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临床分子生物学检验试题
一 填空题
1.核酸的最大紫外吸收波长在         ，蛋白质的最大吸收波长在          。
2.双链DNA中的碱基对有         ，          。
3.根据分子和结构不同，RNA可以分为         ，         ，          ，          。
4.核酸变性过程中,紫外光吸收达到最大值50%时温度称为         ,其主要与核酸的         最终
含量有关.
5.DNA水解后主要产物是           ,            ,            。
6.核酸（DNA和RNA）分子除含有      ，      ，       ，       四种元素外，还含有大量的        元素。
7.PCR技术是当今分子生物学使用最多的技术之一，它一般都有      ，      ，      三个基本反应步骤构成。
8.核酸水解后首先得到核苷酸，核苷酸可以继续水解得到        和       。
9.通用遗传密码中代表终止密码的三种密码是UAA、       和        。
10.PCR方法扩增DNA片段是，在反应中除了用该DNA片段作为模板外，尚需加入        、
          和          。
11.在DNA分子中还有大量的磷（P），P的含量大约为         。  
二．判断题
1.核酸变性时,碱基对之间的氢键断开,堆积力也受到破坏,共价键断裂.（   ）
2.核酸杂交原理就是根据核酸分子间互补.(    )
3.在中性或碱性溶液中,核酸主要带正电荷.(    )
4.核酸分子质量很大,因此核酸溶液具有很大粘性.(    )
5.分子杂交可以发生在任何只有互补核苷酸顺序两条单股核酸单链之间,如DNA/DNA、DNA/RNA、RNA/RNA等.（  ）
6.核酸水解后首先得到核苷酸，核苷酸可以继续水解得到核苷和磷酸（  ）
7.在高分子溶液中一般球形分子比线形分子的具有较大的粘度。（  ）
8.核酸的最大吸收波长在280nm，而蛋白质的最大吸收波长在260nm。（  ）
9.酚—氯仿提取法是我们在提取DNA时所用的经典方法，现在仍然被许多实验室所采用。（  ）
10.组成RNA的四种碱基是腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胞嘧啶（C）、胸腺嘧啶（T）。（ ）
11.PCR 技术是以DNA或RNA为模板进行核酸的体外扩增技术。（  ）
12.PCR技术是现在常用的一种扩增技术，它的基本步骤的顺序是退火、变性、延伸。（ ）
13.免疫印漬技术及Southern Blotting 是一种印漬技术和抗原抗体反应结合的技术（ ）
14.在临床基因扩增检验诊断实验室工作的实验操作人员必须经过业务培训并取得上岗证书（ ）
15.无论是DNA还是RNA，在多核苷酸链内既有酸性的磷酸基又有碱性的含氮杂环碱，因此核酸是两性电解质。（   ）
16.在PCR实验中，退火是指在极端的PH和受热条件下，核酸分子中的氢键断裂，DNA双螺旋解开的一个过程。（   ）
17.临床基因扩增诊断实验室的设置必须遵循一定的原则，而这些基本原则制定的主要依据就是使建立的基因扩增诊断实验室结果的准确性能够得到保证，能忠实的反映被检的临床样本的真实情况。（

  ）
二 选择题
1.核酸在波长为260nm光吸收强度大小排列正确的是（  ）
A. G>A>T>C   B.A>T>G>C   C.C>G>T>A      D.G>C>A>T
2．鉴别RNA 靶分子的杂交是（  ）
A Southern Blot B Northern Blot C Western Blot D 斑点杂交
3.在做RNA检测时，我们对全血抗凝最好用下列哪种抗凝剂（  ）
A.   肝素    B.  EDTA-K2   C. EDTA-Na2     D. 草酸钾

4.一般DNA 分子中的碱基数组成规律，下列哪一项是错的（   ）
A. A=C,G=T  B. A+G=C+T  C. 不同DNA中碱基组成不相同  D. 同一个不同组织细胞中DNA碱基组成相同
5.核酸分子储存和传递遗传信息是通过（    ）来进行的
A.核苷的结构  B. 磷酸二酯键  C.碱基顺序  D. 核苷酸的结构
6.分子生物学对医学的发展已经起到越来越大的作用，许多分子生物学的发现对分子生物学的发展都起到里程碑的作用，基因就是由转化功能的DNA所组成，最早是由谁发现的（ ）
A.Friderick Griffith B.Alfred Hershey C.Martha Chase D.Oswald Avery
7.基因扩增检测方法也有检测的灵敏度，一般适时荧光定量PCR的检测下限是（ ）
A.103拷贝/ml    B.104拷贝/ml   C.102拷贝/ml   D.105拷贝/ml
8.RNA和DNA彻底水解后的产物为 （  ）
A.核糖相同，部分碱基不同  B.核糖不同，碱基相同  
C.核糖相同，碱基相同      D.核糖不同，部分碱基不同
9.下列哪种碱基仅存在于RNA中而不存在于DNA中（   ）
A. 鸟嘌呤   B.  尿嘧啶   C. 胸腺嘧啶   D.腺嘌呤
三 讨论题
1.简述核酸探针及其应用。
2.简述PCR技术的基本原理及基本反应步骤。
3.什么叫人类基因组计划，它对医学上的研究具有哪些意义？
4.简述核酸分子杂交的基本原理、类别和应用。
5.简述基因诊断检测的临床应用
6.核酸产物主要用哪些方法检测，他们分别用在哪些情况下？
7.简述DNA芯片技术的应用。

分子生物学参考答案：
一．填空题：
1.260nm 280nm    2.A=T   G=C  3. tRNA   mRNA  rRNA  hnRNA    4.解链温度   G+C
5.磷酸  脱氧核糖  碱基   6. C  H O N    P    7.变性 退火 延伸  8. 戊糖  含氮碱基
9.UAA  UAG UGA 10.耐热Taq酶   引物   dNTP 11.  9%～10% 二．判断题：
1.× 2.√ 3. × 4. √ 5. √ 6. √ 7. × 8. × 9. √ 10. × 11.√ 12. × 13. ×
14. √ 15. √ 16. × 17. √
三．选择题：
1.B 2.B 3.C 4.A 5.C 6.D 7.A 8.D 9.B
四．讨论题
1.（1）一小段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素、和荧光染料标记它的末端或者全链，我们就把这一段多聚核苷酸序列称为探针。（2）可以用于检测特异DNA或RNA序列片段，可以用于遗传病的基因诊断，用于限制性片段长度多态性作疾病的相关分析，法医学上的性别分析和性别鉴定。
2.（1）PCR的基本原理是以需要扩增的DNA为模板，以一对分别与模板的5,和3，末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。（2）PCR的基本步骤包括：①变性：将反应系统加热至95

℃，使模板DNA全部变性变成单链DNA。②退火：将温度下降至适当温度，使引物与模板DNA退火结合。③延伸：将温度升至72℃，DNA聚合酶以dNTP底物催化DNA的合成反应。上述三个步骤称为一个循环，这样的循环重复25-30次，就可以得到大量的目的DNA。
3.（1）1991年，由美国众院批准的一个15年的人类基因组研究计划，花费金额约为30亿美元，该项目很快得到各国科学家和各国政府的所重视，1994年，我国也加入到其中的相关研究项目，人类基因组分析的主要内容包括：遗传图分析，物理图分析，转录图分析，基因组序列测定等。（2）人类基因组计划的实施大大促进了医学的发展，DNA的遗传作图和物理作图对于认识疾病相关基因具有巨大的推动作用。遗传性疾病的基因定位，尤其是对多基因位点将可以进行全基因组的定位扫描，使得确定致病基因的工作更为容易。
4.（1）单链的核酸分子在合适的温度和离子强度下，通过碱基互补形成双链杂交体的一类技术。（2）核酸分子杂交分为液相杂交，固相杂交，原位杂交，基因芯片技术。（3）主要应用SOUTHERN BLOTTING 用于未知DNA的检测，NORTHERN BLOTTING用于检测未知RNA，原位杂交用于组织和细胞中的基因定位。
5．主要应用于感染病原的检测、遗传病的诊断、组织配型及肿瘤的早期诊断等。
6.主要的检测方法有：（1）凝胶电泳分析法：主要用于PCR产物的检测。（2）微孔板夹心杂交法（PCR-ELISA）本法可避免电泳和杂交的繁杂步骤，适于常规的ELISA计数仪检测PCR反应的产物。（3）荧光探针标记法：这种方法在PCR的反应过程中对PCR产物中荧光强度的检测，从而对PCR产物进行定量。（4）分支DNA（dDNA):可以用于一些计算机程序中自动计算标本病毒RNA的含量。
7.主要应用于（1）基因诊断；（2）DNA序列测定；（3）临床药物筛选；（4）其他领域：法医学鉴定、食品工业、环境监测。

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