实验-血糖测定(葡萄糖氧化酶法).doc

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实验 血糖测定（葡萄糖氧化酶法）
【目的】
体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。
【临床意义】
葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。通常在查找这些病症的起因时，还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。葡萄糖含量增高见于：糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少见于：胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。
【原理】
样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。
【器材】
紫外分光光度计，恒温水浴箱，移液器（枪），枪头，试管
【药品】
葡萄糖测定试剂盒，试剂盒主要成分与浓度：
试剂
主要成分
实验浓度
R1
葡萄糖氧化酶（GOD）
过氧化物酶（POD）
≥13000U/L
≥900U/L
R2
磷酸缓冲液（pH7.0）
酚
4-氨基安替吡啉
100mmol/L
11mmol/L
0.77mmol/L
葡萄糖标准液 5.55mmol/L(100mg/dl)
【样本】
新鲜无溶血血清。
【步骤】
将10ml R1与90ml R2混合均匀，即为工作液。

空白管
校准管
样品管
工作液
1.50 ml
1.50 ml
1.50 ml
蒸馏水
0.01 ml
——
——
校准液
——
0.01 ml
——
样品
——
——
0.01 ml
分别混合均匀，37℃水浴10～15分钟（避免太阳光直射），用波长505nm、比色杯光径1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（A）值。
【计算】

【参考值】
血清/血浆：3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。
此范围仅供参考，各实验室须建立本室的参考值范围。
【参考文献】
1．全国临床检验操作规程（第二版），主编：叶应妩，王敏三，1997，P616.
2．Trinder P. Ann Clin Biochem，1969，6: 24-27.
血糖测定实验所需器材：
1. 紫外分光光度计（比色杯光径1.0cm），
2. 恒温水浴箱（能调温度的，37℃），
3. 移液器（枪）（规格1.0ml 6个，20µl 6个），枪头各100个
4. 试管50支，6个试管架
5. 烧杯100ml一个，50ml（或25ml）6个
6. 记号笔6支
7. 蒸馏水1瓶
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