwaysJ.Eur JPharmacol,2018,838:1-10.2