转移癌患者浆膜腔积液细胞蜡块中Villin、IMP3及MOC-31蛋白的表达及临床意义.pdf

医药前沿 2024年3月 第14卷第7期 临床医学 39转移癌患者浆膜腔积液细胞蜡块中 Villin、IMP3 及 MOC-31蛋白的表达及临床意义赵维聪，彭江兰，牙冬雪，陈 盈，冯 敏（广西华银医学检验所病理实验室 广西 南宁 530031）【摘要】目的：探讨转移癌患者浆膜腔积液细胞蜡块中 Villin、IMP3 及 MOC-31 蛋白的表达及临床意义。方法：选取广西华银医学检验所病理实验室 20202023 年确诊的 127 例转移性腺癌与 46 例非肿瘤浆膜腔积液患者，制备细胞石蜡切片，采用免疫组织化学标记方法检测抗体 Villin、IMP3 及 MOC-31 的表达水平。结果：3 种抗体在转移癌患者细胞中的阳性表达率高于非肿瘤患者（P 0.05）；Villin 鉴别转移癌细胞的敏感度为 49.61%，特异度为 93.48%，IMP3敏感度为 42.52%，特异度为 91.30%；MOC31 敏感度为 85.04%，特异度为 93.48%。3 种抗体联合鉴别转移癌的敏感度为94.49%，特异度为 93.48%。Villin 在胃腺癌、胰腺癌、结肠腺癌中阳性率较高（均为 100.00%），在肺腺癌、卵巢腺癌、乳腺癌中阳性率较低（7.14%、21.05%、0.00%）；IMP3 在胃腺癌、胰腺癌、结肠腺癌、肺腺癌中阳性率较高（48.28%、46.15%、43.75%、50.00%），在卵巢腺癌、乳腺癌中阳性率较低（31.58%、22.73%）；MOC-31 在不同来源转移癌中阳性率均较高（93.10%、84.62%、93.74%、92.86%、89.47%、54.55%）；3 种抗体组合鉴别胃腺癌、胰腺癌、结肠腺癌、肺腺癌、卵巢腺癌阳性率均达到 100.00%。结论：Villin、IMP3 及 MOC-31 在转移癌浆膜腔积液肿瘤细胞中阳性率较高，三者联合可提高鉴别病变的敏感度。【关键词】转移癌；腺癌；浆膜腔积液；免疫组织化学；抗体；转病理诊断【中图分类号】R730【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2024）07-0039-03恶性肿瘤是导致浆膜腔积液的重要原因，浆膜腔积液患者中 15%20%罹患恶性肿瘤1。细胞学检查是判断浆膜腔积液病变性质的金标准。随着精准医学的发展，细胞学诊断在鉴别良恶性的同时，还要进一步明确积液中恶性肿瘤细胞的来源。由于细胞涂片制作质量存在较大差异，而且高温修复细胞涂片抗原时往往发生掉片，难以应用该方法进行免疫细胞化学技术操作2。近年来细胞蜡块制作技术进步较快，有效改善了免疫细胞化学染色质量，从而为判断恶性肿瘤细胞来源提供了可行性3。但由于大部分抗体在浆膜腔积液中增生间皮与恶性肿瘤细胞中均有一定表达，免疫抗体的选择成为影响诊断质量的重要环节。目前相关指南对于判断恶性肿瘤细胞来源的免疫抗体组合尚无明确建议。本研究利用免疫组化检测包括 Villin、IMP3、MOC-31 在内的一组抗体的表达情况，分析其判断转移癌来源的作用，以期为浆膜腔积液的精准诊断提供参考。1 资料与方法1.1 一般资料选取广西华银医学检验所病理实验室 20202023 年确诊的127例转移性腺癌与46例非肿瘤浆膜腔积液患者，所有患者采集病理标本时均未接受过放化疗，且临床资料完整；标本均制作细胞蜡块，进行免疫组化检查。转移性腺癌患者包括胃腺癌 29 例，胰腺癌 13 例，结肠腺癌 16 例，肺腺癌 28 例，卵巢腺癌 19 例，乳腺癌 22 例。胸腔积液 91 例，腹腔积液 36 例。非肿瘤患者胸腔积液31 例，腹腔积液 15 例。1.2 方法1.2.1 细胞石蜡切片制备 将浆膜腔积液标本加入离心管中，2 500 r/min 离心 10 min，去除上清液，将95%乙醇加入沉渣中，再次进行离心处理提取沉渣，将收集的沉渣放进包埋盒，添加 10%中性甲醛固定，常规石蜡包埋，按 4 m 规格切片，放入烘箱中，温度设置为65，进行烤片处理后备用。1.2.2 苏木精-伊红（HE）及 IHC 染色 常规切片脱蜡，进行 HE 染色，中性树胶封片。特抗体 Villin、IMP3、MOC-31 均购自福建迈新生物技术公司。使用全自动 IHC 染色机严格按试剂盒说明书的标准步骤进行染色。1.2.3 结果判定 Villin 定位于细胞质，IMP3 定位于细胞质、MOC-31 定位于细胞核及细胞质。着色 5%判定为阳性。着色 5%或存在异型细胞均判定为阴性。1.3 统计学方法使用 SPSS 20.0 统计软件进行数据处理。计数资料采用频数和百分率n（%）表示，组间比较采用2检验。以 P 0.05 为差异有统计学意义。2 结果2.1 转移癌浆膜腔积液蜡块切片镜下表现浆膜腔积液蜡块切片中，转移癌细胞在光镜下呈圆形或椭圆形，具有核异型，核膜不光滑，核仁明显增大，染色质深染。非肿瘤性细胞聚集成团，核质比较低，染40 医药前沿 2024年3月 第14卷第7期 临床医学色质均匀，核仁相对较小。在肿瘤细胞单个散在分布的情况下，其镜下表现与非肿瘤细胞较难鉴别。2.2 3 种抗体在转移癌与非肿瘤患者浆膜腔积液中的表达3 种抗体在转移癌患者细胞中的阳性表达率高于非肿瘤患者（P 0.05），Villin 鉴别转移癌细胞的敏感度为 49.61%，特异度为 93.48%，IMP3 敏感度为 42.52%，特异度为 91.30%，MOC31 敏感度为 85.04%，特异度为93.48%。3 种抗体组合鉴别转移癌的敏感度为 94.49%，特异度为 93.48%，3 种抗体组合可提高诊断敏感度，见表 1。2.3 3 种抗体在不同来源转移癌中的表达3 种抗体在不同来源转移癌中的阳性表达率见表 2。表1 三种抗体在转移癌与非肿瘤患者浆膜腔积液中的表达比较n（%）项目转移癌细胞（n=127）非肿瘤细胞（n=46）2PVillin 26.57 0.001阳性63（49.61）3（6.52）阴性64（50.39）43（93.48）IMP317.335 0.001阳性54（42.52）4（8.70）阴性73（57.48）42（91.30）MOC-3190.537 0.001阳性108（85.04）3（6.52）阴性19（14.96）43（93.48）三者组合102.734 0.001阳性120（94.49）3（6.52）阴性7（5.51）43（93.48）表 2 三种抗体在不同来源转移癌中的表达分析 n（%）项目胃腺癌（n=29）胰腺癌（n=13）结肠腺癌（n=16）肺腺癌（n=28）卵巢腺癌（n=19）乳腺癌（n=22）Villin 阳性29（100.00）12（92.31）16（100.00）2（7.14）4（21.05）0（0.00）阴性0（0.00）1（7.69）0（0.00）26（92.86）15（78.95）22（100.00）IMP3阳性14（48.28）6（46.15）7（43.75）14（50.00）6（31.58）5（22.73）阴性15（51.72）7（53.85）9（56.25）14（50.00）13（68.42）17（77.27）MOC-31阳性27（93.10）11（84.62）15（93.75）26（92.86）17（89.47）12（54.55）阴性2（6.90）2（15.38）1（6.25）2（7.14）2（10.53）10（45.45）三者联合阳性29（100.00）13（100.00）16（100.00）28（100.00）19（100.00）15（68.18）阴性0（0.00）0（0.00）0（0.00）0（0.00）0（0.00）7（31.82）3 讨论浆膜腔积液在临床中相当常见，而且采集标本对患者创伤较小，特别适合于高龄且无法进行活检的患者。细胞学检查能够鉴别病变良恶性，还可判断部分肿瘤细胞的来源，对于临床诊断与治疗具有重要意义。Villin 是一种绒毛蛋白，是胰腺癌、胃肠道腺癌的特异性抗体，也较多存在于肺腺癌中4，常用于组织病理肿瘤来源的判断。本研究结果显示，Villin 鉴别转移癌细胞的敏感度为 49.61%，其在胃腺癌、胰腺癌、结肠腺癌中阳性率较高（均为 100.00%），在肺腺癌、卵巢腺癌、乳腺癌中阳性率较低（7.14%、21.05%、0.00%）。唐福婷等4研究报道，Villin 在胃腺癌中阳性表达较高，而在肺腺癌及女性生殖系统来源的腺癌阳性率较低，本研究与此基本一致。这提示单独应用 Villin 鉴别对于某些系统肿瘤来源时存在一定局限，必须增加其他肿瘤特异性抗体。IMP3是一种与多种肿瘤相关的胎儿蛋白，可与IGF-mRNA 的 5端非编码区相结合，激活多条细胞信号通路，从而促进 IGF-的生物作用，使其蛋白表达显著升高，最终促进癌细胞的增殖5。在正常生理状态下，IMP3 水平极低，几乎不能被检测到6。而在多种恶性肿瘤中，IMP3 呈高表达，且与患者预后密切相关7。本研究结果显示，IMP3 鉴别肿瘤细胞敏感度为 42.52%，在胃腺癌、胰腺癌、结肠腺癌、肺腺癌中阳性率较高（48.28%、46.15%、43.75%、50.00%），而在卵巢腺癌、乳腺癌中阳性率较低（31.58%、22.73%），因此，IMP 是鉴别病变良恶性及恶性肿瘤细胞来源的较为可靠指标，但在女性生殖系统肿瘤中，其敏感度仍较低。MOC-31 属于上皮糖蛋白，是上皮细胞的分子标记，是鉴别细胞是否为上皮来源的可靠指标8。有研究报道，MOC-31 在转移性腺癌细胞的阳性率较高，在多种常用的鉴别浆膜腔积液病变的特异性抗体中其敏感度最高9。本研究结果表明，韩永良等10研究指出，MOC-31 在诊断腺癌的敏感度高于 Ber-Ep4。本研究结果显示，MOC31 敏感度为 85.04%，且在不同来源转移癌中阳性率均较高（93.10%、84.62%、93.74%、92.86%、89.47%、医药前沿 2024年3月 第14卷第7期 临床医学 4154.55%），与 Villin、IMP3 比较更具优越性。本研究中，3 种抗体组合鉴别转移癌的敏感度为94.49%，3 种抗体组合鉴别胃腺癌、胰腺癌、结肠腺癌、肺腺癌、卵巢腺癌阳性率均达到 100.00%，具有较高的应用价值。但 3 种抗体组合在乳腺癌中的阳性表达仅为68.18%，提示对于女性乳腺癌仍需选用其他特异性抗体协助诊断。综上，Villin、IMP3 及 MOC-31 在转移癌浆膜腔积液肿瘤细胞中阳性率较高，三者联合可提高鉴别病变的敏感度，在病理学诊断中应用价值较高，值得推广。【参考文献】1 PATEL A,BORCZUK A C,SIDDIQUI M T.Utility of Claudin-4 versus BerEP4 and B72.3 in pleural fluids with metastatic lung adenocarcinoma J.J Am Soc Cytopathol,2020,9(3):146-151.2 ZHANG H,LI C H,HU F,et al.Auxiliary diagnostic value of tumor biomarkers in pleural fluid for lung cancer-associated malignant pleural effusion J.Respir Res,2020,21(1):284.3 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