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检测生物组织中的糖类蛋白质脂肪省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

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1、文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 1.试验原理第1页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。斐林试剂斐林试剂苏丹苏丹橘黄色橘黄色红色红色砖红色沉淀砖红色沉淀紫色紫色苏丹苏丹 双缩脲试剂双缩脲试剂判定物质判定物质试剂试剂试验现象试验现象还原性糖还原性糖脂肪脂肪蛋白质蛋白质淀粉淀粉 碘液碘液 蓝色蓝色 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质判定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质判定l试验原理试验原理第2页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。第3页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。选材:含糖量较高选材:含糖量较高白色或

2、近于白色植物组织白色或近于白色植物组织(排除色素对排除色素对显色干扰显色干扰),苹果、梨最好,苹果、梨最好。l试验流程试验流程(步骤步骤)1.可溶性还原糖可溶性还原糖 制备组织样液:制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)过滤:(用单层纱布)取液:取液:(mL)显色反应显色反应 mL组织样液刚配制斐林试剂mL现象:现象:(用前混匀用前混匀)5065.C水浴水浴加热加热2min葡萄糖,果糖,葡萄糖,果糖,麦芽糖;麦芽糖;蔗糖为非还原蔗糖为非还原性糖性糖第4页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。还原糖检测和观察:还原糖检测和观察:第5页文档仅供参考,如

3、有不当之处,请联系改正。还原糖检测结果还原糖检测结果还原糖检测结果还原糖检测结果第6页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。第7页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。2.脂肪判定脂肪判定 取材:花生种子(浸泡取材:花生种子(浸泡h),去皮,将子叶削成薄片),去皮,将子叶削成薄片 制片:制片:选取最薄薄片移至载玻片中央选取最薄薄片移至载玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加苏丹苏丹(或苏丹或苏丹)染液染液2 3滴,滴,染色染色min滴加体积分数为滴加体积分数为50%酒精酒精溶液溶液12滴,洗滴,洗去浮色去浮色(多出苏丹多出苏丹)吸去余液,滴吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成滴蒸馏水,盖

4、上盖玻片,制成暂时装片暂时装片显微观察:显微观察:先在低倍镜下找到已着色薄片,后用高倍镜观察先在低倍镜下找到已着色薄片,后用高倍镜观察现象:现象:有被染成有被染成橘黄色橘黄色(或红色或红色)脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒第8页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。脂肪检测结果脂肪检测结果第9页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。第10页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。3.蛋白质判定蛋白质判定 选材与制备选材与制备组织样液:组织样液:黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)黄豆组织样液(或鸡蛋蛋清稀释液)黄豆浸泡黄豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨过滤过滤滤液滤液 显色反应显色反应mL组织

5、样液双缩脲试剂mL现象:现象:无色无色双缩脲试剂滴紫色或紫红色紫色或紫红色(创设碱性条件创设碱性条件)(提供提供Cu2+)第11页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。蛋白质检测结果蛋白质检测结果第12页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。第13页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。4.淀粉判定淀粉判定取材:马铃薯匀浆取材:马铃薯匀浆检测:检测:mL组织样液碘液碘液2滴滴现象:现象:摇匀后变成蓝色摇匀后变成蓝色第14页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。问题探讨问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质判定试验时,为何要留出一部、在做还原糖、蛋白质判定试验时,为何要留出一部分样液?分样液?

6、作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为何、使用双缩脲试剂时为何B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能过量?过量?过量双缩脲试剂过量双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应,使溶液呈蓝色,反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成紫色。而掩盖生成紫色。3、为何斐林试剂要现配现用,不能放置太久?为何斐林试剂要现配现用,不能放置太久?时间太长,时间太长,Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而悬浊液就沉淀在试管底部而无法参加反应。无法参加反应。l深化深化第15页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。比比较项较项目目试剂及成份原理原理溶液溶液浓浓度度方法方法加热是否结结果果可溶还原糖判定斐林斐林试剂

7、试剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4砖砖红红色色沉沉淀淀蛋白质判定双双缩脲试缩脲试剂剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、斐林试剂与双缩脲试剂二者有何不一样?、斐林试剂与双缩脲试剂二者有何不一样?新配制新配制Cu(OH)2溶液溶液在碱性在碱性环境下环境下Cu2+NaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.05g/mLNaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合,而后而后马上使用马上使用。先先加入加入Na0H1mL,然,然后后再加再加CuS044滴,摇匀。滴,

8、摇匀。(不能过量不能过量)水浴水浴加热加热不不需需要要第16页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。知识结构第17页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。1、青苹果汁遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂青苹果汁遇碘液显蓝色,熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀,以下结论中最合理是作用产生砖红色沉淀,以下结论中最合理是()A青苹果汁中有淀粉,不含还原糖青苹果汁中有淀粉,不含还原糖 B熟苹果汁中含还原糖,没有淀粉熟苹果汁中含还原糖,没有淀粉 C苹果转熟时,大量淀粉水解成还原糖苹果转熟时,大量淀粉水解成还原糖 D苹果转熟时单糖聚合成淀粉苹果转熟时单糖聚合成淀粉 Cl例题例题第18页文档仅供参考,

9、如有不当之处,请联系改正。、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引发世、安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引发世人注目。判定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,必人注目。判定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,必定不需要用到化学试剂是定不需要用到化学试剂是()A.斐林试剂斐林试剂 B.红墨水红墨水C.双缩脲试剂双缩脲试剂 D.苏丹苏丹染液染液 Bl例题例题第19页文档仅供参考,如有不当之处,请联系改正。3(.广东广东)生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物判生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物判定试验中,以下操作错误是定试验中,以下操作错误是()A、可溶性还原糖判定,可用酒精灯直接加热产生砖红色、可溶性还原糖判定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀沉淀B、只有脂肪判定需要使用显微镜、只有脂肪判定需要使用显微镜C、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热、用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用、使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A 第20页

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